CC BY
58
100
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
трактов шиповника, эхинацеи, аргината Mg, Zn и других микроэлементов. Разработаны лекарственная форма препаратов в твердых желатиновых капсулах, методы стандартизации и контроля качества, подготовлена и утверждена нормативно-техническая документация, осуществлен опытно-промышленный выпуск. В сравнительных исследованиях по имму-нофармакологии БЭ-1 и БЭ-2 были на 30—40 % менее эффективны в стимуляции гуморального и клеточного иммунитета по сравнению с КС и КК. Систематическое ежедневное введение мышам BALB/c комбинации препаратов БЭ + КС или БЭ + КК было на 40-50 % более эффективно, чем использование только КС или КК. Комбинированное применение БЭ и КС эффективно снижало иммунодепрессию, индуцированную цитостатиком аранозой.
Заключение. Разработанные БЭ можно рассматривать в качестве перспективных потенциальных средств ХПР и рекомендовать их в комбинированном использовании с препаратами КС, КК и другими ПС.
Си Джан1, Е.В. Санарова2, М.В. Дмитриева2, А. П. Полозкова2, Н.А. Оборотова1,2, А.В. Ланцова2, О.Л. Орлова2, З.С. Шпрах2 РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ НОВОГО АНАЛОГА ГИПОТАЛАМИЧЕСКОГО ГОРМОНА СОМАТОСТАТИНА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России, Москва;
2ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Введение. В лаборатории разработки лекарственных форм РОНЦ им. Н.Н. Блохина разработана модель липо-сомальной лекарственной формы (ЛЛФ) нового отечественного аналога гипоталамического гормона соматостатина (АГГС). Доказана эффективность данной ЛЛФ на перевиваемой опухоли мышей - аденокарциноме молочной железы Са-755: торможение роста опухоли при дозе 5 мг/кг составило более 60 %, при дозе 20 мг/кг — более 80 %, что указывает на перспективность дальнейших исследований модели ЛЛФ АГГС с целью получения высокоэффективного противоопухолевого препарата из группы аналогов соматостатина.
Цель исследования — разработка методики спектрофо-тометрического количественного определения содержания АГГС в ЛЛФ.
Материалы и методы. АГГС (РОНЦ им. Н.Н. Блохина); яичный фосфатидилхолин E PC S (Lipoid, Германия); холестерин (Sigma, Япония); PEG-2000-DSPE (Lipoid, Германия); сахароза («Химмед», Россия); спирт этиловый 95 % (ЗАО «Брынцалов-А» — «Ферейн», Россия). Спектрофото-метрия в ультрафиолетовом спектре.
Результаты. Содержание АГГС в ЛЛФ определяли в интенсивном максимуме поглощения при длине волны 282 ± 3 нм. Установлено, что интенсивность поглощения спиртовых растворов ЛЛФ препарата в данном максимуме подчиняется закону Бугера — Ламберта — Бера в диапазоне концентраций от 0,02 до 0,2 мг/мл в пересчете на АГГС. Максимумы поглощения в растворах субстанции и лекарственной формы совпадают. При оценке влияния вспомогательных
веществ ЛЛФ на спектральные характеристики действующего вещества обнаружено, что сахароза не поглощает в области 250—350 нм, в то время как компоненты липосо-мального бислоя (фосфатидилхолин, холестерин, РЕв-2000-Б8РЕ) в данной области имеют собственное значительное поглощение. Это обстоятельство следует учитывать при анализе, используя в качестве раствора сравнения раствор вспомогательных веществ с соответствующей концентрацией. Относительная ошибка определения АГГС в ЛЛФ не превышает 2,0 %, что указывает на высокую точность анализа с использованием разработанной методики.
Заключение. Разработанная методика может быть использована для количественного определения АГГС в ЛЛФ.
Л.Ю. Скляров, И.В. Назимов, Р.Х. Зиганшин, Н.Ю. Половков СИНТЕЗ МУЛЬТИФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
ФГБУН «ИБХ им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН», Москва; ИНХС РАН, Москва
Введение. Природным кором (центральная часть разветвленной, дендримерной молекулы) белков и пептидов можно считать гетероциклические и ароматические соединения — порфирины, корины, пиридины, фенолы и ряд других конденсированных соединений, осуществляющих жизненно важные функции.
Цель исследования. Кором для синтеза мультиплетных пептидов послужили полифункциональные производные аминокислот и гетероциклы, полученные на основе реакции. Необычные физико-химические свойства образующихся полифункциональных гетероциклов — сильная флуоресценция и высокая реакционная способность боковых групп — были использованы как для синтеза порфира-зинов и их дендримеров, так и для разработки аналитических методов.
Материалы и методы. В качестве исходных соединений для синтеза порфиразинов и их дендримеров использованы 3-амино-, 3-гидроксипиридины и 6-пептидилпиридины.
Результаты. Широкий спектр флуоресценции мультиплетных производных порфиразина (400—900 нм) позволил наблюдать связывание этих соединений с раковыми клеточными линиями методом проточной цитофлуориметрии. Показана возможность связывания полученных соединений с ионами щелочноземельных, тяжелых, платиновых металлов и способностью образовывать суспензию нано-частиц с узким распределением по размерам.
Заключение. Относительно высокая реакционная способность нитрильных групп в получаемых гетероциклах позволяет рассматривать их как перспективные би- и полифункциональные флуоресцентные реагенты в синтезе аналогов противораковых препаратов, содержащих амин-ные и сульфгидрильные группы.
Е.Г. Славина, А.И. Черткова, М.Е. Абрамов, З.Г. Кадагидзе РЕФНОТ - НОВЫЙ ИММУНОМОДУЛЯТОР В ОНКОЛОГИИ
ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Введение. Новый отечественный иммуномодулятор Рефнот является гибридной молекулой двух биологически
№1 / том 15 / 2016
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 101
активных агентов — цитокина фактора некроза опухолей Е.Г. Славина, А.И. Черткова, Л.Г. Жукова, и гормона тимозина. М.А. Окружнова, Э.К. Шоуа, А.А. Борунова, З.Г. Кадагидзе Цель исследования - изучить влияние Рефнота в соче- ВЗАИМОСВЯЗЬ МЕЖДУ КОЛИЧЕСТВОМ тании с химиотерапией на основные показатели имму- РЕГУЛЯТОРНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ нитета у больных диссеминированной меланомой кожи И КЛИНИЧЕСКИМ ЭФФЕКТОМ ХИМИОТЕРАПИИ на разных этапах лечения. ПРИ ТРИЖДЫ НЕГАТИВНОМ РАКЕ МОЛОЧНОЙ Материалы и методы. В исследование были включены ЖЕЛЕЗЫ пациенты с диссеминированной меланомой кожи, исчер- ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва павшие возможности стандартного лекарственного лече- Введение. Эффективность противоопухолевой терапии ния (n = 21). Контролем служили доноры без признаков во многих случаях зависит от состояния иммунной систе-онкологических заболеваний (n = 25). Все пациенты полу- мы пациента, а определенные популяции иммунокомпе-чали лечение по следующей схеме: Рефнот вводили в дозе тентных клеток связывают с прогнозом заболевания. 100 тыс. МЕ в 1-5-й дни подкожно (п/к) с 2-дневными Цель исследования — изучение связи между исходным перерывами в течение 2 нед или по 400 тыс. МЕ п/к 3 раза количеством основных популяций лимфоцитов перифе-в неделю в течение 4 нед. Начиная с 3-й или 5-й недели рической крови и результатами химиотерапии (ХТ) боль-проводили химиотерапию (дакарбазин 250 мг/м2 внутри- ных местно-распространенным трижды негативным раком венно (в/в) струйно в 1—3-й дни, ломустин 80 мг/м2 внутрь молочной железы (ТН РМЖ). в 1-й день через 3 ч после дакарбазина, цисплатин 80 мг/м2 Материалы и методы. В исследование были включены в/в в 3-й день). Перерыв между курсами составлял 2 нед. 32 пациентки с ТН РМЖ. Контролем служили здоровые Состояние иммунитета определяли до начала лечения, по- женщины (n = 26). После ХТ (цисплатин + паклитаксел) сле 2—4 нед терапии Рефнотом (до химиотерапии, 1-й больные получали оперативное лечение. До начала ХТ курс) и перед 2-м курсом химиоиммунотерапии. Иммуно- проводилось иммунофенотипирование лимфоцитов пери-фенотипирование лимфоцитов периферической крови ферической крови методом проточной цитометрии. Опре-проводили с помощью многопараметрового цитометриче- деляли количество следующих популяций лимфоцитов: ского анализа с использованием панели моноклональных (CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD8+CD28+, CD8+CD28-, антител. CD3+HLA-DR+, CD3+CD38+, CD4+CD25+)^; В-; Результаты. До лечения у 47,6 % больных было сниже- (CD3+CD16+CD56+) NKT-; NK- и (CD4+CD25+FOXP3+) но количество CD3+ Т-лимфоцитов (55,9 ± 3,9 %) по срав- регуляторных Т-клеток (Т ег). В соответствии с эффектив-нению с контролем (72,96 ± 4,9 %; p = 0,0000). В то же ностью проведенного лечения пациентки были разделены время у этой группы пациентов отмечалось значительное на 2 группы: без прогрессирования (группа А, n = 25) повышение исходного количества CD3 — CD16+CD56+ ес- и с прогрессированием заболевания (группа Б, n = 7). тественных киллерных клеток (24,0 ± 5,1 против 16,9 ± 6,5 % Результаты. Проведенное исследование показало, что в контрольной группе; p = 0,004), а также снижение ко- различия между группами главным образом касались ре-личества CD8+ Т-лимфоцитов, экспрессирующих коакти- гуляторных популяций лимфоцитов. Так у больных в груп-вационный рецептор CD28, и величины соотношения пе А количество Трег было выше, чем в группе Б и в контроле CD8+CD28+/CD8+CD28- (0,36 ± 0,13; в контрольной груп- (1,27 ± 0,92; 0,9 ± 0,54 и 0,64 ± 65 соответственно; р = 0,005). пе 1,04; p = 0,009). Перед 2-м курсом лечения сниженное Величина соотношения CD8+CD28+/CD8+CD28- Т-клеток количество CD3+ Т-клеток было выявлено лишь у 9,1 % па- (CD8+CD28- Т-клетки во многих исследованиях рассма-циентов, а также повысилось количество CD3+CD4+ (с 36,7 триваются как супрессорная популяция) в группе А была ± 4,4 до 43,6 ± 3,4 %; p = 0,048) и сниженное до лечения статистически значимо ниже, чем в группе Б (0,6 ± 0,4 и 1,2 количество CD3+CD8+ Т-лимфоцитов. Повышенный ± 0,78 соответственно; р = 0,047), и ниже, чем в контроль-у этих пациентов до лечения процент CD3 — CD16+CD56+ ной группе (1,13 ± 0,92; р = 0,045). Уникальную роль в ре-естественных киллерных клеток (23,7 ± 5,1 %) по срав- гуляции иммунного ответа играют NKT-клетки. Они могут нению с контролем (10,7 ± 5,7 %, p = 0,0006; 16,9 ± 6,5 %, и стимулировать, и подавлять противоопухолевый иммун-p = 0,004) после 2—4 нед терапии Рефнотом снизился ный ответ. У больных в группе А исходное количество до уровня контроля. В то же время отмечалась тенденция NKT-клеток было более чем в 2 раза выше, чем в группе Б к росту их цитотоксической активности. У этих больных (13,3 ± 5,5 и 5,6 ± 3,0 соответственно; р = 0,002), и выше, повысилось также сниженное количество CD8+CD28+- чем в контрольной группе (9,9 ± 6,0; р = 0,046). Логисти-Т-лимфоцитов и в 2 раза возросло соотношение ческий регрессионный анализ выявил значимую отрица-CD8+CD28+/CD8+CD28-. Это может указывать на повы- тельную связь между эффектом лечения и величиной со-шение цитотоксического потенциала естественных кил- отношения CD8+CD28+/CD8+CD28- (b = —1,67; р = 0,039) леров под влиянием химиоиммунотерапии с включени- и значимую положительную связь с количеством NKT-кле-ем Рефнота. ток (b = 0,43; р = 0,016). Заключение. Полученные в настоящем исследовании Заключение. Полученные результаты позволяют пред-результаты подтвердили способность Рефнота оказывать положить существование взаимосвязи между исходным положительное влияние на основные показатели противо- количеством регуляторных популяций лимфоцитов пери-опухолевого иммунитета у онкологических больных с позд- ферической крови и эффективностью проведенной ХТ ними стадиями заболевания, исчерпавшими возможности при ТН РМЖ. Определение иммунологических маркеров, стандартного лекарственного лечения. коррелирующих с течением болезни и клинической эф-
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
