CC BY
77
УДК 598.617:591.3
О. В. Ложниченко, В. П. Загрийчук
Кафедра гидробиологии и общей экологии Кафедра аквакультуры и водных биоресурсов
РАЗВИТИЕ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЦЫПЛЯТ В ОНТОГЕНЕЗЕ
Гематологические показатели являются одним из важнейших критериев жизнедеятельности, позволяющих дать оценку физиологического состояния организма. Гематологические показатели широко используют в экспериментальной и клинической медицине, ветеринарии. Знание картины крови помогает диагностировать заболевание и следить за течением патологического процесса. Благодаря своеобразию реакций и чувствительности картина крови часто является решающим звеном в клиникодиагностической цепи.
Работа выполнена в Астраханском государственном техническом университете на кафедре гидробиологии и общей экологии в 2002-2003 гг. Объектом исследования служили цыплята (петушки и курочки) 1-го, 3-го, 5-го, 21-го, 24-го, 54-го, 84-го дней после вылупления и взрослые особи 240-го и 540-го дней, выращивавшиеся на птицефабрике «Камызякская», кроме того, исследовали цыплят с врожденными аномалиями. Изучение гематологических показателей крови проводили по известным методам (Иванова, 1982; Житенева, 1989). Кровь для мазков брали пункцией из подкрыльцовой вены, окрашивали по Романовскому-Г имза.
У однодневных петушков в периферической белой крови бластные формы составили 13,8 %, причем доминировали лимфобласты - 6,8 %. Монобласты и миелобласты присутствовали в одинаковом количестве:
3,2 и 3,1 % соответственно. Из V класса созревающих клеток обнаружены пролимфоциты - 0,9 %, из зрелых клеток - лимфоциты - 86,0 %. Более половины клеток эритропоэтического ряда были представлены зрелыми эритроцитами - 69,0 %, эритробласты составили всего 3,6 %. Из V класса созревающих клеток пронормобластов было 2,2 %, нормобластов базо-фильных - 14,4 %, нормобластов полихроматофильных - 5,8 %, нормо-бластов оксифильных - 5,0 %.
У однодневных курочек в периферической крови из клеток белой крови бластные формы составили 15,0 %. Доминировали лимфобласты -
10,0 %, миелобластов было в два раза больше, чем монобластов - 3,3 % и 1,7 % соответственно. Пролимфоцитов отмечено 2,5 %. Превалировали зрелые лимфоциты - 82,5 %. Из клеток красной крови у курочек 1-го дня после вылупления доминировали эритроциты - 68,6 %, эритробластов было 2,7 %. Класс созревающих клеток был представлен оксифильными нор-мобластами - 13,3 %, полихроматофильными нормобластами - 10,6 %, ба-зофильными нормобластами - 3,4 %, меньше всего встречалось пронормоб-ластов - 14 %.
Анализ лейкограммы пятидневных петушков показал, что количество бластных клеток практически не изменилось и составило 8,9 %, доминировали по-прежнему лимфоциты. Класс созревающих клеток был представлен нейтрофилами и эозинофилами на стадии миелоцита и метамиелоцита, причем нейтрофилов было в четыре раза больше, чем эозинофи-лов. Из зрелых клеток белой крови присутствовали только лимфоциты -
69,2 %. Эритропоэтический ряд был представлен эритробластами - 4,5 %. Класс созревающих клеток составил 25,0 % и был представлен пронор-мобластами - 2,4 %, базофильными нормобластами - 9,2 %, полихромато-фильными нормобластами - 4,9 %, оксифильными нормобластами - 8,5 %. Ортохромных эритроцитов было 70,5 %.
У курочек 5-го дня после вылупления в лейкограмме произошли следующие изменения: количество бластных форм - 13,9 %, лимфобластов -
10,5 %, монобласты и миелобласты были в равном количестве - по 1,7 %. Кроме того, отмечены нейтрофилы и эозинофилы на разных стадиях развития: нейтрофилы на стадии миелоцита - 9,6 %, эозинофилы на стадии миелоцита - 4,4 %, пролимфоцитов было 1,9 %. Число лимфоцитов уменьшилось до 70,0 %. Количество клеток эритропоэтического ряда увеличилось в 2 раза по сравнению с 3-дневными курочками, число эритробластов составило 5,1 %. В классе созревающих клеток по-прежнему доминировали нор-мобласты оксифильные - 13,1 %, нормобласты базофильные - 5,9 %, про-нормобластов было 4,8 %, эритроцитов - 59,2 %.
Анализ лейкограммы петушков в возрасте 21 день показал, что бла-стных клеток было 14,3 %, доминировали лимфобласты - 9,5 %. Монобла-сты и миелобласты составили 1,6 и 3,2 % соответственно. Из класса созревающих клеток присутствовали нейтрофилы на стадии миелоцита - 1,2 %, нейтрофилы на стадии метамиелоцита - 2,0 %, эозинофилы на стадии миелоцита и метамиелоцита - 2,1 и 2,3 % соответственно, пролимфоциты -
4,6 %. Зрелых лимфоцитов было 62,4 %. Эритропоэтический ряд представлен эритробластами - 4,6 %. Уменьшилось число созревающих клеток V класса за счет сокращения числа базофильных нормобластов до 8,6 % и оксифильных нормобластов до 2,9 %. Количество пронормобластов и полихроматофильных нормобластов значительно не уменьшилось. Число зрелых эритроцитов увеличилось на 10 %.
У курочек в возрасте 21 день в лейкограмме бластные формы клеток составили 15,1 %, причем превалировали лимфобласты - 11,5 %, монобласты и миелобласты присутствовали в незначительном количестве - по 1,7 и 1,9 % соответственно. Класс созревающих клеток был представлен пролимфоцитами - 7,0 %, нейтрофилами и эозинофилами на стадии миелоцита по 2,0 и 3,7 % соответственно. Из зрелых клеток присутствовали лимфоциты - 72,2 %. В составе клеток эритропоэтического ряда произошли следующие изменения (по сравнению с 5-дневными курочками): число эритробластов увеличилось до 9,7 %, в два раза увеличилось количество пронормобластов, число базофильных нормобластов изменилось незначительно и составило 4,8 %, в два раза сократилось число полихроматофиль-
ных нормобластов - 6,3 % и оксифильных нормобластов - 6,9 %. Орто-хромных эритроцитов отмечено 70,1 %.
Состав лейкограммы 56-дневных петушков показал, что бластные формы клеток составили 2,7 %, из них лимфобластов было 1,9 %, монобла-стов - 0,3 % и миелобластов - 0,5 %. В классе созревающих клеток значительных изменений не произошло: юных нейтрофилов было 3,4 %, палочкоядерных - 3,2 %, юных эозинофилов - 3,1 %, палочкоядерных - 2,8 %, пролимфоциты составили 2,0 %. В составе класса зрелых клеток в два раза, по сравнению с 24-дневными петушками, увеличилось количество моноцитов - 1,9 % и сегментоядерных нейтрофилов - 28,1 %, количество сегментоядерных эозинофилов изменилось незначительно и составило 3,2 %, лимфоциты составили 48,4 %. В составе клеток красной крови в два раза увеличилось число эритробластов - 6,1 %, класс созревающих клеток представлен: про-нормобластами - 0,9 %, нормобластами базофильными - 1,7 %, нормобла-стами полихроматофильными - 5,2 %, нормобластами оксифильными -13,9 %. Зрелые эритроциты составили 72,2 %.
Лейкограмма 56-дневных курочек показала, что количество бласт-ных форм уменьшилось, (по сравнению 21-дневными курочками) и составило 9,5 %, превалировали лимфобласты - 6,7 %, монобласты и миелобла-сты присутствовали в незначительном количестве - по 1,6 % и 1,2 % соответственно. V класс созревающих клеток был представлен нейтрофилами на стадии миелоцита - 1,6 % и метамиелоцита - 2,1 %, палочкоядерными формами - 2,5 %, эозинофилами на стадии миелоцита - 1,1 % и метамиелоцита - 1,5 %, палочкоядерных эозинофилов было 2,9 %, пролимфоцитов -
5,5 %. Из класса зрелых клеток отмечены моноциты - 1,5 %, сегментоядерные эозинофилы - 2,2 %, сегментоядерные нейтрофилы - 15,9 %, лимфоциты - 54,0 %. В составе эритропоэтического ряда увеличилось количество ортохромных эритроцитов, их стало 78,9 %. V класс созревающих клеток был следующим: пронормобласты - 2,1 %, нормобласты базофиль-ные - 1,6 %, нормобласты полихроматофильные - 2,5 % и нормобласты оксифильные - 9,2 %.
У 84-дневных петушков в составе лейкограммы произошли следующие изменения: в три раза уменьшилось количество лимфобластов -
0,5 %, число монобластов и миелобластов изменилось незначительно и составило 0,2 % и 0,3 % соответственно. Состав класса созревающих клеток по сравнению с таковым у 54-дневных петушков практически не изменился. Из числа зрелых клеток до 2,0 % увеличилось количество мо-нобластов, сегметоядерные нейтрофилы составили 30,1 %, сегментоядерные эозинофилы - 3,5 %, лимфоциты - 54,4 %. В составе клеток эритропо-этического ряда на 2 % уменьшилось число эритробластов (по сравнению с 54-дневными петушками). Класс созревающих клеток составил 10,9 %. Доминировали дефинитивные эритроциты - 84,7 %.
В лейкограмме 84-дневных курочек произошли следующие изменения. Количество бластных клеток незначительно сократилось и составило 7,8 %. Класс созревающих клеток составил 18,1 %, причем эозинофилы составили 7,3 %, нейтрофилы - 5,9 %. Из числа дефинитивных клеток
моноцитов было 3,8 %, сегментоядерных эозинофилов - 2,3 %, сегментоядерных нейтрофилов - 17,6 %, лимфоцитов - 50,5 %. Из клеток красной крови эритробласты составили 5,1 %, пронормобласты - 5,0 %, нормобла-сты базофильные - 1,1 %, нормобласты полиоксифильные - 2,2 %, нормобласты оксифильные - 24,7 %, ортохромные эритроциты - 61,8 %.
Дальнейшие исследования были продолжены на взрослых несушках и петухах. У несушек в возрасте 240-ка дней в лейкограмме количество бла-стных форм составило 7,8 %, причем доминировали лимфобласты - 5,1 %, монобласты и миелобласты содержались в незначительном количестве. Число юных форм нейтрофилов и эозинофилов незначительно возросло и составило 5,9 и 7,3 % соответственно. В классе зрелых клеток моноциты составили 3,8 %, сегментоядерные нейтрофилы - 17,6 %, сегментоядерные эозинофилы - 2,3 %, лимфоциты - 50,5 %. В составе клеток красной крови превалировали оксифильные нормобласты - 5,3 %. Ортохромные эритроциты составили 86,3 %.
Лейкограмма 240-дневных петушков показала, что бластные клетки крови присутствовали в незначительном количестве и составили 1 %. Отмечены как зрелые, сегментоядерные нейтрофилы и эозинофилы, так и юные формы, которые составили 1,8 % и 1,6 % соответственно. Палочкоядерных форм отмечено равное количество - по 3,3 %, пролимфоцитов отмечено 2,1 %. Класс зрелых клеток состоял из моноцитов - 2,3 %, сегментоядерных нейтрофилов - 30,4 %, сегментоядерных эозинофилов -
3,7 % и лимфоцитов - 50,9 %. В составе клеток эритропоэтического ряда число эритробластов уменьшилось до 2,1 %. Класс созревающих клеток состоял из пронормобластов - 0,6 %, базофильных нормобластов - 1,0 %, полихроматофильных нормобластов - 1,5 % и оксифильных нормобластов -
9.5 %. Зрелые эритроциты составили 85,3 %.
Исследование лейкограммы 540-дневных несушек показало, что бласт-ные формы составили всего 1,3 % от числа всех клеток белой крови. Молодые формы нейтрофилов и эозинофилов составили 2,5 и 5,8 % соответственно. IV класс зрелых клеток был представлен лимфоцитами - 79 %, сегментоядерными эозинофилами - 3,3 % и сегментоядерными нейтрофилами -
2.5 %. Эритропоэтический ряд на 84,3 % состояли из ортохромных эритроцитов. Бластные формы составили 1,7 %, молодые эритроциты - 14,0 %.
Анализ состава клеток крови 540-дневных петушков особых отличий не выявил. Так, белые клетки крови были представлены лимфобластами -0,4 %, монобласты и миелобласты содержались в равном количестве -по 0,3 %. Юные формы нейтрофилов составили 1,4 %, палочкоядерные нейтрофилы - 4,0 %. Эозинофилы на стадии миелоцита и метамиелоцита составили 0,5 и 0,3 % соответственно, палочкоядерные формы - 3,4 %. Пролимфоцитов было 2,0 %. Из зрелых клеток доминировали лимфоциты - 41,7 % и сегментоядерные нейтрофилы - 38,1 %, моноциты и сегменто-ядерные эозинофилы отмечены практически в равных количествах - 4,0 и 3,2 % соответственно. Эритропоэтический ряд представлен следующими клетками крови: эритробласты - 2,0 %, пронормобласты - 0,8 %, нормобласты базо-фильные - 1,2 %, нормобласты полихроматофильные - 1,4 %, нормобласты оксифильные - 9,1 %. Ортохромных эритроцитов было 84,8 %.
Анализ мазков крови петушков и курочек показал, что все особи, подвергнутые исследованию, имели симптомы анемии, проявляющиеся в нарушении деятельности органов кроветворения, уменьшении количества гемоглобина и числа эритроцитов в единстве объема крови. Анемия может развиваться вследствие повышенного кроверазрушения. В данном случае она является патологическим процессом, вызываемым различными факторами. Различное содержание в красных клетках дыхательного пигмента определяется как анизохромия (Силянский, 1986; Иванова, 1982). При малом содержании гемоглобина возникает гипохромазия, клетки бледные. Чаще данное явление - результат регенерации при кроветворении. Дегенеративное развитие эритроцитов нередко проявляется и в обратном направлении, т. е. созревание ядра при стимулировании эритропо-эза отстает от созревания цитоплазмы. Так, гипохромазия встречалась: у петушков в возрасте 24-х дней - 3,1 %, 56-ти дней - 7,4 %, 84-х дней -
5,0 %; у курочек в возрасте 240-ка дней - 2,4 %.
При тяжелом течении анемии изменяется обычная форма эритроцитов, образуются пойкилоциты. Пойкилоцитоз был отмечен у всех цыплят. Так, он встречался: у петушков в возрасте 1-го дня - 12,6 %, 3-х дней -13,4 %, 21-го дня - 17,5 %, 56-ти дней - 9,1 %, 84-х дней - 7,5 %; у курочек в возрасте 1-го дня - 2,2 %, 3-х дней - 8,5 %, 5-ти дней - 2,7 %, 21-го дня - 4,4 %, 56-ти дней - 12,2 %, 84-х дней - 16 %, 240-ка дней - 2,4 %, 540-ка дней - 5,0 %.
Гемолиз встречался в мазках: у петушков в возрасте 1-го дня - 7 %, 3-х дней - 4,9 %, 21-го дня - 9,2 %, 56-ти дней - 1,7 %, 84-х дней - 2,5 %; у курочек в возрасте 3-х дней - 4,5 %, 5-ти дней - 3,7 %, 21-го дня - 2,9 %, 56-ти дней - 3,2 %, 84-х дней - 1,6 %, 240-ка дней - 4,8 %, 540-ка дней - 4,5 %.
Кроме того, в клетках эритропоэтического ряда у исследуемых цыплят встречались клетки с вакуолизированной цитоплазмой: у петушков в возрасте 1-го дня - 4,1 %, 3-х дней - 7,5 %, 56-ти дней - 1,7 %; у курочек в возрасте 1-го дня - 3,4 %, 5-ти дней - 5 %, 21-го день - 2,3 %, 56-ти дней - 2,2 %.
Наличие клеток крови, цитоплазма которых заполнена крупными вакуолями или твердыми включениями, объясняется тем (Житенева, 1999), что эритроциты кроме дыхательной функции выполняют и выделительную.
Выводы
В результате исследований отмечены возрастные изменения состава развивающихся клеток белой и красной крови от бластных элементов (эритробластов, лимфобластов, монобластов, миелобластов) до появления зрелых (дефинитивных) форм.
Обнаружена половая гетерохрония в развитии клеток крови. У петушков на 24-й день жизни после вылупления, а у курочек на 240-й заканчивается дифференцировка клеток миелобластического ряда: появляются сегментоядерные эозинофилы, сегментоядерные нейтрофилы и моноциты.
СПИСОК ЛИТЕРА ТУРЫ
1. Житенева Л. Д., Полтавцева Т. Г., Рудницкая О. А. Атлас нормальных и патологически измененных клеток крови рыб. - Ростов н/Д.: Ростиздат, 1989. - 112 с.
2. Иванова Н. Т. Атлас клеток крови рыб. Сравнительная морфология и классификация форменных элементов крови рыб. - М.: Легкая и пищ. Пром-сть, 1982. - 184 с.
3. Силянский В. М. Анатомия и физиология сельскохозяйственной птицы. - М.: Агропромиздат, 1986. - 212 с.
Получено 23.01.04
DEVELOPMENT OF CELLS OF PERIPHERAL CHICKEN BLOOD IN ONTOGENESIS
O. V. Lozhnichenko, V. P. Zagriychuk
Hematological characteristics are one of the most important criteria of vital functions that testify physiological state of an organism. Complex changes showing any adoptive reaction are reflected in morphological composition of white blood. There have been observed age changes in composition of developing cells of white and red blood -from blast elements (erythroblasts, lymphoblasts, monoblasts, mieloblasts) to appearing of adult (definitive) forms. There has been found sexual heterochronia in development of blood cells - with cockerels on the 24th day after the hatch, and in hens on the 240th day finishes differention of cells of mieloblast row: there appear segmental nuclear eozinophils, segmental and nuclear neutrophils and monocytes.
