Развитие иммунодефицита вследствие аспленизации Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

© КАРГИН А.Г., РОЙ Т.А., АПАРЦИН К.А., ЗАРИЦКАЯ Л.В., ПОСТОВАЯ О.Н., БАТУНОВА Е.В., ЛЕПЕХОВА С.А., ПРОКОПЬЕВ М.В.,

ГРИГОРЬЕВ С.Е., КУВШИНОВ А.Г. — 2009

РАЗВИТИЕ ИММУНОДЕФИЦИТА ВСЛЕДСТВИЕ АСПЛЕНИЗАЦИИ

А.Г. Каргин, Т.А. Рой, К.А. Апарцин, Л.В. Зарицкая, О.Н. Постовая, Е.В. Батунова, С.А. Лепехова,

М.В. Прокопьев, С.Е. Григорьев, А.Г. Кувшинов (Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии СО РАМН, директор — член-корр. РАМН, д.м.н., проф. Е.Г. Григорьев;

Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах, ЦНИЛ,

зав. — к.м.н., доц. А.В. Стародубцев)

Резюме. Исследование выполнено с использованием аспленизированных животных, оценивали показатели неспецифической резистентности и воспалительной реакции организма в раннем послеоперационном периоде. Показатели контролировали на протяжении 2-х, 5-х и 7-х суток. Установлено, что аспленизация животных приводит к выраженным изменениям выбранных показателей к 7-м суткам, с развитием иммунодефицита, что проявляется депрессией фагоцитоза и неспецифической резистентности организма.

Ключевые слова: спленэктомия, неспецифическая резистентность, иммунодефицит.

THE DEVELOPMENT OF IMMUNODEFICIT AFTER SPLENECTOMY

A.G. Kargin, T.A. Roy, K.A. Aparcin, L.V. Zaritskaya, O.N. Postovaja, E. V. Batunova, S.A. Lepekhova,

M.V. Prokopjev, S.E. Grigorjev, A.G. Kuvshinov (Center for Reconstructive Surgery, Siberian Branch of Russian Academy of Medical Sciences, Irkutsk;

Irkutsk Institute for Postgraduate Medical Education)

Summary. The study has been executed on the animals without spleen. We evaluated the factors of nonspecific resistance and inflammatory reaction of an organism at early postoperative period. The indices were analysed during 2th, 5th and 7th days. It has been defined that splenectomy in animals results in considerable changes in the selected indices to the 7th day with the development of immunodeficit, that result in depression of fagocytosis and nonspecific resistance of an organism.

Key words: immunodeficit, splenectomy, inflammatory reaction.

Нормальное функционирование иммунной системы является одним из определяющих условий адекватного состояния физиологических систем организма. Основной компонент иммунной системы — лимфоидная система, состоящая из первичных (центральных) и вторичных (периферических) лимфатических органов. Наиболее крупный вторичный орган — это селезенка, содержащая до 25% общего числа лимфоцитов человека [2].

В настоящее время активно обсуждается вопрос о роли селезенки в иммунитете. Уделяется значительное внимание изучению иммунологических и физиологических функций селезенки [5]. Установлено, что после спленэктомии развивается иммунный дефицит, что предрасполагает к генерализации инфекции и возникновению синдрома отягощенной постспленэкто-мической инфекции (так называемый OPSI-syndrome) [6]. Клинические проявления которого развиваются, преимущественно, в отдаленном послеоперационном периоде и характеризуются астеническим синдромом, снижением антимикробной и антибластической резистентности организма вплоть до развития молниеносного сепсиса [4, 1]. Вопросы о том, какому именно нарушению иммунитета принадлежит приоритет в развитии осложнений при спленэктомии, остаются до конца не решенными. [3].

Целью настоящего исследования была оценка воспалительной реакции и неспецифической резистентности у крыс в условиях аспленизации, в ранний послеоперационный период.

Материалы и методы

Выполнение работы осуществлялось на базе научного отдела экспериментальной хирургии с виварием Научного центра реконструктивной и восстановительной хирургии НЦ РВХ СО РАМН совместно с Центральной научно-исследовательской лабораторией Иркутского государственного института усовершенствования врачей.

Животных содержали в условиях вивария при свободном доступе к воде и пище соответственно нормативам ГОСТа «Содержание экспериментальных животных в питомниках НИИ» (виварий I категории, вет. удостоверение №18-005304 от 27 октября 2004 г, администрация Иркутской области, управление ветеринарии). В эксперимент включали крыс-самцов породы Вистар в возрасте не менее 6 месяцев, весом 200-250г. Опыты на животных проводились в соответствии с правилами гуманного обращения с животными, которые регламентированы «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных Приказом МЗ СССР №742 от 13.11.84 г. «Об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и №48 от 23.01.85 г. «О контроле за проведением работ с использованием экспериментальных животных».

У всех экспериментальных крыс, в стерильных условиях выполняли спленэктомию с удалением всех обнаруженных очагов резидуальной ткани (полная асплени-зация).

Проведено исследование общего анализа крови и иммунологических показателей у аспленизированных

Таблица 1

Результаты показателей воспалительной реакции у животных при аспленизации (медиана, квартили)

Группы Сутки Лейкоциты (х 109) П (%) С (%) Э (%) М (%) Л (%)

2 7,5* (7,0-9,0) 0* (0-1,0) 43* (41-59) 2,5 (1,0-3,0) 3,0 (2,0-4,0) 50Ф (34-53)

СЭ 5 17,5*^ (16,0-19,0) 2,5^ (2,0-4,0) 59* (59-69) 0,5* (0-1,0) 2,5 (2,0-5,0) 33* (25-37)

7 32,0* (23,0-38,0) 4,0* (2,0-4.0) 50* (30-65) 1,5 (1,0-2,0) 4,5* (3,0-5,0) 42^ (39-59)

Норма 3,2 (3,2-3,3) 2,0 (1,0-2,0) 39 (38-40) 2,0 (2,0-2,0) 6,5 (6,0-7,0) 51 (50-52)

Примечания: *- значимые различия по критерию Даннета по сравнению с нормальным показателем (pD£0,05); — значимые различия по критерию Вилкоксона по сравнению с предыдущим показателем (pW£0,05).

Таблица 2

Результаты показателей неспецифической резистентности у животных при аспленизации (медиана, квартили)

Группы Сутки ЦИК ФИ (%) ФЧ НСТсп, (%) НСТинд. (%)

СЭ 2 б* (3-14) б4* (б4-б5) 1,8 (1,7-2,0) 0,5* (0-1,0) 1,0* (1,0-2,0)

5 4* (2-б) б3* (б0-75) 2,0 (1,9-2,1) 0,5* (0-1,0) 3,5* (2,0-4,0)

7 72* (5б-77) 40* (40-42) 1,4* (1,3-1,5) 0,5* (0-1,0) 0,5* (0-1,0)

Норма 22 (12-22) 53 (53-54) 1,9 (1,9-1,9) ,0) О, LO (4 15,0 (14,0-1б,0)

Примечания: *- значимые различия по критерию Даннета по сравнению с нормальным показателем (pD£0,05); — значимые различия по критерию Вилкоксона по сравнению с предыдущим показателем (pW£0,05).

животных. Забор анализов выполняли на 2-е, 5-е и 7-е сутки послеоперационного периода. За норму приняты показатели, полученные у 6 здоровых животных.

Результаты исследования

Для оценки воспалительной реакции организма на аспленизацию контролировали количество лейкоцитов и форменных элементов в венозной крови (табл. 1).

Отмечено, что уровень лейкоцитов в крови экспериментальных животных на 2-е сутки был существенно повышенным по сравнению с нормой (pD<0,006). А на 7-е сутки исследования закономерно сохранялся лейкоцитоз, при этом уровень лейкоцитов был максимальным (pD<0,004; pW<0,006).

При анализе лейкоцитарной формулы в мазке крови отмечено несущественное возрастание количества сегментоядерных нейтрофилов и снижение лимфоци-

тов на 2-е сутки. Изменения лейкоцитарной формулы в наибольшей степени происходили на 7-е сутки послеоперационного периода. А также отмечалось относительное увеличение количества сегментоядерных нейтрофилов, статистически значимо отличающееся от нормы. Описанные сдвиги лейкоцитарной формулы сопровождались синхронным увеличением удельного веса моноцитов в формуле крови.

Далее рассмотрим результаты исследования неспецифической резистентности организма, показатели фагоцитоза, представленные в таблице 2.

Отметим, что на вторые сутки исследования процент нейтрофилов, участвующих в фагоцитозе, достоверно возрастал. В свою очередь фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов существенно снижалась на 7-е сутки эксперимента по сравнению с нормой.

При исследовании величины спонтанного и индуцированного НСТ-теста на вторые и пятые сутки нами выявлено существенное снижение показателей, по сравнению с нормой (pDё0,0001).

При оценке величины спонтанного НСТ-теста на 7-е сутки выявлена существенная депрессия по сравнению с нормой. Реакция индуцированного НСТ-теста на 7-е сутки выявила существенное снижение этого показателя у всех спленэктомированных животных

Для оценки функции фагоцитарной системы нами были исследованы уровни циркулирующих иммунных комплексов. Результаты динамической оценки ЦИК представлены в таблице 2.

Следует отметить, что при оценке количества ЦИК на 5-е сутки отмечалась выраженная депрессия ^£0,05; ри£0,0001).

Установлено, что аспленизация животных приводит к выраженным изменениям выбранных показателей к 7-м суткам, с развитием иммунодефицита, что проявляется депрессией фагоцитоза и неспецифической резистентности организма.

ЛИТЕРАТУРА

1. Матинян Н.С. Аутотрансплантация размельченной селезеночной пульпы в эксперименте (экспериментальное исследование): Автореф. ... канд. мед. наук. — М., 1986. — 22 с.

2. Павлова И.Е. Особенности функционирования иммунной системы после спленэктомии у пациентов с заболеваниями системы крови и травмами селезенки: Автореф. . док. мед. наук. — С-Пб., 2007. — 42 с.

3. Сорокин А.П., Полянкин Н.Я., ФедонюкЯ.И. Клиническая морфология селезенки. — М.: Медицина, 1989. — 160с.

4. Acea Nebril B. Acute abdomen caused by thrombosis of the portal and superiror mesenterie veins in a splenectomized hematologic patient / B. Acea Nebril, M. Marini Dhaz, J. Fraguela Marica [ et al.] // Gastroenterol hepatol. — 1997. — Vol. 20. — № 6. — P. 299-302.

5. Buntain W.L., Lynn H.B. Splenorraphy: changing concepts for the traumatized spleen // Surgerry. — 1979. — Vol. 86. — № 5. — P. 748-760.

6. Dujmovic F Post-traumatic asplenia and splenosis // Med Pregl. — 1993. — Vol. 46. — № 7-8. — P. 264-267.

Адрес для переписки: 664079 Иркутск, Юбилейный, 100, а/я 23.

Александр Германович Каргин — аспирант НЦРВХ СО РАМН;

Татьяна Аркадьевна Рой — м.н.с. ОЭХ НЦРВХ СО РАМН, тел. 89021771894;

Константин Анатольевич Апарцин — д.м.н., профессор НЦРВХ СО РАМН;

Лариса Васильевна Зарицкая — к.б.н., зав. лабораторным отделом ЦНИЛ ИГИУВ Ольга Николаевна Постовая — м.н.с. лабораторного отдела ЦНИЛ ИГИУВ;

Елена Владимировна Батунова — м.н.с. лабораторного отдела ЦНИЛ ИГИУВ;

Светлана Александровна Лепехова — к.б.н., заведующая ОЭХ НЦРВХ СО РАМН, [email protected] 407-666; Максим Владимирович Прокопьев, Сергей Евгеньевич Григорьев, Артем Геннадьевич Кувшинов

© ЛЕПЕХОВА С.А., АПАРЦИН К.А., ЗАРИЦКАЯ Л.В., ПОСТОВАЯ О.Н., БАТУНОВА Е.В., ПРОКОПЬЕВ М.В., КАРГИН А.Г., РОЙ Т.А., КОВАЛЬ Е.В. — 2009

ВЛИЯНИЕ КСЕНОТРАНСПЛАНТАЦИИ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК ПЕЧЕНИ НА ИЗМЕНЕНИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ПРИ ОСТРОМ ТОКСИЧЕСКОМ ПОВРЕЖДЕНИИ ПЕЧЕНИ

С.А. Лепехова, К.А. Апарцин, Л.В. Зарицкая, О.Н. Постовая, Е.В. Батунова,

М.В. Прокопьев, А.Г. Каргин, Т.А. Рой, Е.В. Коваль (Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии СО РАМН, директор — член-корр. РАМН, д.м.н., проф. Е.Г. Григорьев; Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах, ЦНИЛ, зав. — к.м.н., доц. А.В. Стародубцев)

Резюме. Нами были проанализированы показатели неспецифической реакции организма на токсическое повреждение печени при коррекции ксенотрансплантацией культуры эмбриональных криоконсервированных кле-