CC BY
23
ВЕТЕРИНАРИЯ И ЗООТЕХНИЯ
4.2.3. ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ И ИММУНОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ _(БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ)
УДК 579.62 DOI 10.18286/1816-4501-2022-1-155-161
РАЗРАБОТКА УСКОРЕННОЙ СХЕМЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ
ИДЕНТИФИКАЦИИ AEROMONAS VERONII
Минаева Ангелина Николаевна, аспирант кафедры «Микробиология, вирусология, эпизоотология и ветеринарно - санитарная экспертиза»
Ломакин Артем Андреевич, аспирант кафедры «Микробиология, вирусология, эпизоотология и ветеринарно - санитарная экспертиза»
Феоктистова Наталья Александровна, кандидат биологических наук, доцент кафедры «Микробиология, вирусология, эпизоотология и ветеринарно - санитарная экспертиза»
Сульдина Екатерина Владимировна, ассистент кафедры «Микробиология, вирусология, эпизоотология и ветеринарно - санитарная экспертиза» ФГБОУ ВО Ульяновский ГАУ
432017, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1; 8(8422)55-95-47 e-mail: [email protected]
Ключевые слова: A. veronii, аэромоноз, схема, выделение. идентификация, питательные среды, физио-лого-биохимические показатели
В статье представлены результаты исследований по разработке ускоренной схемы выделения и бактериологической идентификации бактерий Aeromonas veronii, вызывающих совместно с A. salmonicida subsp. salmonicida, A. hydrophila, A. sobria, A. eucrenophila A. сaviae аэромоноз лососевых и карповых рыб. Эксперименты осуществлялись на бактериальном штамме Aeromonas veronii biogroup sobria - АТСС 9071. Схема состоит из трех этапов: первый - выделение микроорганизмов из исследуемого образца с применением накопительной питательной среды A.vA-УГАУ оригинальной авторской рецептуры; второй этап - пересев типичных для Aeromonas veronii колоний на авторскую плотную дифференциально-диагностическую среду Av^^A^ третий этап - изучение физиолого-биохимических показателей: определение подвижности, продукция оксидазы, утилизация ксилозы, образование пигмента у выросших бактериальных колоний на ГРМ-агаре с тирозином, декарбоксилирование лизина и орнитина, гидролиз аргинина, ферментация лактата. Предложенный способ выделения и идентификации позволит за 120 часов дифференцировать Aeromonas veronii от бактерий-ассо-циантов, включая A. salmonicida, A. hydrophila, A. сaviae, при относительно невысоких затратах на питательные среды и реактивы.
Введение
Согласно литературным данным, бактерии вида Aeromonas veronii являются инфекционным агентом, вызывающим заболевания человека, животных и рыб [1-4]. Aeromonas veronii выделяют при желудочно-кишечных заболеваниях и широком спектре системных заболеваний теплокровных [5-6]. Часто вышеназванные бактерии выделяются при воспалительных процессах у иммунокомпрометированных паци-
ентов, особенно с циррозом печени и злокачественными новообразованиями [7-8].
Бактерии вида Aeromonas veronii широко встречается в водной среде, большинство выделенных бактериальных штаммов проявляют высокую патогенность [9-10]. Некоторые исследователи относят Aeromonas veronii к группе возбудителей аэромоноза лососевых и карповых рыб совместно A. salmonicida subsp. salmonicida, A. hydrophila, A. sobria, A. eucrenophila A. caviae
[11-13].
На сегодняшний день в Российской Федерации стандартизированная методология для типизации бактерий Aeromonas veronii отсутствует, поэтому разработка схемы выделения и идентификации A. veronii является актуальной темой для исследований, разработка которой позволит провести скрининг объектов ветеринарного надзора на наличие вышеназванного патогена.
Цель исследований - разработка ускоренной схемы выделения и бактериологической идентификации бактерий вида Aeromonas ve-ronii.
Материалы и методы исследований
Эксперименты осуществлялись на бактериальном штамме Aeromonas veronii biogroup sobria - АТСС 9G71.
Для оценки эффективности разрабатываемых селективных сред для Aeromonas veronii были использованы штаммы бактерий: Aero-monas caviae ATCC15468, Aeromonas salmonicida ATCC 33658, Aeromonas hydrophila ATCC 49240, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Entero-coccus faecalis, Streptococcus pneumonia, Listeria monocytogenes, Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Salmonella infantis, Serratia marc-escens, Pseudomonas mirabilis, Escherichia coli, Alcaligenaceae spp., Acinetobacter calcoaceticus, характеризующиеся типовыми биологическими свойствами.
Оборудование: микроскоп ZEISS Primo Star (Германия), тринокуляр с видеосистемой, термостат TC-8GM-2, шкаф сушильно-стерилиза-ционный ШСС^п УХЛ 424, автоклав ГК-^-З, установка бактерицидная УГД-2, холодильник бытовой, лабораторная посуда.
Питательные среды и реактивы: бульон с лизином (HiMedia, Индия), бульон с аргинином (HiMedia, Индия), бульон с орнитином (HiMedia, Индия), ГРМ-агар (ФБУН «ГНЦ ПМБ», Оболенск), D-ксилоза (Dia-m, Россия), мальтоза (Dia-m, Россия), лактат (JINDAN, Китай), натрий хлорид (Dia-m, Россия), сульфат магния (ЛенРе-актив, г. Санкт-Петербург), гидрофосфат калия (AppliChem, Испания), пептон сухой ферментативный (ГНЦ ПМБ, Россия), хлорид бария (Не-ваРеактив, Россия), SDS (Applephem, Германия), агар бактериологический (Dia-m, Россия), крахмал (HiMedia, Индия), иргозан (Sigma-Aldrich, Германия), хлорид аммония (ЛенРеактив, г. Санкт-Петербург), бромтимоловый синий (Лен-Реактив, г. Санкт-Петербург), тирозин-L (Dia-m, Россия), гидроксид калия (Компонент-Реактив,
Россия).
Микроскопические исследования проводились с использованием Диахим набора для окраски по Граму(НПФ АБРИС +, Россия).
Бактериологическая схема выделения и идентификации A. veronii строилась на использовании общепринятых микроскопических и бактериологических методов идентификации бактерий [14-15].
Результаты исследований
Первый блок исследований был посвящен изучению биологических свойств Aeromonas veronii - АТСС 9071. Было установлено, что бактерии обладают типовыми свойствами и могут быть использованы в качестве тест-объекта для апробации разрабатываемой ускоренной схемы выделения и идентификации Aeromonas veronii.
Вторым этапом исследований была разработка оригинальных селективных сред - жидкой среды накопления и плотной дифференциально-диагностической среды. Конструирование питательных сред осуществлялось методом эмпирического подбора компонентов и их концентраций. Составы сконструированных селективных сред представлены в таблицах1-2.
Таблица 1
Состав жидкой среды накопления A.v.1-УГАУ для выделения бактерий вида A. veronii pH=7,4)
Компонент среды Концентрация (г/л)
Н20 (дистиллированная) 1GGG мл
С12Н22О11 3,G
К2НРО4 1,G
NaCl 5,G
Пептон сухой ферментативный 1,G
ВаС1 1,G
Додецилсульфат натрия 5,G
Бромтимоловый синий G,G8
Таблица 2
Состав дифференциально-диагностической среды A.v^-УГАУ для идентификации бактерий вида A. veronii (pH=7,4)
Компонент среды Концентрация (г/л)
Н20 (дистиллированная) 1GGG мл
Агар бактериологический 15,G
Пептон 6,G
(СбНю05)п 2G,G
NaCl 5,G
ВаС1 1,G
Додецилсульфат натрия 5,G
Иргозан G,G6
Бромтимоловый синий G,G8
Способ приготовления: в дистиллированной воде растворяли вышеперечисленные компоненты. Среду накопления перед стерилизацией разливали по 5 мл в пробирки. Для выведения pH среды использовали 0,1 М раствор гидроксида калия. Водородный показатель доводили до значения 7,4. Стерилизовали при температуре 121°С 40 мин. Среда имеет болот-но-зеленый цвет.
Изучение специфичности авторских селективных сред (A.v.l-УГАУ и А^.2-УГАУ) осуществляли, используя контрольный высев на них бактерий-ассоциантов. Параметры культивирования - в течение 23±1 ч. при температуре 30-35°С. По итогам исследования было установлено, что в жидкой среде накопления на среде A.v.l-УГАУ не способны развиваться: Bacillus sub-tilis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus pneumonia, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Alcaligenaceae spр., Acinetobacter calcoaceticus, Aeromonas caviae ATCC15468, Aeromonas salmonicida ATCC 33658 (рис. 1). Бактерии видов Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Salmonella infantis, Serratia marcescens, Pseudomonas mirabilis, Aeromonas hydrophila ATCC 49240 подобно штамму Aeromonas veronii
- АТСС 9071 растут с изменением цвета среды с болотно-зеленого на желтый (рис. 2).
Определение возможности роста бакте-рий-ассоциантов на дифференциально-диагностической среде A.v.2-yrAy позволило установить, что Aeromonas hydrophila ATCC 49240 проявляет сходный рост с колониями Aeromonas veronii - АТСС 9071 (колонии округлые, желтые, размером в диаметре 0,5 мм, с гладкой поверхностью и ровным краем), с изменением цвета среды с болотно-зеленого на желтый под колониями (рис. 1 А). Бактерии вида Aeromonas salmonicida ATCC 33658 и Citrobacter freundii растут также с изменением цвета среды с болотно-зе-леного на желтый (рис. 1 Б). Выросшие колонии
- округлой формы, желто-зеленого цвета, им характерна гладкая поверхность, ровный край и мелкий размер. Рост микроорганизмов вида Serratia marcescens и Acinetobacter calcoaceticus отличаются цветом колоний (фиолетовые и зеленые соответственно) и отсутствием изменения цвета среды. Бактерии Salmonella infantis, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Streptococcus pneumonia, Enterococcus faecalis, Listeria monocytogenes, Alcaligenaceae spр., Aeromonas caviae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas mirabilis на разработанной дифференциально-диагностической среде роста не
Рис. i - Культивирование бактерий Esch-erichia coli, Alcaligenaceae spр., Acinetobacter calcoaceticus, Aeromonas caviae ATCC 15468, Aeromonas salmonicida ATCC 33658, Listeria monocy-togenes, Bacillus subtilis, Streptococcus pneumo-niae в пробирках со средой накопления A.v.i-УГАУ через 24 ч при температуре 30°С
Рис. 2 - Культивирование бактерий Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Salmonella infantis, Serratia marcescens, Pseudomonas mirabilis, Aeromonas hydrophila ATCC 49240, Aeromonas veronii АТСС 9071 в пробирках со средой накопления A.v.l-УГАУ через 24 ч при температуре 30С
проявляли (рис. 1 Б).
Третьим этапом экспериментов была аналитическая работа по подбору физиолого-био-химических свойств, которые позволят ускоренно дифференцировать бактерии, культивированные на питательных средах оригинальной авторской рецептуры. Было установлено, что изучение таких характеристик, как определение подвижности, продукции оксидазы, утилизации ксилозы, образования пигмента у выросших бактериальных колоний на ГРМ-агаре с тирози-
А Б
Рис. 3 - Чашки со средой А^.2-УГАУ: А - Aeromonas veronii - АТСС 9071, Б - Авготопа5 5о1топ1с1-ба АТСС33658; АстегоЬаОвг са1соасеЪ'сш, А1саНдепасеае spр., Aeromonas caviae (парамерты культивирования - 48 часов при t =300С)
ном, декарбоксилирование лизина и орнитина, гидролиз аргинина, ферментация лактата, позволяет получить положительный результат исследований. Вышеназванные показатели были выбраны на основании твердо положительного или твердо отрицательного результата для изучаемого вида бактерий, так как иные дифференциально-диагностические тесты, описанные в литературных источниках [16-17], не дают точных результатов.
Таким образом, авторский коллектив разработал ускоренную схему выделения и типиро-вания бактерий вида Aeromonas veronii, схематично изображенную на рисунке 3, позволяющую получить результат за 120 часов.
Алгоритм исследования по авторской схеме:
1. Выделение бактерий из пробы, которую в количестве 1 (г) мл вносят в А^.1-УГАУ (параметры культивирования -24 ч при t=30°C). Установлено, что на данной среде изучаемые штаммы бактерий Aeromonas, Pseudomonas Citrobacter, Serratia, Klebsiella, Salmonella растут, изменяя цвет среды с болотно-зеленого на желтый, также образуют осадки и помутнение среды.
2. Из A.v.1-yrAy делается посев на A.v.2-УГАУ (параметры культивирования 24 ч при t=30°C). На данной среде бактерии вида A. veronii АТСС 9071 образуют колонии, характеризующиеся: округлой формой, глянцевой поверхностью с ровными краями, диаметром 0,5 мм, желтым цветом колоний и пожелтением среды под ними.
3. Проводят дальнейшее исследование для видовой идентификации выросших колоний на селективной среде А^.2-УГАУ.
3.1 Окраска колоний бактерий по методу Грама - грамотрицательные палочки.
3.2 Изучают подвижность на полужидком ГРМ-агаре (параметры культивирования 24 ч при t=30°С). Бактерии вида А. veronii подвижны.
3.3 Бактериальные колонии исследуют на оксидазную активность - продуцируют оксидазу.
3.4 Способность утилизировать ксилозу проверяют на ГРМ-агаре с ксилозой. Колонии бактерии вида А. veronii синего цвета (отрицательная реакция).
3.5 Фиксируют продукцию изучаемыми бактериальными штаммами аргинингидролазы, орнитин- и лизиндекарбоксилазы. Для определения способности выделенных бактерий де-карбоксилировать лизин и орнитин, вызывать гидролиз аргинина производят посев в бульоны с указанными аминокислотами (параметры культивирования 24 ч при t=30°С). Положительный результат отмечается только в пробирках с аргинином и лизином в виде изменения цвета среды, что свидетельствует о способности де-карбоксилировать указанные аминокислоты.
3.6 Определяют ферментацию лактата. Для исследования готовят солевую среду, содержащую лактат, используя следующую рецептуру: NaCl- 4,0 г/л, MgSO4 - 0,2 г/л, Na2HPO4 -1,0 г/л, лактат - 6,0 мл, N^0 - 0,8 г/л, бромтимоло-вый синий - 0,08 г/л. (параметры культивирования 24 ч при t=30°С). Бактерии вида А. veronii на
данной среде не растут и цвет среды не изменяют, поскольку не утилизируют лактат.
3.7 Образование бурого пигмента определяют путем посева на скошенный ГРМ-агар в пробирках с 0,1% тирозином. Результат снимают после 48 ч культивирования при температуре 30°С (бактерии вида A. veronii пигмент не образует).
Обсуждение
Полученные нами данные, характеризующие физиолого-биохимические свойства бактерии Aeromonas veronii - АТСС 9071, свидетельствуют о том, что изучаемый штамм обладает типовыми характеристиками, описанными в литературных источниках [18-20]. Научных публикаций на русском языке, описывающих схемы выделения и идентификации вышеназванных бактерий нами найдено не было.
Изложенный экспериментальный материал по разработке ускоренной схемы выделения и типирования бактерий Aeromonas veronii включает три этапа и применение питательных сред оригинальной авторской рецептуры -A.v.l-УГАУ - накопительной, A.v.2-yrAy - дифференциально-диагностической. Таким образом, предложенный авторами способ выделения и идентификации позволит за 120 часов дифференцировать Aeromonas veronii от бактерий-ас-социантов, включая A. salmonicida, A. hydrophila, A. caviae, при относительно невысоких затратах на питательные среды и реактивы.
Заключение
На основании данных, полученных при изучении биологических свойств штамма Aeromonas veronii - АТСС 9071, была разработана ускоренная схема выделения и бактериологической идентификации указанного микроорганизма, которая позволяет конкретизировать количество тестов для типирования вышеназванного микроорганизма до 10, снизив тем самым материальные затраты на исследования, а также провести скрининг объектов ветеринарного надзора на наличие вышеназванного патогена в течение 120 часов. Полученные в ходе планируемых экспериментов «полевые» штаммы бактерий Aeromonas veronii будут использованы в перспективе как индикаторные штаммы при выделении и селекции специфических бактериофагов.
Библиографический список
1. Challenges of unculturable bacteria: environmental perspectives / A. Bodor, N. Bounedjoum, G. Vincze, A. Kis, K. Laczi, G. Bende, A. Szila'gyi, T.
Kova'cs, K. Perei // Reviews in Environmental Science and Bio/Technology. - 2020. - № 19. - P. 1-22.
2. Proteomic characterization and discrimination of Aeromonas species recovered from meat and water samples with a spotlight on the antimicrobial resistance of Aeromonas hydrophila / A. Elbehiry, E. Marzouk, E. Abdeen, M. Al-Dubaib, A. Alsayeqh, M. Ibrahem, M. Hamada, A. Alenzi, I. Moussa, H. Hemeg // The Open Microbiology. -2019. - P. 1-14.
3. Distribution of virulence factors and molecular fingerprinting of Aeromonas species isolates from water and clinical samples: suggestive evidence of water -to -human transmission / B. Khajanchi, A. Fadl, M. Borchardt, R. Berg, A. Hor-neman, M. Stemper, S. Joseph, N. Moyer, J. Sha, A. Chopra // Applied and Environmental Microbiology. - 2010. - № 76. - P. 2313 -2325.
4. Diversity and antibiotic resistance of Aeromonas spp. in drinking and waste water treatment plants / V. Figueira, I. Vaz -Moreira, M. Silva, C. Ma-naia // Water Research. - 2012. - № 45. - P. 5599 -5611.
5. Bhowmick, U. D. Bacteriological, clinical and virulence aspects of Aeromonas-associated diseases in humans / U. D. Bhowmick, S. Bhattacha-rjee // Polish Journal of Microbiology. - 2018. - № 67. - P. 137-149.
6. Phylogenetic diversity, antibiotic resistance and virulence traits of Aeromonas spp. from untreated waters for human consumption / M. Carvalho, A. Martinez -Murcia, A. Esteves, A. Cor-reia, M. Saavedra // The International Journal of Food Microbiology. - 2012. - № 159. - P. 230 - 239.
7. Hoel, S. Species distribution and prevalence of putative virulence factors in Mesophilic Aeromonas spp. isolated from fresh retail sushi / S. Hoel, O. Vadstein, A. N. Jakobsen // Frontiers in Microbiology. - 2017. - № 8. - P. 1-11.
8. Emerging Aeromonas species infections and their significance in public health / I. H. Igbino-sa, E. U. Igumbor, F. Aghdasi, M. Tom, A. I. Okoh // The Scientific World Journal. - 2012. - P. 1-13.
9. Phylogenetic characterization of bacteria in the gut of house flies ( Musca domestica L.) / A. K. Gupta, D. Nayduch, P. Verma [et al.] // FEMS Microbiology Ecology. - 2012. - № 79. - P. 581-593.
10. Aeromonas spp. from marketed Yesso scallop (Patinopecten yessoensis): Molecular characterization, phylogenetic analysis, virulence properties and antimicrobial susceptibility / B. Silva, S. Hossain, P. Dahanayake, G. Heo // Veterinary Medical Center and College of Veterinary Medicine. -2019. - 126(1). - P. 288-299.
11. Multi-drug resistance mediated by class 1 intégrons in Aeromonas isolated from farmed fresh water animals / Y. Deng, Y. Wu, L. Jiang, A. Tan, R. Zhang, L. Luo // Frontiers in Microbiology. - 2016. -№ 7. - P. 935-942.
12. Molecular identification and epizootiol-ogy of Aeromonas veronii infection among farmed Oreochromis niloticus in Eastern Province, KSA, Egypt / M. A. Hassan, E. A. Noureldin, M. A. Mahmoud, N. A. Fita // Journal of Aquatic Research. -2017. - № 43. - Р. 161-167.
13. Detection and characterization of virulence genes and integrons in Aeromonas veronii isolated from catfish / M. Nawaz, S. Khan, A. Khan, K. Sung, Q. Tran, K. Kerdahi, R. Steele // Food Microbiology. - 2010. - № 27. - Р. 327 -331.
14. Равилов, А. З. Микробиологические среды / А. З. Равилов, З. Я. Гильмутдинов, М. Ш. Хусаинов. - Казань : ФЭН, 1999. - 398 с. - ISBN 5-7544-0137-Х.
15. Лабинская, А. С. Микробиология с техникой микробиологичкских исследований / А. С. Лабинская. - Москва : Медицина, 1972. - 356 с.
16. Aeromonas veronii virulence and adhesion attenuation mediated by the gene aodp / L. Zhang, S. Jin, C. Feng, H. Song, S. H. A. Raza, H. Yu,
L. Zhang, T. Chi, Y. Qi, D. Zhang, A. Qian, N. Liu, X. Shan // The Journal of Fish Diseases. - 2022. - № 45(2). - P. 231-247.
17. Frequency and diversity of small plasmids in mesophilic Aeromonas isolates from fish, water and sediment / D. Pérez-García, V. Larios-Serrato, R. Rojas-Rios, J. E. Otero-Olarra, I. Mendoza-Sanchez, E. Curiel-Quesada, A. Pérez-Valdespino // Plasmid.
- 2021. - No. 118. - P. 102607.
18. Characterization and Antimicrobial Resistance of Environmental and Clinical Aeromonas Species Isolated from Fresh Water Ornamental Fish and Associated Farming Environment in Sri Lanka / P. M. Dhanapala, R. S. Kalupahana, A. W. Kalupa-hana, D. P. H. Wijesekera, S. A. Kottawatta, N. K. Jayasekera, A. Silva-Fletcher, S. S. Jagoda // Microorganisms. - 2021. - № 9(10). - P. 2106.
19. Janda, J. M. The Genus Aeromonas: Taxonomy, Pathogenicity, and Infection / J. M. Janda, S. L. Abbott // Clinical Microbiology Reviews. - 2010.
- № 23. - P. 35-73.
20. Virulence and Antimicrobial Resistance Pattern of Aeromonas spp. Colonizing European Pond Turtles Emys orbicularis and Their Natural Environment / L. Guz, A. Nowakiewicz, K. Puk, P. Zi^ba, S. Gnat, t. Matuszewski // First Study from Poland. Animals (Basel). - 2021. - № 11. - P. 2772.
DEVELOPMENT OF A RAPID SCHEME FOR ISOLATION AND BACTERIOLOGICAL IDENTIFICATION OF AEROMONAS
VERONII
Minaeva A.N., Lomakin A.A., Feoktistova N.A., Suldina E.V.
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education Ulyanovsk State Agrarian University 432017, Ulyanovsk, Novyi Venets boulevard, 1; 8(8422)55-95-47 e-mail: [email protected]
Key words: A. veronii, aeromonosis, scheme, isolation, identification, nutrient media, physiological and biochemical parameters
The article presents results of the studies on development of a rapid scheme for isolation and bacteriological identification of Aeromonas veronii bacteria, which induce aeromonosis of salmon and cyprinids, as well as A. salmonicida subsp. salmonicida, A. hydrophila, A. sobria, A. eucrenophila A. caviae. The experiments were carried out on the bacterial strain Aeromonas veronii biogroup sobria - ATSS 9071. The scheme consists of three stages: the first is the isolation of microorganisms from the test sample using the A.v.1-UlGAU accumulative nutrient medium of the original author's formula; the second stage is reseeding of colonies typical for Aeromonas veronii on the author's dense differential diagnostic medium A.v.2-UlGAU; the third stage is the study of physiological and biochemical parameters: mobility specification, oxidase production, xylose utilization, pigment formation of grown bacterial colonies on GRM agar with tyrosine, decarboxylation of lysine and ornithine, arginine hydrolysis, lactate fermentation. The proposed isolation and identification method will allow to differentiate Aeromonas veronii from associated bacteria, including A. salmonicida, A. hydrophila, A. caviae, within 120 hours, at relatively low costs for nutrient media and reagents.
Bibliography:
1. Challenges of unculturable bacteria: environmental perspectives/A. Bodor, N. Bounedjoum, G. Vincze, A. Kis, K. Laczi, G. Bende, A. Szila'gyi, T. Kova'cs, K. Perei//Reviews in Environmental Science and Bio/Technology. - 2020. - № 19. - P. 1-22.
2. Proteomic characterization and discrimination of Aeromonas species recovered from meat and water samples with a spotlight on the antimicrobial resistance of Aeromonas hydrophila /A. Elbehiry, E. Marzouk, E. Abdeen, M. Al-Dubaib, A. Alsayeqh, M. Ibrahem, M. Hamada, A. Alenzi, I. Moussa, H. Hemeg // The Open Microbiology. - 2019. - P. 1-14.
3. Distribution of virulence factors and molecular fingerprinting of Aeromonas species isolates from water and clinical samples: suggestive evidence of water-to -human transmission / B. Khajanchi, A. Fadl, M. Borchardt, R. Berg, A. Horneman, M. Stemper, S. Joseph, N. Moyer, J. Sha, A. Chopra //Applied and Environmental Microbiology. - 2010. - № 76. - P. 2313 -2325.
4. Diversity and antibiotic resistance of Aeromonas spp. in drinking and waste water treatment plants / V. Figueira, I. Vaz -Moreira, M. Silva, C. Manaia // Water Research. - 2012. - № 45. - P. 5599 -5611.
5. Bhowmick, U. D. Bacteriological, clinical and virulence aspects of Aeromonas-associated diseases in humans/ U. D. Bhowmick, S. Bhattacharjee//Polish Journal of Microbiology. - 2018. - № 67. - P. 137-149.
6. Phylogenetic diversity, antibiotic resistance and virulence traits of Aeromonas spp. from untreated waters for human consumption / M. Carvalho, A. Martínez -Murcia, A. Esteves, A. Correia, M. Saavedra // The International Journal of Food Microbiology. - 2012. - № 159. - P. 230 - 239.
7. Hoel, S. Species distribution and prevalence of putative virulence factors in Mesophilic Aeromonas spp. isolated from fresh retail sushi / S. Hoel, O. Vadstein, A. N. Jakobsen //Frontiers in Microbiology. - 2017. - № 8. - P. 1-11.
8. Emerging Aeromonas species infections and their significance in public health /1. H. Igbinosa, E. U. Igumbor, F. Aghdasi, M. Tom, A. I. Okoh // The
Scientific World Journal. - 2012. - P. 1-13.
9. Phylogenetic characterization of bacteria in the gut of house flies (Musca domestica L.)/A. K. Gupta, D. Nayduch, P. Verma [et al.] // FEMS Microbiology Ecology. - 2012. - № 79. - P. 581-593.
10. Aeromonas spp. from marketed Yesso scallop (Patinopecten yessoensis): Molecular characterization, phylogenetic analysis, virulence properties and antimicrobial susceptibility/ B. Silva, S. Hossain, P. Dahanayake, G. Heo // Veterinary Medical Center and College of Veterinary Medicine. - 2019. -126(1). - P. 288-299.
11. Multi-drug resistance mediated by class 1 integrons in Aeromonas isolated from farmed fresh water animals / Y. Deng, Y. Wu, L. Jiang, A. Tan, R. Zhang, L. Luo //Frontiers in Microbiology. - 2016. - № 7. - P. 935-942.
12. Molecular identification and epizootiology of Aeromonas veronii infection among farmed Oreochromis niloticus in Eastern Province, KSA, Egypt / M. A. Hassan, E. A. Noureldin, M. A. Mahmoud, N. A. Fita //Journal of Aquatic Research. - 2017. - № 43. - P. 161-167.
13. Detection and characterization of virulence genes and integrons in Aeromonas veronii isolated from catfish / M. Nawaz, S. Khan, A. Khan, K. Sung, Q. Tran, K. Kerdahi, R. Steele //Food Microbiology. - 2010. - № 27. - P. 327 -331.
14. Ravilov, A. Z. Microbiological media/A. Z. Ravilov, Z. Ya. Gilmutdinov, M. Sh. Khusainov. - Kazan: FEN, 1999. - 398 p. - ISBN 5-7544-0137-X.
15. Labinskaya, A. S. Microbiology with the technique of microbiological research / A. S. Labinskaya. - Moscow: Medicine, 1972. - 356 p.
16. Aeromonas veronii virulence and adhesion attenuation mediated by the gene aodp/L. Zhang, S. Jin, C. Feng, H. Song, S. H. A. Raza, H. Yu, L. Zhang, T. Chi, Y. Qi, D. Zhang, A. Qian, N. Liu, X. Shan // The Journal of Fish Diseases. - 2022. - № 45(2). - P. 231-247.
17. Frequency and diversity of small plasmids in mesophilic Aeromonas isolates from fish, water and sediment/D. Pérez-García, V. Larios-Serrato, R. Rojas-Rios, J. E. Otero-Olarra, I. Mendoza-Sanchez, E. Curiel-Quesada, A. Pérez-Valdespino //Plasmid. - 2021. - № 118. - P. 102607.
18. Characterization and Antimicrobial Resistance of Environmental and Clinical Aeromonas Species Isolated from Fresh Water Ornamental Fish and Associated Farming Environment in Sri Lanka /P. M. Dhanapala, R. S. Kalupahana, A. W. Kalupahana, D. P. H. Wijesekera, S. A. Kottawatta, N. K. Jayasekera, A. Silva-Fletcher, S. S. Jagoda //Microorganisms. - 2021. - № 9(10). - P. 2106.
19. Janda, J. M. The Genus Aeromonas: Taxonomy, Pathogenicity, and Infection / J. M. Janda, S. L. Abbott // Clinical Microbiology Reviews. - 2010. - № 23. - P. 35-73.
20. Virulence and Antimicrobial Resistance Pattern of Aeromonas spp. Colonizing European Pond Turtles Emys orbicularis and Their Natural Environment / L. Guz, A. Nowakiewicz, K. Puk, P. Zi^ba, S. Gnat, t. Matuszewski // First Study from Poland. Animals (Basel). - 2021. - № 11. - P. 2772.
