CC BY
130
РАЗРАБОТКА СОСТАВА, ТЕХНОЛОГИИ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ТАБЛЕТИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ПРЕПАРАТА НООТРОПНОГО И НЕЙРОПРОТЕКТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ
И.А. Зимина \ С.Н. Суслина \ К.В. Алексеев 2, Б.М. Пятин 2, О.Б.
Степаненко2, Л.Н. Грушевская 2, A.B. Гусев 2
1 Кафедра общей фармацевтической и биомедицинской технологии, медицинский факультет, РУДН, Миклухо-Маклая, 8,
117198, Москва, Россш
21
ГУ НИИ фармакологии РАМН, ул. Балтийская, 8,
103112, Москва, Россия
Статья посвящена исследованиям по разработке состава и технологии таблетирован-ной лекарственной формы нового препарата ноопепт, а также стандартизации разработанных таблеток. Осуществлён подбор вспомогательных веществ и разработана оптимальная технология получения таблеток ноопепта, разработаны методики анализа, изучена стабильность таблеток при хранении, обоснованы нормы качества и сроки годности.
В последние годы во всём мире наблюдается увеличение числа нарушений функций центральной нервной системы. Поиск и изучение механизма действия ноотропов - веществ, нормализующих когнитивные функции, нарушенные различными повреждающими воздействиями, является одной из актуальных задач нейрофармакологии. Одним из эффективных подходов к изысканию новых более эффективных ноотропов явилось создание дипептидных аналогов пирацетама на основе пролина. Ноопепт - этиловый эфир N-фенилацетил L-пролилглицина - новый отечественный препарат пептидной структуры, разработан и фармакологически изучен в НИИ фармакологии РАМН, обладает ноотропным действием. Благодаря сочетанию ноотропного и нейропротективного действия ноопепт устраняет нарушения когнитивных функций мозга, уменьшает степень амнезии, ускоряет коррекцию нарушений интегративной активности, снижает поведенческие и электрофизиологические нарушения, вызванные алкоголем или гипоксией в пренатальном периоде развития. Ноопепт в широком диапазоне доз обладает мощным ноотропным действием, которое не сопровождается побочными эффектами. При длительном введении ноопепта не наблюдается толерантности и не развивается синдром отмены, как это обычно характерно для большинства нейроактивных веществ [1].
Таким образом, актуальной задачей является создание лекарственных форм препарата ноопепт, в частности, твердой лекарственной формы, а также разработка методик ее анализа, изучения стабильности таблеток при хранении, установления научно-обоснованных норм качества и сроков годности.
При выборе методов изготовления таблеток, а также при подборе вспомогательных веществ, большое значение имеют физико-химические
и технологические свойства субстанции: сыпучесть, выражаемая через массовую скорость истечения порошка из вибрирующей воронки, и угол естественного откоса, насыпная масса, форма и размер частиц, прессуе-мость, плотность вещества [2]. В работе использованы различные физикохимические методы исследования. Для разработки таблетированной лекарственной формы определены технологические характеристики ноопепта, представленные в табл. 1.
Таблица 1
Технологические свойства субстанции ноопепта___________________
Показатель Значение показателя
Размер частиц, мкм <315-99%
>315-1%
Сыпучесть, г/с Не сыпется
Насыпная масса, г/см3 0,255+0,023
Прессуемость, Н 94,73115,319
Плотность, г/см3 1,0910,05
Для реализации поставленной цели проведена работа по изучению влияния вспомогательных веществ на технологические характеристики таблетной массы и готовых таблеток. Использованные в нашей работе составы приведены в табл. 2.
Оптимальная дозировка ноопепта в таблетках, установленная в результате фармакологических исследований, составляет 0,01 г, что предполагает введение в состав лекарственной формы наполнителя, в качестве которого использовались сахар, крахмал, лактоза.
Ввиду того, что ноопепт мало растворим в воде, вспомогательные вещества должны создать условия для достаточно быстрого проникновения растворяющей среды в таблетку. В качестве наполнителя и разрыхляющего вещества была использована микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ). Кроме того, МКЦ, введенная в состав таблеток в количестве 15-20%, обеспечивает необходимую механическую прочность.
Технология выбранного нами метода влажного гранулирования предусматривает использование в качестве увлажнителей растворы высокомолекулярных соединений [3]. Для этой цели были использованы 5% крахмальный клейстер, 2% раствор метилцеллюлозы (МЦ) и 10% раствор по-ливинилпирролидона (ПВП).
Введение в состав таблеток магния карбоната основного (МКО) в количестве 15%, а также кальция фосфата двузамещенного при влажности гранулята 5-6% и использовании в качестве гранулирующей жидкости 2% раствора МЦ-100 и 10% раствора ПВП позволило добиться достаточной механической прочности таблеток и высокой сыпучести гранулята.
Однако время распадаемости полученных таким образом таблеток превышало регламентированные ГФ-Х1 15 мин. (20 и 17 мин. соответственно).
При введении 65% лактозы и 20% МКЦ в состав таблеток были получены удовлетворительные результаты при увлажнении смеси порошков
10% водным раствором ПВП с последующим опудриванием сухого гра-нулята 1% магния стеарата при средней массе таблеток 0,1г. Прочность и время распадаемости полученных таблеток удовлетворяют соответствующим нормативным требованиям.
Таблица 2
Исследованные рецептуры_____________________________
Ингредиенты, г № состава
1 2 3 4 5
Ноопепт 10 10 10 10 10
Лактоза 50 - 50 50 65
Крахмал 24 24 22 20 -
Сахар - 50 - - -
МКЦ 15 15 - - 20
ПВП - - - 4 4
МКО - - 15 - -
Кальция фосфат двузамещенный - - - 15 -
МЦ-100 - - 2 - -
Магния стеарат 1 1 1 1 1
Средняя масса 100 100 100 100 100
Таблица 3
Основные технологические показатели гранулята и таблеток ноопепта
Показатели № состава
1 2 3 4 5
Влажность,% 2,2 2,0 2,2 2,3 3,0
Сыпучесть, г/с 7,23± 0,19 8,01 ±0,46 9,0110,59 8,8310,51 10,0610,64
Прочность, Н 0 30,03±1,71 49,1111,03 40,5412,23 47,8113,23
Распадаемость, мин. 0,87±0,19 17,3812,24 20,4611,53 17,2211,69 3,8110,55
Как видно из табл. 3, технологические характеристики гранулята, изготовленного по прописи 5, являются оптимальными, а полученные из него таблетки по прочности и времени распадаемости соответствуют требованиям ГФ XI. По данной прописи были изготовлено 5 серий таблеток ноопепта для проведения исследований по установлению научнообоснованных норм качества и сроков годности, разработке методик анализа, изучения стабильности таблеток при хранении.
Идентификацию ноопепта и определение содержания посторонних примесей в таблетках проводили методом тонкослойной хроматографии (по величине 1^ и интенсивности окраски в сравнении с пятном свидетеля ноопепта) и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии одновременно с количественным определением.
Возможными примесями в препарате могут быть продукты гидролиза ноопепта - И-фенил-ацетил-Ь-пролилглицина и фенилуксусная кислота. Для определения “чистоты” препарата пятна примесей на хроматограмме испытуемого раствора сравнивали по величине и интенсивности окраски со шкалой свидетелей.
Лекарственное вещество и возможные примеси экстрагировали из таблеток смесью спирт 95% - хлороформ (1:1), на стартовую линию хроматографической пластинки Kieselgel 60 F254 (Мерк, 0,2 мм) наносили 20 мкл извлечения (500 мкг). Рядом в качестве свидетеля наносят 5 мкл 0,1% раствора рабочего стандартного образца (РСО) ноопепта (5 мкг) и 5 мкл раствора смеси свидетелей для проверки пригодности хроматографической системы (по 50 мкг). В качестве подвижной фазы использовали смесь растворителей н-бутанол - кислота уксусная ледяная - вода (5:1:2) и хроматографировали восходящим способом. Детектирование проводили в УФ свете при длине волны 254 нм.
Примеси на хроматограммах испытуемых образцов отсутствовали.
Разработана методика проведения теста “Растворение” на приборе типа “Вращающаяся корзинка”, среда растворения - вода очищенная, объем - 500 мл, скорость вращения корзинки -100 об/ мин.
Тест проводят в соответствии с требованиями ОФС 42-0003-00 по следующей методике: в корзинку помещают 1 таблетку. Через 15, 20, 30 и 45 минут после начала растворения отбирают 10 мл раствора и фильтруют через фильтр типа “Владипор” или “Миллипор” с диаметром пор 0,45 мкм, отбрасывая первые порции фильтрата.
Количественное определение проводили методом ВЭЖХ на хроматографе Schimadzu LC-10, снабженном колонкой Ultra Cie 5 мкм, 250x4,6 мм с предколонкой Ultra 5 мкм, 30x4,6 мм или аналогичной (температура колонки комнатная). Объем вводимой пробы 20 мкл, детектор спектрофотометрический с длиной волны 259 нм. Подвижная фаза представляла собой смесь ацетонитрил - вода очищенная - ледяная уксусная кислота [50:50:0,1]; скорость потока подвижной фазы 0,5 мл/мин. Рабочая концентрация растворов ноопепта - 0,01 мг/мл.
Анализировали раздельно раствор РСО ноопепта и раствор испытуемого образца (не менее 5 вколов). Вычисляли усредненное значение площадей пиков ноопепта в растворе РСО и испытуемом растворе и рассчитывали высвободившееся количество ноопепта.
Во всех образцах таблеток наблюдалось высвобождение лекарственного вещества на 99,0% за 30 мин.
Количественное определение проводили методом ВЭЖХ в условиях, описанных ранее для теста «Растворение».
Рабочая концентрация испытуемого и стандартного растворов ноопепта -1 мг/мл.
Экстракцию лекарственного вещества из растертой массы таблеток проводили подвижной фазой, раствор фильтровали через фильтр типа “Миллипор” 0,45 мкм, отбрасывая первые порции фильтрата.
Анализировали раздельно раствор РСО ноопепта и раствор испытуемого образца (не менее 5 вколов) и вычисляли усредненное значение площадей пиков ноопепта в растворе РСО и испытуемом растворе.
Содержание ноопепта в таблетке (X) в граммах вычисляли по формуле:
Б ■ т0 ■ 25 ■ Ь 5 • т0 ■ Ь
X —----------------=------------
50 • т ■ 25 ¿'о • т
где Б - площадь пика ноопепта на хроматограмме испытуемого раствора;
Бо - площадь пика ноопепта на хроматограмме РСО; ш0 - навеска ноопепта, взятая для приготовления раствора РСО, г; ш - навеска таблеточной массы, взятая для приготовления испытуемого раствора, г;
Ь - средняя масса таблетки.
Результаты определения достоверны, если выполняются критерии пригодности хроматографической системы.
Содержание ноопепта в таблетке должно быть от 0,009 г до 0,011 г (0,01 г + 10%).
Точность и воспроизводимость методики количественного определения ноопепта была проверена на модельных смесях таблеток ноопепта. Результаты представлены в табл. 4.
Таблица 4
Результаты количественного определения модельных смесей таблеток ноопепта
Взято ноопепта, г Взято плацебо, г Найдено ноопепта, г Метрологические характеристикики
0,0250 0,2250 0,0252 X = 0,0250 = 0,000292
0,0254
0,0248
0,0249 £ - 1,17%
0,0247
0,0255 0,2295 0,0255 X - 0,02552
0,0252
0,0259 = 0,000377
0,0251 £ = 1,48%
0,0259
0,0245 0,2205 0,0249 X - 0,0245
0,0245
0,0241 = 0,000316
0,0243 с
0,0247 ° = 1,29%
Вспомогательные вещества не мешают количественному определению.
Определение однородности дозирования проводили методом ВЭЖХ по методике количественного определения с той лишь разницей, что раствор РСО готовили более низкой концентрации - 0,4 мг/мл.
Однородность дозирования всех образцов соответствовала требованиям ГФ XI, вып.2, с. 154.
Для изучения стабильности препарата использовали метод «ускоренного старения». Таблетки хранили в стеклянных банках с навинчиваемыми пластмассовыми крышками при температуре 60°С. По истечении срока, эквивалентного 2 годам хранения в естественных условиях, таблетки выдерживали испытания по всем показателям качества. На основании
проведенных исследований установили предварительный срок годности таблеток - 2 года.
Таким образом нами разработаны оптимальный состав и технология таблеток ноопепта, а также методики их стандартизации, установлены сроки годности в процессе хранения.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Островская Р.У., Гудашева ТА., Воронина ТА., Середенин С.Б. Экспер. и клин.фармакол. -2002,- Т.65 (5).- С.66-72.
2. Езерский М.Л. Методы определения технологических характкристик фармацевтических порошков // Хим.-фарм.ж,- 1997,- №8.- С.98-111.
3. Полимеры в фармации. Под ред. Тенцовой А.И., Алюшина М.Т. - М., Медицина, 1985, -256 с.
COMPOSITION, TECHNOLOGY AND STANDARDIZATION OF NOOTROPIC AND NEUROPROTECTIVE DRUGS IN TABLET
I.A. Zimina S.N. Suslina *, K.V. Alekseev 2, B.M. Piatin2,
O.B. Stepanenko2, L.N. Grushevskaja 2, A.V. Gusev 2
1 Departament of general pharmaceutical and biomedical technology, RPFU, Miklukho.-Maklaya str., 8, 117198, Moscow, Russia 2SI SRI Pharmacology RAMS, Baltyiskaya, 8, 103112, Moscow, Russia
The article is about studies of components, technology and standardization of the new drug “Noopept” in tablet form. Selection of adjuvant substances was done, an optimal technology of manufacture worked out, analytical methods and stability studies were continued and basing qualitative norms and expiry date.
