Латыпова Г.М., Пупыкина К.А., Закиева С.В.
ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет», г. Уфа
РАЗРАБОТКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА ЛИСТЬЕВ ХМЕЛЯ ОБЫКНОВЕННОГО
В исследованных образцах листьев хмеля обыкновенного обнаружены полисахариды, аминокислоты, органические кислоты, дубильные вещества и аскорбиновая кислота, определено их количественное содержание. Проведено сравнительное изучение качественного и количественного состава дикорастущего и культивируемого сортов листьев хмеля обыкновенного. Установлены другие числовые показатели, характеризующие качество сырья.
Ключевые слова: листья хмеля, лекарственные растения, качество сырья.
Одним из перспективных лекарственных растений, содержащих большой комплекс биологически активных веществ, является хмель обыкновенный (Ниши1и 1ири1и8, сем. СаппаЬасеае) - двудомное многолетнее растение, широко применяемое в народной и научной медицине. Шишки хмеля обыкновенного используются в пищевой и пивоваренной промышленностях, в пекарном производстве, в получении биологически активных добавок к пище [2].Растение хмель обыкновенный имеет широкий ареал произрастания, охватывающий всю Европейскую часть России, Кавказа, Западную Сибирь, широко распространено во флоре Республики Башкортостан.
Лекарственным сырьем являются собранные в фазе начала цветения и высушенные соплодия культивируемых или дикорастущих растений. Хмеля обыкновенного шишки богаты биологически активными веществами, такими как эфирные масла (более 100 компонентов), горькие гликозиды, фитогормоны, органические кислоты, флавоноиды (кверцетин, рутин, мирицетин, кемпферол и др.), витамины группы В, РР, С, Н, токоферол, аминокислоты, ку-марины, дубильные вещества, пектиновые вещества, алкалоиды. Препараты хмеля оказывают седативное, нейротропное, противовоспалительное, противоязвенное, капилляроукрепляющее, антиоксидантное, болеутоляющее, снотворное действие [5].
Сейчас в основном используют культивируемый хмель. В конце 90-х годов заложены хмельники в Башкирии, Удмуртии, Нижегородской, Ульяновской, Омской областях и Хабаровском крае.
Целью наших исследований явилось сравнительное изучение качественного и количественного состава дикорастущего и культивируемого сортов листьев хмеля обыкновенного.
Материалы и методы исследований
Объектом наших исследований явились образцы высушенных листьев хмеля обыкновенного различных сортов: дикорастущий, собранный на территории Республики Башкортостан (Давлекановский р-н), и культивируемые на территории Чувашии сорта (Михайловский, Сумерь и Подвязный).
Определение качественных и количественных характеристик различных сортов хмеля проводилось в аналитических пробах сырья, высушенного до воздушно-сухого состояния по методикам Государственной Фармакопеи XI издания.
Все исследованные образцы хмеля обыкновенного давали положительную реакцию на фла-воноиды, органические кислоты, полисахариды, аскорбиновую кислоту и дубильные вещества.
Качественные реакции, тонкослойная и высокоэффективная жидкостная хроматографии полифенольных соединений, проведенные нами ранее, показали идентичность исследуемых образцов и наличие в них рутина, кверцетина, лю-теолина, лютеолин 7-биозида, апигенина, умбе-лиферона, галловой и хлорогеновой кислот [4].
Целью данного исследования явилось обнаружение и количественное определение других групп биологически активных веществ.
Качественное обнаружение полисахаридов проводили по реакции осаждения полисахаридного комплекса 95% спиртом из водного извлечения. Количественное содержание полисахаридов определяли спектрофотометрическим методом с подбором оптимальных условий экстракции после предварительного гидролиза и использования восстанавливающих свойств моносахаров при аналитической длине волны 460 нм. Содержание суммы моносахаридов после гидролиза полисахаридов вычисляют в пересчете на глюкозу. Данный метод дает представление о содержании в сы-
Таблица 1. Содержание биологически активных веществ в образцах листьев хмеля обыкновенного
Содержание БАВ, %
Образцы сырья Полисахариды Аминокислоты Дубильные вещества Аскорбиновая кислота Органические кислоты,%
Дикорастущий (Давлеканово) 22,12±0,63 15,08± 0,28 1,46±0,051 0,39± 0,0082 0,064 ± 0,002
Сорт Михайловский 22,43±0,72 15,88± 0,31 1,73±0,057 0,33± 0,0064 0,058 ± 0,002
Сорт Подвязный 19,49±0,61 14,56± 0,21 1,88±0,075 0,197± 0,0043 0,060 ± 0,001
Сорт Сумерь 18,7±0,52 15,04± 0,25 1,92±0,077 0,23± 0,0057 0,051 ± 0,001
Таблица 2. Показатели качества образцов листьев хмеля обыкновенного
Образцы сырья Влажность, % Зола общая, % Зола, нерастворимая В 10% НОЦ %
Дикорастущий (Давлеканово) 5,86 ± 0,14 12, 27 ± 0,36 9,37± 0,28
Сорт Михайловский 7,40 ± 0,22 15,40 ± 0,43 13,57± 0,44
Сорт Подвязный 6,89 ± 0,16 18,4 ± 0,34 15,12± 0,38
Сорт Сумерь 7,30 ± 0,18 20,75 ± 0,66 17,16± 0,34
рье всей суммы сахаров в свободном и связанном состоянии, переходящих в водное извлечение [3].
Обнаружение аминокислот в различных сортах хмеля обыкновенного проводили методами качественного анализа и хроматографически. При проведении качественной реакции смешивали равные объемы исследуемых водных извлечений и 0,1% свежеприготовленного раствора нингидрина при нагревании. Присутствие аминокислот во всех образцах хмеля обыкновенного устанавливали по появлению красно-фиолетового окрашивания после охлаждения.
Количественное определение аминокислот в исследуемых образцах проводили на аминокислотном анализаторе ААА-339 (ЧССР) в стандартных условиях, используемых для разделения белковых гидролизатов. В качестве внутреннего стабилизатора использовали смесь, состоящую из аминокислот.
Определение содержания дубильных веществ проводили методом Левенталя [1].
Качественное обнаружение аскорбиновой кислоты проводили методом тонкослойной хроматографии в системе этилацетат - уксусная кислота (80:20), для проявления использовали водный раствор 2,6-дихлорфенолиндо-фенолята натрия. Количественное определение содержания аскорбиновой кислоты прово-
дили спектрофотометрическим методом при длине волны 730 нм, основанном на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать натрия фосфорномолибдат и изменять при этом окраску раствора [6].
Определение содержания свободных органических кислот проводили алкалиметричес-ким методом прямого титрования, основанным на нейтрализации органических кислот раствором гидроксида натрия в пересчете на яблочную кислоту [1] .
Результаты и их обсуждение
В ходе исследования установлено, что в листьях различных сортов хмеля обыкновенного содержится значительное количество биологически активных веществ (таблица 1). Содержание полисахаридов максимально в с. Михайловский - 22,43%, минимально в с. Су-мерь - 18,7%. Суммарное содержание аминокислот максимально накапливается в с. Михайловский и составляет 15,88%, минимально в с. Подвязный - 14,56%. Минимальное количество дубильных веществ находится в дикорастущем виде - 1,46%, а в культивируемых сортах хмеля примерно в одинаковых концентрациях: 1,73-1,92%. Концентрация кислоты аскорбиновой находится в пределах от 0,197% (с. Подвязный), до 0,33% - с. Михайловский. Сумма свободных органических кислот нахо-
дится в пределах от 0,0507% в с. Сумерь до
0,064% в с. Михайловский и Подвязный.
Статистический анализ не выявил достоверных различий между сортами хмеля обыкновенного по содержанию полисахаридов, аминокислот, дубильных веществ, аскорбиновой и других органических кислот.
Для всех образцов листьев хмеля обыкновенного определяли показатель влажности сырья, который учитывали при расчетах количественного содержания различных групп биологически активных веществ. Содержание влаги или потерю в массе растительного сырья за счет гигроскопической влаги определяли по методике ГФ-Х1 издания [1]. Результаты определения представлены в таблице 2.
Были изучены показатели золы общей и нерастворимой в 10% HCL в вышеуказанных образцах сырья (таблица 2).
Выводы:
1. В ходе проведенных исследований определено наличие в исследуемых образцах листьев хмеля обыкновенного полисахаридов, аминокислот, органических кислот, дубильных веществ и аскорбиновой кислоты.
2. При сравнительном изучении листьев различных сортов хмеля обыкновенного РБ и Республики Чувашия установлена близость качественного состава и количественного содержания полисахаридов, аминокислот, органических кислот, дубильных веществ и аскорбиновой кислоты.
Список использованной литературы:
1. Государственная фармакопея СССР, XI-е изд., доп. - Вып. 1.2 Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. МЗ СССР. - М.: Медицина, 1989.- 336 с.
2. Годованный А.А. Хмель и его использование. - Киев, 1990. - С. 335.
3. Кочетков Н.К. Химия биологически активных природных соединений. - М.,1970. - 378 с.
4. Латыпова Г.М., Закиева С.В. Некоторые результаты фармакогностического исследования листьев хмеля обыкновенного // Аграрная Россия. - 2009. Спец. выпуск. - С. 88.
5. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; семейство Rutaceae-Eleagnaceae. -Л., 1988. - 357 с.
6. ТУ 9161-037-46865780-03 «БАД таблетки «Виратон», рег. уд. 77.99.02.916.Б.000641.0803.