CC BY
8
спецификации для определенных патологий и повышения репаративных свойств.
Цель исследования: исследовать содержание про-ангиогенных факторов в среде культивирования клеток кардиосфер после стимуляции липополисахаридами (ЛПС).
Для получения кардиальных сфероидов (кардиосфер) использованы образцы ушка правого предсердия, полученных от пациентов с ИБС в ходе операции аорто-коронарного шунтирования. Кардиосферообразующие клетки получали методом эксплантной культуры, сборку сфероидов проводили на чашках с низкоадгезионным покрытием (poly-HEMA). Характеристику клеток проводили с помощью проточной цитофлуориметрии и ПЦР в реальном времени. Стимуляцию клеток сфероидов проводили с помощью ЛПС (100 нг/мл) в течение 24 часов. Анализ секретома выполняли с помощью мультиплексного иммуноанализа Magpix.
Показано, что на поверхности клеток кардиосфер присутствуют белки характерные для кардиальных про-гениторных клеток (CD105, CD73, CD117, Sca-1 like) и отсутствуют маркеры гематопоэтических клеток. Обнаружено, что клетки кардиосфер экспрессиру-ют Толл-подобные рецепторы 4 типа (TLR4), которые способны распознавать ЛПС. В кондиционированной среде клеток кардиосфер после стимуляции ЛПС наблюдалось увеличение содержания проангиоген-ных факторов: VEGF (63+/-2,8 vs 243+/-18,5 пг/ мл), Rantes (59,9+/-2,7 vs 2981+/-1641 пг/мл), MCP1 (56,9+/-2,7 vs 4739,8+/-2885,4 пг/мл), IL8 (55+/-2,8 vs 6879,5+/-29,8 пг/мл), Fraktalcine (30+/-2,8 vs 72,2+/-8,8 пг/мл).
Таким образом, ЛПС могут выступать в качестве индуктора секреции VEGF и других проангиогенных факторов клетками кардиосфер. Прекондиционирование клеток кардиосфер с помощью ЛПС может служить основой для создания подходов для разработки препаратов направленного действия (на основе компонентов секре-тома) для лечения заболеваний ишемической природы. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РНФ 19-15-00384 «Исследование механизмов активации эпикарда при повреждении сердца и возможности стимулировать репаративный ангиогенез и репарацию миокарда после ишемического повреждения путем активирующих воздействий на эпикард»
IN VITRO ИССЛЕДОВАНИЕ БИОАКТИВНЫХ ФИБРИЛЛЯРНЫХ МАТРИКСОВ НА ОСНОВЕ ПЕПТИДНЫХ АМФИФИЛОВ
К. Даиоб, М. Зухайб, Т.И. Абдуллин, Д. Салахиева, Р.И. Гарифуллин
Казанский (Приволжский) Федеральный Университет, Казань, Россия
e-mail: kenanadayob@gmail.com
Ключевые слова: биоматериалы, пептидные амфифилы, нанофибриллы, клеточные матриксы
Пептидные амфифилы (ПА) представляют собой многофункциональные молекулы, способные собираться в супрамолекулярные матриксы и проявлять различные биохимические и физико-химические свойства. Благодаря своим свойствам и биосовместимой природе ПА являются перспективной основой для создания новых биоматериалов для тканевой инженерии и регенеративной медицины.
В нашей работе исследован потенциал ПА с последовательностью VVAGHH, модифицированной насыщенной жирной кислотой с различной длиной углеродной цепи. Оптимизированы условия формирования матрик-сов на поверхности культуральной посуды в зависимости от концентрации, рН, температуры. По данным сканирующей электронной микроскопии матриксы имели организованную фибриллярную структуру с диаметром фибрилл в нанометровом диапазоне. Показана возможность включения в нанофибриллярный матрикс ионов переходных металлов (Cu, Zn, Mn), способных генерировать АФК в фентоновских реакциях.
По данным теста на жизнеспособность клеток и оптической микроскопии нанофибриллрный матрикс оказывал различное модулирующее влияние на пролиферацию фибробластов и нейрональных клеток. Включенные металлы в зависимости от концентрации проявляли дополнительное модулирующее влияние на поведение клеток. Результаты представляют интерес для дальнейшего создания биоактивных пептидных биоматериалов с нанофибриллярной структурой, способных связывать ионы металлов, поддерживать рост клеток млекопитающих и модулировать их активность. Работа выполнена за счет средств субсидии, выделенной Казанскому федеральному университету для выполнения государственного задания в сфере научной деятельности (проект FZSM-2022-0020).
РАЗРАБОТКА ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКИХ
ТАМПОНИРУЮЩИХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ
КОЛЛАГЕНОВЫХ И АЛЬГИНАТНЫХ ГЕЛЕЙ
Д.М. Дарвиш1, 3, И.О. Гаврилюк2, А.Н. Куликов2,
В.В. Васильева3, Е.С. Цобкалло3, Н.А. Михайлова1
1 Институт Цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, Санкт-Петербург, Россия
3 Санкт-Петербургский государственный университет промышленных технологий и дизайна, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: darvishdi@mail.ru
Ключевые слова: ожоги глаз, коллаген I типа, коллагеновый
гель, альгинатный гель, инъекционные формы гелей
Ожоги глаз как химические, так и термические могут приводить к серьезному поражению тканей глаза и повлечь за собой потерю зрения. Одним из факторов, влияющих на степень тяжести поражения, является своевременность оказания первой помощи пострадавшему. При ожогах происходит деэпителизация поверхностных тканей глаза, что может в короткие сроки приводить к их склеиванию, выражающемуся в укорочении или полном исчезновении конъюнктивальных сводов. Особенно остро эта проблема может стоять в военно-полевых условиях, когда пострадавший не может быть быстро доставлен в специализированный стационар. Нами была предложена модель офтальмологического тампонирующего средства для оказания первой помощи в таких условиях. Модель предполагает герметизацию конъюнктивальной полости и заполнение ее препаратом способным хорошо распределяться и удерживаться в ней не менее 24 часов. В качестве такого средства было предложено использовать инъекционные формы коллагеновых и альгинатных гелей.
В результате экспериментов как in vitro, так и in vivo, было показано, что основной проблемой при использовании коллагеновых гелей является существенное
уменьшение их поперечных размеров вследствие вытеснения влаги из структуры геля. В ходе работы была проведена модификация таких гелей гиалуроновой кислотой, альгинатом натрия и ПЭГ-400. Наилучший вла-гоудерживающий эффект наблюдался после обработки коллагеновых гелей раствором альгината натрия, однако только гиалуроновая кислота могла быть введена в структуру геля до его желирования и не препятствовала процессам фибриллообразования.
Инъекционная форма альгинатного геля была получена путем смешивания раствора альгината натрия с раствором CaSO4 в глицерине. Такие гели имели удовлетворительное время желирования, не теряли влагу при сжатии и в течение длительного времени сохраняли тампонирующее действие.
Контрольные эксперименты in vivo на модели обожженного глаза показали существенное превосходство коллагеновых гелей в качестве тампонирующего офтальмологического средства. Несмотря на более слабые механические свойства, коллагеновые гели способствовали сохранению тканей глаза, а также имели выраженное противовоспалительное действие.
АНАЛИЗ СОВРЕМЕННЫХ ПУБЛИКАЦИЙ О НОВЫХ МЕТОДАХ ГЕННОЙ ТЕРАПИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ИНФАРКТА МИОКАРДА
Э.Т. Дегирменджи, С.С. Хилько
Институт «Медицинская академия
им. С.И. Георгиевского», ФГАОУ ВО КФУ
им. В.И. Вернадского, Симферополь, Россия
e-mail: evelinadegirmenji@yandex.ru
Ключевые слова: инфаркт миокарда, метод AAV9, CircTRRAP, действие CDR132L
Введение. В основе последствий инфаркта миокарда (ИМ) лежит критическая потеря сократимости миокарда вследствие замены его поврежденного участка фибро-бластами. В настоящее время попытки восстановления поврежденных тканей предпринимаются учеными с использованием генной терапии.
Цель исследования. Провести анализ литературных данных, посвященных изучению новым методам генной терапии для лечения последствий ИМ.
Методы. Для достижения поставленной цели проведен систематический поиск и анализ резельтатов публикаций и онлайн ресурсов за период с 2020 по 2022год. Все публикации были индексированы из баз PubMed, e-Library, Scholar.
Результаты. Ученые исследовали [2], что CircTRRAP экспрессируется в огромном количестве после гипоксии в кардиомиоцитах. Его подавление способствует росту клеток и ингибирует апоптоз, воспаление, окислительный стресс в клетках.
По данным исследователей из Китая [3] сверхэкспрессия гена Ndufsl с помощью метода AAV9, облегчает сердечную дисфункцию и миокардиальный фиброз в фазе заживления инфаркта миокарда. Это лечение может существенно улучшить качество жизни пациентов.
Также определили [4], что сверхэкспрссия гена Snhg1 способствует пролиферации кардиомиоцитов, ангиогенезу и ингибирует апоптоз клеток после ИМ. Snhg1 способен образовать петлю положительной обратной связи с c-Myc, что позволяет поддержать активацию передачи сигналов PI3K/Akt.
Исследователи провели первое клиническое испытание [5], которое продемонстрировало ингибирующее действие CDR132L на mir-132. Результаты показали дозозависимое, статистически значимое снижение mir-132 в плазме. Испытание антисмыслового препарата обнадеживает, т. к. у пациентов с сердечной недостаточностью состояние улучшилось.
Проведенный анализ литературы подтверждает необходимость в дальнейших исследованиях по изучению действия генов в устранении последствий ИМ.
Выводы. Выявлена возможность геннотерапевтиче-ской коррекции постинфарктных изменений миокарда. Для оценки клинической и экономической эффективности генной терапии для лечения последствий инфаркта миокарда необходимо проведение экспериментальных и рандомизированных многоцентровых исследований.
Литература:
1. Yuan Zhang et al. Cardiovasc Ther (2022).
2. Qi B., Song, L., Hu, L.et al. Exp Mol Med (2022).
3. Mengsha Li et al. Theranostics (2021).
4. Yorg Taubel, Wilfried Hauke et al. European Heart Journal (2021).
ПЕРИНАТАЛЬНЫЕ МСК В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ДЕТЕЙ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПЕЧЕНИ
А.В. Дегтярева1, В.В. Зубков1, М.Х. Исаева1, Е.А. Филиппова1, М.Б. Албегова1, А.А. Буров1, И.В. Дубровина1, К.В. Горюнов1, Ю.А. Шевцова1, Д.Н. Силачев1, Г.Т. Сухих1
1 НМИЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова, Москва, Россия
2 Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова, Москва, Россия
e-mail: a_degtyareva@oparina4.ru
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимальные стро-мальные клетки, Криглер-Найяр, билиарная атрезия, печеночный холангит, гепатопротекция.
Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (МСК) являются альтернативным методом для лечения метаболических нарушений печени. В ряде работ было показано, что МСК избирательно накапливаются в печени при внутривенном введении [1], могут дифференцироваться в гепатоциты и участвовать в регенерации при различных патологиях [2].
В рамках терапии синдрома Криглера-Найяра I типа ребенку провели трансплантацию аллогенных МСК, выделенных из пуповины человека. Целью данного лечения являлось уменьшение продолжительности фототерапии при сдерживании уровня билирубина в сыворотке крови.
Фототерапия была начата ребенку в возрасте 5 сут жизни, когда уровень билирубина составил 340 мкмоль/л. Однако уровень билирубина продолжал варьировать от 329 до 407 мкмоль/л. В связи с чем, на 2 месяце жизни было принято решение о трансплантации МСК, на фоне которой отмечалось значительное снижение продолжительности фототерапии до 2 ч в день. В течение всего периода наблюдения, составляющего 2 года, ребенку провели 6 трансплантаций МСК. Отмечено, что эффект сохранялся в течение 2-3 мес. Побочных эффектов от трансплантации при этом выявлено не было.
