CC BY
22Проблемы медицинской микологии. 2020, Т.22. №3
Заключение. Полученные нами моноклональные антитела могут быть использованы для дальнейшей разработки иммунохимических тест-систем для экспресс-детекции дифтерийного токсина с высокой чувствительностью.
ОЦЕНКА СТРУКТУРЫ МИКРОБИОТЫ РЕПРОДУКТИВНОГО ТРАКТА ЖЕНЩИН, ОБРАТИВШИХСЯ В ОТДЕЛЕНИЕ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ.
Лебедева Е.А.1, Гончаров А.Е.12, Рищук С.В.1, Душенкова Т.А.1
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; 2Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург, Россия
ESTIMATION OF THE MICROBIOTA STRUCTURE OF THE REPRODUCTIVE TRACT OF WOMEN WHO APPEALED TO THE DEPARTMENT OF ASSESSMENT REPRODUCTIVE TECHNOLOGIES.
Lebedeva E.A.1, Goncharov A.E.12, Rischuk S.V.1, Dushenkova T.A.1
1North-West State Medical University named after I.I. Mechnikov; 2Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - оценка состояния вагинального микробиоценоза женщин, обратившихся в отделение вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).
Материалы и методы. Обследовали 129 женщин в возрасте 23-39 лет перед проведением ВРТ. Определение состояния биоценоза влагалища проводили методом real-time ПЦР с применением набора реагентов «Фемофлор-16» («НПО ДНК-технология», Россия). Наличие Trichomonas vaginalis в вагинальных мазках определяли культивационным методом, присутствие маркеров Chlamydia trachomatis - методом ИФА с помощью наборов производства «ВекторБэст» (Россия).
Результаты. Для выявления влияния дисбиоза на наступление клинической беременности было проведено исследование «случай-контроль». Полученный показатель отношения шансов 7,5 (1,04-54,12), свидетельствует о том, что дисби-оз ассоциирован с риском не наступления клинической беременности при ВРТ. Отметим, что у женщин с выявленными T. vaginalis и C. trachomatis снижается доля Lactobacillus spp. При выявлении маркеров C. trachomatis увеличивается разнообразие облигатно-анаэробной биоты, а разнообразие факультативно-анаэробой биоты, напротив, снижается. Частота идентификации Candida spp. увеличивается при выявлении маркеров ИППП.
Заключение. Выявление маркеров ИППП и дисбиоза влагалища в качестве факторов риска не наступления клинической беременности у бесплодных пар в центрах ВРТ требует оптимизации протоколов обследования перед проведением процедур ЭКО и ЭКО/ИКСИ.
РАЗРАБОТКА НОВОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ПРОТИВОГРИБКОВОГО СРЕДСТВА «ГРИЗЕОФУЛЬВИН» ДЛЯ ТРАНСДЕРМАЛЬНОЙ ДОСТАВКИ
Ленгерт Е.В., Савельева М.С., Павлов А.М., Верховский Р.А., Свенская Ю.И.
Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского, Саратов, Россия
DEVELOPMENT OF NOVEL TOPICAL FORMULATION FOR «GRISEOFULVIN» ANTIFUNGAL DRUG
Lengert E.V., Saveleva M.S., Pavlov A.M., Verkhovskii R.A., Svenskaya Yu.I.
Saratov State University, Saratov, Russia
Цель исследования. «Гризеофульвин» является одним из классических противогрибковых препаратов, который применяют для лечения дерматомикозов. Существуют разрешенные коммерческие лекарственные формы для перорально-го использования, что сопряжено с рядом серьезных побочных эффектов. Большинство поверхностных кожных грибковых инфекций можно эффективно лечить с помощью препаратов местного применения при условии, что они обеспечивают эффективное накопление антимикотика в области поражения. Местное лечение значительно уменьшает токсические эффекты, по сравнению с системным действием препаратов, позволяет избежать эффекта первого прохождения, тем самым, снизить нагрузку на ЖКТ и печень. Таким образом, разработка лекарственной формы препарата «Гризеофульвин» для местного применения является важной задачей, позволяющей повысить его терапевтическую эффективность.
Материалы и методы Предложена и оптимизирована методика иммобилизации противогрибкового препарата «Гризеофульвин» в мезопористые частицы карбоната кальция (CaCÜ3), выполняющие роль носителя антимикотика для местного применения, направленной доставки и накопления в коже с целью усиления и продления его терапевтического действия (Lengert et al., 2019).
Результаты. Получены субмикронные частицы CaCÜ3, содержащие противогрибковый препарат «Гризеофульвин», эффективность загрузки которых составила 22 масс.%, что соответствует включению 220 мкг гризеофульвина в 1 мг частиц CaCÜ3. Проведено исследование цитотоксичности полученных частиц на
культуре клеток фибробластов крысы, в результате которого выявлено отсутствие выраженного токсического эффекта от их применения. Продемонстрирована эффективная доставка предлагаемой системы (частицы ватерита, нагруженные антимикотиком) в волосяные фолликулы белой лабораторной крысы in vivo. Методами оптической когерентной томографии и сканирующей электронной микроскопии показана возможность обильного и глубокого заполнения волосяных фолликулов разработанными частицами. Для исследования возможности управления процессом высвобождения антимикотика, иммобилизованного в частицы CaCO3, проведена модификация их поверхности оптимальным числом биосовместимых биодеградируемых полиэлектролитных слоев по методу последовательной адсорбции полиэлектролитов (Peake et al., 2015). При цитотоксическом исследовании полученных носителей на культуре фибробластов крысы также наблюдали отсутствие выраженного токсического эффекта. Далее провели внедрение как модифицированных оболочкой СaCOз-носителей, так и не модифицированных в волосяные фолликулы лабораторной крысы in vivo с целью изучения профилей экскреции гризеофульвина с мочой исследуемых животных в течение двух недель. Спектры флуоресценции мочи оценивали с использованием специально разработанного в программе «Python» алгоритма, работающем в многопоточном режиме, предоставленном библиотекой Pathos (McKerns et al., 2012).
Выводы. Полиэлектролитная оболочка, сформированная на поверхности CaCO3, носителей гризеофульвина обеспечивает пролонгированное действие, что открывает перспективы для повышения его терапевтической эффективности.
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект № 17-73-20172).
РАСПОЗНАВАНИЕ КЛЕТОЧНОЙ ПОВЕРХНОСТИ КОЛИФАГАМИ
Летаров А.В., Голомидова А.К., Иванов П.А., Куликов Е.Е., Ефимов А.Д., Кузнецов А.С.
Институт микробиологии им. С.Н. Виноградского, Федеральный исследовательский центр Биотехнологии РАН, Москва, Россия
HOST CELL RECOGNITION BY COLIPHAGES
Letarov A.V., Golomidova A.K., Ivanov P.A., Kulikov E.E., Efimov A.D., Kuznetsov A.S.
S.N. Vinogradsky Institute of Microbiology, Federal Research Center of Biotechnology of the Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia
Escherichia coli является одним из лидирующих возбудителей инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСПМ), а также оппортунистических инфекций. Так, более 50% урологических инфекций вызваны этим патогеном. Это делает E. coli одной из важных мишеней для фаговой терапии. Кроме того, существуют высококонтагиозные пищевые инфекции, в том числе инфекции, вызванные Шига-токсигенными E. coli (STEC), в патогенезе которых определяющую роль играет конверсия stx-бактериофагами.
Цель - изучение механизмов детерминирующих спектр хозяев бактериофагов, инфицирующих E. coli, среди которых доминирующую роль играют механизмы распознавания клеточной поверхности.
Многие колифаги распознают в качестве своих терминальных рецепторов весьма консервативные структуры клеточной поверхности, такие как белки внешней мембраны и кор-олигосахарид LPS. Тем не менее, подавляющее большинство колифагов имеет узкий спектр хозяев.
Результаты. Установлено, что высоковариабельные О-антигены энтеробак-терий являются высокоэффективными неспецифическим барьером, имеющим определяющее значение для хозяйской специфичности бактериофагов. Вирусы бактерий могут использовать несколько различных стратегий для проникновения через О антиген, основанных на специфическом распознавании отдельных структурных типов этих молекул. При этом характер связи между первичным взаимодействием с О антигеном и последующими событиями фаговой инфекции оказывает влияние на свойства фагоустойчивых мутантов, отбираемых под давлением инфекции соответствующих вирусов.
Выявили, что фаги группы псевдо-Т-четных, такие как RB49 и сходные с ним вирусы, обладают широким спектром хозяев среди О антиген-продуцирующих штаммов E. coli. Отмечено, что рецептор-узнающий белок gp38 этих бактериофагов имеет способность к одновременному распознаванию нескольких типов О антигенов, что, вероятно, связано с конформационной пластичностью его ре-цептор-распознающего центра. Это создает новые возможности для искусственного видоизменения спектров хозяев данных бактериофагов за счет искусственной рандомизации небольших фрагментов адгезина gp38.
Заключение. Нами установлено, что О антиген является мощным ограничителем лизогенизации E. coli умеренными бактериофагами. В частности, широкий спектр лизогенизации stx-фагом phi24B оказался связан не с наличием у этого вируса специфического механизма преодоления различных типов О антигена, но с лизогенизацией спонтанных rough мутантов хозяев, присутствующих в культурах. Этот результат позволяет по-новому оценить эпидемиологическое значение публикуемых данных о лизогенизации комменсальных штаммов E. coli stx-бактериофагами.
Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 15-15-00134.
