Научная статья на тему 'Разработка методик качественного и количественного определения флавоноидов в сырье ромашки аптечной'

Разработка методик качественного и количественного определения флавоноидов в сырье ромашки аптечной Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
899
165
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Бубенчикова В. Н., Кондратова Ю. А.

Purpose of investigation: development of qualitative and quantitative determinotion of flavonoids in the raw material of Matricaria recutita L. The investigations determine the optimal conditions for chromatography analysis and for spectrophotometric analysis and determination of flavonoids in Matricaria recutita L. Conclusion: The methods of qualitative and determination of flavonoids of Matricaria recutita L. have been worked out. It employ the standardization of flavonoids content by flavonoid rutin. The content of flavonoids in Matricaria recutita L. flowers ranges from 1,54% to 2,11%.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Бубенчикова В. Н., Кондратова Ю. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Development of qualitative and quantitative determinotion of flavonoids in the raw material of Matricaria recutita L

Purpose of investigation: development of qualitative and quantitative determinotion of flavonoids in the raw material of Matricaria recutita L. The investigations determine the optimal conditions for chromatography analysis and for spectrophotometric analysis and determination of flavonoids in Matricaria recutita L. Conclusion: The methods of qualitative and determination of flavonoids of Matricaria recutita L. have been worked out. It employ the standardization of flavonoids content by flavonoid rutin. The content of flavonoids in Matricaria recutita L. flowers ranges from 1,54% to 2,11%.

Текст научной работы на тему «Разработка методик качественного и количественного определения флавоноидов в сырье ромашки аптечной»

ЛИТЕРАТУРА

1. Бабушкин О. С. Стратегия использования ЭХА растворов в многопрофильной больнице // Бабушкин О. С., Назин В. А. Доклады и краткие сообщения. Третий международный симпозиум «Электрохимическая активация». М., 2001. С. 46-50.

2. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963. 152 с.

3. Гублер Е. В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. Л.: Медицина, 1973. 144 с.

4. Кулаков В. И. Бесплодный брак. М., 2005. С. 10-21.

5. Матюшин А. И. Деонтология медико-биологического эксперимента. М., 1987. 75 с.

6. О лечебном применении электрохимически активированных растворов в медицине // Мельникова В. М., Локтионова Н. В., Беликов Г. П., Мальгинов С. В. Докл. и краткие сообщ. Третий междунар. симп. «Электрохимическая активация». М., 2001. С. 92-95.

7. Резников К. М. Свойства воды и информационные аспекты формирования эффектов действия электроактивированных водных растворов // Прикладные информационные аспекты медицины. 2006. Т. 2, № 1. С. 46 - 49.

8. Кулаков В. И., Серов В. Н., Барашнев Ю. И. и др. Руководство по безопасному материнству. М.: Триада-X, 1998. 531 с.

9. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. В. П. Фисенко. М., 2000. 398 с.

10. Шабалов Н. П. Современная терапия в неонатологии. СПб, 2000. 6 с.

A. D. BREZDYNJK, K. M. REZNIKOV

THE INFLUENCE OF ELECTROACTIVE WATER SOLUTIONS ON EMBRYO AND FOETUS

The article provides information on influence electroactivated water solutions on reproductive function. On during investigation with katolite and anolite on experimental animals we find wear no embryotoxically and fetotoxically effects.

Key words: electroactivated water solutions, reproductive, toxically.

В. Н. БУБЕНЧИКОВА, Ю. А. КОНДРАТОВА

РАЗРАБОТКА МЕТОДИК КАЧЕСТВЕННОГО И КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛАВОНОИДОВ В СЫРЬЕ РОМАШКИ АПТЕЧНОЙ

Курский государственный медицинский университет

Ромашка аптечная (Matricaria recutita L.) - однолетнее травянистое растение семейства астровых (Asteraceae). В научной медицине цветки ромашки аптечной широко применяются в качестве противовоспалительного, спазмолитического, антиаллергическо-го средства. Фармакологическое действие препаратов ромашки обусловлено присутствием в ней эфирного масла, основным компонентом которого является хамазулен, флавоноидов, производных апигенина, лю-теолина, кверцетина, кумаринов [3, 5].

До настоящего времени качество сырья ромашки аптечной оценивают только по содержанию эфирного масла, что обусловливает и срок хранения сырья -1 год. Стандартизация сырья по содержанию флавонои-дов даст возможность увеличить срок хранения сырья и использовать его в течение нескольких лет.

Целью настоящего исследования является разработка методик качественного и количественного определения флавоноидных соединений ромашки аптечной.

Объектом исследования служили различные образцы цветков ромашки аптечной, заготовленные в 2002-2006 годах в период цветения растений.

Методы и результаты исследования

Качественное определение флавоноидов проводили методом хроматографии в тонком слое сорбента на пластинки «Sorbfil» в системе растворителей: этилаце-тат - муравьиная кислота - вода (70:15:15) [1]. Для этого на стартовую линию наносили 0,04 мл извлечения (смотри раздел «Количественное определение»), пластинку с нанесенными пробами высушивали на воздухе в течение 5 минут и хроматографировали. После хроматографирования пластинку вынимали из камеры,

высушивали в вытяжном шкафу в течение нескольких минут и просматривали в УФ-свете при длине волны 360 нм. На хроматограмме должны быть видны 8 основных зон с Rf около 0,32, Rf около 0,4, Rf около 0,55, Rf около 0,62, Rf около 0,72, Rf около 0,79, Rf около 0,84, Rf около 0,89, имеющих темно-коричневую флуоресценцию. Система для хроматографирования со смесью растворителей: этилацетат - муравьиная кислота - вода (70:15:15) должна быть свежеприготовленная.

Количественное определение флавоноидов в цветках ромашки аптечной проводили спектрофотометрическим методом. В основе метода анализа нами выбрана реакция взаимодействия флавоноидов с алюминия хлоридом в среде 70%-ного спирта этилового [2].

Определение оптимальных условий экстракции суммы флавоноидов из цветков ромашки аптечной проводили на одном образце сырья. Проведенные нами исследования по изучению степени измельченности сырья на экстракцию флавоноидов показали, что максимальное извлечение флавоноидов из цветков ромашки аптечной достигается при степени измельчения 1 мм (таблица).

Для экстрагирования суммы флавоноидов из растительного сырья в литературе описано применение спиртов и спиртово-водных растворов. Нами проведено изучение оптимальной концентрации этилового спирта для извлечения суммы флавоноидов. Максимальное извлечение суммы флавоноидов достигается 70%-ным этиловым спиртом (таблица).

Для извлечения суммы флавоноидов нами использована экстракция с нагреванием на кипящей водяной бане до наступления равновесия [2], которое в данном случае наступает через 45 минут (таблица).

УДК 615.32:582.998.2].07:547.814.5

Влияние условий экстракции на содержание суммы флавоноидов

в цветках ромашки аптечной

Условия экстракции Содержание суммы флавоноидов, %

Степень измельченности сырья, мм:

0,5 1,41

1,0 2,11

2,0 1,52

3,0 1,37

Экстрагент: этиловый спирт, %

30 1,72

50 2,05

70 2,07

96 1,62

Время экстракции, мин (70%-ный спирт этиловый, соотношение сырье - экстрагент 1:100)

30 1,85

45 2,07

75 1,77

90 1,69

Исследование компонентного состава показало, что преобладающим флавоноидным соединением ромашки аптечной являются биозиды, поэтому нами в качестве стандартного образца применен рутин-стандарт.

Нами исследованы спектры поглощения спиртовых извлечений из цветков ромашки аптечной с алюминия хлоридом и РСО рутина с алюминия хлоридом. Эти спектры совпадали, а максимум поглощения находился при длине волны 415 нм. Измерения рекомендуем проводить в области максимума поглощения. Данная область спектра достаточно удалена от спектров поглощения сопутствующих фенольных и других органических веществ, содержащихся в экстрактах из сырья. В качестве раствора сравнения мы использовали исходный раствор извлечения без алюминия хлорида, т. е. применяли дифференциальный вариант спектрофотометрии, что позволяет исключить влияние на результаты анализа сопутствующих веществ, имеющих оптическую плотность в области максимума поглощения извлечений из сырья. При проведении анализа пробы подкисляли уксусной кислотой для переведения флавоноидов и сопутствующих им веществ в недиссоциированную форму с целью улучшения воспроизводимости результатов. В качестве стандартного образца применяли РСО рутин по ТУ 64-4-127-96 НПО ВИЛАР.

Были также изучены оптимальные условия фотометрической реакции, количество спиртового извлечения, концентрация и объем алюминия хлорида. Максимальная оптическая плотность достигается при использовании 3 мл извлечения с 5 мл 5%-ного раствора алюминия хлорида в 70%-ном спирте этиловом.

Устойчивое окрашивание извлечений из растительного материала с хлоридом алюминия наступает через 30 минут и сохраняется в течение 1,5 часа, что достаточно для проведения анализа.

На основании проведенных исследований разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в цветках ромашки аптечной.

Методика количественного определения

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито (ТУ 23.2.2068-89) с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл

этилового спирта 70%-ного и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику, нагревают на кипящей водяной бане в течение 45 минут, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят до первоначальной массы спиртом этиловым 70%-ным. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр, смоченный тем же спиртом, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

3 мл извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл 5%-ного раствора алюминия хлорида в спирте этиловом 70%-ном и через 10 мин 2 капли раствора кислоты уксусной. Объем раствора доводят тем же спиртом до метки и оставляют на 30 минут. Оптическую плотность полученного раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 415 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 3 мл извлечения, 2 капель раствора кислоты уксусной, доведенный спиртом этиловым 70%-ным до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора РСО рутина, приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Содержание суммы флавоноидов в процентах (X) в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье вычисляются по формуле:

х_ D х m 0 х 1 0 0 х 1 0 0 х 1 0 0 где D0 х m х 100 х (100-W) х v’

D - оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 410 нм;

D0 - оптическая плотность стандартного образца (ГСО) рутина;

m - масса навески сырья в граммах;

m0 - масса стандартного образца рутина, г;

V - количество извлечения в мл;

W - влажность сырья, %

Предложенной методикой проанализировано 5 партий сырья. Результаты исследования обработаны статистически согласно ГФ-XI [4]. Ошибка единичного определения с 95%-ной вероятностью не превышает 3,75%. Содержание суммы флавоноидов находится в пределах от 1,54% до 2,11%.

Выводы

Разработаны методики качественного и количественного определения флавоноидов цветков ромашки аптечной. Подобраны оптимальные условия разделения флавоноидов, и разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в цветках ромашки аптечной спектрофотометрическим методом.

Установлено, что содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в цветках ромашки аптечной колеблется от 1,54% до 2,11%.

Разработанные методики могут быть использованы для стандартизации сырья ромашки аптечной по содержанию флавоноидов.

Поступила 14.11.2006 ЛИТЕРАТУРА

1. Беликов В. В. Методы анализа флавоноидных соединений // Беликов В. В., Шрайбер М. С. Фармация. 1970. № 1. С. 68-72.

2. Беликов В. В. Реакции комплексообразования в анализе фла-воноидов // Беликов В. В., Точкова Т. В. Фенольные соединения и их физиологические свойства. Алма-Ата, 1973. С. 168-172.

3. Государственная фармакопея СССР: 11-е изд., доп. Вып. 1. Общие методы анализа. М3 СССР. М.: Медицина, 1987. 336 с.

4. Государственная фармакопея СССР: 11-е изд., доп. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. М3 СССР. М.: Медицина, 1989. 400 с.

В последние годы во всем мире депрессия является одной из наиболее обсуждаемых медицинских проблем. К 2020 году депрессия выйдет на второе место среди причин нетрудоспособности (К^ег й., 1999). Раньше лечение таких состояний практически всегда было сопряжено с необходимостью госпитализации в психиатрическую больницу, теперь не только значительно расширены возможности амбулаторной психиатрической помощи, но и широко внедряется возможность ее оказания на уровне первичного звена - врача общей практики. Специалисты различных отраслей медицины с успехом диагностируют депрессию и нередко самостоятельно назначают антидепрессанты, что во многом связано с внедрением в широкую практику антидепрессантов нового поколения, обеспечивающих практически полное отсутствие побочных эффектов и высокую безопасность терапии даже у соматически ослабленных больных.

В рубрике «Аффективные расстройства настроения» МКБ-10 депрессия рассматривается в рамках различных диагностических категорий, как единичный эпизод, имеющий континуум регистра тяжести симптоматики, в рамках рекуррентного депрессивного расстройства, в рамках биполярного расстройства и в рамках хронических расстройств настроения. Успешное купирование депрессивной симптоматики не всегда является залогом будущего благополучия пациента. Депрессивная симптоматика в рамках каждой из этих рубрик требует собственной терапевтической такти-

5. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейство Asteraceae (Compositae) / Ответственный редактор П. Д. Соколов. Российская акад. наук, Ботанич. ин-т им. В. Л. Комарова. СПб: Наука, 1993. С. 145-148.

V. N. BUBENCHICOVA, Y. A. KONDRATOVA

DEVELOPMENT OF QUALITATIVE AND QUANTITATIVE DETERMINOTION OF FLAVONOIDS IN THE RAW MATERIAL OF MATRICARIA RECUTITAL

Purpose of investigation: development of qualitative and quantitative determinotion of flavonoids in the raw material of Matricaria recutita L.

The investigations determine the optimal conditions for chromatography analysis and for spectrophotometric analysis and determination of flavonoids in Matricaria recutita L.

Conclusion: The methods of qualitative and determination of flavonoids of Matricaria recutita L. have been worked out. It employ the standardization of flavonoids content by flavonoid rutin. The content of flavonoids in Matricaria recutita L. flowers ranges from 1,54% to 2,11%.

г. Краснодар

ки, которая и определяет дальнейшее течение заболевания (Костюкова Е. Г., Мосолов С. Н., 2003). Существует огромное число работ, посвященных купированию актуальной депрессивной симптоматики, лечению хронических расстройств настроения и рекуррентного депрессивного расстройства, однако крайне скупо освещены вопросы диагностики и терапии депрессии в рамках биполярного расстройства. Диагноз биполярного расстройства ставится в тех случаях, когда в анамнезе имеется маниакальный, гипо-маниакальный или смешанный эпизод или предшествующий диагноз циклотимии. При биполярной депрессии риск суицида и развития психотической симптоматики выше в сравнении с униполярной. Большинство суицидальных попыток при биполярном расстройстве происходит в период депрессивной фазы (Sach G. S., Koslov C. L., Ghaemi S. N., 2000). Клинически более чем в 50% случаев биполярного расстройства именно депрессия знаменует манифестацию заболевания (Roy-Byrne P., Post R. M., Uhde T. W. и соавт., 1985), сразу же создавая дилемму дифференциальной диагностики рекуррентной депрессии и биполярного расстройства. Ориентиром для ее разрешения могут быть клинические особенности биполярной депрессии: психомоторная заторможенность, такие атипичные симптомы, как гиперфагия, гиперсомния и психотические включения, одинаковая встречаемость у мужчин и женщин, начало в более раннем возрасте (Mitchell P. B. и соавт., 2001).

Т. И. ГЛАЗУНОВА, К. Д. ТОПАЛОВА, Т. Ю. РЕЗНИКОВА

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ЛАМИТОРА В ЛЕЧЕНИИ И ПРОФИЛАКТИКЕ ДЕПРЕССИИ ПРИ БИПОЛЯРНЫХ АФФЕКТИВНЫХ РАССТРОЙСТВАХ

СКПБ № 1,

УДК 616.895.4-072-085

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.