CC BY
1IF = 7.921
EURASIAN JOURNAL OF MEDICAL AND NATURAL SCIENCES
Innovative Academy Research Support Center 921 www.in-academy.uz
ARTICLE INFO
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF QUANTITATIVE DETERMINATION OF DIHYDROATHISIN HYDROCHLORIDE UV-VIS SPECTROPHOTOMETRY
Ubaydullaev Q.A. Abduraimova M.M. Tashkent, Republic of Uzbekistan, Tashkent Pharmaceutical Institute [email protected] https://doi.org/10.5281/zenodo.14167995
ABSTRACT
Received: 10th November 2024 Accepted: 14th November 2024 Online: 15th November 2024
KEYWORDS Dihydroathizin e hydrochloride, diterpene alkaloids,
spectrophotometry, antiarrhythmic drug, validation, quantitative determination.
The technique of quantitative determination of dihydroatisine hydrochloride substance by UV-visible spectrophotometry was developed. The validation parameters of the method were determined. The method meets the requirements to the methods of analysis of pharmaceutical substances.
РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИГИДРОАТИЗИНА ГИДРОХЛОРИДА МЕТОДОМ УФ-СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ
Убайдуллаев К.А. Абдураимова М.М.
Ташкент, Республика Узбекистан, Ташкентский фармацевтический институт
[email protected] https://doi.org/10.5281/zenodo.14167995
ARTICLE INFO
ABSTRACT
Received: 10th November 2024 Accepted: 14th November 2024 Online: 15th November 2024
KEYWORDS Дигидроатизина гидрохлорид, алкалоиды дитерпенового ряда, спектрофотомерия, антиаритмическое средство, валидация, количественное определение.
Разработана методика количественного определения субстанции дигидроатизина гидрохлорида методом спектрофотометрии в УФ-области. Определены валидационные параметры методики. Методика отвечает требованиям, предъявляемым к методикам анализа фармацевтических субстанций.
Введение. Алкалоиды - это группа органических соединений, содержащих азот, которые имеют значительную биологическую активность. Дитерпеновые алкалоиды -это подгруппа, которая включает алкалоиды с двумя терпеновыми единицами.
EURASIAN JOURNAL OF MEDICAL AND NATURAL SCIENCES
Innovative Academy Research Support Center 921 www.in-academy.uz
IF = 7.921
Основными источниками дитерпеновых алкалоидов в мире являются растения рода Aconitum (аконит или борец) и Delphinium (дельфиниум или живокость) [1]. Aconitum zeravschanicum Worosch. (борец зеравшанский) принадлежит к семейству Ranunculaceae и значительно интересует исследователей благодаря своему содержанию разнообразных алкалоидов. В этом растении содержатся различные алкалоиды, относящиеся к классу дитерпеновых, такие как: тангутизин, зераконин, атизин, изоатизин, гетизин, номинин, зеравшанизин, бензоилгетератизин, атидин, гетератизин, атизин-азометин. Каждый из них обладает противоаритмической активностью [2]. Из алкалоида атизин, путем его восстановления, получают дигидроатизин. Субстанция дигидроатизина гидрохлорид демонстрирует более высокую противоаритмическую активность по сравнению с другими алкалоидами этого растения [3-5].
Для стандартизации и контроля качества препарата дигидроатизина гидрохлорида, можно использовать один из широко применяемых и современных методов анализа - спектрофотомерию в УФ-области. Преимущество данного метода заключается в том, что для эксперимента затрачивается небольшое количество исследуемого вещества, и метод обладает достаточно простой техникой выполнения анализа.
Цель исследования. Доказать пригодность анализа, разработав методику количественного определения дигидроатизина гидрохлорида методом спектрофотомерии в УФ-области с последующей валидацией методики.
Материалы и методы. В качестве объекта исследования использовали производное атизина-дигидроатизина гидрохлорид [6]. Применили спектрофотометрический метод количественного определения дигидроатизина гидрохлорида.
0,12 г (точная навеска) дигидроатизина гидрохлорида поместили в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворили в 20 мл воды очищенной, объем раствора довели до метки тем же растворителем (раствор А). 1 мл раствора А поместили в мерную колбу ёмкостью 50 мл и разбавили водой очищенной до метки.
Оптическую плотность раствора определили на спектрофотометре при длине волны 241 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве контрольного раствора использовали очищенную воду.
Одновременно определили оптическую плотность очищенного раствора дигидроатизина гидрохлорида.
Содержание дигидроатизина гидрохлорида в процентах рассчитали по следующей формуле:
Результаты и их обсуждение.
EURASIAN JOURNAL OF MEDICAL AND NATURAL SCIENCES
Innovative Academy Research Support Center 921 www.in-academy.uz
IF = 7.921
Провели статистическую обработку полученных результатов спектрофотомерии в УФ-области [7]. Провели валидацию методики по следующим критериям: специфичность, линейность, сходимость (прецизионность), правильность. Данные, полученные при статистической обработки результатов спектрофотомерии в УФ-области, представлены в таблице 1.
Таблица 1
Показатели статистического анализа УФ-спектрофотометрии дигидроатизина гидрохлорида.
Специфичность данной аналитической методики доказывалась путем сравнения анализируемого вещества и стандартного образца. УФ-спектры анализируемого вещества и стандартного образца идентичны, то есть имеют максимум поглощения при длине волны детектора 241±2 нм. Интерференция не превысила 2%, что отвечает критериям приемлемости [8].
УФ-спектры испытуемого образца имеют максимум поглощения при длине волны 241±2 нм (Рис. 1).
Рис. 1. УФ-спектр анализируемого раствора дигидроатизина гидрохлорида
Для определения линейности методики были получены спектры растворов дигидроатизина гидрохлорида различной концентрации и построен график зависимости оптической плотности (при соответствующей длине волны) от концентрации раствора лекарственного вещества (Рис. 2). Из построенного графика следует, что коэффициент корреляции отвечает критерию приемлемости и равен 0,9981. Соответственно, данная методика анализа обладает выраженной линейной зависимостью.
IF = 7.921
EURASIAN JOURNAL OF MEDICAL AND NATURAL SCIENCES
Innovative Academy Research Support Center 921 www.in-academy.uz
Рис. 2. График линейности методики
Определение правильности и сходимости (прецизионности) метода было выполнено путем получения УФ-спектров 3 параллельных образцов, приготовленных из одной серии исследуемого раствора. Анализ проводили два химика в течение 3 дней. Относительное стандартное отклонение (RSD, %) рассчитанное для определения содержания дигидроатизина гидрохлорида в исследуемом растворе и полученное в условиях повторяемости, составило 0,37%, что соответствует критерию приемлемости - не более 2,0%.
Таблица 2
Определение параметров правильности и сходимости (прецизионности) методики на модельных растворах
Уровень № Навеска, г Оптическая Найдено, г Найдено, %
(Xi) плотность, (Ai) (Yi) (Zi=Yi lOOXi)
1 0,0995 0,52 0,0998 100,30
1 2 0,1010 0,53 0,1007 99,70
3 0,1020 0,53 0,1016 99,60
4 0,1011 0,53 0,0999 98,81
2 5 0,1030 0,54 0,1028 99,80
6 0,0998 0,52 0,0990 99,20
7 0,1022 0,53 0,1020 99,80
3 8 0,1012 0,53 0,1013 100,10
9 0,0999 0,52 0,1002 100,30
Среднее, Ъ (® о) 99,73
Стандартное отклонение, Б 0,37
Относительное стандартное отклонение, ЯБО. (°о) 0,37
Относительный доверительный интервал, Д2 =1 (95 %, п-1) 1150^ 0,85
Систематическая погрешность, 6 = £ — 100| 0.27
Критерий статистической незначимости, Д 7. 3 0,28
Вывод. Разработан метод количественного определения дигидроатизина гидрохлорида в субстанции с использованием их УФ-спектров поглощения. Полученные математические характеристики подтверждают пригодность метода для стандартизации дигидроатизина гидрохлорида в субстанции. Валидационные параметры метода, такие как, правильность, точность, сходимость, воспроизводимость
IF = 7.921
EURASIAN JOURNAL OF MEDICAL AND NATURAL SCIENCES
Innovative Academy Research Support Center 21 www.in-academy.uz
и линейность, находятся в пределах нормы, ЯББ = 0,37. Относительный доверительный интервал равен 0,85.
References:
1. Юнусов М.С. Дитерпеновые алкалоиды. Структура, свойства, применение // Научно-практический журнал «Фармацевтический бюллетень». - Караганда, 2014, №34, С. 34.
2. Кодирова М.Ш., Турсунходжаева Ф.М., Салимов Б.Т., Джахангиров Ф.Н., Режепов Ж. Атизин ва гетизин цатори алкалоидларининг антиаритмик таъсири ва кимёвий тузилишфаоллик муносабатлари // Farmatsevtika jurnali. - 2010, №4, Б. 72.
3. Валиев Н.В. Технологии производства субстанций препаратов антиаритмина и дигидроатизина гидрохлорида: Автореф. дисс. д-ра филос. по техн. наукам. - Ташкент, 2018, С. 44.
4. Валиев Н.В., Юсупова Д.М., Салимов Б.Т. Aconitum Zeravschanicum - сырье для производства препарата дигидроатизина гидрохлорида и анатомо-морфологическое строение его надземных органов // Фармацевтический журнал. - Ташкент, 2016, № 3, С. 24-27.
5. Джахангиров Ф.Н., Кадирова М.Ш., Режепов Ж., Турсунходжаева Ф.М. К фармакологии дитерпеноидного алкалоида дигидроатизина // Сборник тезисов конференции «Актуальные проблемы химии природных соединений». - Ташкент, 2009, С. 233, 247.
6. Ботиров Р.А., Валиев Н.В., Жураев О.Т., Азизова М.А., Саноев А.И. Оптимизация процесса получения дигидроатизина // Universum: Химия и биология: электрон. научн. журн. 2019. № 3(57), С.2-3.
7. П.С. Зориков, В.М. Колдаев Спектрофотометрические параметры некоторых алкалоидов // Тихоокеанский медицинский журнал, 2013, № 2, С. 28-30.
8. Убайдуллаев К.А., Абдуллабекова В.Н., Хусаинова Р.А., Умарова Г.К. Дори воситаларини иш-лаб чицариш валидацияси - Тошкент, «Янги нашр» - 2017, Б. 22-28
