CC BY
76
УДК 504.062.2
РАЦИОНАЛЬНОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВИДОВ РОДА HEDYSARUM L., ПРОИЗРАСТАЮЩИХ В САМАРСКОЙ ОБЛАСТИ
© 2012 И.А. Попова1, Т.И. Плаксина1, В.А. Куркин2, В.М. Рыжов2, Л.В. Тарасенко2
1 Самарский государственный университет 2 Самарский государственный медицинский университет
Поступила в редакцию 14.05.2012
Одним из растительных препаратов, применяемых в терапии вирусных заболеваний, является препарат Алпизарин, получаемый из травы Hedysarum alpinum L. (копеечник альпийский). В Самарской области произрастают близкородственные виды к копеечнику альпийскому: (H. grandiflorum Pall., H. Gmelinii Ledeb., H. razoumovianum Fisch. et Helm.). В работе приводятся результаты исследований, подтверждающие перспективность использования H. razoumovianum и Н. Gmelinii в фармацевтической промышленности в качестве источников противовирусных препаратов и внедрения их в культуру.
Ключевые слова: Hedysarum, Hedysarum grandiflorum, Hedysarum razoumovianum, Hedysarum Gmelinii, анатомия, гистология, морфология, спектроскопия, хроматография
Род Hedysarum L. (сем. Fabaceae, Legumi-nosae) насчитывает около 200 видов, из них в бассейне Средней Волги достоверно произрастает только три: копеечник крупноцветковый (Hedysarum grandiflorum Pall.), копеечник Разумовского (Н. razoumovianum Fisch. et Helm) и копеечник Гмелина (Н. Gmelinii Ledeb.), два первых вида занесены в Красную книгу РСФСР [4, 7]. Растения, произрастающие, в Самарской области имеют свою экологию и биологию. H. grandiflorum Pall. -травянистый стержнекорневой многолетник высотой 15-35 см. Листья непарноперистые, с обеих сторон серебристо-волосистые. Венчики, беловато-желтые. Цветет в мае-июне. Размножение исключительно семенное [5, 6]. H. razoumovianum Fisch. et Helm - полукустарничек высотой 20-45 см, с многочисленными восходящими побегами. Стебли прижатоволосистые, с непарноперистыми листьями. Венчик бледно-розовый или лиловый. Цветет в июне [5, 6]. H. Gmelinii Ledeb. - многолетнее травянистое растение высотой 15-60 см. Стебли восходящие или прямостоячие, ребристые, покрытые густыми волосками. Листья сверху почти голые, снизу прижатоопушенные, яйцевидно-эллиптические. Венчик розово-пурпуровый. Окраска лепестков изменяется при смене субстрата: на мелах она ближе к палевому цвету, на известняках - к розовому. Цветет в июне-июле [5, 6]. По отношению к субстрату копеечники являются
Попова Ирина Александровна, аспирантка Плаксина Тамара Ивановна, доктор биологических наук, профессор кафедры экологии, ботаники и охраны природы. E-mail: listochek5@yandex.ru Куркин Владимир Александрович, доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии. E-mail: vakur@samaramail.ru
Рыжов Виталий Михайлович, кандидат фармацевтических наук, ассистент кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии. E-mail: lavr_rvm@mail. ru
Тарасенко Kюбовь Владимировна, ассистент кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии
кальцефилами, произрастают в условиях карбонатных грунтов [3], в связи с этим они обычно встречаются в составе каменистых степей, кустарниковых опушек на известняковой, меловой, доломитовой, мергелистой литологии [1]. H. grandiflorum произрастает на меловых обнажениях и карбонатных почвах с недостаточной увлажненностью. Вид предпочитает открытые пространства с разреженным травостоем. H. razoumovianum встречается на каменистых склонах с крутизной 45-60 градусов, что превышает оптимальный уклон местообитаний копеечника крупноцветкового, либо виды соседствуют.
Популяция H. grandiflorum и H. Razou-movianum (с которой были собраны нами образцы для анализа) - Самарская область, Кинельский район, с. Преображенка, склоны пермских отложений Татарского яруса верхнепермской системы. На 100 м2 простирается с востока на запад около 1 км, 55-60 особей. Популяция H. Gmelinii (с которой были нами собраны образцы для анализа) - Самарская область, Шигонский район. Окрестности Ле-вашовки, на меловых обнажения, за рекой Мазой (направление от Левашовки, популяция около 200м2, около 40 особей, в цветущем состоянии).
Цель исследования: выявление перспективности использования видов рода Hedysarum, произрастающих в Самарской об-ласти, с дальнейшим выведением их в культуру.
Материалы и методы. Объектами настоящих исследований являлись: гербарные образцы и органы растений трех видов рода Hedysarum: H. grandiflorum Pall., H. Gmelinii Ledeb., H. Razoumovianum Fisch. Et Helm. Экземпляры растений заготавливались в период с июня по август 2010 г. в Кинельском районе Самарской области. Сушка сырья производилась естественным способом, под навесами, без доступа прямых солнечных лучей. В качестве сравнения использовали лист манго сухой (Аргентина, 2008 г.), достоверный образец манги-ферина полученный на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского
2279
Известия Самарского научного центра Российской академии наук, том 14, №1(9), 2012
государственного медицинского университета. Для изучения возможностей диагностики видов копеечника использовали морфологический и анатомо-гистологический метод анализа. Изучение анатомии и гистологии образцов проводили при помощи световых микроскопов марки Motic: DM111, DM-39C-N9GO-A. Подготовка микропрепаратов осуществлялась по общей фармакопейной методике на траву [2]. В качестве методов выделения и идентификации химических структур из исследуемых образцов использовали: метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинках «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» в различных системах растворителей: хлороформ, этанол, вода, бутанол, ледяная уксусная кислота, препаративной колоночноч-ной хроматографии; метод спектроскопии и спек-трофотометрии проводился на спектрофотометре "Specord 40" (Analytik Jena) в кюветах с толщиной слоя 10 мм, в качестве раствора сравнения использовали спирт этиловый 95%.
Результаты и обсуждение. Сравнительное ТСХ исследование водно-спиртовых извлечений из органов Н. grandiflorum, H. Razoumovia-num, H. Gmelinii позволило выявить наличие в них структур фенольной природы, при этом доминирующее количество фенолов было обнаружено в листьях и цветках анализируемых объектов. Фенольную природу обнаруженных структур подтверждали на хроматограммах обработкой раствором диазобен-золсульфокислоты (ДСК), при этом наблюдалось окрашивание пятен с Rf = 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 в ярко-оранжевый цвет (рис. 1).
/ Ri - 0,7
Ч-■>.<-
--".-"-V L-- М-0,4
•Ii Г
• J-0Л '
I г э 4 1 6 7 я 4 1 г 1 1 5 6 ' 8 *
А Б
Рис. 1. Хроматограмма анализа органов H. Ra-zoumovianum: А - детекция пятен в видимой области спектра; Б - обработка реактивом ДСК.
1, 2, 3 - водно-спиртовые извлечение листа на 96%, 70%, 40% этиловом спирте; 4, 5, 6 - водно-спиртовые извлечения цветков на 96%, 70%, 40% этиловом спирте; 7, 8, 9 - водно-спиртовые извлечения из корней на 96%, 70%, 40% этиловом спирте
Сравнение с достоверно известным образцом ксантонового гликозида мангиферина позволило обнаружить сходную с ним структуру в листьях копеечника Разумовского. Анализ спектральных кривых показал наличие характерных максимумов поглощения для флавоноидов и ксан-тонов. Батохромный сдвиг, указывающий на наличие флавоноидных структур в объекте, сильно выражен в водно-спиртовых извлечениях из листьев и цветков всех видов копеечника (рис. 2).
V u и
I» 1» od J« i« ni >«е т **> *i* «о *«
Д IHMЯ ВОЛНЫ,КМ
А
Рис. 2. Спектральный анализ водно-спиртовых извлечений образцов цветов H. Gmelinii: А - батахромный сдвиг электронного спектра, Б - дифференциальная кривая электронного спектра. 1 - извлечение из цветков И.О.на 70% этиловом спирте; 2 - извлечение из цветков И.О. на 70%
этиловом спирте (+А1С13)
Результаты спектрофотометрического определения количественного содержания флавонои-дов в анализируемых объектах показали, что наибольшее их содержание имеет копеечник Разумовского в листьях - 3%, в цветках - 1,5%. Содержание флавоноидов в корнях всех, проанализированных видов копеечников не значительно и не превышает 0,2%.
Диагностика анатомо-гистологии позволила выявить отличия в строении близкородственных видов. При этом основным отличительным признаком на уровне анатомии и гистологии явилась петиолярная анатомия, позволившая выявить явные различия в строении рахиса исследуемых видов копеечников (рис. 3) [8, 9].
Выводы: проведены сравнительные хрома-тографические и спектроскопические исследования надземных и подземных органов копеечников. Выявлено наличие флавоноидных структур во всех анализируемых образцах, в частности, обнаружено присутствие мангиферина в листьях копеечника Разумовского. Проведенный анатомо-гистологи-ческий анализ позволил выявить отличительные признаки в строении близкородственных видов. Полученные данные фитохимического анализа свидетельствуют о перспективности дальнейших исследований по углубленному изучению химического состава видов копеечника, а также изучению возможностей введения их в культуру.
2280
А Б
Рис. 3. Поперечный срез рахисов листьев копеечников (х40): А - Hedysarum grandiflorum окраска раствором сернокислого анилина, Б - Hedysarum razoumovianum общий вид. 1 - эпидермис; 2 - паренхима первичной коры; 3 - колленхима; 4 - склеренхима; 5 - флоэма; 6 - ксилема; 7 - полость; 8 -
клетки с пигментом; 9 - паренхима сердцевины
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
Абрамова, Л.М. Синантропизация степей: методы оценки и возможности управления процессом / ЛМ. Абрамова, БМ. Миркин // Вопросы степоведения. Оренбург. 2000. С.62-69.
Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа / М.: Медицина, 1987. Вып. 1. 336 с. Ильина, В.Н. Изучение пространственной структуры ценопопуляций копеечника Разумовского на территории Самарской области // Степи Северной Евразии. Эталонные степные ландшафты: проблемы охраны, экологической реставрации и использования: Матер. III Междунар. симпоз. Оренбург: Оренбургсупрем-сервис, 2003. С. 241-243.
Красная книга РСФСР (растения). Сост. А.Л. Тахтаджян. - М.: Росагропромиздат, 1988. 591 с. Красная книга Самарской области. Редкие виды растений, лишайников и грибов. Под ред. Г.С.
Розенберга, С.В. Саксонова. - Тольятти: ИЭВБ РАН, 2007. Т. 1. 372 с.
Маевский, П.Ф. Флора средней полосы европейской части России. - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2006. 600 с.
Плаксина, Т.И. Редкие, исчезающие растения Самарской области. - Самара: Самарский Университет, 1998. 272 с.
Попова, И.А. Анатомо-гистологическое исследование листочков сложного листа Hedysarum grandiflorum Pall. / И.А. Попова, Т.И. Плаксина, В.М. Рыжов, Л.В. Тарасенко // Вестник Самарского государственного университета. 2011. № 8 (89). С. 196-201. Сдобнина, Л.И. Диагностические признаки лекарственных растений в петиолярной анатомии // Пятио-лярная анатомия. - Пенза: РИА Новая волна, 2008. С. 25-27.
RATIONAL USE OF HEDYSARUM L., GROWING IN SAMARA OBLAST
© 2012 I.A.Popova1, T.I. Plaksina1, V.A. Kurkin2, V.M.Ryzhov2, L.V. Tarasenko2
1 Samara State University 2 Samara State Medical University
One of the vegetative preparations applied in therapy of virus diseases, is Alpizarin received from of Hedysarum alpinum L. herb. In Samara oblast closely related types grows: H. grandiflorum Pall., H. Gmelinii Ledeb., H. razoumovianum Fisch. et Helm. The results of researches, given in work, confirming prospects of use of H. razoumovianum and H. Gmelinii in pharmaceutical industry as sources of antiviral preparations and their introduction in culture.
Key words: Hedysarum, Hedysarum grandiflorum, Hedysarum razoumovianum, Hedysarum Gmelinii, anatomy, histology, morphology, spectroscopy, chromatography
Irina Popova, Post-graduate Student
Tamara Plaksina, Doctor of Biology, Professor at the Department of Ecology, Botany and Nature Protection. E-mail: listochek5@yandex.ru Vladimir Kurkin, Doctor of Pharmacy, Professor, Head of the Department of Pharmacognosy with Botany and Bases of Phytotherapy. E-mail: vakur@samaramail.ru Vitaliy Ryzhov, Candidate of Pharmacy, Assistant at the Department of Pharmacognosy with Botany and Bases of Phytotherapy. E-mail: lavr_rvm@mail.ru Lyubov Tarasenko, Assistant at the Department of Pharmacognosy with Botany and Bases of Phytotherapy
2281
