CC BY
59
УДК 616.36-002-036.12+616.36-004
© Г.Б. Левитан, А.В. Астахин, Н.Н. Ларина, Б.Н. Левитан, 2010
Г.Б. Левитан, А.В. Астахин, Н.Н. Ларина, Б.Н. Левитан
РАСТВОРИМЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ ТИПА II И ЭТИОЛОГИЯ ХРОНИЧЕСКИХ ГЕПАТИТОВ И ЦИРРОЗОВ ПЕЧЕНИ
ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия Росздрава»
У 50 больных хроническим гепатитом (ХГ), 47 больных циррозом печени (ЦП) и 25 здоровых доноров исследовали концентрацию фактора некроза опухолей (TNF) и растворимых рецепторов фактора некроза опухолей типа II (sTNF-RII) методом иммуноферментного анализа. Установлено, что концентрация sTNF-RII и TNF при ХГ и ЦП вирусной этиологии была достоверно выше, чем при алкогольных ХГ и ЦП и в норме.
Ключевые слова: хронический гепатит, цирроз печени, растворимых рецепторов фактора некроза опухолей типа II
G.B. Levitan, A.V. Astakhin, N.N. Larina, B.N. Levitan
SOLUBLE RECEPTORS OF TUMOUR NECROSIS FACTOR TYPE II AND ETIOLOGY OF CHRONIC HEPATITIS AND LIVER CIRRHOSIS
50 Chronic Hepatitis (CH) and 47 Liver Cirrhosis (LC) patients and 25 healthy volunteers were included in the investigation. Tumour necrosis factor (TNF) and soluble receptors of tumour necrosis factor type II (sTNF-RII) concentrations were assessed by the ELISA method. It was investigated that sTNF-RII and TNF concentrations in virus CH&LC were significantly (p<0,05) increased in comparison with the alcoholic CH&LC and in the normal condition.
Key words: chronic hepatitis, liver cirrhosis, soluble receptors of tumour necrosis factor type II.
Хронические гепатиты (ХГ) и циррозы печени (ЦП) характеризуются тяжелым, прогредиентным течением и являются одной из основных причин инвалидности и смертности в развитых странах [2, 7]. Известно, что течение и прогноз ХГ и ЦП в значительной степени определяются состоянием иммунного статуса организма. На всех этапах иммунного ответа активное участие в нем принимают цитокины, которые осуществляют регуляцию межклеточных и межсистемных взаимодействий [3, 5, 6]. Действие цитокинов на клетку-мишень опосредуется высокоспецифичными мембранными рецепторами, представляющими собой трансмембранные гликопротеины, у которых внеклеточная часть отвечает за связывание отдельного цитокина [4]. Растворимый рецептор - это отщепленный ферментом внеклеточный домен мембранного рецептора, сохраняющий высокую аффинность в отношении своих лигандов и способный нейтрализовывать цитокины, препятствуя их доступу к интактным мембранным рецепторам. Растворимые рецепторы могут выполнять функции конкурирующих антагонистов, а также участвовать в транспорте, доставке цитокинов в очаг поражения и выведении их из организма [4, 9].
Исследования ряда авторов показали, что при заболеваниях печени большое значение имеет такой провоспалительный цитокин, как фактор некроза опухолей (ФНО), который участвует в формировании неспецифического и специфического иммунного ответа на вирусную инфекцию, процессах регенерации, развития фиброза, внутрисосудистого тромбоза [1, 5, 6, 8]. Однако многие аспекты функционирования ФНО при ХГ и ЦП остаются неясными, литературные данные, нередко, носят противоречивый характер. Вероятно, это объясняется тем, что факторы, влияющие на биологические эффекты ФНО при ХГ и ЦП, отличаются сложностью и многообразием. При этом, если характеристике роли ФНО в развитии и прогрессировании заболеваний печени посвящено значительное количество публикаций, то об исследовании состояния его растворимых рецепторов как факторов, регулирующих биологическую активность данного цитокина, имеются лишь единичные сообщения. Причем наименее изученными при ХГ и ЦП являются растворимые рецепторы фактора некроза опухолей типа II (sTNF-RII) [9, 10].
Для уточнения механизмов, обусловливающих изменение ФНО и sTNF-RII у больных ХГ и ЦП, был проведен анализ изменений этих показателей в зависимости от этиологии заболевания. Как известно, наряду с наиболее значимым этиологическим фактором: вирусной инфекцией, к развитию хронических форм заболевания печени могут приводить алкоголь и ряд других причин.
Целью настоящего исследования явился поиск этиологических особенностей изменения показателей sTNF-RII и ФНО при ХГ и ЦП вирусной, алкогольной и смешанной природы.
Материалы и методы. Для решения поставленных задач на базе гастроэнтерологического отделения Александро-Мариинской областной клинической больницы г. Астрахани было проведено комплексное обследование 50 больных ХГ и 47 - ЦП вирусной, алкогольной и смешанной (вирус + алкоголь) этиологии и 25 здоровых доноров.
Для уточнения этиологии заболевания у всех пациентов проводилось определение маркеров вирусов гепатита «В» и «С» методом иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции,
учитывалось наличие в анамнезе злоупотребления алкоголем, присутствие внешних и системных признаков алкогольной болезни.
С помощью метода ИФА всем больным проводилось определение концентрации ФНО в сыворотке крови с использованием коммерческих тест-систем производства ООО «Протеиновый контур», г. Санкт Петербург и концентрации sTNF-RII с использованием набора реагентов фирмы «Bender MedSystems» (Австрия).
Результаты и обсуждение. Анализ полученных данных показал (табл. 1), что достоверное повышение средних значений концентрации sTNF-R2 в различной степени наблюдается при всех этиологических вариантах ХГ и ЦП, причем при ЦП концентрация растворимых рецепторов значительно превышала соответствующие параметры при ХГ.
Таблица 1
Концентрация ФНО и его растворимых рецепторов типа II в зависимости от этиологии ХГ
Группы обследованных больных Концентрация sTNF-R2 (пкг/мл) Концентрация ФНО (пкг/мл)
Хронический гепатит (n=50)
вирусный (n=23) 8,57±2,09* 101,13±10,41*
алкогольный (n=18) 4,87±1,21*'** 42,36±7,23 *'**
смешанный (n=9) 6,3±1,23* 68,02±12,7*'**
Цирроз печени (n=47)
вирусный (n=22) 19,0±3,9* 109,36±21,27*
алкогольный (n=14) 7,64±2,4*'** 79,12±12,9*
смешанный (n=11) 14,76±2,28* 109,45±11,24*
Контроль (n=25) 3,54±0,39 23,54±6,02
Примечание: *р<0,05 по сравнению с контролем; **р<0,05 по сравнению с группой вирусных ХГ и ЦП
Содержание sTNF-R2 в сыворотке крови при вирусных ХГ и ЦП была достоверно выше, чем при алкогольных. Значения sTNF-R2 при ХГ и ЦП смешанной этиологии приближались к таковым у больных с вирусными поражениями, причем у лиц с ЦП вирусной и смешанной этиологии достоверные различия отсутствовали (р>0,05).
Согласно полученным данным, концентрация ФНО также была увеличена при всех этиологических формах ХГ, но у больных вирусной природы она была значительно выше, чем при смешанной и алкогольной (табл. 1). При ЦП наблюдалась аналогичная тенденция, но отсутствовали достоверные различия между всеми этиологическими группами.
Следовательно, механизм увеличения концентрации sTNF-R2 при хронических вирусных и вирусно-алкогольных гепатитах и циррозах печени, по-видимому, в первую очередь, объясняется ответной реакцией на повышение продукции ФНО, выброс которого опосредован прямым стимулирующим эффектом гепатотропных вирусов на синтез данного цитокина макрофагами печени и гепатоцитами. Хотя, по-видимому, существуют и иные причины повышения концентрации рецепторов, на что указывает довольно значительный процент больных ХГ алкогольной этиологии с повышенными значениями sTNF-R2.
Механизм повреждающего действия вирусов гепатита В и С на клетки печени существенно различается: при воздействии HВV преобладает иммуноопосредованный, а при HСV - прямой цитопатический эффект. В связи с этим для установления особенностей реакции sTNF-R2 в зависимости от видовой принадлежности вируса, был проведен сравнительный анализ содержания растворимых рецепторов в сыворотке крови больных HВV и HСV вирусными ХГ и ЦП.
Было показано, что у больных ХГ и ЦП вирусной этиологии, независимо от вида вируса, происходит значительное, примерно равное увеличение концентрации sTNF-R2, по сравнению со здоровыми лицами. Концентрация sTNF-R2 при ХГВ в среднем составила 7,62±1,65 пкг/мл, при ХГС - 8,06±2,33 пкг/мл. Имевшаяся незначительная тенденция к появлению более высоких средних значений sTNF-R2 при ЦП С -21,0±3,9 пкг/мл, по сравнению с 16,3±2,8 пкг/мл при ЦП В, не отличалась достоверностью (р>0,05). Все это свидетельствует, что нарастание уровня sTNF-R2 при вирусных ХГ и ЦП происходит независимо от характера воздействия на гепатоциты различных (HВV и HСV) видов гепатотропных вирусов.
Полученные в ходе исследования данные имеют не только теоретическое, но и важное практическое значение. Установленные закономерности, свидетельствующие, что для вирусных ХГ и ЦП характерно более существенное нарастание концентраций sTNF-R2, чем для алкогольных поражений печени, могут быть использованы при проведении дифференциальной диагностики этиологии заболевания. Выявление значительного подъема концентрации рецепторов у больных с алкогольной болезнью печени может свидетельствовать о присоединении вирусного компонента и развитии заболевания смешанной этиологии, либо о возможной трансформации ХГ в ЦП.
Несмотря на то, что сходные изменения наблюдались и при исследовании показателя ФНО, однако, учитывая факт, что при алкогольных ЦП отсутствовали достоверные различия с группами больных ЦП вирусной и смешанной этиологии, диагностическая ценность показателя ФНО при определении этиологии ЦП не высока.
Таким образом, исследование sTNF-R2 может найти широкое применение при проведении дифференциальной диагностики этиологии ХГ и ЦП, в том числе при раннем распознавании развития вирусного поражения у больных алкогольной болезнью печени.
ЛИТЕРАТУРА
1. Астахин А.В. Система регуляторных цитокинов и сывороточного интерферона-a при хронических диффузных заболеваниях печени: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. - Волгоград, 2004. - 39 с.
2. Диагностика и лечение диффузных заболеваний печени / под ред. академика РАМН В.Т. Ивашкина и академика РАМН Н.Д. Ющука. - М., 2003. - 416 с.
3. Ивашкин В.Т., Маевская М.В. Алкогольно-вирусные заболевания печени. - М.: Литтерра, 2007. -160 с.
4. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. - СПб: Фолиант, 2008. - 552 с.
5. Лобзин Ю.В., Никитин В.Ю., Сухина И. А. Иммунопатогенез вирусного гепатита С. Иммунологические маркеры прогрессирования заболевания // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -2007. - № 6. - С. 75-84.
6. Царегородцева Т.М., Серова Т.И. Цитокины в гастроэнтерологии. - М.: Анахарсис, 2003. - 96 с.
7. Шерлок Ш., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей. Практическое руководство / Пер. с англ. / под ред. З.Г. Апросиной, Н.А. Мухина. - М.: ГЭОТАР Медицина, 2002. - 864 с.
8. Ягода А.В., Гейвандова Н.И., Хубиев Ш.М. Фактор некроза опухоли при хронических вирусных гепатитах: патогенетическая роль, пути фармакологической коррекции // Иммунолог. - 2000. - Вып. 2.
С. 36-38.
9. Tilg H., Kaser A., Moschen A.R. How to modulate inflammatory cytokines in liver diseases // Liver Int. -2006. - № 9. - P. 1029-1039.
10. Zekri A.R., Ashour M.D., Hassan A. Cytokine profile in Egyptian hepatitis C virus genotype-4 in relation to liver disease progression // World. J. Gastroenterol. - 2005. - Vol. 11, № 42. - P. 6624-6630.
Левитан Григорий Болеславович, аспирант кафедры факультетской терапии и профессиональных болезней с курсом постдипломного образования ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия Росздрава», Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121, тел. (8512) 76-03-03, e-mail: grishaka@inbox.ru
Астахин Александр Владимирович, доктор медицинских наук, профессор кафедры факультетской терапии и профессиональных болезней с курсом постдипломного образования ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия Росздрава»
Ларина Надежда Николаевна, кандидат медицинских наук, доцент, заместитель главного врача по лечебной работе ГУЗ «Александро-Мариинская областная клиническая больница», г. Астрахань
Левитан Болеслав Наумович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой факультетской терапии и профессиональных болезней с курсом постдипломного образования ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия Росздрава», Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121, тел. (8512) 28-90-68, e-mail: bolev@mail.ru
