CC BY
55
УДК 613.32.614.777-78
М.В. Мальцева, Е.Д. Савилов, Н.Ю. Чубук, С.И. Беликов, В.А. Астафьев, Р.Б. Карасев,
И.А. Хаснатинов, С.С. Шулунов, М.М. Верхозина, И.В. Козлова, Ю.И. Лысанов, Е.Б. Щербакова
РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ЭНТЕРОВИРУСОВ В ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Институт эпидемиологии и микробиологии НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН ВСНЦ (Иркутск)
Лимнологический институт (Иркутск) Территориальное Управление Федеральной Службы по надзору в сфере защиты прав потребителей
и благополучия человека по Иркутской области (Иркутск) Городская клиническая инфекционная больница (Иркутск)
В статье представлены результаты вирусологического мониторинга объектов окружающей среды. Полученные материалы свидетельствуют, об интенсивной циркуляции, энтеровирусов во внешней среде, что определяет, рост, заболеваемости, населения данной инфекцией.
Ключевые слова: вирусы, распространенность, заболеваемость
PREVALENCE OF ENTEROVIRUSES IN OBJECTS OF ENVIRONMENT
M.V. Maltseva, E.D. Savilov, N.U. Chubuk, S.I. Belikov, V.A. Astafjev, R.E. Karasyov,
M.A. Hasnatinov, S.S. Shulunov, M.M. Verkhosina, I.V. Kozlova, U.I. Lysanov, E.B. Shcherbakova
Institute of Epidemiology and Microbiology SC ME ESSC SB RAMS, Irkutsk
Limnological Institute, Irkutsk Territorial Management of Federal Service on supervision in sphere of protection of rights of consumers and well-being of the person on Irkutsk area, Irkutsk
City Clinical Infectious Hospital, Irkutsk
Results of virologic monitoring of objects of environment are submitted, in the article. The received, materials testify to intensive circulation of enteroviruses in the environment, that defines growth of population morbidity by the given infection.
Key words: viruses, prevalence, morbidity
ВВЕДЕНИЕ
Одной из наиболее значимых проблем в области охраны окружающей среды является загрязнение водоемов и других эпидемически значимых объектов патогенными вирусами. Специфическую особенность данной проблемы составляет способность вирусов длительно сохраняться на объектах окружающей среды, в том числе в водах различного качества [1, 3, 4, 6], способствуя широкому распространению таких инфекционных заболеваний, как вирусный гепатит А, ротавирусная инфекция и др.
В последнее время все большее внимание органов здравоохранения и общественности г. Иркутска привлекают к себе энтеровирусы, что, прежде всего, обусловлено высокой частотой вспышечной заболеваемости, а также недостаточной изученностью эпидемиологии данной инфекции [2, 5, 7]. В связи с этим в г. Иркутске в 2004 г. был проведен мониторинг окружающей среды, основной целью которого явился контроль циркуляции энтеровирусов в объектах повышенного эпидемического риска.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Настоящая работа основана на результатах поэтапного комплексного исследования объектов окружающей среды и биосубстратов больных.
Первый этап исследований заключался в проведении ретроспективного анализа заболеваемости населения г. Иркутска энтеровирусной инфекцией. Для изучения многолетней динамики заболеваемости и ее уровней использовались данные Территориального Управления Федеральной Службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Иркутской области за 1999 — 2003 гг.
Второй этап предусматривал проведение мониторинга объектов окружающей среды г. Иркутска. С этой целью исследовались пробы воды различного качества, смывы с эпидемически значимых объектов (оборудование и инвентарь, а также руки детей и персонала в детских дошкольных учреждениях), мякоть овощей и фруктов, реализуемых через розничную торговлю. Забор проб воды из источников водоснабжения и рекреационных зон г. Иркутска осуществлялся в период с мая по сентябрь, из разводящих сетей водопровода и водозаборных сооружений — в течение всего исследуемого периода. Смывы с эпидемически значимых объектов брали ежемесячно и по эпидемическим показаниям. Забор проб овощей и фруктов осуществлялся на рынке «Центральный» в летние месяцы. Исследования проводились с использованием метода полимеразной цепной реакции. Отдельные пробы подлежали анализу классическим вирусологическим методом на культуре клеток RD.
Всего было исследовано 170 проб, в том числе:
• вода различного качества — 58 проб;
• смывы в детских дошкольных учреждениях
— 78 проб;
• смывы с овощей и фруктов — 34 пробы.
На третьем этапе с целью индикации энтеровирусов и определения их генотипов, методом поли-
меразной цепной реакции были исследованы 215 проб биологического материала (кровь, ликвор, кал и носоглоточные смывы), взятого от 115 больных, госпитализированных в инфекционную больницу с диагнозом «Энтеровирусная инфекция». Забор материала от больных осуществлялся в 2003 — 2004 гг.
Детекция соответствующих вирусов методом полимеразной цепной реакции осуществлялась с использованием коммерческого набора РИБО-ЗОЛЬ-Амплисенс и набора РЕВЕРТА Ь-100-Ампли-сенс, Москва. Для амплификации фрагмента 5‘ не-транслируемого региона использовали праймеры 5СХ3 и 5ЕУ1, гена УР1 — праймеры УР1.1 и 2А.
Установление первичной нуклеотидной последовательности проводили на автоматическом сек-венаторе АВ1 310. В работе использовали наборы реагентов для автоматического секвенирования (Аше^Ьаш).
Генотипирование обнаруженных энтеровирусов производили с помощью сравнения первичных нуклеотидных последовательностей фрагмента гена УР1 с гомологичными фрагментами изоля-тов энтеровирусов опубликованными в интерактивной базе данных GenBank.
Обработку полученных данных проводили с помощью общепринятых параметрических и непараметрических критериев статистики [8].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В г. Иркутске в период с 1999 по 2003 гг. наблюдался значительный рост заболеваемости детского населения энтеровирусной инфекцией. Если в 1999 г. показатель заболеваемости детей данной формой инфекционной патологии составлял 46,8 0/0000, то в 2003 г. — уже 574,6 0/0000, при темпе прироста 87,2 %. Наиболее интенсивно в эпидемический процесс вовлекались дети старшего дошкольного и младшего школьного возрастов (4 — 9 лет).
Взрослое население отреагировало менее активно при развитии эпидемического процесса. Заболеваемость указанной группы в 1999 и 2003 гг. составила 0,6 и 2,4 0/0000 по этим годам соответственно, при темпе прироста 39,1 %.
Интенсивный рост заболеваемости энтерови-русной патологией, а также преимущественное вовлечение в эпидемический процесс детского населения послужили основной причиной организации на территории г. Иркутска вирусологического мониторинга эпидемически значимых объектов окружающей среды.
Как показали результаты проведенных исследований, с наибольшей частотой энтеровирусы встречались в мякоти овощей и фруктов, реализуемых через торговую сеть г. Иркутска (Центральный рынок). Присутствие соответствующей РНК наблюдалось в 40,0 % проб, из них 20,0 % овощей были местного производства (Иркутский район), 13,3 % — завезены из Китая, 6,7 % — из Ташкента.
В процессе накопления вируса на культуре клеток RD, энтеровирусы были идентифицированы в пяти из девяти исследуемых проб. Вирус со-
держался в мякоти перца (Ташкент), редиса (с. Хомутово, Иркутский район), помидор (хозяйство «Тепличное», Иркутский район), бананов (Эквадор) и яблок (Китай).
Исследование смывов, взятых в детских дошкольных учреждениях, методом полимеразной цепной реакции выявило присутствие маркера энтеровируса в 10,3 % проб. На культуре клеток RD соответствующий вирус определялся в двух из четырех исследованных проб. Следует отметить, что забор проб, давших положительный результат, приходился на конец июля и совпадал с периодом подъема заболеваемости энтеровирусной инфекцией.
В процессе индикации энтеровирусов из воды различного качества методами полимеразной цепной реакции позитивные результаты были получены в 10,3 % проб. Из них в 5,2 % случаев патогенный вирус определялся в пробах горячей воды, взятых из разводящей сети Иркутска II, в 3,4 % — в р. Ангара (п. Боково, завод нерудных материалов), в 1,7 % — на техническом водозаборе Авиазавода. Выборочное исследование проб воды методом культуры клеток позволило выделить три цитопатогенных агента из семи проб. Все они идентифицированы как энтеровирусы.
Заключительным этапом проведенных исследований явился анализ клинического материала больных энтеровирусной инфекцией.
Исследование ликвора больных, госпитализированных в городскую инфекционную больницу с диагнозом «Энтеровирусная инфекция» во время вспышки 2003 г. выявило присутствие РНК энтеровируса в 90,0 % случаев. В ликворе лиц, заболевших в 2004 г., соответствующий маркер определялся лишь в 70,1 % проб. Возможно, различия в данных показателях обусловлены изменением структуры клинических форм в 2004 г. по сравнению с 2003 г. Так, если в 2003 г. превалировали менингиальные формы инфекции (57,4 %), то в 2004 г. — уже лихорадочные (66,0%). Кроме того, проведенные в 2004 г. исследования позволили выявить РНК вируса в крови — в 28,6 %, в фекалиях — в 76,4 %, в носоглоточных смывах — в 85,2 % случаев.
Цитопатическое действие энтеровируса на культуре клеток RD проявлялось в 12,0 % исследуемых проб.
Дальнейшим анализом позитивных проб было установлено, что образцы как 2003 г., так и 2004 г. преимущественно принадлежат виду Human enterovirus B (HEVB), серотипу Echovirus 30. Уровень гомологии с типовыми штаммами близкородственных серотипов HEVB составил: Echo21 (штамм Farina) — 69,6 — 75,4 %; Echo13 (Madrid-May00-2) - 66,3-69,6 %; Echo11 (TUN/1999-10005)
- 64,3-67,6 %; Echo 6 (NM95-2070) - 66,8-70,4 %. Ближайшим родственным вирусом оказался вирус, обнаруженный в спинномозговой жидкости больного менингитом из Франции.
Подводя итоги представленного материала, можно сделать следующие выводы:
1. Рост заболеваемости энтеровирусной инфекцией, а также результаты вирусологического
мониторинга свидетельствуют об интенсивной циркуляции соответствующих вирусов в различных объектах окружающей среды, что представляет серьезную проблему для здравоохранения.
2. Вода различного качества (источники водоснабжения и рекреационные зоны) может рассматриваться, как возможный фактор передачи энтеровирусной инфекции.
3. Присутствие в смывах с инвентаря и оборудования, а также с рук детей и персонала детских дошкольных учреждений энтеровирусов свидетельствует о реальной возможности реализации механизма передачи рассматриваемой инфекции бытовым путем.
4. Одним из основных факторов передачи энтеровирусной инфекции являются овощи и фрукты, реализуемые через сеть розничной торговли.
5. Полученные материалы ставят больше вопросов, чем ответов и, естественно, данная проблема требует дальнейшего изучения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Багдасарян Г.А. Сравнительная выживаемость некоторых энтеровирусов в воде различной степени загрязненности / Г.А. Багдасарян // ЖМЭИ. - 1970. - С. 96.
2. Вспышка энтеровирусной инфекции в Витебске в условиях загрязнения питьевой воды менингита и лихорадками / Т.В. Амвросьева, З.Ф. Богуш, О.Н. Казинец, О.В. Дьяконова и др. // Вопросы вирусологии. — 2004. — № 1. — C. 30-34.
3. Григорьева Л.В. Санитарная бактериология и вирусология водоемов / Л.В. Григорьева. — М.: Медицина, 1975.
4. Зайцева М.С. Энтеровирусные инфекции / М.С. Зайцева, Н.С. Клячко // Труды института эпидемиологии и микробиологии им. Пастера. — 1971. — C. 51.
5. Касымбекова К.Т. Клинико-эпидемиологические особенности энтеровирусного менингита и лихорадки в Кыргызской республике / К.Т. Ка-сымбекова // Актуальные проблемы здоровья населения Сибири: Гигиенические и эпидемиологические аспекты. Матер. V междунар. научн.-практ. конф. с междунар. участием. — Омск, 2004. — Т. 1.
— С. 172—175.
6. Конторович В.Б. Вирусологическое обследование различных вод Московского региона / В.Б. Конторович // Гигиена и санитария. — № 2.
— 2002. — C. 65.
7. Михеев В.Н. Санитарно-эпидемиологический надзор за серозными менингитами энтерови-русной этиологии на территории Новосибирской области в 2004 году / В.Н. Михеев // Актуальные проблемы здоровья населения Сибири: Гигиенические и эпидемиологические аспекты. Матер. V междунар. научн.-практ. конф. с междунар. участием. — Омск, 2004. — Т. 1. — С. 162—164.
8. Применение статистических методов в эпидемиологическом анализе / Е.Д. Савилов, Л.М. Мамонтова, В.А. Астафьев, Л.В. Иванова. — Новосибирск: Наука, 1993. — 136 с.
