CC BY
78
УДК 638.154.2
Ключевые слова: острый, хронический вирусный паралич, пчела медоносная
Key words: acute and chronic viral paralysis, honey bee
Волыхина В. Е.
РАСПРОСТРАНЕНИЕ И ПРОЯВЛЕНИЕ ОСТРОГО И ХРОНИЧЕСКОГО ВИРУСНОГО ПАРАЛИЧА У APIS MELLIFERA L (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
spread and presentation of acute and chronic viral paralysis
of APIS MELLIFERA L (LITERATuRE REVIEW)
РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского» Адрес: 220003, Республика Беларусь, г. Минск, ул. Брикета, 28
S. N. Vyshelessky Institute of Experimental Veterinary Science Address: 220003, the Republic of Belarus, Minsk, Bricketa str., 28
Волыхина Вера Евгеньевна, к. б. н., ст. научн. сотрудник отдела молекулярной биологии
Volykhina Vera E., PhD in Biological Sciences, Senior Scientific Researcher of Molecular Biology Dept.
Аннотация. Статья о возбудителях острого и хронического паралича пчелы медоносной. РНК-вирусы, отличающиеся вирулентностью, геномной организацией, морфологией, сезонной активностью, поражают преимущественно взрослых особей. Распространены в местах обитания Apis mellifera L. Характерен нейротропизм. Продолжительность инкубационного периода зависит от вирусной нагрузки, способа инфицирования, стадии развития насекомого. Массовую гибель пчелиных семей не вызывают, но могут значительно сократить численность рабочих пчел.
Summary. This article is about the causative agents of acute and chronic bee paralysis. RNA-viruses differ in virulence, genomic organization, morphology and seasonal activity and predominantly affect adult honey bees. The viruses are common in habitats of Apis mellifera L. They are characterized by neurotropism. The duration of the incubation period depends on the viral load, the route of infection, the stage of insect development. The viruses do not cause mass death of honey bee colonies but can significantly reduce the number of worker bees.
Введение
В настоящее время известно свыше 18 вирусов пчелы медоносной. Большинство из них - РНК-содержащие изометрические частицы диаметром 17-30 нм, не имеют липидной оболочки, реплицируются в цитоплазме клетки, принадлежат семействам и Iflaviridae, отряд Р1оогпау1га1в8. И хотя вирусные инфекции не считают самыми опасными заболеваниями пчел, но бессимптомность, наличие эктопаразитов-переносчиков, высокая плотность популяции и другие факторы превращают их в серьезную угрозу, а для пчеловодства становятся проблемой с значительными экономическими потерями. Именно с вирусами связывают «коллапс» пчелиных семей. В число наиболее распространенных вирусных заболеваний входят острый и хронический паралич, возбудители известны с 1963 г.
Обзор
Классификация и распространение вируса острого паралича. Вирус острого парали-
ча (acute bee paralysis virus, ABPV) относят к роду Aparavirus (семейство Dicistroviridae), отличающемуся от рода Cripavirus филогенетически и структурой межгенной области (IGR) IRES (internal ribosome entry site). Сходство между ABPV и cricket paralysis virus (род Cripavirus, семейство Dicistroviridae) составляет до 45 % [28].
На европейской территории ABPV распространен в местах обитания пчелы медоносной, уступая лидерство вирусу деформации крыла, изредка - вирусам мешотчатого расплода (Дания) и черных маточников (Словения). Наибольшее количество зараженных пасек выявлено в Австрии (68 %), Венгрии (67 %), Франции (58 %) [7, 10, 37]. В Дании вирус детектирован только на 11 пасеках [27], в Словении - на пасеках с видимыми симптомами паралича и высокой смертностью (40 %) [38], в России - в пяти из семи исследованных регионах [1]. Выявлена кластеризация штаммов вирусов острого паралича по их географическому происхождению: отдельный кластер австрийских и немецких
изолятов, венгерские штаммы формируют свой отличный от других кластер, польские штаммы показывают большое разнообразие, а референтный штамм из Великобритании -относительно слабую генетическую связь с центрально-европейскими штаммами.
ABPV часто ассоциирован с вирусами деформации крыла и черных маточников, микроспоридиями Nosema apis [34, 39]. Конкурирует с кашмирским вирусом за одни и те же «места» в организме хозяина [21].
Всплеск заболеваемости отмечают поздним летом [8].
Классификация и распространение вируса хронического паралича. Вирус хронического паралича (chronic bee paralysis virus, CBPV) не классифицирован, занимает промежуточное положение между семействами вирусов Nodaviridae и Tombusviridae (отряд не определен) [28, 33]. Проявляет слабое сходство с представителями рода Cripavirus: от 5,4 % с вирусом черных маточников до 12,5 % с cricket paralysis virus. Некоторые ученые рассматривают вирус хронического паралича как прототип новой группы (+)ssRNA-вирусов [28].
На европейской территории встречается реже вируса острого паралича: в Австрии и Франции выявлен у почерневших пчел с дезориентацией на 10 % и 28 % обследованных пасек соответственно [10, 37], в Дании и Чехии - на единичных пасеках (4 % и 3 %) [27, 34], в Словении - на пасеках с клиническими проявлениями паралича и высокой смертностью (18,3 % пасек) [38], в России - в четырех из семи исследованных регионах [1]. В Японии и США появляется спорадически (заболеваемость на уровне 5,6 % и менее 1 % соответственно) [14, 26]. Возможна ассоциация с вирусами деформации крыла, острого паралича, мешотчатого расплода и черных маточников [10, 34]. Синергичен с Nosema apis и Nosema ceranae [34].
Среди европейских изолятов отсутствует четкое географическое разделение [33]: кластер А представлен пятью изолятами из Франции и по одному - из Испании и Бельгии, кластер В - центрально-европейскими (большинство польских), кластер D - французским, швейцарским и уругвайским. Толь-
ко в кластере С - изоляты одной страны (Уругвая).
Симптоматика ABPV. Болеют преимущественно взрослые особи. Быстро развивающийся паралич, потеря волосяного покрова, почернение окраски и гибель насекомых в течение суток [14].
О высокой вирулентности вируса острого паралича свидетельствуют исследования Аззами и др. [3]. У взрослых рабочих пчел в зависимости от вирусной нагрузки начальные симптомы заболевания (тремор крыльев, тела) наблюдали в течение 18-48 час. В первые сутки выживали 54,3-82,7 % особей; через двое суток - 6,3-56,7 %; через 72 часа - до 98,3 %. У молодых рабочих пчел симптомы появлялись в течение 18 часов, насекомые погибали через 24-48 час. Личинки не выживали. Тремор замечен только у экспериментально инфицированных пчел [33]. Ученые считают [3], что ABPV не является триггером гуморального и клеточного иммунного ответа. Через сутки после введения 103 вирусных частиц в гемолимфе отсутствовали антимикробные пептиды (дефензин, абаецин, гименоптецин). Меланизированные узелки не образовывались. В то же время у личинок и взрослых особей, зараженных Escherichia coli, отмечен синтез гемоптаеци-на, дефензина и формирование меланизиро-ванных узелков. При смешанной инфекции (E. сoli - ABPV) у личинок на протяжении суток общая антибактериальная активность оставалась очень низкой, у взрослых рабочих пчел - не изменялась на фоне сокращения количества меланизированных узелков.
При экспериментально смешанных инфекциях вирус острого паралича с более высокой скоростью репликации доминирует и вытесняет вирус хронического паралича [8].
Симптоматика СBPV. «Слабость, атипичный тремор, раздвинутые крылья и ножки придавали телу сплюснутую форму, растянутые медовые зобики у большинства парализованных особей, сбивание в группы, выживаемость в течение нескольких суток после появления симптомов», - так описывал хронический вирусный паралич Bailey в 1965 г. [5], проявляющийся, как позднее установлено, в виде синдро-
мов 1 и 2 типа [33]. Тип 1 характеризуется нетипичным дрожанием крыльев, тела, пчелы не способны летать, ползают, собираются в группы, брюшки раздуты, медовые зобики переполнены жидкостью, крылья вывернуты и не полностью раскрыты. На терминальной фазе может оставаться только матка и несколько рабочих пчел. На начальном этапе второго типа, называемом в Великобритании "black robbers", "little blacks", в континентальной Европе - "Schwarzsucht", "mal noir", "maladie noireormal nero", в США - "hairless black" синдром, пчелы «лысые», с блестящей темной или почти черной окраской, расширенными брюшками. Через несколько дней перестают летать, появляется тремор, умирают. В одной пчелиной семье можно наблюдать оба типа.
Видимые признаки появляются на фоне высокой вирусной нагрузки: через 5 суток после инокуляции 109-1010 копий очищенной РНК [15] и на 6 сутки после введения экстракта природно-парализованных пчел в гемолимфу [4]. У маток после торакально введенной вирусной суспензии (4 мкл, ~2*109 копий/особь) первые симптомы также наблюдали на 6 сутки, а через две недели все насекомые погибали. У большинства маток (34 из 39) вирусная нагрузка варьировала с 7,0*108 до 2,3*10" копий/голову. Тремор ножек, вывернутые и расставленные в стороны крылья наблюдали чаще, чем вздутые брюшки, расширенные медовые зобики, заполненную гемолимфой полость тела (после вскрытия) [2].
Вспышку CBPV часто отмечают весной и летом [33].
Некоторые симптомы острого и хронического паралича характерны для других вирусных заболеваний. Паралич первых пар ног вызывает вирус медленного паралича [19]; тремор, быстро развивающийся паралич, потемнение окраски, выпадение волосков c последующей гибелью - израильский вирус острого паралича [18].
Согласно Baltimore Classification of Viruses, ABPV и CBPV относят к IV группе ((+)ssRNA) вирусов [9].
Молекулярная характеристика вируса острого паралича. Геномная РНК состоит
из 9470 нуклеотидов (nt), исключая poly (A) «хвост» у 3'-конца [23]. Аденина (A) -30,3 %, урацила (U) - 30,4 %, гуанина (G) -20,5 %, цитозина (C) - 18,8 % [14]. Есть две неперекрывающиеся открытые рамки считывания (ORF1 и ORF2). ORF1 (605-6325 nt) кодирует неструктурные белки РНК-зависимую РНК-полимеразу, РНК-хеликазу, 3С-протеазу, VPg (viral protein genome linked). ORF2 (6509-9253 nt) кодирует 4 кап-сидных структурных белка VP1-4. У словенских штаммов в ORF1 и ORF2 выявлено два различных участка с нуклеотидной идентичностью 91,2-92,5 % и 96,7-97,2 % соответственно [16]. Некодируемые области представлены 184-nt межгенной областью (IGR), разделяющей две открытые рамки считывания; 605-nt 5'-URT (untranslated region) и 217-nt 3'-URT (без poly (A) «хвоста») [23]. У dicistroviruses два независимых IRESs (internal ribosome entry site): 5'-IRES и IGR-IRES, инициирующие трансляцию неструктурных и структурных белков соответственно. К 5'-концу ковалентно присоединен маленький белок VPg, который отвечает за стабилизацию 5'-конца, участвует в упаковывании РНК в вирионах [14]. Длина белка варьирует слабо, у различных пикорнавиру-сов находится в пределах 20-24 аминокислотных остатков.
Среди вирусов (Drosophila C virus, plautia stali intestine virus, Rhopalosiphum padi virus, Himetobi p virus) с похожей бицистрон-ной организацией генома вирус острого паралича наиболее близок к Drosophila C virus [23]. Идентичность аминокислотного состава структурных белков составляет всего 30-33 % [23].
Молекулярная масса VP1, VP2, VP3 и минорного белка VP4 составляет 35, 33, 24 и 9,4 кДа [23], а по данным [3] - 36, 33, 27 и 7,5 кДа соответственно. Еще обнаружены триптические пептиды [3]. Капсидные белки участвуют в детерминации вирусной специфичности, в упаковывании вирусного генома и его защите от внешних нуклеаз, являются важным фактором клеточного и тканевого тропизма [14].
Замечено, что визуализация вновь синтезированных структурных вирусных бел-
ков в гемолимфе взрослых пчел зависит от вирусной нагрузки и по времени совпадает с появлением первых симптомов заболевания [3]. VP2, VP3, белок-предшественник VP0 становятся видимыми через 18-24 час. после инокуляции 103-104 вирусных частиц и в отдельных образцах - через 12 час. после введения 104 вирусных частиц. Образование «зрелых» VP1 и VP4 из VP0 отмечают только через сутки. В гемолимфе личинок VP0, VP2, VP3 идентифицируют через 9 часов.
Вирусные частицы изометрической формы, диаметром около 30 нм [23], расположены в цитоплазме или в везикулах овальной формы, отсутствуют в гранулах [22].
Молекулярная характеристика вируса хронического паралича. Полицистронная организация генома отличает вирионы хронического паралича от tombusviruses с моно-цистронной и nodaviruses c бицистронной РНК [28]. Геном состоит из 9500 нуклеоти-дов (nt). Одноцепочечная РНК разделена на два главных фрагмента РНК1 (3674 nt), РНК2 (2305 nt), отчетливо видные в агарозном геле, и три минорных фрагмента 3 a, 3b, 3 c (по 1100 nt) [15, 28]. По другим данным [30], РНК1 и РНК2 состоят из 4200 и 2800 nt. Такая разница, по мнению исследователей, может быть обусловлена использованием более специфичного к молекулярной массе маркера и разными условиями денатурации. Несколько открытых рамок считывания (ORF) [33]. Как и у представителей семейства Nodaviridae, poly (A) «хвост» на 3'-кон-це отсутствует, а 5'-конец кэпирован [28, 33]. Кэп и рoly (A) последовательность обеспечивают стабильность геномной РНК.
Вирусные частицы чаще эллипсоидной формы модальной длиной 30-65 нм и шириной около 20 нм, но могут быть в виде колец, восьмерок, разветвленных палочек длиной до 640 нм [31, 33]. Их анизометрич-ность скорее исключение среди вирусов Apis mellifera L. В цитоплазме частицы находятся свободно или в составе включений [29]. Коэффициент седиментации варьирует от 80S до 130S [31, 33].
Кроме единственного капсидного белка с молекулярной массой 23,5 кДа, есть еще
четыре полипептида с молекулярной массой около 75, 50, 30 и 20 кДа [31, 33].
Характерно наличие сателлитного вируса CPVA (chronic paralysis virus associate), позднее переименованного в CBPSV (chronic bee paralysis satellite virus) [30, 33]. Изометрич-ные вирусные частицы диаметром 17 нм. Одноцепочечная геномная РНК состоит из трех фрагментов A, B, C (по 1100 nt), нуклео-тидные последовательности на 50 % гомологичны РНК2 вируса хронического паралича. Единственный капсидный белок молекулярной массой около 15 кДа [30].
Локализация вирусов. Для ABPV и CBPV присущ нейротропизм. Высоким содержанием вирусных частиц голова пчелы отличается от груди и брюшка [5]. У взрослых пчел вирус острого паралича накапливается в головном мозге, преимущественно в грибовидных телах, зрительных долях, а также в подпищеводных ганглиях, гипофаринге-альных железах [6]. С локализацией ABPV в жировом теле связывают отсутствие клинических проявлений у внешне здоровых пчел [7, 22], а измененное поведение насекомых, инфицированных летальной дозой ABPV, — с плотными базофильными скоплениями в средней кишке [22].
CBPV обнаружен в латеральной протоце-ребральной лопасти, в вентральном нервном тяже, в зрительных и обонятельных долях, в подпищеводных ганглиях [29]. В грибовидных телах клетки Кеньона отличались от дендритных зон чашечек и ß-долей более интенсивным флуоресцентным сигналом, что обусловлено, по мнению ученых, разной вирусной нагрузкой. В грудных мышцах и жировом теле вирусные частицы не выявлены [25].
Специфической локализацией вирусов острого и хронического паралича объясняют неспособность к полету, появление тремора, атаксии, паралича [29].
Трансмиссия вирусов. В естественных условиях близкого контакта здоровых пчел с больными особями при высокой плотности насекомых достаточно для быстрого распространения вирусов, а удаление волосков с поверхности кутикулы облегчает проникновение [2]. Трофоллаксис между здоровыми
и больными особями способствует вирусной диссеминации и развитию открытой формы инфекции [2]. У природно-парализованных пчел вирус хронического паралича количественно преобладает и способен подавлять репликацию вируса острого паралича [4, 5].
При контактном инфицировании видимые признаки хронического паралича появлялись через 7-8 сут., насекомые погибали на 8-9 сут. после заражения [11]. Наибольшая геномная нагрузка CBPV у взрослых рабочих пчел отмечена в голове (4,9х109 копий) и гемолимфе (2х1010 копий/мкл). В алиментарном канале, гипофарингеаль-ных и мандибулярных железах составляет 2,5х105-2,1х106 копий. Из-за частых контактов именно сторожевые пчелы становились главной мишенью вируса. Геномная нагрузка у них достигала 1,9х1013 копий по сравнению с трутнями, пчелами-сборщицами и находившимися в улье рабочими пчелами (до 3,4х106 копий). Геномная нагрузка в яйцах, личинках, куколках относительно низкая (2х103 копий/особь).
При фекальной трансмиссии продолжительность инкубационного периода зависит от способа инфицирования, а выживаемость - от величины титра вирусных частиц [32]. Инокуляция неочищенными фекалиями природно-парализованных пчел (хронический паралич), экспериментально зараженными фекалиями и фекалиями инфицированных в лабораторных условиях насекомых вызывала тремор на 5 сутки; смертность на 8 сутки составляла - 100 %, 70 % и 53 % соответственно. Введение незара-женных неочищенных фекалий (контрольная группа) не сопровождалось тремором, на 8 сутки погибало 20 % особей. У пчел, содержавшихся в CBPV-садках с парализованными особями в течение 5 суток, дрожь появлялась на 10 сутки, менее половины насекомых выживало на 15-е сутки. Риск вирусной контаминации сохранялся и после удаления из садков мертвых парализованных пчел, экскрементов.
На пищевую трансмиссию указывает наличие вирусов острого и хронического паралича в слюнных, гипофарингеальных, мандибулярных железах, пищеварительном
канале, маточном молочке. Распространение вирусов через загрязненный корм, как и через секрет слюнных желез, не всегда приводит к клиническим проявлениям [6, 13, 14].
Аэрозольной вирусной трансмиссии способствуют специальный терморегулиру-ющий механизм пчел и постоянный воздухообмен, достигающийся естественной приточно-вытяжной вентиляцией. На 6 сутки после распыления вирусной суспензии погибало только четверть насекомых. Наибольшее количество парализованных и мертвых особей замечено после распыления экстрактами CBPV-парализованных пчел, хранившимися неделю или 6 мес. при -20 °С. Повышение температуры до +4 °С снижало эффективность экстрактов [4, 5].
О вертикальной венерической трансмиссии свидетельствует детектирование вирусов на всех стадиях развития, на горизонтальную венерическую трансмиссию указывают инфицированный семяприемник после спаривания с ABPV/CBPV-трутнями, а также трутни, зараженные матками-носителями [13].
Ведущую роль в диссеминации и активации вирусных инфекций между/внутри пчелиных семей отводят клещам Varroa destructor (векторная трансмиссия) [12]. Клещи как биологические переносчики и вызванная ими иммуносупрессия могут стать пусковыми факторами перехода бессимптомной формы инфекции в летальную форму. Мартин и Шредер полагают, что даже при наличии Varroa destructor вирус острого паралича не вызывает «коллапс» пчелиных семей [36]. Также не установлена связь между вспышкой хронического паралича и клещами Varroa destructor [33].
Справляться с клещевым паразитизмом помогают пчелам избирательное гигиеническое поведение и Varroa-чувствительная гигиена [35]. Именно различия в поведении лежат в основе Varroa-толерантности. «Резистентные» к Varroa destructor пчелиные семьи отличаются более интенсивным гру-мингом (до 4 раз), меньшей численностью клещей (до 15 раз) и большим количеством поврежденных клещей (до 9 раз) [24]. От потомства, пораженного «вирулентными кле-
щами» (вызывают видимые признаки), пчелы избавляются чаще, чем от пораженного «менее вирулентными клещами» или незара-женного потомства [35]. Различия углеводородного профиля кутикулы также влияет на взаимоотношение между пчелами, пчелами и клещами, идентификацию больных особей [20]. Большее предпочтение клещи отдают пчелам-кормилицам, отличающимся от пчел-сборщиц меньшим содержанием в кутикуле ^)-8-гептадецена [20].
Дополнительным вектором и «резервуаром» CBPV могут стать рыжие лесные муравьи Formica ruta и черные муравьи-древоточцы Camponotus vagus. Высокой геномной нагрузкой у Formica ruta и Camponotus vagus обусловлено, по мнению [12], длительное существование вируса в окружающем пространстве и отчасти его возвратность на лесных пасеках в летний период.
Еще одним биологическим переносчиком вирусов считают клещей рода Tropilaelaps [17]. Влияние эктопаразитов на вирулентность инфекционного агента и их роль в «коллапсе» пчелиных колоний пока не известны.
Заключение
Таким образом, несмотря на имеющиеся различия, отсутствие клинической симптоматики, выживаемость и репродуктивность хозяина позволяет вирусам острого и хронического паралича продолжительное время существовать в популяции. Ключевым моментом вирусной стратегии является наличие фактора или комплекса факторов, инициирующих открытую форму инфекции.
Список литературы
1. Калашников, А. Е. Распространение РНК-содержащих вирусов у медоносной пчелы Apis mellifera L. на территории России [Текст] / А. Е. Калашников, И. Г. Удина // Farm animals. - 2012. -N 1. - С. 72-76.
2. Amiri, E. Chronic bee paralysis virus in honeybee queens evaluating susceptibility and infection routes [Текст] / E. Amiri, M. Meixner, R. Büchler [et al.] // Viruses. - 2014. - V. 6. - N 3. - P. 1188-1201.
3. Azzami, K. Infection of honey bees with acute bee paralysis virus does not trigger humoral or cellular immune responses [Текст] / K. Azzami, W. Ritter, J. Tautz [et al] // Arch. Virol. - 2012. - V. 157. - N 4. - P. 689-702.
4. Bailey, L. Two viruses from adult honey bees (Apis mellifera L.) [Текст] / L. Bailey, A. J. Gibbs, R. D. Wood // Virology. - 1963. - V. 21. - P. 390-395.
5. Bailey, L. Paralysis or the Honey Bee, Apis mellifera Linnaeus [Текст] / L. Bailey // Journal of Invertebrate Pathology. - 1965. - V. 7. - P. 132-140.
6. Bailey, L. The Multiplication Regions and Interaction of Acute and Chronic Bee-paralysis Viruses in Adult Honey Bees [Текст] / L. Bailey, R. G. Milne // J. Gen. Virol. - 1969. - V. 4. - P. 9-14.
7. Bakonyi, T. Detection of acute bee paralysis virus by RT-PCR in honey bee and Varroa destructor field samples: rapid screening of representative Hungarian apiaries [Текст] / T. Bakonyi, R. Farkas, A. Szendroi [et al.] // Apidologie. - 2002. - V. 33. - P. 63-74.
8. Ball, B. V. The prevalence of pathogens in honey bee (Apis mellifera) colonies infested with the parasitic mite Varroa jacobsoni [Текст] / B. V. Ball, M. F. Allen // Ann. Appl. Biol. - 1988. - V. 113. - P. 237-244.
9. Baltimore Classification of Viruses (Website) [Электронный ресурс] : Molecular Biology Web Book. - Режим доступа: http://web-books.com. - Загл. с экрана.
10. Berényi, O. Occurrence of six honeybee viruses in diseased Austrian apiaries [Текст] / O. Berényi, T. Bakonyi, I. Derakhshifar [et al.] // Appl. Environ. Microbiol. - 2006. - V. 72. - N 4. - P. 2414-2420.
11. Blanchard, P. Evoluation of real-time two-step RT-PCP assay for quantitation of Chronic bee paralysis virus (CBVP) genome in experimentally-infected bee tissues and in life stages of a symptomatic colony [Текст] / P. Blanchard, M. Ribiere, O. Celle [et al.] // J. Virol. Methods. - 2007. - V. 141. - P. 7-13.
12. Celle, O. Detection of Chronic bee paralysis virus (CBPV) genome and its replicative RNA form in various hosts and possible ways of spread [Текст] / O. Celle, P. Blanchard, V. Olivier [et al.] // Virus Research. -2008. - V. 133. - Issue 2. - P. 280-284.
13. Chen, Y. P. Prevalence and Transmission of Honeybee Viruses [Текст] / Y. P. Chen, J. S. Pettis, A. Collins [et al.] // Appl. Environ. Microbiol. - 2006. -V. 72. - N 1. - P. 606-611.
14. Chen, Y. P. Honey Bee Viruses [Текст] / Y. P. Chen, R. Siede // Advances in Virus Research. -2007. - P. 33-80.
15. Chevin, A. Experimental infection of the honeybee (Apis mellifera L.) with the chronic bee paralysis virus (CBPV): infectivity of naked CBPV RNAs [Текст] / A. Chevin, F. Schurr, P. Blanchard [et al.] // Virus Res. -2012. - V. 167. - N 2. - P. 173-180.
16. Ciglenecki, U. J. Genetic diversity of acute bee paralysis virus in Slovenian Honeybee samples [Текст] / U. J. Ciglenecki, I. Toplak // Acta Veterinaria Hunga-rica. - 2013. - V. 61. - N 2. - P. 244-256.
17. Dainat, B. The ectoparasitic mite Tropilaelaps mercedesae (Acari, Laelapidae) as a vector of honeybee viruses [Текст] / B. Dainat, T. Ken, H. Berthoud, P. Neumann // Insect. Soc. - 2009. - V. 56. - P. 40-43.
18. De Miranda, J. The Acute bee paralysis virus-Kashmir bee-Israeli acute paralysis virus complex
[Текст] / J. De Miranda, G. Cordoni, G. Burde // J. of Invertebrate Pathology. - 2010. - V. 103. - Suppl. S. 30-47.
19. De Miranda, J. Genetic characterization of slow bee paralysis virus of the honeybee (Apis melífera L.) [Текст] / J. De Miranda, B. Dainat, B. Locke [et al.] // J. Gen. Virol. - 2010. - V. 91. - N 10. - P. 2524-2530.
20. Del Piccolo, F. Selection of Apis mellifera works by the parasitic mite Varroa destructor using host cuticular hydrocarbons [Текст] / F. Del Piccolo, F. Nazzi, G. Della Vedova [et al.] // Parasitology. - 2010. -V. 137. - N 6. - P. 967-973.
21. Evans, J. D. Genetic Evidence for Coinfection of Honey Bees by Acute Bee Paralysis and Kashmir Bee Viruses [Текст] / J. D. Evans // J. of Invertebrate Pathology. - 2001. - V. 78. - P. 189-193.
22. Furgala, B. Acute bee paralysis virus, a cytoplasmic insect virus [Текст] / B. Furgala, P. E. Lee // Virology. - 1966. - V. 29. - N 2. - P. 346-348.
23. Govan, V. A. Analysis of the complete genome sequence of acute bee paralysis virus shows that it belongs to the novel group of insect-infecting RNA viruses [Текст] / V. A. Govan, N. Leat, M. Allsopp [et al.] // Virology. - 2000. - V. 277. - N 2. - P. 457-463.
24. Guzman-Novoa, E. Genotypic variability and relationships between mite infestation levels, mite damage, grooming intensity, and removal of Varroa destructor mites in selected strains of worker honey bees (Apis mellifera L.) [Текст] / E. Guzman-Novoa, B. Emsen, P. Unger [et al.] // J. Invertebr. Pathol. -2012. - V. 110. - N 3. - P. 314-320.
25. Lee, P. E. Chronic bee paralysis virus in the ganglia of the adult honey bee [Текст] / P. E. Lee, B. Furgala // J. of Invertebrate Pathology. - 1965. -V. 7. - N 2. - P. 170-174.
26. Morimoto, T. Molecular identification of chronic bee paralysis virus infection in Apis mellifera colonies in Japan [Текст] / T. Morimoto, Y. Kojima, M. Yoshiyama [et al.] // Viruses. - 2012. - V. 4. - N 7. - P. 1093-1103.
27. Nielsen, S. L. Incidence of acute bee paralysis virus, black queen cell virus, chronic bee paralysis virus, deformed wing virus, Kashmir bee virus and sacbrood virus in honey bees (Apis mellifera) in Denmark [Текст] / S. L. Nielsen, M. Nicolaisen, P. Kryger // Apidologie. -2008. - V. 39. - Issue 3. - P. 310-314.
28. Olivier, V. Molecular characterisation and phylogenetic analysis of Chronic bee paralysis virus, a honey bee virus [Текст] / V. Olivier, P. Blanchard, S. Chaouch [et al.] // Virus Res. - 2008a. - V. 132. -N 1-2. - P. 59-68.
29. Ol^rer, V. In situ hybridization assays for localization of the chronic bee paralysis virus in the
honey bee (Apis mellifera) brain [Текст] / V. Olivier, I. Massou, O. Celle [et al.] // J. of Virol. Methods. -2008. - V. 153. - P. 232-237.
30. Overton, H. A. Relationships between the RNA components of chronic bee-paralysis virus and those of chronic bee-paralysis virus associate [Текст] / H. A. Overton, K. W. Buck, L. Bailey [et al.] // J. Gen. Virol. - 1982. - V. 63. - P. 171-179.
31. Ribière, M. Detection of chronic honey bee (Apis mellifera L.) paralysis virus infection: application to a field survey [Текст] / M. Ribière, J. Faucon, M. Pépin // Apidologie. - 2000. - V. 31. - P. 567-577.
32. Ribière, M. Spread of infections Chronic bee paralysis virus by honeybee (Apis mellifera L.) feces [Текст] / M. Ribière, P. Lallemand, A. I. Iscache [et al.] // Appl. Environ. Microbiol. - 2007. - V. 73. - N 23. -P. 7711-7716.
33. Ribière, M. Chronic bee paralysis: A disease and a virus like no other? [Текст] / M. Ribière, V. Olivier, P. Blanchard // J. of Inverteb. Pathology. - 2010. -V. 103. - Suppl. 1. - P. 120-131.
34. Ryba, S. Prevalence of honeybee viruses in the Czech Republic and coinfections with other honey bee diseases [Текст] / S. Ryba, D. Titera, I. Schodelbauerova-Traxmandlova [et al.] // Biologia. - 2012. - V. 67. -N 3. - P. 590-595.
35. Schöning, C. Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee, Apis mellifera [Текст] / C. Schöning, S. Gisder, S. Geiselhardt [et al.] // J. Exp. Biol. - 2012. - V 215. - Pt. 2. -P. 264-271.
36. Schroeder, D. C. Deformed wing virus. The main suspect in unexplained honeybee deaths worldwide [Текст] / D. C. Schroeder, S. J. Martin // Virulence. -2012. - V. 3. - N 7. - P. 589-591.
37. Tentcheva, D. Prevalence and seasonal variations of six bee viruses in Apis mellifera L. and Varroa destructor mite populations in France [Текст] / D. Tentcheva, L. Gauthier, N. Zappulla [et al.] // Appl. Environ. Microbiol. - 2004. - V. 70. - N 12. - P. 71857191.
38. Toplak, I. Detection of six honeybee viruses in clinically affected colonies of carniolan gray bee (Apis mellifera C) [Текст] / I. Toplak, D. Rihtaric, J. U. Ciglenecki [et al.] // Slov. Vet. Res. - 2012. -V. 49. - N 2. - P. 89-96.
39. Topley, E. Detection of three honeybee viruses simultaneously by a single Multiplex Reverse Transcriptase PCR [Текст] / E. Topley, S. Davison, N. Leat [et al.] // African Journal of Biotechnology. -2005. - V. 4 - N 7. - P. 763-767.
CD
Форум для ветеринарных специалистов: www.ivb.forum24.ru/70-18-0
