УДК 619:616-001.4:615
РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ ОРГАНИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Кулешов С.М., - к. вет. н.
Кулешов Р. С., - аспирант
Приморская государственная сельскохозяйственная академия
В работе приведены результаты, свидетельствующие о ранозаживляющем действии препаратов органического происхождения. В исследованиях использовались гумат натрия, пантолизат северного и пятнистого оленя, солодка уральская и бархат амурский.
Ключевые слова: РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ
АКТИВНЫЕ ПРЕПАРАТЫ ОРГАНИЧЕСКОЕ ПРОИСХОЖДЕНИЕ
Для лечения ран разработаны и разрабатываются все новые препараты различного происхождения, и процесс этого поиска по нашему мнению будет происходить еще достаточно долго.
Исследования по действию изучаемых нами препаратов органического происхождения на регенерационные процессы ранее не проводились и имеют важное практическое значение, так как имеют природное происхождение и их действие на организм наиболее физиологичное, чем синтетические препараты.
В практике они используются по различному назначению: так, гумат натрия, содержащий соли гуминовых кислот, применяют для повышения урожайности растений, прироста живой массы животных и птиц, как адаптоген при неблагоприятных условиях внешней среды и для лечения ран [6]. Под названием «Гумивит» его используют для профилактики и лечения кишечных заболеваний, снятия интоксикаций и при отравлениях у животных и человека.
Другие препараты, содержащие гуминовые кислоты: торфот,
гумизоль, пеллоидистилят используются в качестве биогенных стимуляторов при различных патологиях опорно-двигательного аппарата и http://ej.kubagro.ru/2007/02/pdf/16.pdf
нарушении обмена веществ, понижении резистентности организма. За рубежом имеются аналогичные разработки под торговым названием «Санфидор» (Япония), «Калюмин» (Германия) и др. В России в ДВО РАН ТИБОХ имеются разработки по использованию гуматов в сочетании с элеутерококком и остролистом: «Биоэффект ДВ- 1» и «Биоэффект ДВ -2», которые проходят клинические испытания в животноводстве, птицеводстве и медицине.
Солодка - растение, произрастающее на Урале, в Забайкалье и некоторых степных регионах. В своем составе содержит гликозиды, наиболее активным из которых является глицериновая кислота, близкая по химическому составу к стероидным гормонам и обладающая противовоспалительным действием. В ветеринарии и медицине она используется в качестве отхаркивающего, смягчительного средства. Изучается ее действие при кожных заболеваниях. Солодку содержат многие лекарственные сборы, используемые при различных заболеваниях.
Бархат амурский, или пробковое дерево, произрастающий на Дальнем Востоке, хорошо изучен в китайской и тибетской медицине. Его применяют при желудочно-кишечных, респираторных, кожных заболеваниях, лечении печени, новообразованиях и других патологиях организма. Используются все компоненты растения: луб, корни, листья, ягода. Растение содержит биологически активные вещества: берберин, кумарин, фенолкарбоновые кислоты, флавониды, дубильные вещества, витамины и другие, полезные для организма, включения.
Панты северного и пятнистого оленя - это ценное лекарственное сырье, имеющее неограниченный спрос на внешнем и внутреннем рынке. Панты представляют собой нежную растущую ткань с небольшой степенью окостенения. Пористая внутренняя ткань заполнена кровью. В народной медицине Китая и Юго-Восточной Азии фармакологическая активность пантов известна более двух тысяч лет. Панты применяют в
чистом виде или в сочетании с другими лечебными средствами. Используются при лечении ревматизма, малокровия, переутомления, после перенесенных инфекционных заболеваний, при сердечнососудистой недостаточности, для стимуляции половых функций, ускорения заживления язв и профилактики других заболеваний. В России уже создан препарат из окостеневших рогов под названием «Цыгапан», у которого также очень широкий спектр, применяемый при различных заболеваниях, в том числе и для активизации регенеративных процессов в костной и кожно-мышечной тканях. На Росийских фармзаводах из пантов готовят две лекарственные формы: «Пантокрин» и «Ранторин». Проведенный обзор по действию препаратов на организм, позволил нам провести исследования и в области их ранозаживляющих свойств.
Материал и методы
Экспериментальную часть работы проводили на клинически здоровых животных, подобранных по принципу аналогов с учётом возраста, пола и живой массы. Все животные находились в равноценных условиях кормления и содержания.
Приготовление лекарственных форм гистолизатов из пантов северного и пятнистого оленей для воздействия ими на животных производили по методике запатентованной В.Г. Ярцевым (1990).
Мы в своей работе используем: пантолизат северного и пятнистого оленя, гумат натрия, получаемый из торфа; «Биоэффект ДВ-1»; бархат амурский; солодку уральскую.
В опытах подопытным мышам наносили кожные раны размером 10^10 мм; кроликам 10*30 мм в области наружной поверхности ушной раковины и одновременно такого же размера в области подвздоха. На этих животных отрабатывали способ, кратность, концентрацию, дозу
применения изучаемых препаратов и при получении положительных результатов их апробировали в производственных условиях на свиньях.
Свиньям раны наносили в области наружной поверхности бедра трепаном размером в диаметре 1,5 см и глубиной 2,0 см отмечали клинику и сроки заживления по моменту отпадения струпа и наличия под ним покрытого эпителием дефекта.
По окончанию опыта раневые рубцы биопсировали и проводили гистоморфологические исследования по общепринятым методикам. Гистохимически определяли гликоген по Шабадаш, наличие и формирование нервных волокон по Кохаль-Фаворскому.
Результаты исследований
При применении для лечения изучаемых препаратов отмечалось, что воспалительная реакция была менее выраженной, чем у животных контрольной группы, заполнение раневого дефекта происходило быстрее. Формирование струпа и его отпадение происходило без образования вторичного струпа, и дефект имел полностью эпителизированую поверхность.
Полученные данные по срокам заживления экспериментальных ран у свиней (таблицы 1-4) свидетельствуют, что применение для лечения экспериментальных ран у животных препаратов: животного,
растительного и биоорганического происхождения: гумата натрия, гумата натрия с
Таблица 1- Сроки заживления экспериментальных ран у свиней при
лечении гуматом натрия
Г руппа (п = 5) Форма и способ применения Срок заживления (М±т, суток); Р Разница сроков заживления к контролю (±, суток.)
1 с кормом 20 мг/кг 17,2±0,82 *** -6,6
2 аэрозоль 0,1% раствор 19,0±0,34 *** -4,8
3 инъекции 0,1% раствор 20,6±0,55 *** -3.2
4 инъекции 0,025% раствор 20,8±0,96 *** -3,0
5 орошение 0,035% раствор 20,4±0,27 *** -3,8
6 мазь 0,035% 21,0±0,73 *** -2,8
7 контроль 23,8±0,92 - -
Примечание: Уровень достоверности (Р) значений выведен при сравнении с контролем, без лечения: ***Р<0,001; п - количество животных в группе. Обработку животных препаратом в 1, 3, 4, 5, 6 группах производили через 48 часов; во 2-й группе через 72 часа. ***-( Р< 0,001)
Таблица 2 - Сроки заживления ран свиней при лечении «Биоэффектом ДВ-
1» на основе геля
Группа Форма и способ применения Сроки заживления, (М ± т, суток) Разница сроков заживления к контролю, ±сутки Ускорение заживления ран по отношению к контролю, % Р<
1 «Биоэффект ДВ-1» 0,5% в форме геля, наружно 14,6 ± 0,34 - 5,2 26,3 ***
2 «Биоэффект ДВ-1» 1,5% в форме геля, наружно 15,1 ± 0,45 -4,7 23,8 ***
3 Контроль 19,8 ± 0,63 - - -
Примечание: Уровень достоверности (Р) значений выведен при сравнении с контролем, без лечения: ***Р<0,001; п - количество
Таблица 3- Влияние гистолизатов из пантов северного и пятнистого оленей на сроки заживления экспериментальных ран у свиней при наружном и пероральном применении
Группы животных (п=6) Способ приме- нения Исследуемые препараты Сроки заживления ран, сутки (М ± т) Разница сроков заживления к контролю, ± суток Ускорение заживления ран по отношению к контролю, %
1. контроль без лечения - 19,8 ± 0,60 - -
2. опытная наружно гистолизат пантов северного оленя на гелевой основе 13,5 ± 0,50*** - 6,3 31,8
3. опытная перо- рально гистолизат пантов пятнистого оленя 16,0 ± 0,36*** - 3,8 19,2
Примечание: Перорально вводили из расчёта 10 мл на животное, ежедневно. Полученные результаты обработаны статистически с использованием ^критерия Стьюдента. Уровень достоверности (Р) значений выведен при сравнении с контролем, без лечения: ***Р<0,001; п - количество животных в группе.
Таблица 4 - Влияние препаратов бархата амурского и солодки уральской
на заживление ран у свиней
Группы животных Способ применения Сроки заживления ( М ± м, суток) Разница сроков заживлен. к контролю (± суток) Ускорение заживления ран по отношению к контролю (%) Р<
Контроль Без лечения 19,8 ± 0,63 - -
1 опытная Гель 2% солодки уральской, наружно 12,1 ± 0,44 - 7,7 39,0 ***
2 опытная Гель бархата амурского, наружно 15,1 ± 0,42 - 4,7 28,7 ***
Примечание: Уровень достоверности (Р) значений выведен при сравнении с контролем, без лечения: ***Р<0,001; п - количество животных в группе
элеутерококком, солодки уральской, бархата амурского, гистолизатов северного и пятнистого оленя способствует сокращению срока
заживления от 19 до 39 процентов.
Особенно эффективно ранозаживляющее действие изучаемых препаратов проявлялось при наружном нанесении на раневую поверхность с метилцеллюлозной основой. Из ранозаживляющего действия препаратов наиболее активным действием обладают препараты, полученные из солодки уральской и пантов северного оленя.
Изучение морфоструктуры рубцующейся ткани показало, что использование препаратов вызывает в ней повышение количества фибробластов, венул, артериол, жировых клеток. Коллагеновые волокна расположены более компактно и занимают большую часть раневого дефекта. Эпидермис сформирован в большей степени, чем у животных, у которых экспериментальные раны не подвергались лечению изучаемыми препаратами.
Гликоген выявляется в околососудистых участках регенерата и вокруг формирования волосяных луковиц. Г ликогена в интактной дерме не обнаружено.
Аргирофильные волокна в грануляциях, определяются уже на 3 сутки, а на 16 сутки они имеют уже вид развитой системы заполняющей уже всю структуру дермы. Наиболее активно эти процессы выявлены в гистопрепаратах от подопытных животных.
Лечение укушенных ран свиней показало, что применение препаратов на гелевой основе позволяет в более быстрые сроки на 3-4 и более дня стимулировать их заживление по сравнению с лечением (обработка синтомициновой эмульсией) применяемым в хозяйстве.
Проведенные исследования позволили произвести патентование по препаратам из гуминовых кислот и гистолизатам [3-4].
ВЫВОДЫ
1. Препараты органического происхождения содержащие: гуминовые кислоты, пантолизаты северного и пятнистого оленя, бархат амурский; солодка уральская обладают ранозаживляющими свойствами.
2. Использование для лечения препаратов органического происхождения способствует ускорению заживления ран на 19-39 процентов.
3. Активизация процессов регенерации происходит за счет более активного появления клеточных элементов в зоне рубцующейся ткани и заполнения дефекта коллагеновыми волокнами.
4. Гистохимическое исследование показало, что в опытных группах в рубцующейся ткани имеется большее количество гликогена, это свидетельствует об активизации обменных процессов.
5. Нервные волокна быстрее формируются в рубцующейся ткани у животных с применением биостимуляторов.
Литература
1. Ярцев В.Г. Способ получения «Пантолизата»: 961112592 РФ/В.Г. Ярцев - № 2112396; Заявл. 21.06.96; Опубл. 10.06.98.
2. Кулешов С. М. Применение гумата натрия для лечения экспериментальных и случайных ран у животных: дис.... канд. вет. наук. /С.М.Кулешов.- М., 1986.-136 с.
3. Патент. 2235548 Российская Федерация, МПК7 А 61 К 35/10 35/78 31/715 А 61 Р 41/00 Ранозаживляющее средство /Любченко Е.Н., Анисимов М.М., Кулешов С.М.; заявитель и патентообладатель ТИБОХ Дальневосточного отделения РАН-№2003113570; заявл. 08.05. 03; опубл.10.09.2004, Бюл.№25.-5 с.
4. Патент. 2248802 Российская Федерация, МПК 7 А 61 К 35/32 Способ изготовления геля из пантов и отходов их фармацевтической переработки / Кулешов Р.С., Ярцев В.Г.,
Кулешов С.М.: заявитель и патентообладатель Дальневосточный государственный аграрный университет.-№ 2003113507/15; заявл. 07.05.2003;опубл. 20.11.2004, Бюл. № 9