CC BY
30
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2020
Лебедева М.А.12, Медведева Ю.С.2, Золотов Н.Н.3, Баранов М.В.1, Карганов М.Ю.12
РАННИЕ ЭФФЕКТЫ ДЕЙСТВИЯ МОДЕЛИРОВАННОЙ МИКРОГРАВИТАЦИИ НА РАЗВИТИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИНФАРКТА МИОКАРДА
Щаучно-исследовательский институт космической медицины Федерального государственного бюджетного учреждения «Федеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий» Федерального медико-биологического агентства, 115682, г. Москва;
2Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии»,
125315, г. Москва;
3Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова»,
125315, г. Москва
Введение. Несмотря на многочисленные исследования, механизмы негативного влияния факторов космического полета на основные функции организма остаются до конца не раскрытыми. Цель настоящей работы - изучение срочных эффектов моделированной микрогравитации на развитие экспериментального ишемического повреждения миокарда крыс. Материал и методы. Работа выполнена на самцах крыс линии Вистар, возраст 3-4 мес. Животные были разделены на 4 группы: контроль, n = 38; группа крыс, подвергшаяся антиор-тостатическому вывешиванию в течение 2 нед (АОВ, n = 35); группа крыс с изопротеренол-индуцированным очагово-диффузным инфарктом миокарда (ИМ) (Iso, n = 45); группа крыс с экспериментальным ИМ после двухнедельного АОВ (АОВ+Iso, n = 43). Вывешивание животных в антиортостатическом положении осуществляли стандартным методом в течение 2 нед. Группе АОВ+Iso после моделирования микрогравитации в качестве дополнительной фармакологической нагрузки на миокард проводили стимуляцию в-адренорецепторов с помощью введения изопротеренола в дозе 80 мг/кг по схеме две инъекции с перерывом в 24 ч. Оценивали интегральные показатели состояния организма животных и изменения электрической и функциональной активности сердца.
Результаты и обсуждение. Характерные изменения в ранние сроки после последовательного действия двух факторов состояли в значительной потере массы тела, изменении электрической проводимости миокарда, проявляющимся в увеличении продолжительности интервала QТс, возникновении большего процента аритмий и развитии воспалительной реакции. Моделирование микрогравитации с последующим введением изопротеренола приводило к сердечной недостаточности вплоть до гибели животных. Индекс массы сердца был значительно увеличен в группах с введением в-адреномиметика. Обнаружено повышение уровня сывороточного корти-костерона в опытных группах, наиболее выраженное при действии изопротеренола отдельно и в сочетании с антиортостатическим вывешиванием. В субфракционном составе сыворотки крови наблюдали изменения (увеличение доли мелких и крупных частиц), вызванные действием двух исследованных факторов - моделирования микрогравитации и введения изопротеренола. Исходя из результатов, полученных при исследовании срочных реакций организма на экстремальные факторы, можно сделать следующие выводы:
1. Антиортостатическое вывешивание приводит к снижению массы тела, введение изопротеренола крысам после АОВ вызывает более выраженную потерю массы тела.
2. Моделирование микрогравитации с последующим введением изопротеренола приводит к более выраженным нарушениям электрической проводимости миокарда по сравнению с другими группами и развитию сердечной недостаточности вплоть до гибели животных.
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
3. Увеличение индекса сердца может свидетельствовать о развитии гипертрофии миокарда в группах с введением изопротеренола.
4. На клеточном и молекулярном уровнях действие изопротеренола после антиортостатиче-ского вывешивания приводит к значимым сдвигам гомеостаза системы крови крыс.
Ключевые слова: микрогравитация; антиортостатическое вывешивание; экспериментальный инфаркт миокарда; изопротеренол; лазерная корреляционная спектроскопия; кортикостерон.
Для цитирования: Лебедева М.А., Медведева Ю.С., Золотов Н.Н., Баранов М.В., Карганов М.Ю. Ранние эффекты действия моделированной микрогравитации на развитие экспериментального инфаркта миокарда. Медицина экстремальных ситуаций. 2020; 22(1): 91-103.
Для корреспонденции: Лебедева Марина Андреевна, кандидат биол. наук, ведущий научный сотрудник ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», 125315, г. Москва. E-mail: ma_lebedeva@mail.ru
Lebedeva M.A.12, Medvedeva Yu.S.2, Zolotov N.N.3, Baranov M.V.1, Karganov M.Yu.12
THE EARLY EFFECTS OF SIMULATED MICROGRAVITY ON THE DEVELOPMENT OF EXPERIMENTAL MYOCARDIAL INFARCTION
Research institute for space medicine, Federal research clinical center of specialized types of medical care and medical technologies, Federal Biomedical Agency of Russia, 115682, Moscow, Russian Federation; institute of General Pathology and Pathophysiology, Moscow, 125315, Russian Federation;
3Research Zakusov Institute of Pharmacology, Moscow, 125315, Russian Federation
Despite numerous studies, the mechanisms of the negative influence of space flight factors on the basic functions of the organism remain not fully disclosed. The purpose of this study was to study the early effects of simulated microgravity on the development of experimental ischemic damage to the rat's myocardium. After a 14-day simulation of the microgravity as an additional pharmacological load on the rat myocardium, fi-adrenoreceptors were stimulated by administering isoproterenol at a dose of 80 mg/kg on two consecutive days with an interval of 24 hours between applications. Evaluated integral indices of the state of the organism and changes in electrical and functional heart activity. Characteristic changes at the early stages after the successive action of two factors consisted in a significant loss of body weight, a change in the electrical conductivity of the myocardium ventricles, manifested in an increase in the QTc interval, the occurrence of a greater percentage of arrhythmias and the development of an inflammatory reaction. Simulation ofmicrogravityfollowed by the introduction of isoproterenol leads to heart failure even to the death of animals. The heart mass index was significantly increased in the groups with the administration of fi-adrenomimetics. An elevated serum corticosterone level was found in the experimental groups, most pronounced with the action of isoproterenol alone and in combination with exposure to microgravity. Changes were observed in the subfraction composition of blood serum (increase in the percentage of small and large particles) caused by the action of the two extreme factors - simulated microgravity and the administration of isoproterenol.
Keywords: microgravity; hindlimb unloading; experimental myocardial infarction; isoproterenol; laser correlation spectroscopy.
For citation: Lebedeva M.A., Medvedeva Yu.S., Zolotov N.N., Baranov M.V., Karganov M.Yu. The early effects of simulated microgravity on the development of experimental myocardial infarction. Meditsina ekstremal'nykh situatsiy (Medicine of Extreme Situations, Russian journal) 2020; 22(1): 91-103. (In Russian)
For correspondence: Marina A. Lebedeva, MD, Ph.D., leading researcher of the Research Institute for space medicine, Federal research clinical center of specialized types of medical care and medical technologies, Federal Biomedical Agency of Russia, 115682, Moscow; Institute of General Pathology and Pathophysiology, Moscow, 125315, Russian Federation. E-mail: ma_lebedeva@mail.ru
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest. Acknowledgments. The study had no sponsorship.
Received August 13, 2019 Accepted February 28, 2020
Введение
В условиях космического полета (КП) организм подвергается стрессам, в основе которых лежит ряд воздействий. Активация саногене-тических механизмов позволяет поддерживать достаточный уровень функционирования физиологических систем, вследствие чего большинство произошедших под действием факторов КП изменений носят обратимый характер. Данные, полученные в ходе освоения космоса, очень ценны и уникальны, но пока что их недостаточно для решения проблем, связанных с коррекцией неблагоприятных последствий для здоровья человека. К одним из факторов КП, оказывающим наиболее существенное, предположительно негативное влияние, относят микрогравитацию [1, 2]. Пребывание в условиях микрогравитации вызывает перестройку функционального состояния организма, зависящую от степени напряжения его регуляторных систем [3, 4]. Вследствие действия микрогравитации происходит перераспределение жидких сред организма в краниальном направлении, что является мощным стрессогенным фактором для сердечно-сосудистой системы. В течение КП среди космонавтов были зафиксированы случаи развития заболеваний или нарушений работы различных систем организма, в том числе и сердечно-сосудистой [5, 6]. Длительное воздействие микрогравитации может повысить риск развития сердечно-сосудистых заболеваний и в постполетный период [7].
Несмотря на проводимые многочисленные исследования состояния сердечно-сосудистой системы, причины и механизмы негативного влияния факторов космического полета на ее функции остаются до конца непонятыми [8, 9]. Значительная доля результатов по изучению сердечно-сосудистой системы была получена на моделях, имитирующих условия микрогравитации и других факторов КП как на человеке, так и на экспериментальных животных [10-12]. Влияние микрогравитации может привести к дезадаптации сердечно-сосудистой системы, которая может проявляться нарушениями сердечного ритма [13] и вегетативной регуляции [14], а также ортостатической дисфункцией [15, 16]. Экспериментальные исследования показали,
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
что микрогравитация повышает восприимчивость (чувствительность) адренорецепторов и ухудшает последствия ишемическо-реперфу-зионного повреждения миокарда крыс, проведенного до хвостового вывешивания [17]. При этом экспериментов по исследованию особенностей развития инфаркта миокарда (ИМ) после моделирования микрогравитации не проводилось. В период реадаптации возможно возникновение патологических отклонений в связи с воздействием на организм дополнительных нагрузок [5, 18]. В связи с этим, исследования возникновения и развития тех или иных отклонений после действия микрогравитации с последующей нагрузкой на организм являются весьма актуальными для сохранения здоровья космонавтов и астронавтов. Использование Р-адреномиметика изопротеренола, вызывающего развитие мелкоочагового ишемического повреждения после действия микрогравитации, можно рассматривать как дополнительную нагрузку на миокард.
Цель настоящего исследования - изучить интегральные показатели состояния организма животных (масса тела, лейкоцитарная формула крови, сдвиги сывороточного гомеостаза) и сердечно-сосудистой системы (ЧСС, изменения электрической и функциональной активности) после 14-дневного моделирования действия микрогравитации с последующей фармакологической нагрузкой на миокард.
Материал и методы
Работа выполнена на самцах крыс линии Вистар (n = 161), масса составляла около 265 г, возраст - 3-4 мес. Животные были разделены на 4 группы: 1-я - интактные животные (контроль, n = 38); 2-я - группа крыс, подвергшаяся антиортостатическому вывешиванию в течение 2 недель (АОВ, n = 35); 3-я - крысы с изопро-теренол-индуцированным очагово-диффузным инфарктом миокарда (Iso, n = 45); 4-я группа -крысы с экспериментальным ИМ после двухнедельного АОВ (АОВ+Iso, n = 43). Вывешивание животных в антиортостатическом положении осуществляли стандартным методом [11], в модификации [19] в течение 2 нед. В течение этого же времени группы без моделирования
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
микрогравитации (контроль и Iso) содержались в обычных условиях вивария. Для моделирования диффузно-очагового ИМ крысам вводили агонист Р-адренорецепторов изопротере-нол («Sigma-Aldrich», China) подкожно в дозе 80 мг/кг (в объеме 2 мл) по схеме две инъекции с перерывом в 24 ч [20, 21]. В пилотный серии в группе АОВ+Iso при введении изопротеренола сразу после окончания АОВ наблюдали 100% гибель животных в течение 4 ч. В связи с этим в данной работе, крысам этой группы вводили изопротеренол через 24 ч после окончания анти-ортостаза. Все исследования, кроме эхокардио-графии (ЭхоКГ), проводили до и после (в течение сут) последнего оказанного воздействия. За два ч до взвешивания крыс лишали корма. Для выявления нарушений в электрической и функциональной активности сердца использовали методы ЭКГ и ЭхоКГ. ЭКГ регистрировали с помощью компьютерного электрокардиографа «Полиспектр-8/В» в I, II, III и avl стандартных отведениях в течение 2 мин. Животных наркотизировали введением внутрибрюшинно препарата «Золетил-100» в дозе 55 мг/кг. Анализировали записи, не содержащие эктопических сокращений, обрабатывали полученные результаты с помощью программ «Нейрософт» (Россия). После регистрации ЭКГ проводили забор крови из латеральной хвостовой вены для подсчета абсолютного количества лейкоцитов и составления лейкоцитарной формулы крови стандартными методами. Мазки крови для микроскопии окрашивали по Папенгейму. Для регистрации ЭхоКГ использовали цифровой ультразвуковой эхокардиограф DP6600 с электронным микроконвексным датчиком 65С15ЕА (6,5/8,0 мГц). В М-модальном режиме по методу Teichholz оценивали конечный систолический и диастолический размеры левого желудочка сердца, рассчитывали фракцию выброса и фракцию укорочения. Измерения проводили, как минимум, по пяти последовательным сердечным циклам [22]: эхокардиографию - при наркотизации животных кетамином в дозе 100 мг/кг, забор крови для проведения лазерной корреляционной спектроскопии (ЛКС) и определения уровня сывороточного кортикосте-рона - при декапитации наркотизированных животных с последующим получением сы-
воротки крови; исследование изменений субфракционного состава сыворотки крови крыс -на лазерном корреляционном спектрометре (ООО «Интокс», Санкт-Петербург). Физическая сторона данного метода основана на принципах допплеровской спектроскопии [23].
Измерения проводили по отработанной методике, в частотном диапазоне 16 384 кГц в количестве 2000 накоплений [24]. Регуляризацию спектра осуществляли в программе Viewer, входящей в программное обеспечение спектрометра. Измерение содержания кортикостерои-дов (кортикостерона и кортизола) в сыворотке крови проводили унифицированным методом определения по флуоресценции в серно-спир-товом реактиве по стандартной методике [25]. За счет того, что кортизол в крови крыс присутствует в очень малой концентрации, можно сказать, что данный метод позволяет измерить уровень непосредственно кортикостерона. После декапитации извлекали сердечную мышцу, промывали в физиологическом растворе и взвешивали для вычисления массового индекса сердца (отношение массы сердца к массе тела крыс в процентах). Для подтверждения развития изо-протеренол-индуцированного ИМ (группа Iso) на вторые сутки после повторного введения изопротеренола выделяли сердечную мышцу крыс (n = 7) для проведения гистологического исследования по стандартной методике. Сердца фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина (ООО «Гем», Россия) с дальнейшей заливкой в парафин и изготовлением серийных поперечных срезов толщиной 5 мкм на микротоме МНС-2. Срезы выполняли на расстоянии 4, 6 и 8 мм от верхушки сердца и окрашивали гематоксилином и эозином для оценки морфологических изменений.
Работа с животными проведена в соответствии с Директивой ЕС о защите животных, используемых в научных целях - EU Directive 2010/63/EU, принятой 22 сентября 2010 г., и «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации», утвержденными приказом Министерства здравоохранения РФ № 708н от 23.08.2010.
Статистические методы. Статистическую обработку данных проводили с помощью программы Statistica 8.0. Нормальный характер
распределения данных проверяли по тестам Колмогорова-Смирнова и Лиллиефорса, далее применяли непараметрический анализ Kruskal-Wallis с апостериорным сравнением по Z,-критерию, позволяющему определить значимые различия по уровню распределения признака между тремя и более группами. Для оценки достоверных различий между процентными долями выборок применяли критерий углового преобразования Фишера. Основные данные представлены в виде медиан с квартилями ^25; Q75). Данные по ЛКС представлены в виде средних значений для возможности сохранения 100-процентного суммарного вклада в светорассеяние частиц крови.
Результаты и обсуждение
Адекватность модели изопротеренол-инду-цированного экспериментального ИМ крыс была показана при проведении гистологического исследования. Наличие лейкоцитарной инфильтрации в толще миокарда и локальные признаки патологии кардиомиоцитов (КМЦ) свидетельствуют о диффузно-очаговом ишемическом повреждении миокарда (рис. 1).
Для анализа состояния животных после моделирования микрогравитации с последующим развитием кардиопатологии был применен полисистемный подход, оценивающий произошедшие изменения на разных структурно-функциональных уровнях.
Масса тела. Антиортостатическое вывешивание привело к стойкому снижению массы тела крыс групп АОВ и АОВ+Ьо по сравнению
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
Рис. 1. Микрофотография гистологического препарата миокарда. * - клеточная инфильтрация в межмышечной интерстициальной ткани.
Окраска гематоксилин и эозин, 10 х 10.
с группами крыс без моделирования действия микрогравитации (рис. 2).
Масса тела является интегральным параметром, объективно характеризующим состояние организма в целом. По данным литературы, АОВ крыс может приводить к атрофии скелетных и сердечной мышц, уменьшению массы жировой ткани [26], что мы и наблюдали в нашей работе. Следует отметить, что последовательное воздействие двух факторов - моделирование микрогравитации в течение 14 дней и последующее введение изопротеренола вызывает достоверно более выраженную потерю массы тела.
320 300
я" 280 л е
£ 260 сс
J 240 220 200
Контроль
АОВ
Iso
АОВ + Iso
* - дни введения изопротеренола крысам групп Iso и АОВ + Iso
Z'-критерий, p < 0,05: ■ - отличие от групы контроля
• - отличие от групы АОВ
♦ - отличие от групы Iso
Исходно После АОВ
Рис. 2. Изменение массы тела.
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Таблица 1 ЭКГ крыс до и после воздействий в трёх отведениях
Группа Измерение, п Амплитуда R-зубца, мВ Длительность R-зубца, мс
I II III I II III
Контроль 117 0,225 [0,16;0,29] 0,31 [0,23;0,37] 0,17 [0,12;0,2] 20,0 [19;21] 20,0 [19;21] 18,0 [18;20]
АОВ 33 0,135^ [0,07;0,18] 0,21^ [0,17;0,31] 0,125 [0,08;0,2] 19,0 [19;20] 19,5 [19;20] 18,0 [18;20]
Ьо 11 0,16 [0,13;0,24] 0,18^ [0,1;0,26] 0,04^ • [0,03;0,11] 20,0 [20;21] 20,0 [18;22] 16,0 [15;20]
АОВ + Ьо 10 0,305* ♦ [0,26;0,38] 0,3 [0,25;0,33] 0,095 [0,09;0,14] 22,0 [20;22] 22,0* [21;22] 18,0 [18;18,5]
Группа ЧСС, уд в 1 мин Длительность, мс
Р PR (Р-0) QRS 0Тс RRNN
Контроль 498,0 [475;515] 28,0 [26;28] 41,0 [39;44] 30,0 [29;31] 74,0 [69;78] 212,0 [201;222] 121,0 [116;126]
АОВ 516 [490;526] 28 [28;30] 41 [38;44] 29,0 [28;30] 74 [68;78] 216 [202;224] 116 [114;122]
Ьо 457,0^ • [437;480] 28,0 [28;30] 40,0 [39;45] 31,0 [29;31] 72,0 [72;76] 202,0 [197;209] 130,0^ • [125;137]
АОВ+Ьо 411,0^ • [393;447] 28,5 [26;30] 42,0 [40;46] 31,0* [30;32] 87,0^ • ♦ [84;96] 236,5^ • ♦ [227;251] 146,0^ • [134;153]
Примечание. Представлены медианы с квартилями [025;075]. ■ - сравнение с контролем; • - сравнение с группой АОВ; ♦ - сравнение с группой Ьо; р < 0,05; 2'-критерий.
Электрокардиографическое исследование.
Данные, полученные при регистрации ЭКГ, представлены в табл. 1. В группах АОВ и Ьо наблюдали снижение амплитуды R-зубца в двух отведениях. После введения изопротеренола в группах Ьо и АОВ+Ьо была снижена частота сердечный сокращений и, соответственно, увеличен показатель RRNN. Также в группах с введением агониста Р-адренорецепторов была выявлена тенденция к увеличению амплитуды зубца Р в II и III стандартных отделениях по сравнению с исходными значениями (данные не приводятся). Характерная особенность для группы АОВ+Ьо - наиболее выраженное удлинение интервала QT и QTc по сравнению с контрольной и опытными группами.
Снижение ЧСС в группах с введением изо-протеренола может быть связано с выявленными нарушениями электрической проводимости миокарда, что согласуется с данными других публикаций [20, 27]. Наблюдаемая тенденция увеличения амплитудной характеристики зубца Р может быть связана с продолжительной нагруз-
кой правых отделов сердца во время антиорто-стаза на фоне изменений уровня активности симпатической нервной системы [28]. Значительное снижение вольтажной характеристики R-зубца в группе Ьо может свидетельствовать о поражения миокарда ишемического или воспалительного характера. По данным [29], во время микрогравитации в большинстве случаев снижается амплитуда R-зубца, что было зафиксировано в группе крыс после АОВ. В норме продолжительность интервала QT зависит от текущей частоты сердечного ритма, поэтому с диагностической целью чаще всего используют абсолютный показатель - корригированный интервал QT (0Тс). Увеличение продолжительности QT- и QTc- интервалов в группе АОВ+Ьо может свидетельствовать о нарушении процессов реполяризации желудочков [10, 30]. В клинике такое изменение является электрофизиологическим субстратом появления триггерной активности и, как следствие, - желудочковых аритмий [30]. При введении изопротеренола сразу после окончания антиортостатического
вывешивания наблюдали 100% гибель животных в течение 4 ч. Недавно была выдвинута гипотеза о повышенной чувствительности реакции конечных органов на нейроэндокринные стимулы, в результате длительной дезактивации. Во время космического полета [31] снижается уровень плазменного норадреналина, поэтому гиперчувствительность адренорецепторов может быть следствием адаптации к космическому полету. Сходная гиперчувствительность адренорецепторов была обнаружена у пациентов с дизавтономиями, при которых отсутствуют или резко снижены циркулирующие кате-холамины. Моделированная микрогравитация производит устойчивое ингибирование симпа-тонейрального высвобождения, оборота и синтеза норадреналина [32]. Экспериментальные исследования показали, что микрогравитация вызывает селективное увеличение чувствительности бета-адренорецепторов [31] Эти изменения могли бы объяснить ортостатическую непереносимость [33], испытываемую астронавтами, возвращающимися из космических полетов. Можно предположить, что в настоящем эксперименте использование значительных доз агониста бета-адренорецепторов сразу после прекращения действия микрогравитации на фоне такой гиперчувствительности усилило кардиотоксический эффект изопротеренола. Недавние исследования также показали, что в условиях микрогравитации ухудшаются последствия ишемическо-реперфузионного повреждения миокарда крыс, проведенного перед хвостовым вывешиванием [17].
В табл. 2 представлены случаи нарушения сердечного ритма и электрической проводимости миокарда после воздействий трех видов. Введение изопротеренола вызывало гибель животных в те же сроки в группе ко в 8 % случаев и в группе АОВ+Ьо, при введении изопротеренола через сут после окончания АОВ в 7 % случаев. Кроме того, в группе с последовательным действием факторов отмечали значительное число случаев нарушений сердечного ритма.
Уже в течение первых суток после последней инъекции изопротеренола наблюдали достоверные изменения в электрической проводимости миокарда, причем в группе с воздействием двух факторов (АОВ+Ьо) наблюдаемые электрокар-
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
Таблица 2
Процент экспериментальных животных
с нарушениями ЭКГ
Группа Появление зубца Q, % Нарушение QRS-комплекса, % Нарушение ритма, %
АОВ 0 3 3
Iso 9 18 0
АОВ + Iso 10 10 40 • ♦
Приме чание. • - отличие от группы АОВ; ♦ - от-
личие от группы Ьо; р < 0,05; критерий углового преобразования Фишера.
диографические сдвиги носили более выраженный характер, также был увеличен процент встречаемости аритмий.
Эхокардиографическое исследование (ЭхоКГ). Для оценки структурно-функциональных изменений в миокарде, вызванных моделированием микрогравитации с последующим введением изопротеренола или без него, часть животных подвергли ЭхоКГ При анализе результатов конечные систолический и диастолический размеры левого желудочка в разных группах животных достоверных отличий не имели. В группе АОВ в день окончания вывешивания наблюдали снижение фракции укорочения и фракции выброса. В группе АОВ+Ьо наблюдали более выраженное снижение функциональной активности сердца, однако количество крыс было недостаточным для статистического анализа (рис. 3, а).
Индекс массы сердца. В группе после АОВ достоверных изменений индекса сердца не наблюдали. Введение изопротеренола привело к увеличению индекса массы сердца, причем в группе АОВ+Ьо данный показатель изменялся в наибольшей степени (рис. 3, б).
Динамика развития сердечной дисфункции после введения изопротеренола достаточно хорошо изучена. Его введение вызывает дилата-ционные изменения сердца, характеризующиеся уменьшением ФВ, ФУ и увеличением размеров левого желудочка [20, 21, 34]. Наблюдаемые изменения в опытных группах: снижение ФУ и ФВ левого желудочка, свидетельствуют об уменьшении сократительной функции миокарда, формировании систолической дисфункции, которые могут повлечь за собой развитие сердечной недостаточности [22].
97
Рис. 3. Структурно-функциональные изменения миокарда после окончания воздействий: а - эхокардиографическое исследование миокарда крыс; б - индекс массы сердца.
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
■ - сравнение с группой контроля; • - отличие от трупы АОВ; Z'-критерий, р < 0,05.
Вместе с увеличенным массовым индексом сердца крыс в группах Ьо и АОВ+Ьо, нарушения, зарегистрированные с помощью ЭхоКГ, могут отражать развитие гипертрофических процессов в миокарде.
Исследование клеток крови. Общее количество лейкоцитов в группах не различалось. АОВ не оказало влияния на изменения количе-
ства лейкоцитов в крови, наблюдали лишь тенденцию к снижению содержания лимфоцитов. Введение изопротеренола вызывало тенденцию к увеличению числа нейтрофилов, а при воздействии двух факторов - их достоверное увеличение (рис. 4, а). Также в группе АОВ+Ьо наблюдали увеличенное содержание моноцитов (рис. 4, б).
тыс/мкл
20-1
18-
16-
14-
12-
10-
8-
6-
4-
2-
0-
Исходно После Контроль
Исходно После АОВ Группа
Исходно После ^о
После АОВ+^о
I Лимфоциты
Нейтрофилы
тыс/мкл 1,61,41,210,80,60,40,20
Исходно После Контроль
Исходно После АОВ Группа
Исходно После 1»
После АОВ+Iso
Эозинофилы
Моноциты
б
* - отличие от исходных значений; • - отличие от трупы АОВ; ♦ - отличие от трупы !бо;
Z'-критерий, р < 0,05.
а
Рис. 4. Изменение количества клеток крови крыс: а - изменение абсолютного числа лимфоцитов и нейтрофилов; б - изменение абсолютного числа эозинофилов и моноцитов.
Исходные значения группы Контроль соответствуют исходным значениям для группыЛОВ+Ь'о.
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
%
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
НИ
'Контроль АОВ ' ¡¡с ' АОВ+1во' Группа
■ Исходно ■ После
а
%
30 п 25 20 154 10 5-1 0
■А
■ *
ДА А А и
После Исходно После Исходно После После оль АОВ ¡¡о АОВ+^о
Группа □ Нп ИНс I б
Мон
■ - отличие от трупы контроля; * - отличие от исходных значении; • - отличие от трупы АОВ; ♦ - отличие от трупы ¡¡о; Z'-критериИ, р < 0,05.
Рис. 5. Лейкоцитарная формула крови крыс: а - процентное содержание лимфоцитов; б - процентное содержание палочко- и сегментоядерных нейтрофилов, моноцитов.
Исходные значения группы контроль соответствуют исходным значениям для группы АОВ+Ь'о.
Анализ лейкоцитарной формулы крови показал, что в группе после АОВ наблюдали повышение процентного содержания сегменто-ядерных нейтрофилов (Нс), не достигающего уровня статистической значимости (рис. 5, б). В двух группах с экспериментальным ИМ было снижено процентное содержание лимфоцитов (рис. 5, а) и повышен процент встречаемости сегментоядерных нейтрофилов. Кроме того, в группе АОВ+Ьо было повышено процентное содержание моноцитов (Мон) и палочкоядер-ных нейтрофилов (Нп) (см. рис. 5, б).
При неблагоприятных воздействиях различной природы регистрируют снижение как процентного, так и абсолютного количества лимфоцитов и повышение нейтрофилов. За счет этого уменьшается отношение лимфоциты/нейтро-филы, наблюдаемое в нашей работе в группах крыс с введением изопротеренола. Такой сдвиг в картине крови рассматривают как неспецифическое проявление стресс-реакции в ответ на экстремальный стимул, в том числе и на факторы КП [18, 35]. Изопротеренол-индуцирован-ные ишемические изменения в миокарде сопровождаются воспалительными процессами [36], вследствие которых происходит повышение в крови числа нейтрофилов и моноцитов, заре-
гистрированное в группе АОВ+Ьо [37]. Таким образом, наиболее глубокие сдвиги в клеточном составе крови были характерны для крыс группы АОВ+Ьо, включающие в себя как действие моделируемых эффектов микрогравитации так и, возможно, развитие воспалительной реакции под действием изопротеренола.
Микрогравитацию считают одним из ведущих стресс-факторов, оказывающих влияние на организм в течение космического полета [1]. Сохранность гомеостаза в значительной степени зависит от компенсаторных возможностей организма, которые предотвращают или нивелируют развитие дисбаланса в системе крови при воздействии экстремальных факторов внешней среды [38]. При обнаружении изменения количества клеток крови, характерного для неспецифической реакции организма в ответ на экстремальный стимул, было решено исследовать изменения содержания стресс-гормона кортикостерона в крови крыс.
Изменение уровня сывороточного корти-костерона. В группе крыс после антиортоста-тического вывешивания наблюдали повышение уровня сывороточного кортикостерона, являющегося маркером стресс-реакции. Введение изопротеренола крысам двух опытных групп
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
(Ьо и АОВ+Ьо) приводило к более значительному нарастанию уровня гормона в крови (рис. 6).
Глюкокортикоидные гормоны способствуют мобилизации энергетических ресурсов, участвуя в осуществлении приспособительных реакций организма в ответ на стрессогенный фактор. Стресс-агенты, наряду с наличием какого-либо патологического процесса в организме, действуют на активность синтеза кортикостероидов и на содержание данных гормонов в крови, влияя на состояние системы гомеостаза крови [38, 39]. Введение изопротеренола вызвало резкое повышение уровня кортикостерона в крови крыс, поэтому на данный момент сложно сказать, вызывает ли сочетанное действие двух факторов более сильный стресс, чем просто введение изопроте-ренола без предварительного вывешивания.
Лазерная корреляционная спектроскопия.
Двухнедельное антиортостатическое вывешивание привело к повышению процентного вклада в светорассеяние частиц крупного (165-223 нм) гидродинамического радиуса и в большей степени - малого (4-11 нм). Введение изопротеренола повлияло на субфракционный состав сыворотки крови в сторону более выраженного возрастания процента вклада частиц малого гидродинамического радиуса (1,9-15,3 нм), причем в группе АОВ+Ьо данный сдвиг менее выражен, чем в группе Ьо (рис. 7).
Представленные результаты согласуются с данными, полученными ранее на мышах, где было показано, что действие микрогравитации как в течение КП, так и при ее моделировании [40-32] приводит к повышению доли низкомолекулярной фракции частиц сыворотки крови. Возрастание процента частиц малого гидродинамического радиуса, выявленное при моделировании микрогравитации и постинфарктной сердечной недостаточности, может служить показателем происходящей клеточной деструкции [23], которая, в свою очередь, вызывает развитие воспалительной реакции, в процессе которой выделяются цитокины, привносящие вклад в низкомолекулярную фракцию частиц крови. Дополнительно к этому, про-воспалительные цитокины индуцируют р53-независимый апоптоз, усиливающий тканевую деградацию [43].
В процессе адаптации организма к изменениям окружающей среды, к которым относят и действие микрогравитации, происходит модификация системы гомеостаза, направление
го сц
00
16 14 12 10 8 6 4 2 0
Размер частиц, нм
Контроль -*-АОВ
-^аов + 1бо
* - отличие от групы контроля
• - отличие от групы АОВ
♦ - отличие от групы АОВ+^о Z'-критерий, р < 0,05
нг/мл 700-1 600500400300200100 0
■ •
■
Контроль АОВ ^о Группа
АОВ + ^о
■ - отличие от групы контроля; • - отличие от групы АОВ; Z'-критерий, р < 0,05.
Рис. 6. Уровень сывороточного кортикостерона после воздействия.
■
Рис. 7. График лазерной корреляционной спектроскопии сыворотки крови крыс после воздействия.
которой зависит от природы соответствующего действующего фактора. Известно, что в интегральных системах организма сдвиги, формирующиеся при развитии патологического процесса, отличаются выраженным индивидуальным полиморфизмом. В настоящей работе исследовали последовательное действие моделированной микрогравитации и эффектов введения изопротеренола. Показано, что масса тела животных снижается под действием АОВ и АОВ+Iso, причем ее снижение при действии обоих факторов было более выражено. Электрокардиографическое исследование показало значимые изменения в амплитуде R-зубца, длительности интервалов QT, QTc, величинах ЧСС. При анализе ЭхоКГ наблюдали снижение фракции выброса и фракции укорочения в день окончания вывешивания в группе АОВ и АОВ+Iso при сочетанном действии факторов, что может свидетельствовать о развитии систолической недостаточности миокарда. Выявлены значимые изменения отношения массы сердца к массе тела при действии изопроте-ренола на интактных крыс и животных после АОВ. На клеточном уровне наблюдали изменения в содержании иммунокомпетентных клеток - лимфоцитов, нейтрофилов и, только в группе АОВ+Iso, моноцитов. На малых сроках эффекты исследуемых факторов на субфракционный состав сыворотки крови привели к увеличению процентного вклада частиц малого гидродинамического радиуса в разной степени. Обнаружено повышение уровня сывороточного корти-костерона в опытных группах, наиболее выраженное при действии изопротеренола отдельно и в сочетании с АОВ. Исходя из результатов, полученных при исследовании срочных реакций организма на экстремальные факторы, можно сделать следующие выводы:
1. Антиортостатическое вывешивание приводит к снижению массы тела, введение изо-протеренола крысам после АОВ вызывает более выраженную потерю массы тела.
2. Моделирование микрогравитации с последующим введением изопротеренола приводит к развитию более выраженных нарушений электрической проводимости миокарда по сравнению с другими группами и развитию сердечной недостаточности вплоть до гибели животных.
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
3. Увеличение индекса сердца может свидетельствовать о развитии гипертрофии миокарда в группах с введением изопротеренола.
4. На клеточном и молекулярном уровнях
действие изопротеренола после антиортоста-
тического вывешивания приводит к значимым
сдвигам гомеостаза системы крови крыс.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
ЛИТЕРАТУРА
(пп. 2, 4, 7, 9, 11-17, 23, 26, 27, 29, 31-34, 36, 42, 43 см. в REFERENCES)
1. Газенко О.Г., Григорьев А.И., Егоров А.Д. Физиологические проблемы невесомости. Под ред. О.Г. Газенко, И.И. Касьян. М.: Изд-во Медицина; 1990. 3. Качаева Е.В., Ушаков И.Б., Шенкман Б.С. Функции протеолитических систем скелетных мышц в условиях гравитационной разгрузки: факты и гипотезы. Успехи физиологических наук. 2012; 43(3): 3-20.
5. Григорьев А.И. Концепция здоровья и проблема нормы в космической медицине. М.: Изд-во «Слово»; 2001.
6. Ушаков И.Б., Орлов О.И., Баевский Р.М., Берсенев Е.Ю. и др. Концепция здоровья: Космос - Земля. Физиология человека. 2013; 39(2): 5-9.
8. Григорьев А.И., Баранов В.М. Сердечно-сосудистая система человека в условиях космического полета. Вестник РАМН. 2003; 12: 41-45. 10. Ахметзянова С.В., Киблер Н.А., Нужный В.П. и др. Влияние антиортостатической гипокинезии на последовательность деполяризации, реполяризации миокарда и гемодинамические показатели сердца собаки. Известия Коми научного центра УрО РАН. 2014; 1(17): 43-50.
18. Серова Л.В. Реакция крыс, перенесших космический полет, на иммобилизованный стресс. Космическая биология и авиакосмическая медицина. 1983; 17(1): 52-8.
19. Ильин В.А., Новиков В.Е. Стенд для моделирования физиологических эффектов невесомости в лабораторных экспериментах с крысами. Космическая биология и авиакосмическая медицина. 1980;14(3):79-80.
20. Капелько В.И., Лакомкин В.Л., Лукошкова Е.В. и др. Комплексное исследование сердца крыс при поражении изопротеренолом. Кардиология. 2014; 54(3): 46-56.
21. Северова Е.А., Беркинбаев С.Ф., Нугманова М.Н. и др. Влияние аллагенных влияние аллогенных ге-мопоэтических стволовых/прогениторных клеток, обработанных IL-3, на структурнофункциональные изменения сердца при экспериментальной постинфарктной сердечной недостаточности в отдаленные сроки. Гены и клетки. 2015; 10(1): 103-10.
22. Крыжановский С.А., Ионова Е.О., Столярук В.Н. и др. Особенности ремоделирования миокарда в острейшую фазу экспериментального инфаркта миокарда. Физиология человека. 2012; 38(6): 43-52.
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
24. Лебедева М.А., Медведева Ю.С., Мирзоян Р.С. и др. Интегральная оценка сдвигов в сывороточном гоме-остазе при экспериментальном инфаркте миокарда. Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2013; 57(4): 35-40.
25. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник. М.: Изд-во Медицина; 1987.
28. Кабулова А.З., Иванов Г.Г., Пащенко А.В., Баевский Р.М. Диагностическая и прогностическая значимость метода электрокардиографии высокого разрешения при действии факторов космического полета. Авиакосмическая и экологическая медицина. 2007; 2: 29-34.
30. Фурман Н.В., Шматова С.С. Клиническое значение удлинения интервалов QT и QTC на фоне приёма лекарственных препаратов. Рациональная фармакотерапия в кардиологии. 2013; 9(3): 311-5.
35. Антонишкинс Ю.А., Лобзин А.А., Несмеянов А.А. и др. Новые представления о механизме защитной реакции клеток крови на экстремальное воздействие. Вестник новых медицинских технологий. 2012; 19(1): 24-8.
37. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований: практич. рук-во. М.: Изд-во Медицина; 2000.
38. Кузичкин Д.С., Маркин А.А., Воронцов А.Л. и др. Комплексная оценка системы гемостаза у испытателей в эксперименте «МАРС-500». Авиакосмическая и экологическая медицина. 2015; 49(3): 19-24.
39. Селятицкая В.Г., Андросова Е.Н., Пальчикова Н.А., Кузьминова О.И. Реакция коры надпочечников крыс на действие бальнеологического фактора при хроническом воспалении. Фундаментальные исследования. 2011; 10-13: 593-7.
40. Алчинова И.Б., Архипова Е.Н., Медведева Ю.С. и др. Дифференциация клеточно-метаболических эффектов у мышей. В книге «Космический научный проект «Бион-М1»: медико-биологические эксперименты и исследования». Под ред. А.И. Григорьева. М.: Изд-во ГНЦ РФ-ИМБП РАН; 2016: 427-35.
41. Медведева Ю.С., Яковенко Е.Н., Алчинова И.Б. Оценка радиационно-индуцированного апоптоза в клетках костного мозга и сдвигов в составе плазмы крови мышей после экспозиции на субмагнитосфер-ной орбите (биоспутник Бион-М №1). Патогенез. 2016; 14(2): 38-42.
REFERENCES
1. Gazenko O.G., Grigor'ev А.1., Egorov АЛ. Physiological problems of weightlessness [Fiziologicheskie prob-lemy nevesomosti]. Ed. by O.G. Gazenko, I.I. Kas'yan. Moscow: Izdatelstvo Meditsina; 1990. (in Russian)
2. Latchney S.E., Rivera Ph.D., Mao X.W. et al. The effect of spaceflight on mouse olfactory bulb volume, neu-rogenesis, and cell death indicates the protective effect of novel environment. Journal of Applied Physiology. 2014; 116(12): 1593-604.
3. Kachaeva E.V, Ushakov I.B., SHenkman B.S. Activity of the skeletal muscle proteolytic systems during func-
tional unloading. Uspekhi fiziologicheskikh nauk. 2012; 43(3): 3-20. (in Russian)
4. Thiel C.S, Paulsen K., Bradacs G. et al. Rapid alterations of cell cycle control proteins in human T lymphocytes in microgravity. Cell Communication and Signaling. 2012; 10(1): doi.org/10.1186/1478-811X-10-1
5. Grigor'ev A.I. The concept of health and the problem of the norm in space medicine [Kontseptsiya zdorov'ya i problema normy v kosmicheskoj meditsine]. Moscow: Izdatelstvo Slovo; 2001. (in Russian)
6. Ushakov I.B., Orlov O.I., Baevskij R.M., Bersenev E.YU. et al..Conception of health: Space-Earth. Fiziologiya cheloveka. 2013; 39(2): 5-9.(in Russian)
7. Herault S., Fomina G., Alferova I. et al. Cardiac, arterial and venous adaptation to weightlessness during 6 month MIR spaceflights with and without thigh cuffs (bracelets). Europe Journal of Applied Physiology. 2000; 81: 384-90.
8. Grigor'ev A.I., Baranov V.M. The human cardiovascular system under the conditions of a space flight. Vestnik RAMN. 2003; 12: 41-5. (in Russian)
9. Aubert A.E., Larina I., Momken I. et al. Towards human exploration of space: the THESEUS review series on cardiovascular, respiratory, and renal research priorities. NPJ Microgravity. 2016(2): doi.org/10.1038/npjmgrav.2016.31
10. Akhmetzyanova S.V, Kibler N.A., Nuzhnyj VP. et al. Effect of antiorthostatic hypokinesia on the sequence of the myocardial depolarization and repolarization of ventricles and hemodynamic indices of the heart in dog. Iz-vestiya Komi nauchnogo tsentra UrO RAN. 2014; 1(17): 43-50. (in Russian)
11. Morey-Holton E.R., Globus R.K., Kaplansky A., Durnova G. The hindlimb unloading rat model: literature overview, technique update and comparison with space flight data. Space Biology and Medicine. 2005; 10: 7-40.
12. Watenpaugh D.E. Analogs of microgravity: head-down tilt and water Immersion. Journal of Applied Physiology. 2016; 120: 904-14.
13. Katuntsev V.P, Osipov Y.Y., Barer A.S. et al. The main results of EVA medical support on the Mir Space Station. ActaAstronautica. 2004; 54(8): 577-83. (in Russian)
14. Fortrat J.O., Sigaudo D., Hughson R.L. et al. Effect of prolonged head-down bed rest on complex cardiovascular dynamics. Autonomic Neuroscience. 2001; 86: 192-201.
15. Blomqvist C.G., Buckey J.C., Gaffney F.A. et al. Mechanisms of post-flight orthostatic intolerance. Journal of gravitational physiology. 1994; 1: 122-4.
16. Custaud M.-A., de Souza Neto E.P., Abry P. et al. Ortho-static tolerance and spontaneous baroreflex sensitivity in men versus women after 7 days of head-down bed rest. Autonomic Neuroscience. 2002; 100: 66-76.
17. Lu Y.M., Jiao B., Lee J. et al. Simulated microgravity increases myocardial susceptibility to ischemia reperfusion injury via a deficiency of AMP activated protein kinase. Can. Journal of Physiology and Pharmacology. 2017; 95: 59-71.
18. Serova L.V. The reaction of rats to immobilized stress after space flight. Kosmicheskaya biologiya i aviakosmi-cheskaya meditsina. 1983; 17(1): 52-8.(in Russian)
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
19. Il'in V.A., Novikov VE. Stand for modeling the physi- 32 ological effects of weightlessness in laboratory experiments with rats. Kosmicheskaya biologiya i aviakosmi-cheskaya meditsina. 1980; 14(3): 79-80. (in Russian)
20. Kapel'ko V.I., Lakomkin V.L., Lukoshkova E.V et al. 33 Complex Study of the Rat Heart at Isoproterenol Damage. Kardiologiyax. 2014; 54(3): 46-56.(in Russian)
21. Severova E.A., Berkinbaev S.F., Nugmanova M.N. et al. Influence of allogeneic hematopoietic stem/progenitor cells treated with IL-3 on structural-functional heart 34 changes under experimental postinfarction heart failure
in long-term period of observation. Geny i kletki. 2015; 10(1): 103-10.(in Russian)
22. Kryzhanovskij S.A., Ionova E.O., Stolyaruk VN. et al. 35 Peculiarities of Myocardial Remodeling in the Acut-
est Phase Experimental Myocardial Infarction in Rats. Fiziologiya cheloveka. 2012; 38(6): 43-52.(in Russian)
23. Karganov M., Alchinova I., Arkhipova E., Skalny A.V. 36 Laser correlation spectroscopy: Nutritional, ecological,
and toxic aspects. In "Biophysics". Ed. by. A.N. Misra. Rijeka, Croatia: InTech; 2012: 1-16.
24. Lebedeva M.A., Medvedeva YU.S., Mirzoyan R.S. et
al. Integrated assessment of serum homeostasis shifts in 37 experimental myocardial infarction. Patologicheskaya fiziologiya i ehksperimental'naya terapiya. 2013; 57(4): 35-40.(in Russian)
25. Men'shikov V.V, Delektorskaya L.N., Zolotnitskaya 38 R.P. et al. Laboratory research methods in the clinic: a handbook [Laboratornye metody issledovaniya v klinike: spravochnik]. oscow.: Izdatelstvo Meditsina; 1987.
(in Russian)
26. Bederman I.R., Lai N., Shuster J. et al. Chronic hindlimb 39 suspension unloading markedly decreases turnover rates
of skeletal and cardiac muscle proteins and adipose tissue triglycerides. Journal of Applied Physiology. 1985; 119(1): 16-26. 40
27. Filla L., Francisco J.C., Simeoni R.B. et al. Isoprotere-nol-Induced Intramural Cytotoxicity Does Not Correlate with Echocardiographic Functional Abnormalities in Wistar Rat Hearts. Cardiovascular Pharmacology: Open Access. 2015; 4(5): doi.org/10.4172/2329-6607.1000165
28. Kabulova A.Z., Ivanov G.G., Paschenko A.V, Baevsky
P.M. et al. Diagnostic and prognostic validity of high- 41 resolution electrocardiography under the conditions of space flight. Aviakosmicheskaya i ehkologicheskaya meditsina. 2007; 2: 29-34. (in Russian)
29. Saltykova M., Capderou A., Atkov O. et al. Variations of intrathoracic amount of blood as a reason of ECG voltage changes. Annals of Noninvasive Electrocardiology. 42 2003; 8(4): 321-32.(in Russian)
30. Furman N.V., SHmatova S.S. Clinical significance of drug-induced intervals QT and QTc prolongation. Ratsional'naya farmakoterapiya v kardiologii. 2013; 9(3): 311-5.(in Russian) 43
31. Convertino V.A., Polet J.L., Engelke K.A. et al. Increased beta-adrenergic responsiveness induced by 14 days exposure to simulated microgravity. J Gravit Physi-ol. 1995; 2(1): 66-7.
Berlan M., Verhaeghe S., Pavy-Le T.A., et al. Yohimbine administration prevents over-responsiveness to epinephrine induced by simulated microgravity. Aviat Space Environ Med. 2002; 73(8): 735-42. Meck J.V., Waters W.W., Ziegler M.G., et al. Mechanisms of postspaceflight orthostatic hypotension: low alphal-adrenergic receptor responses before flight and central autonomic dysregulation postflight. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004; 286(4): 1486-95. Woodiwiss A.J., Tsotetsi O.J., Sprot S. et al. Reduction in myocardial collagen cross-linking parallels left ventcu-lar dilatation in rat model of systolic chamber dysfunction. Circulation. 2001; 103: 155-60. Antonishkins YU.A., Lobzin А.А., Nesmeyanov А.А et al. New representation about the mechanism of protective reaction of blood cells to extreme exposure. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologij. 2012; 19(1): 24-8. (in Russian) Shukla S.K., Sharma S.B., Singh U.R. b-Adrenoreceptor agonist isoproterenol alters oxidative status, inflammatory signaling, injury markers and apoptotic cell death in myocardium of rats. Indian journal of clinical biochemistry. 2015; 30(1): 27-34.
Nazarenko G.I., Kishkun А.А. Clinical evaluation of laboratory results: a practical guide [Klinicheskaya otsenka rezul'tatov laboratornykh issledovanij: praktich. ruk-vo]. Moscow: Izdatelstvo Meditsina; 2000. (in Russian) Kuzichkin D.S., Markin А.А., Vorontsov АЪ. et al. Comprehensive assessment of the hemostasis system in test-subjects in experiment «MARS-500». Aviakosmicheskaya i ehkologicheskaya meditsina. 2015; 49(3): 19-24. (in Russian)
Selyatitskaya V.G., Androsova E.N., Pal'chikova NA., Kuz'minova O.I. Rats adrenal cortex reactions on balneal factor influence at chronic inflammation. Fundamental'nye issledovaniya. 2011; 10-13: 593-7. (in Russian) Alchinova I.B., Arhipova E.N., Medvedeva YU.S. et al. Differentiation of cellular-metabolic effects in mice. In book: Space scientific project "Bion-M1": biomedical experiments and research [Kosmicheskij nauchnyj proekt «Bion-M1»: mediko-biologicheskie eksperimenty i issledovaniya]. Ed. by A.I. Grigor'ev. M.: Izdatelstvo GNC RF-IMBP RAN; 2016; 427-35. (in Russian) Medvedeva YU.S., YAkovenko E.N., Alchinova I.B. Evaluation of radiation-induced apoptosis in bone marrow cells and changes in composition of the blood plasma of mice after exposure to submagnetosphere orbit (biosatellite BION-M №1). Patogenez. 2016; 14(2): 3842. (in Russian)
Karganov M., Shenkman B., Sychev V.et al. Differentiation of changes in serum homeostasis of laboratory animals after spaceflight on board of the BION-M1 satellite. In abstract book "40th COSPAR Scientific Assembly". Moscow; 2014: F4.6-7-14. (in Russian) Mukherjee D., Coates Ph.J., Lorimore S.A., Wright E.G. Responses to ionizing radiation mediated by inflammatory mechanisms. Journal of Pathology. 2014; 232(3): 289-99.
Поступила 13 августа 2019 Принята в печать 28 февраля 2020
