CC BY
43
ПУТИ ПРОНИКНОВЕНИЯ МИРАЦИДИЯ И ДЕЙСТВИЕ ЛИЧИНОЧНЫХ СТАДИЙ FASCIOLA HEPATICA
НА ТКАНИ LYMNAEA TRUNCATULA И LYMNAEA PEREGER
Мкртчян М.Э., Филимон М.Г. *,Филимонов Н.Ю. **
*ФГОУ ВПО Ижевская ГСХА **С.- Петербургский государственный университет
Введение. Фасциолез - широко распространенное заболевание многих видов сельскохозяйственных и диких животных. Печеночная двуустка (Fasciola hepatica L., 1758) - один из наиболее известных представителей данного рода. Несмотря на большой арсенал современных антгельминтиков, применяемых при фасциолезе, они не обеспечивают благополучие хозяйств по трематодозам. Основная борьба должна быть направлена на разрыв эпизоотической цепи и предупреждение заражения животных гельминтами. Дезинвазия внешней среды позволяет прервать биологический цикл фасциол на стадиях яйца и адалескария. Однако важнейшим фактором
распространения трематод являются промежуточные хозяева, в организме которых происходит развитие и партеногенетическое деление личиночных стадий.
Для понимания эпизоотической роли моллюсков необходимо знать характер и их взаимоотношения с паразитом. В качестве промежуточного хозяина Fasciola hepatica использует моллюсков рода Lymnaea s. L, из которых малый прудовик (Lymnaea truncatula) является облигатным хозяином, а вытянутый прудовик (Lymnaea pereger) считается факультативным хозяином для данного вида. Они совместно встречаются в природных ареалах и оба этих вида подвержены заражению печеночной двуусткой. Исходя из вышесказанного мы задались целью определить степень взаимодействия спороцист F. hepatica с тканями моллюсков-хозяев Lymnaea truncatula и Lymnaea pereger. Основными задачами исследований явились:
1. Оценить характер и степень повреждения тканей при проникновении личинок F. hepatica .
2. Уточнить локализацию спороцист F.hepatica в промежуточных хозяевах на разных сроках после экспериментального заражения.
3. Выяснить, насколько выражены морфологические изменения в тканях моллюска на разных этапах развития спороцисты.
Материалы и методы. Для решения поставленных задач проводили экспериментальное заражение моллюсков с последующими гистологическими исследованиями. Материалом для исследования служили прудовики, выращенные в лабораторных условиях и свободные от паразитов. Мирацидии для заражения культивировались из яиц фасциол, полученных при вскрытии печени КРС. Моллюсков заражали неограниченным количеством мирацидиев в течение 3 часов, затем их фиксировали раствором Буэна через 3 часа, 1, 3, 4,
286
8 и 14 дней после начала заражения. Гистологические исследования проводили по общепринятой методике, с окрашиванием препаратов гематоксилином Эрлиха с эозином.
Результаты исследований. Результаты гистологических исследований показали, что в течение первых 3 ч мирацидии внедряются через покровы головы и мантии, а также боковую и наружную поверхность ноги.
У незараженных моллюсков покровный эпителий бывает призматическим (цилиндрическим) клетки, которого плотно прилегают друг к другу.
При внедрении мирацидия в моллюска происходит нарушение целостности эпителиального слоя, и выпячивание соединительной ткани наружу. Однако место проникновения удается выявить не во всех случаях, даже при осмотре серийных срезов. Это указывает на то, что за очень короткое время поврежденные ткани моллюска способны полностью регенерировать.
Образовавшаяся спороциста локализуется в соединительной ткани на расстоянии 300 - 500 мкм от места внедрения. У спороцисты уже заметна тонкая пластинка тегумента, а также видны многие личиночные органы (эозинофильная масса, пигментные бокалы).
Наши исследования показали, что спороцисты F.hepatica могут быть не только тканевыми, но и полостными паразитами. Так, на 1-3 сутки после заражения спороциста проникает под покровные эпителии L.pereger и L.truncatula и локализуются в легком, губе мантии и почке. На этом этапе у личинки происходит дегенерация органов и незначительное увеличение размеров, полость тела спороцисты не выражена. На данном этапе развития личинки, в тканях хозяина нарушения целостности не обнаруживается.
Начиная с 3-4 дня пути развития спороцист в L.pereger и L.truncatula резко отличаются. В L.truncatula личинка увеличивается в размере и у нее обнаруживаются более крупные зародышевые шары.
Несмотря на то, что в литературе имеются данные о том, что спороцисты F.hepatica в организме L.pereger могут достичь стадии церкария, с последующим развитием во внешней среде до инвазионной личинки (адолескария) (Н.Д.Круглов, 2005; Н.Ю.Филимонов, 2007), наши исследования показали, что уже на 3-4-е сутки после заражения вокруг большинства спороцист формируется капсула, которая образована фибробластами самого хозяина. При этом происходит гибель личинки. Подобная инкапсуляция отмечена А.М.Сазановым (1972) в результате экспериментального заражения L.stagnalis печеночной двуусткой и рассматривается как защитная реакция промежуточного хозяина.
На 8-е сутки развития в L. truncatula спороцисты имеют вытянутую форму тела и обладают полостью, в которой находятся как зародышевые шары, так и сформированные редии. У последних хорошо выражены мускулистая глотка и кишечник. Таким образом, в облигатном промежуточном хозяине начиная с 4-го дня, происходит бурный рост
287
спороцист, который заканчивается формированием редий 1-го поколения. На 8-й день после заражения у прудовиков вида L. truncatula обнаруживаются свободные редии в миксоцеле моллюска. В организме L.pereger редии за этот же промежуток времени не созревают, и при исследовании обнаруживаются лишь небольшое количество незрелых спороцист.
Более зрелые личинки в возрасте 8-ми суток локализуются в тех же органах хозяина, где и молодые спороцисты, что не согласуется с распространённым мнением о расселительной роли спороцист F. hepatica (Preveround-Sindou, 1994). Уже через 8 дней дочерние клетки покидают материнскую спороцисту и расселяются по телу моллюска, что указывает на миграцию партенит F.hepatica именно на фазе редии, а не спороцисты.
Заключение. Результаты наших исследований показали, в момент внедрения мирацидия отмечаются лишь локальные нарушения целостности эпителиальных и соединительных тканей. Мы установили, что паразитирование спороцист F. hepatica не приводит к обширному разрушению тканей моллюсков, а незначительные повреждения быстро восстанавливаются. На наш взгляд, это связано с высокой регенеративной способностью тканей хозяина. В связи с этим, спороцисты F. hepatica не оказывают заметного влияния на жизнеспособность моллюсков. Необходимо отметить, что факультативные хозяева L.pereger способны ограничивать развитие спороцисты за счет инкапсуляции и дальнейшей её гибели.
Литература: 1. Круглов Н.Д. Моллюски семейства прудовиков Европы и Северной Азии. [- Смоленск, 2005 - 410 с. 2. Сазанов А.М. //Труды Всесоюз. ин-та гельминтол. им. К. И. Скрябина, 1972 - Т. 19 - C. 163-169. 3. Филимонов, Н.Ю. //Материалы IV Всеросс. школы по теоретич. и морск. паразитологии. Калининград, 2007. С. 199-201. 4. Preveraud-Sindou, M. Comparison of the migrations of Fasciola hepatica sporocysts in Lymnaea truncatula and other related snail families. / M.Preveraud-Sindou, G.Dreyfuss, D.Rondelaud - Parasitol. Res., 1994 - Vol. 80 - P. 342-345.
Routes of penetration of miracidia and effects of F. hepatica larval stages on tissues of Lymnaea truncatula and Lymnaea pereger. Mkrtchyan M.A., Filimon M.G., Filimonov N.Yu. Izhevsk State Agricultural Academy. Saint-Peterburg State University.
Summary. As a result of the carried out experiments it was shown that local disturbances in integrity of epithelial and connective tissues were noted at the moment of miracidia introduction. Parasitizing of F. hepatica sporocysts didn’t result in extensive destruction of mollusk tissues and small legions rapidly restored. The latter was connected with high regenerative ability of host tissues. Thus F. hepatica sporocysts didn’t significantly effect on vital activity of mollusks.
288
