CC BY
123. Виноградов В.М., Урюпов Ю.Ю. Гипоксия как фармакологическая проблема // Фармакология и токсикология, 1985. - Т. 48. - № 4. - С. 9-20.
4. Герман С.В. Метгемоглобинемии: особенности патогенеза и клиники//Клиническая медицина, 1999. - № 4. - С. 9-13.
5. Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Антигипоксанты в профилактике и терапии патологий ЦНС. - М, 1995. - 272 с.
6. Ещенко Н.Д., Путилина Ф.Е., Галкина О.В. Реакции, связанные с энергетическим метаболизмом мозга, и их адаптивные изменения при гипоксии // Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция: Материалы Третьей Российской конференции 7-9 октября 2002 г. - М.: Издательство РАМН, 2002. - С. 48.
7. Зузук Б.М., Куцик. Р.В., Томчук Ю.И. др. Гинкго билоба: Аналитический обзор // Провизор, 2001. - № 22. - С. 30-32.
8. Иванова И.А., Бобков Ю.Г. Сравнительное изучение некоторых препаратов на различных моделях гипоксии мозга // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1984. - Т. 98. - № 11. - С. 567-570.
9. Костющенков В.Н., Фаращук Н.В. Влияние фармакологических средств на развитие гемиче-ской гипоксии // Фармакология и токсикология, 1982. - № 1. - С. 76-79.
10. Макаров В.А., Реккандт С.А. Патология: Учебник. - Пятигорск, 1998. - 375 с.
11. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2-х т. — 14-е изд., перераб. и доп. / М.Д. Машковский. — М.: Новая волна, 2000.
12. Петренко Ю.М., Шашурин Д.А., Титов В.Ю. Новые источники окиси азота, их возможная физиологическая роль и значение // Экспериментальная и клиническая фармакология, 2001. — Т. 64. — № 2. — С. 72-79.
13. Хватова Е.М., Загоскин П.П., Фокин В.М. и др. Состояние энергетики мозга и активность ферментативных процессов в разных условиях гипоксии // Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция: Материалы Третьей Российской конференции 7-9 октября 2002 г. — М.: Издательство РАМН, 2002. — С. 139.
14. Тино Г., Гриппи М.А. Транспорт газов к периферическим тканям и обратно. Патофизиология легких. — 3-е изд., испр. — М.-СПб.: «Издательство БИНОМ»; «Невский диалект», 2001.- С. 144-162.
15. Шевченко Ю.Л. Гипоксия адаптация, патогенез, клиника. — СПб.: ООО «ЭЛБИ-СПб», 2000. — 384 с.
16. Шугалей И.В., Целинский И.В., Малинина Т.В. О токсическом действии нитрита натрия // Гигиена и санитария, 1991. — № 4. — С. 49-53.
Материал поступил в редакцию 24.05.05.
T.Ye.Onbysh, V.Ye.Pogoreliy, L.M.Makarova, N.Ye.Slyunkova
COMPARATIVE STUDY OF ANTIHYPOXIC ACTIVITY OF NEUROPROTECTIVE AGENTS AT ADMINISTRATION OF METHEMOGLOBIN FORMER
State Pharmaceutical Academy of Pyatrigorsk It was experimentally shown that extracts of ginkgo biloba, vinpocetine, nicergoline, and nimodipine make life span of animals longer at hemic hypoxia but cinnarizine and picamilonum do not influence this indicator.
УДК 615.9:615.281:577.112.382-389
Л.Б.Бондаренко, Н.А.Сапрыкина*, В.Н.Коваленко
ПУЛ СВОБОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ВВЕДЕНИИ РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ ПИРАЗИНАМИДА
Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины, Киев
В условиях эксперимента на крысах проведена клиническая оценка влияния пиразинамида на метаболизм аминокислот, протеинов, нуклеотидов, нуклеиновых кислот и энергетический обмен.
Ключевые слова: пиразинамид, пул свободных аминокислот, метаболизм.
Введение. В процессе интенсивной химиотерапии туберкулеза широко используются пиразинамид и его производные [1]. Противоречи-
* Фрагмент диссертационной работы
вые результаты, полученные разными авторами при оценке его гепатотоксичности в экспериментальных и клинических исследованиях [2], обусловили необходимость более детального изучения степени и механизмов отрицательного
воздействия данного соединения на организм с целью оптимизации режимов химиотерапии.
Кроме того, длительное применение антибактериальных препаратов приводит к различным функциональным и биохимическим сдвигам [3]. Традиционные биохимические исследования позволяют выявить такие нарушения на этапе, когда их коррекция уже представляет значительные трудности. Для раннего обнаружения возможных отклонений метаболических преобразований в организме в целом и его отдельных органах одним из наиболее чувствительных показателей является пул свободных аминокислот [4-6]. Свободные аминокислоты участвуют в интеграции регуляторных и адаптивных систем организма [7]. Исследование изменений их содержания характеризует состояние внутренних резервов организма, степень дезинтеграции метаболизма в целом и адаптивные возможности организма и его отдельных органов [6].
Целью данной работы являлось изучение пула свободных аминокислот печени крыс при введении различных доз пиразинамида.
Материалы и методы исследований. В экспериментах использовали самцов белых крыс линии Вистар массой тела 160-200 г разведения вивария Института фармакологии и токсикологии АМН Украины, которых содержали в стандартных условиях с соблюдением пищевого и водного режимов.
В опытах использовали пиразинамид в таблетках по 500 мг действующего вещества в каждой производства Борщаговского химико-фармацевтического завода (Украина).
После предварительного карантина на протяжении 10-ти дней крыс разделяли на опытные и контрольные группы методом рандомизации.
Водный раствор пиразинамида в дозах 1000 и 2000 мг/кг массы тела вводили внутрижелудоч-но металлическим зондом самцам крыс (соответственно 1 и 2 группа) на протяжении 60 суток. Контрольной группе крыс внутрижелудоч-но вводили дистиллированную воду.
В течение всего времени введения препарата наблюдали за состоянием животных, их внешним видом и двигательной активностью.
На следующий день после окончания введения пиразинамида животных умерщвляли методом цервикальной дислокации под легким эфирным наркозом. Выделяли печень и сыворотку крови. Печень отмывали через воротную вену охлажденным 1% раствором КС1 и гомогенизировали в 0,1М К-фосфатном буфере (рН 7,4) в соотношении 1:3. Все процедуры выполняли с соблюдением холодового режима (1 +4°С).
Полученный гомогенат оставляли стоять на 30 мин при 1 +4°С. После этого к гомогенату
прибавляли равный объем 3% сульфосалицило-вой кислоты и оставляли стоять на 10 мин при 1 +4°С. Образовавшийся осадок отделяли центрифугированием (5000£, 10 мин, 4°С). Супернатант содержал пул свободных аминокислот печени. Содержание свободных аминокислот определяли на аминокислотном анализаторе ААА-881 (Чехия).
Содержание гексоз в сыворотке крови определяли антроновым методом [8].
Полученные данные подвергали статистической обработке согласно общепринятым методам вариационной статистики. Достоверность изменений оценивали с помощью 1>критерия Стьюдента, считая разницу достоверной при значении р < 0,05.
Результаты и обсуждение. Исследование влияния пиразинамида на пул свободных аминокислот печени крыс самцов показало (табл.), что наибольшее количество изменений данных показателей наблюдается при условии введения препарата в дозе 1000 мг/кг. В данном случае достоверные отличия от нормы отмечались по содержанию 16 отдельных аминокислот и по общей сумме аминокислот.
Дальнейшее увеличение дозы препарата до 2000 мг/кг вело к уменьшению числа достоверных отличий — достоверно изменялось содержание лишь 9 аминокислот. При этом по содержанию орнитина, глутаминовой кислоты и глу-тамина с увеличением дозы отмечали изменение характера эффекта пиразинамида на данные аминокислоты. Учитывая тот факт, что эти соединения являются ключевыми в энергетическом, углеводном, азотистом обменах и биосинтезе пиримидинов (и последующего образования нуклеиновых кислот) [9], отмеченные нами отличия в эффектах различных доз пиразинами-да, возможно, обусловлены серьезными нарушениями метаболических преобразований в организме при дозе 2000 мг/кг, которые уже не могут быть, даже частично, компенсированы его защитными и адапторными системами.
Это предположение подтверждается также и изменениями индекса Фишера (Вал+Лей+Илей/ Фен+Тир), который характеризует уровень развития эндотоксикоза в организме [10]: в норме он составляет 2,72, при дозе 1000 мг/кг — 1,34, а при дозе 2000 мг/кг — 0,77 Увеличение суммы свободных аминокислот, как соединений с низкими и средними молекулярными массами, также является одним из ведущих показателей развития эндотоксикоза [10].
Кроме того, соотношение количества аминокислот с разветвленной боковой цепью к аминокислотам, содержащим ароматические группировки, характеризует уровень печеночной эн-
цефалопатии, вызванной изменениями концентраций данных пяти аминокислот, которые, поступая из печени в плазму крови, конкурируют между собой за проникновение через гематоэн-цефалический барьер [11]. Введение пиразин-амида обусловливает в печени возникновение синдрома дисаминоцидемии, заключающегося в дисбалансе между содержанием ароматических аминокислот и аминокислот с разветвленной структурой. При этом изменения коэффициента Фишера происходят главным образом за счет повышения уровня фенилаланина и тирозина при относительно более слабо выраженных колебаниях уровней валина, лейцина и изолейцина.
При введении пиразинамида изменяется и соотношение незаменимых аминокислот к заменимым: в норме оно составляет — 0,205, при дозе 1000 мг/кг - 0,367, а при дозе 2000 мг/кг - 0,381. При этом увеличение соотношения происходит в основном за счет роста содержания незаменимых аминокислот, тогда как количество большинства заменимых аминокислот остается неизменным или незначительно повышается при дозе 1000 мг/кг пиразинамида, а при 2000 мг/кг — даже снижается (изменения содержания Орн, Асп, Глу, Про, Глн). Такие изменения свидетельствуют о значительных нарушениях процессов биосинтеза аминокислот и протеинов [9]. Способность пи-
разинамида воздействовать на процессы биосинтеза белка подтверждаются и результатами исследования эффекта данного соединения на включение С14-глицина в белки печени [12].
К тому же, поскольку транспорт незаменимых аминокислот происходит при участии глу-татиона, встроенного в клеточную мембрану, изменение уровня незаменимых аминокислот может быть обусловлено нарушением их транспорта за счет глутатион-опосредованного цикла [9]. Снижение уровня глутатиона под влиянием пиразинамида было отмечено в работах ряда авторов [13]. Наблюдаемое в наших экспериментах при введении 2000 мг/кг пиразинамида достоверное снижение содержания глутаминовой кислоты, вместе с глицином и цистеином входящей в состав глутатиона, также может опосредовать ингибирующий эффект данного препарата на биосинтез глутатиона.
Увеличение суммарного количества глюко-генных аминокислот при введении обеих доз пи-разинамида может отразиться на интенсивности процессов образования гликогена в печени, глюконеогенеза и уровне глюкозы в плазме крови. Это предположение нашло свое подтвердже-ние при изучении нами уровня глюкозы в сыворотке крови: в норме он составлял 125,95+1,70 мг%, при введении 1000 мг/кг пиразинамида —
Таблица
Содержание свободных аминокислот и их амидов печени крыс самцов в норме и при введении различных доз пиразинамида (M±m, n = 5, мг/100 г влажной ткани)
Вещество Норма Пиразинамид 1000 мг/кг Пиразинамид 2000 мг/кг
Лизин 7,30+0,86 21,80+1,74* 9,40+1,23
Гистидин 5,80+0,46 12,6+0,86* 9,30+0,43*
Аргинин 0,40+0,06 0,10+0,01 0,60+0,01
Орнитин 1,70+0,06 12,50+1,14* 0,70+0,06*
Аспарагиновая кислота 20,00+2,31 20,40+0,56 9,40+0,33*
Треонин 4,20+0,27 10,90+0,83* 5,60+0,76
Серин 3,30+0,12 16,50+1,34* 8,70+1,20*
Глутаминовая кислота 38,00+1,57 50,50+1,58* 26,10+1,60*
Пролин 3,20+0,36 4,00+0,37 2,10+0,66
Глицин 15,40+1,45 20,30+1,24* 17,80+1,13
Аланин 26,20+1,21 45,30+1,98* 29,00+5,51
Цистеин 0,60+0,19 1,10+0,21 1,20+0,10*
Валин 2,60+0,46 8,81+0,87* 4,00+0,80
Метионин 1,60+0,42 5,20+0,56* 2,80+0,45
Изолейцин 2,00+0,35 5,90+0,60* 2,50+0,45
Лейцин 5,20+0,11 15,30+0,91* 5,60+0,45
Тирозин 1,90+0,27 13,40+1,34* 9,00+0,70*
Фенилаланин 1,70+0,41 8,40+0,76* 6,70+0,58*
Глутамин 39,70+3,57 56,90+8,00 18,00+2,00*
Сумма аминокислот 196,50+3,66 329,00+18,00 168,50+17,00
Примечание. * — p < 0,05 по отношению к норме
141,84+4,32 мг% (р < 0,05), при введении 2000 мг/ кг пиразинамида — 131,06+8,96 мг% (р > 0,05). Снижение уровня глюконеогенеза при большей дозе препарата, очевидно, связано с усугублением процессов эндотоксикоза и исчерпанием адаптационных возможностей энзиматиче-ских систем печени. Отрицательное влияние пиразинамида на гликогенобразовательную функцию печени отмечали и другие авторы [3]. Кроме того, результаты экспериментов с гепатоцитами in vitro показали, что пиразинамид (0,25-5,0 mM) потенциировал триптофан-опосредованное ин-гибирование глюконеогенеза [14].
При введении пиразинамида, очевидно, серьезно нарушается и способность печени поддерживать нормальный уровень процессов расщепления избытка аминокислот в цикле мочевины, о чем свидетельствуют изменения содержания орнитина и глутамина. К тому же глутамин является важнейшей транспортной формой аммиака от всех органов в плазму крови [9]. При снижении его концентрации частично эту функцию могут выполнять свободные аланин, серин, глицин и аспарагиновая кислота [9]. Однако при максимальной дозе пиразинамида содержание аспарагиновой кислоты и глутамина достоверно вдвое снижается по сравнению с нормой. Это не может не отразится на ходе процессов обмена азота в печени и организме в целом.
Триптофан, серин, пролин и тирозин способны выступать в качестве депо NO, который не только отвечает за релаксацию сосудов, но и реагирует с атомами железа (в составе гема и в свободном состоянии), с супероксиданионами, молекулами кислорода, перекисью водорода, органическими перекисями и перекисными радикалами [15]. Таким образом, отмеченные нами изменения содержания серина и тирозина при введении обеих доз пиразинамида отразятся также на уровне NO, состоянии процессов перекисно-го окисления и функционировании сосудистой системы, печени, легких и организма в целом [16]. Полученные результаты вполне согласуются с данными других авторов, обнаруживших ре-гуляторное влияние пиразинамида на уровень NO в организме [17]. Кроме того, свободный тирозин способен взаимодействовать с пиразин-амидом и его производными и модифицировать их биологический эффект [18].
При введении пиразинамида происходят достоверные изменения содержания аминокислот, включенных в процессы биосинтеза пуринов и пиримидинов (аспарагиновой кислоты, глицина, глутамина, гистидина, серина) [9], следовательно, изменения их содержания могут отразиться на процессах биосинтеза нуклеотидов, нуклеиновых кислот и состоянии хромосомного
аппарата клетки. Такой эффект пиразинамида, возможно, связан с его регулирующим влиянием на обмен НАД [19] и биосинтез полинуклеиновых кислот в ядре клетки [20].
Согласно данным ряда авторов ранними проявлениями нарушений глубинных процессов репарации ДНК на уровне реакций ее метилирования могут являться нарушения концентраций свободных цистеина и метионина [21], отмеченные и в наших экспериментах.
Пиразинамид в исследуемых дозах вызывает, очевидно, серьезные нарушения не только обменов нуклеинових кислот, аминокислот и протеинов, но и энергетического обмена. Выявленные нами изменения содержания глицина, сери-на, цистеина и аланина могут являтся следствием нарушения процессов их обмена, тесно связанных с процессами гликолиза [9], а изменения содержания аспарагиновой и глутаминовой кислот, глутамина, пролина, аргинина — с процессами цикла Кребса [9]. Полученные результаты согласуются с данными других авторов, изучавших влияние пиразинамида на энергетический обмен [3, 14, 20].
Что касается фенилаланина и тирозина, то печень является основным местом их метаболизма [9]. Пораженная печень не может полностью катаболизировать данные аминокислоты, и они накапливаются в тканях и сыворотке крови. Наибольшие изменения по фенилаланину и тирозину были выявлены при дозе 1000 мг/кг пи-разинамида. При этой же дозе было наиболее снижено и соотношение Фен/Тир, отражающее интенсивность процессов гидроксилирования фенилаланина до тирозина именно в печени. В норме этот показатель составлял 0,895, при дозе 1000 мг/кг - 0,627, а при дозе 2000 мг/кг - 0,744, что свидетельствует о значительных нарушениях функционирования фенилаланин-гидроксила-зы в печени при введении пиразинамида.
Ряд авторов показал, что повышенные концентрации таурина, изолейцина, лейцина и ва-лина способны нормализовать углеводный обмен в печени при ее токсическом поражении [22]. Одновременное увеличение содержания ва-лина, лейцина и изолейцина может в свою очередь активировать процессы липогенеза из глюкозы и стимулировать процессы биосинтеза белков в печени [23]. Очевидно, таким образом, и реализуется отмеченное другими авторами стимулирующее влияние пиразинамида на биосинтез белка в печени [12]. Учитывая это, отмеченное нами увеличение содержания валина, изо-лейцина, лейцина при введении пиразинамида в дозе 1000 мг/кг может рассматриваться как адаптационная реакция организма на поступление ксенобиотика.
На способность пиразинамида стимулировать адаптационные системы организма указывает и увеличение содержания метионина в пуле печени. Данная аминокислота может выступать в качестве антиоксиданта и иммуно-модулятора [7]. Кроме того, метионин является предшественником таурина — антиоксиданта и стабилизатора мембран. Поэтому его накопление можно рассматривать как защитный механизм [7]. Из метионина в процессе метаболических преобразований синтезируются также и полиамины — стимуляторы и регуляторы пролиферативных процессов [7]. Очевидно, выявленные изменения содержания данной аминокислоты под влиянием 1000 мг/кг пиразинамида могут привести к стимуляции адаптивных перестроек организма и его иммунной системы. При дальнейшем увеличении дозы пира-зинамида происходит исчерпание адаптационных возможностей организма.
При введении пиразинамида в дозе 1000 мг/кг может нарушаться биосинтез S-аденозилгомо-цистеина, гомоцистеина и метионина. На это указывают изменения содержания метионина, глицина и серина — аминокислот, участвующих в обмене данного соединения [9]. Следствием повышения концентрации гомоцистеина является накопление гидроперекисных радикалов, способных поражать клетки эндотелия [21].
Заключение. Изучение изменений содержания свободных аминокислот в пуле печени крыс при введении различных доз пиразинамида позволило провести комплексную оценку влияния данного соединения на метаболизм аминокислот, протеинов, нуклеотидов, нуклеиновых кислот и энергетический обмен. При введении 1000 мг/кг пиразинамида наблюдается наибольшее количество изменений данных показателей, часть из которых может рассматриваться в качестве компенсаторного ответа организма на действие данного ксенобиотика. Увеличение дозы пиразинамида до 2000 мг/кг ведет к исчерпанию адаптационных возможностей организма.
Список литературы
1. Wada M. The adverse reactions of anti-tuberculosis drugs and its management // Nippon Rinsho, 1ЯЯ8. - V. S6. - M 12. - P. З0Я1-З0Я5.
2. Сливка Ю.И. Сравнительная характеристика гепатотоксичности изониазида, рифампицина и пиразинамида // Фармакол. токсикол., 1ЯSЯ. — Т. S2. - M 4. - С. S2-SS.
3. Характер Ж.З. Действие туберкулостати-ческих препаратов на углеводно-фосфорный обмен в печени и легких, зараженнях туберкулезом животных //Вопр. мед. хим., 1Я6S. - Т. 14. - M 6. -С. 601-60S.
4. Fau D. Imbalance through lysine excess and correction by a threonine supplement, as a function of nutritional status //Ann. Nutr. Aliment., 1975. — V. 29. — № 4. — P. 321-335.
5. Li J.Y. Sequential changes of free amino acid pool in burned rabbits // Zhonghua Zh, 1991. — V. 7. — № 3. — P. 208-211.
6. Нечипоренко Н.А., Нефедов Л.И., Климович И.И. Изменение белкового обмена и фонд свободных аминокислот при раке мочевого пузыря // Вопр. он-кол, 1990. — Т. 36. — № 10. — С. 1201-1205.
7. Павлов В.А. Влияние микобактерий на адаптивную перестройку в организме морских свинок при длительном воздействии на них ПАУ-содер-жащих веществ // Пробл. туберкулеза, 1998. — № 1. — С. 51-53.
8. Колб В.Г., Камышников В. С. Клиническая биохимия. — Минск: Беларусь, 1976. — 312 с.
9. Marks D.B. Biochemistry / Ed.Williams & Wilkins. Baltimore, 1994. — P. 234-249.
10. Ерюхин И.А., Шашков Б.В. Эндотоксикоз в хирургической практике. — СПб. : Логос, 1995. — 304 с.
11. Fisher J.E., Rosen H.M., Ebeid A.M. et al. The effect ofnormalization of plasma amino acids on hepatic encephalopathy in man // Surgery, 1976. — V. 80. — № 1. — P. 77-91.
12. Григорян В.Г., Кирошка В.С. Влияние ПАСК и пиразинамида на некоторые показатели обмена белка в митохондриях печени морских свинок // Вопр. мед. хим., 1973. — Т. 19. — № 5. — С. 480-482.
13. Dhuley J.N. Hepatoprotective effect of rhinax on antitubercular drug-induced hepato-toxicity in rats // Hindustan Antibiot. Bull., 2002. — V. 44. — № 1-4. — P. 53-59.
14. Cook J.S., Pogson C.I. Tryptophan and glucose metabolism in rat liver cells.The effect of DL-6-chlo-rotryptophan, 4-chloro-3-hydroxyanthranilate and pyrazinamide //Biochem. J., 1983. — V. 214. — № 2.
— P. 511-516.
15. Степуро И.И. Роль аминокислот и белков в обмене оксида азота // Матер.конф. «Аминокислоты и их производные в биологии и медицине».
— Гродно, 2001. — С. 104.
16. Zhang H.Y., Han D.W., Wang X.G. et al. Experimental study on the role of endotoxin in the development of hepatopulmonary syndrome // World J. Gastroenterol., 2005. — V 11. — № 4. — P. 567-572.
17. Wanchu A., Bhatnagar A., Khullar H. et al. Antitubercular therapy decreases nitric oxide production in HIV/TB coinfectedpatients//BMC Infect. Dis., 2002.
— V. 2. — № 1. — P. 15-17.
18. Herman R.P., Weber M.M. Isoniazid interaction with tyrosine as a possible mode of action of the drug in mycobacteria // Antimicrob. Agents Chemother, 1980. — V. 17. — № 2. — P. 170-178.
19. Shibata K., Fukuwatari T., Sugimoto E. Effects
of dietary pyrazinamide, an antituberculosis agent, on the metabolism of tryptophan to niacin and of tryptophan to serotonin in rats // Biosci. Biotechnol. Bio-chem, 2001. - V. 65. - № 6. - P. 1339-1346.
20. Nasu S, Yamaguchi K., Sakakibara S. et al. The effect of pyrazines on the metabolism of tryptophan and nicotinamide adenine dinucleotide in the rat. Evidence of the formation of a potent inhibitor of amino-carboxy-muconate-semialdehyde decarboxylase from pyrazinamide // Biochim. Biophys. Acta, 1981. - V. 677. - № 1. - P. 109-119.
21. Dimitrova C.R., DeGroot K., Myers A.K. et al. Estrogen and homocysteine // Cardiovascular Res., 2002. - V. 53. - P. 577-588.
22. Мискевич Д.А. Влияние введения некоторых неполярных аминокислот на состояние углеводного обмена в печени крыс на фоне тиоацетамидного гепатита //Матер.конф. «Аминокислоты и их производные в биологии и медицине». — Гродно, 2001.
— С. 79-80.
23. Данченко Е.О., Нехайчик Е.Н. Инсулино-подобный эффект растительного гепатотропно-го препарата, содержащего аминокислоты с разветвленными радикалами//Матер.конф. «Аминокислоты и их производные в биологии и медицине».
— Гродно, 2001. — С. 32-33.
Материал поступил в редакцию 10.06.05.
L.B.Bondaremko, N.A.Saprykina, V.N.Kovalenko
POOL OF FREE AMINO ACIDS IN RAT LIVER AT A NORMAL RATE AND AT ADMINISTRATION OF
DIFFERENT DOSES OF PYRAZINAMIDE
Institute of Pharmacology and Toxicology, Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kiev
In experiment on rats a clinical assessment was conducted of the impact of pyrazinamide on metabolism of aminoacids, proteins, nucleotides, nuclein acids and energy metabolism.
УДК 615.31.099.036.11.07:547.962.3
А.С.Лукьянов
КОНФОРМАЦИОННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ОВАЛЬБУМИНА КАК ПОКАЗАТЕЛЬ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ
Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова
Анализируются экспериментальные данные по воздействию на овальбумин in vitro химических соединений, ис-пользованых в токсикологических исследованиях по международной программе MEIC. Воздействие на овальбумин сравнивается с острой токсичностью соединений для человека и животных и различных культур клеток. Материалы работы подтверждают гипотезу о том, что токсический эффект на клетки организма для большинства соединений определяется неспецифическим связыванием вне и внутриклеточных белков, высказанную ранее Б. Эк-волом, а также перспективность использования подобных тестов для замены экспериментов на животных в токсикологии.
Ключевые слова: альтернативы экспериментам на животных, острая токсичность, овальбумин, денатурация, неспецифическое связывание белков.
Исследования были выполнены в рамках международной программы MEIC (multicentre evaluation of in vitro cytotoxicity), организованной скандинавским обществом клеточных токсикологов в 1989 г. [1]. Работа завершилась в 1996 г. и по ее итогам было опубликовано четыре специальных выпуска журнала ATLA [2-9]. Небольшая часть нашей работы вошла в итоговые материалы [5, 7]. Цель программы состояла в оценке возможности определять острую токсичность химических соединений для человека с помощью так называемых альтернативных методов, т.е. мето-
дов, в которых не используются живые высокоорганизованные животные. Приоритет имеют альтернативные методы на культурах клеток человека и млекопитающих и именно они в наибольшей мере были представлены в программе МЕ1С. В программе приняли участие более тридцати лабораторий, оценено более 60 альтернативных методов. Комиссия и рабочая группа Программы представила список из 50 химических соединений, токсичность которых необходимо было определить [1]. Принцип подбора веществ - максимальное разнообразие и наличие
