CC BY
27УДК: 619:578:616.921.5
Зеленкова Г. А., Карантыш Г. В., Тамбиев Т. С., Малышева Л. А., Капелист И. В., Ермаков А. М.
ПТИЧИЙ ГРИПП: ЭКОЛОГИЯ, МОРФОЛОГИЯ, МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ ПАТОГЕННОСТИ ВИРУСА, СОВРЕМЕННАЯ ЭПИЗООТИЧЕСКАЯ СИТУАЦИЯ
Ключевые слова: птица, вирус гриппа А, экология, морфология, патогенность вируса, эпизоотическая ситуация, Ростовская область.
Резюме: Новые угрозы возникновения пандемий, связанных с вирусом гриппа птиц у людей, определяют важность контроля за распространением данного заболевания среди животных. В настоящей статье представлен анализ данных литературы об эпизоотиях, вызванных вирусом птичьего гриппа на протяжении ХХ-ХХ1 веков. Рассмотрены проблемы экологии вируса гриппа А, межвидовой передачи и геномного разнообразия мембранных белков возбудителя инфекции. Представлены последние данные о строении, молекулярных маркерах патогенности и жизненном цикле вируса гриппа А. Описаны современная эпизоотическая ситуация по птичьему гриппу в нашей стране и за рубежом, а также меры контроля и профилактики распространения данной инфекционной патологии, предпринимаемые, в частности, на территории Ростовской области.
Введение
В последнее время во всем мире заметно изменилась эпизоотическая ситуация: вновь появляются давно известные и новые заразные болезни [1]. Причиной возникновения эмерджентных ситуаций служат изменения взаимосвязей и взаимоотношений в системе хозяин-патоген-среда [2]. Этому в полной мере соответствует ситуация с птичьим гриппом.
В связи с высокой контагиозностью гриппа птиц инфекция быстро распространяется между фермами механическим путем и факторами непрямого контакта, например, через контаминированное оборудование, транспорт, корма, клетки. В отличие от воздушно-капельной передачи инфекции при классическом гриппе человека за счет прямого, близкого контакта с источником возбудителя в данном случае преобладает фекально-оральное заражение и опосредованная передача инфекции с непрямым контактом: один грамм помета, зараженного вирусом Н5Ш, способен заразить 1 млн. голов птицы.
С появлением в 1997 г высокопатогенной формы птичьего гриппа Н5Ш у человека (носителем был домашний гусь) [3] повышенное внимание исследователей направлено к дикой птице, как источнику всех естественных вариантов вируса гриппа А. Крупная эпизоотия среди диких птиц была зарегистрирована в 1961 г. в Южной Африке, где эпизоотическим агентом был высокопатогенный для всех видов птиц вирус гриппа Н5№ [4]. Передача вируса гриппа людям от
диких птиц и других источников возбудителя инфекции вызвала 4 основные пандемии за последние два столетия: H1N1 (испанский грипп) - в 1918; H2N2 - в 1957; H3N2 - в 1968 и H1N1 - в 2009 гг. [5-7].
В статье представлены данные о причинах высокого риска появления новых штаммов вируса, приводящих к пандемиям у человека: строении и экологии вируса гриппа А. Описана современная эпизоотическая ситуация по гриппу птиц. Перечислены основные противоэпизоотические мероприятия по недопущению распространения данной инфекционной болезни.
Экология вируса гриппа А
К вирусу гриппа А восприимчивы человек и многие виды животных, домашние и дикие птицы. Вирус легко преодолевают не только межвидовой барьер у птиц, но также передаются и млекопитающим. К нему восприимчивы человек и ряд домашних (лошади, свиньи) и диких (тюлени, норки, китообразные и т. д.) животных. Но, в экологии вируса гриппа А дикие птицы имеют особое значение, поскольку являются его природным резервуаром. Почти все комбинации подтипов гемагглютинина выделены у диких птиц [8-9] и летучих мышей (кроме одного -H17) [10]. Поскольку подтипы вируса циркулируют среди диких птиц, 15 подтипов вируса гриппа А, инфицирующие птиц, получили название вирусов птичьего гриппа (Avian Influenza Viruses, AIV) [11]. Дикие птицы, как правило, являются носителями вируса грип-
па, который не вызывает каких-либо болезней в нозологическом понимании. Встречается вирус гриппа преимущественно в популяциях мигрирующих водоплавающих птиц определенных видов. Вирусы содержатся в слюне, носовых секретах и помете. Распространение вируса происходит при контакте птиц, имеющих ослабленный иммунитет, с контаминированным назальным, респираторным, фекальным материалом инфицированных птиц. Заражение происходит преимущественно фекально-оральным путем. У инфицированных птиц заболевание, как правило, протекает бессимптомно или со слабо выраженными одним или несколькими симптомами в зависимости от штамма вируса и вида птиц.
Домашние и дикие птицы являются ключевыми источниками для межвидовой передачи хозяевам млекопитающих различных таксонов, включая китов, тюленей, свиней, лошадей, а также людей [12-15]. Согласно проведенному филогенетическому анализу, некоторые гены вирусов штаммов, вызвавших пандемии, до сих пор циркулируют у зараженных диких птиц. Предполагают, что тройной реассортантный вирус, вызвавший пандемию Н1Ш 2009 года, образовался в месте миграции птиц [16]. Некоторые гены вируса Н9№, выделенного у мигрирующих уток в Хоккайдо (Япония), идентичны генам вируса Н3№ [17].
У лошадей грипп вызван вирусами подтипов Н7М7 и Н3№. Вирус гриппа подтипа Н3№ вызывает заболевание у собак [1819]. Свиньи заболевают в случае инфицирования вирусом гриппа подтипов Н1Ш, Н1№, Н3Ш, Н3№ и Н2№. Последние подтипы вирусов заразны и для человека: у людей в течение прошлого века были обнаружены три НА подтипа (Н1, Н2 и Н3) и 2 NA (N1, N2) [20]. Недавно были также зарегистрированы случаи заражения человека такими высоко-патогенными подтипами, как Н5Ш, Н7Щ Н9№ и Н7№ [21-24]. Вирусы диких животных также являются предметом для лабораторных исследований и выяснения молекулярных основ межвидовой передачи, вирулентности и патогенности.
1еномное разнообразие вирусов обеспечивается благодаря трем механизмам: точечным мутациям, реорганизации сегментов или, реже, рекомбинации [25-28]. Высокие скорости мутации возможны благодаря действию вирусной РНК-полимеразы. Мутация приводит к тому, что хозяин заражается уже вирусом с иной нуклеотидной последовательностью. К сожалению, в литературе встречают-
ся данные консенснусной нуклеотидной последовательности вирусов. Тогда как динамика изменения в генетических элементах вирусов исследована недостаточно. Это является наибольшей проблемой для решения вопроса о предотвращении межвидовой передачи, и, соответственно, формирования новых штаммов антигенно-далеких от первоначальных: с новыми комбинациями мембранных белков NA и НА и внутренних сегментов вируса. Это позволяет вирусу «обмануть» иммунную систему хозяина и распространяться в популяции [29].
Некоторые виды животных и птиц содержат вирусные штаммы, которые частично перекрестно серореактивны, при этом последовательность структуры мембранного белка НА гриппа может у них отличаться более чем на 30% на уровне аминокислот и проявлять ограниченную перекрестную реактивность в серологических анализах [30]. При повторном заражении свиней вирусом гриппа животные могут стать носителями штаммов, патогенных для человека [31]. При этом свиньи - не единственные животные-переносчики вируса гриппа: межвидовая передача вируса является достаточно частой [32], поскольку вирусы не являются эндемичными для альтернативных видов-хозяев. 1еном вирусов определяет диапазон хозяев, является полигенным, при этом может зависеть от коэволюции продуктов вирусных генов с генами хозяина, в результате чего происходит формирование конкурентного вируса, способного вызывать инфицирование организма. Частота, с которой возникают новые эпидемии в человеческой популяции [33], дает основание утверждать, что данные события можно предсказать благодаря пониманию динамики изменений геномных последовательностей вирусов у птиц и животных-носителей. В настоящее время запущено несколько программ, направленных на изучение рисков и возникновения новой потенциальной пандемии гриппа.
Прошлые пандемии и угроза появления Н5 и Н9 у людей определяют важность проблемы общественного здравоохранения. К сожалению, частые генетические дрейфы стимулируют развитие вируса гриппа очень высокими темпами [34-35], что затрудняет прогнозирование особенностей следующей вирусной пандемии. Определение степени вероятности развития пандемии включает в себя три основных подхода: анализ вирусов, вызвавших предыдущие пандемии, понимание экологии вируса и мониторинг эволюции вируса путем непрерывного наблюдения.
Строение вируса гриппа А
Вирус птичьего гриппа существуют в двух эпидемиологических формах: низко- или высокопатогенной. Известно, что степень па-тогенности АГУ (как и других ортомиксо- и парамиксовирусов) определяется в конечном счете особенностями первичной структуры молекулы гемагглютинина, ее способностью к протеолитическому расщеплению. Вирус птичьего гриппа низкой патогенности (с нерасщепленным гемагглютинином) способен к длительному бессимптомному сохранению в популяциях как диких, так и домашних птиц. При этом от птиц, главным образом уток, выделяют подтипы АГ\( характеризующиеся десятками антигенных комбинаций ге-магглютинин + нейраминидаза (Н+К). Поэтому в естественных условиях неизбежны микроэволюционные процессы, сопровождающиеся мутациями с образованием высокопатогенных вирусов и их распространением. В результате могут возникать эмерджентные эпидемические вспышки инфекции с массовой летальностью.
Вирус гриппа А относится к семейству Orthomyxoviridae. Он устойчив к воздействию факторов внешней среды и длительно сохраняется вне организма, особенно при низкой температуре. АГУ типируют в соответствии с антигенной специфичностью поверхностных гликопротеинов гемагглютини-на (НА) и нейраминидазы (КА). Благодаря гемагглютинину определяется тропность хозяина: НА связывается с рецепторами, содержащими а 2,6-сцепленные или а 2,3-сцеплен-ные сиаловые кислоты (а 2,6 SA или а 2,3 SA). Тогда как активность нейраминидазы определяет степень разрушения SA-содержащих рецепторов вирусной мембраны и хозяина, что является необходимым для отделения дочерних вирионов с поверхности клетки хозяина и размножения. Геном вируса гриппа А состоит из 8 фрагментов одноцепочечной РНК, которые кодируют 10 вирусных белков. Фрагменты РНК имеют общую белковую оболочку, соединяющую их, образуя антигенно-стабильный рибонуклеопротеид ^-антиген), определяющий принадлежность вируса к се-ротипу А, В или С. Снаружи вирус покрыт двойным липидным слоем, с внутренней стороны которого находится слой мембранного белка.
В липидную мембрану встроены матричный белок М1 и ионный канал М2, кодируемые сегментом М. Внутри вириона также содержится минорный белок КЕР (белок ядерного экспорта). РНК образует комплексы с несколькими неструктурными белками (РВ1, РВ2, РА, К) которые являются ком-
понентами комплекса РНК-зависимой РНК-полимеразы и вместе с минорным белком КЕР способствуют репликации вируса, его выходу из клетки и избеганию иммунного ответа хозяина. В сегментах РВ1 и РА идентифицированы несколько дополнительных белков. К ним относятся РВ1-Е2 и набор недавно открытых форм РА [36], которые, как представляется, влияют на вирулентность вируса. В качестве универсальных вакцин против гриппа могут выступать белок М2 и ну-клеопротеин КР вируса гриппа А. Трансмембранный белок М2 выполняет функцию протон-избирательного ионного канала, который необходим для высвобождения вирусного генома при проникновении вируса. Антитела против эктодомена белка М2 способны ограничивать размножение вируса [37].
В настоящее время известно 17 подтипов гемагглютинина и 9 нейраминидаз [38]. Наиболее частыми являются 24 комбинации гемагглютинина и нейраминидазы: Н1Ш, НЖ2, Н2Ю, Н3№, Н3Ш, Н4№, Н4К4, Н4К6, Н4Ш, Н5К1, Н5№, Н5К9, Н6№, Н6К2, Н6№, Н6№, Н7№, Н7№, НЖ3, Н7Ш, Н9№, Н9Ш, Н10Ш и Н11№.
Молекулярные маркеры патогенности и жизненный цикл вируса
Дикие птицы играют важную роль в экологии АГУ однако факторы, определяющие межвидовые передачи или ассоциации хозяев-подтипов, изучены недостаточно. Исследование закономерностей встраивания вирусов в ткани организма разных видов диких птиц с использованием гистохимического метода выявило значительные различия даже у близких видов [39].
Межконтинентальные перелеты чаек являются фактором, способствующим повторным заражениям этих птиц вирусом. Хотя предполагается, что подтипы Н13 и Н16 специфичны для чаек, они также являются носителями и многих других вирусных штаммов гриппа А [40-42]. Большинство вирусов, выделенных от чаек, не способны искусственно заразить уток, что указывает на наличие межвидовых препятствий передачи вируса между этими видами птиц. Точные механизмы, лежащие в основе данного явления, не ясны, однако предполагают, что это связано с различиями в специфичности рецепторов вирусов уток и чаек, формирующейся в процессе адаптации организма хозяина к вирусу [43]. Некоторые рецептор-связывающие сайты, уникальные для специфичных у чайки (таких как Y98F А1^ и Е190Т в Н16, G228S и R229W в Н13, так и в Н16), могут играть роль в тонкой настройке взаимодействия с неиден-
тичными рецепторами в этих сайтах. Подстановка G к S в положении 228 имеет особое значение, поскольку, как было показано, она влияет на предпочтения, связанные с рецеп-торными связями вирусов Н2 и Н3 человека. Переключение с Р на L в позиции 215 способно изменять конфигурацию домена связывания рецептора (RBD). Кроме того, в положении 222 все вирусы, выделенные у уток, содержат замещенную аминокислоту в НА вирусами Н13.
Кроме того, вирусы птичьего гриппа могут образовывать разные связи с а-2,3-связанными SA-рецепторами. Так, при сравнении вариантов связывания вируса с группой синтетических сиалилгликополимеров, имеющих тот же концевой а-2,3-связный фрагмент SA и отличающийся только структурой внутренних частей углеводной цепи, были показаны значительные различия между вирусами цыпленка, утки и чайки [44-45]. Хотя некоторые исследователи изучали образцы рецепторной экспрессии у цыплят, уток и других видов домашних и диких птиц [46-49], это изучено только для двух основных типов гликозидных связей, используя гистохимическое окрашивание лектинов. Поэтому распределение гликановых рецепторов на тканях разных видов птиц до конца еще не изучено.
При исследовании молекулярных детерминант птичьего гриппа Н5Ш установлено, что субъединицы РА и РВ1 полимеразного комплекса являются основными факторами, вызывающими вирулентность гриппа, развивающегося у уток. Введение двух мутаций в гены РВ1 ^436Н) и РА (Т515А) уменьшило вирулентность фенотипа малой пластинки А/ МеШат/1203/04 (Н5Ш), которая, как известно, высоко вирулентна для хорьков, мышей и крякв [50]. Две аминокислотные замены в РА ^224Р и N383D) вируса A/duck/Hubei/ 49/05 были связаны с высоковирулентным фенотипом [51].
Другим механизмом быстрого распространения вирусной инфекции являются многоосновные аминокислотные вставки на участке расщепления НА0, являющегося предшественником белка НА. Последний формируется путем протеолитического расщепления с помощью трипсиноподобных ферментов на две субъединицы НА1 и НА2 [52]. Многие вирусы Н5 и Н7 развиваются в НРА1 у курицы, как правило, путем приобретения ими многоосновных аминокислотных вставок на участке расщепления НА0. Это изменение облегчает системное распространение вируса: НА0 становится более доступ-
ным для разных протеаз в тканях организма, что, в свою очередь, облегчает и формирование измененных вирусных белков [53].
В отличие от НА белок NA не подвергается гидролизу. В зрелом состоянии NA имеет грибообразную форму; в его структуре содержится 2 пары молекул в виде тетрамера с головкой, обладающей ферментативной активностью, а в части, образующей стебель, у многих вирусов гриппа А есть делеция [54]. Экспериментально доказано, что №стебелъ с делецией ускоряет репликацию вируса гриппа у кур, однако молекулярный механизм этого явления до сих пор до конца не исследован. Сиалидазная активность NA способствует образованию новых вирионов. Как предполагают, делеции, отрицательно влияют на функцию NA, но это не отражается на высвобождении рекомбинантного вируса LPAI Н1Ш, несущего новую делецию стебля NA
[55].
Роль делеций в области стебля NA была показана в исследованиях птичьего гриппа на японских перепелках (СоШгшх ]арошса), которые могут быть промежуточным хозяином вирусов гриппа, включая Н5Ш и Н9№ у домашних птиц и человека [56-57]. 1енети-ческий анализ адаптированного к перепелу штамма H2N2 (A/MaИard/Potsdam/178-4/83) выявил 6 мутаций в 4 генах вируса: РВ2 (A588V), РВ1 ^268Я, D398E, S654I), № (А234Т) и НА (N155D). Это доказывает, что данные гены также играют роль в адаптации вируса к хозяину [58]. У вируса, адаптированного к перепелу и к цыплятам, выявлена дополнительная мутация в НА (K303Q) и делеция в области стебля КА. Данные генетические изменения вируса усиливают пролиферацию вирусных белков в кишечнике и передачу через дыхательные пути, что указывает на то, что делеция стебля КА является основным определяющим фактором респираторного тропизма АГУ [59].
Следующим фактором, определяющим уровень патогенности вируса гриппа, является его устойчивость к кислой среде. При поступлении вируса в организм путем эн-доцитоза он попадает в кислую среду эндо-сомы, что вызывает слияние между вирусной и эндосомной мембраной и высвобождение вирусных нуклеокапсидов в цитоплазму [60]. Мутации, которые модулируют стабильность НА в кислой среде, были связаны с изменениями вирусной патогенности и стойкостью к окружающей среде. Увеличение патогенности Н5Ш у цыплят коррелирует с уровнем активности НА в кислой рН, что связывают с генетической модификаци-
ей остатков в положениях 104 и 115, расположенными в N- и С-концах спирали-110 HA1 [61]. Согласно другим исследованиям, вирус H5N1, несущий мутацию H24Q, снижающей активность НА при низких рН, более широко распространен у зараженных через питьевую воду крякв и сохраняется в течение более длительного периода в окружающей среде [62]. Такие противоречивые данные требуют дальнейших исследований молекулярных детерминант вирусной персистенции [63-64].
Определяющим фактором тропизма вируса гриппа А к хозяину является домен связывания рецептора (RBD). HA является критическим, поскольку он опосредует начальное взаимодействие между вирусом и SA-рецептором [65]. Структурно он состоит из 3-х основных элементов: спирали-190 (остатки 188-194), петли-220 (остатки 221-228) и петли-130 (остатки 134-138). Другие высококонсервативные остатки, такие как Tyr98, Trp153, His183 и Tyr195, образуют основу ре-цептор-связывающего кармана [52]. Аминокислотные замены, влияющие на конфор-мацию RBD, обычно приводят к изменениям аффинности рецептор-связывания НА и последующему переключению в специфике видов хозяина [66]. HA распознает гликаны хозяина с концевыми остатками SA, которые представляют собой разнообразное семейство сахаров с 9-углеродным скелетом, которые различаются по структуре среди разных видов. SA являются самой внешней единицей на гликановых цепях с двумя основными типами связи с основной галактозой (Gal), возникающей из углерода-2. SA может быть либо присоединена к углероду-3 Gal, чтобы образовать а-2,3-гликозидную связь или угле-роду-6 Gal с образованием а-2,6-гликозидной связи [67-68]. Обычно считается, что вирусы птичьего гриппа предпочтительно связывают SA-рецепторы с а-2,3-связями, тогда как человеческие вирусы предпочитают а-2,6-связанную SA, а переход от а-2,3 до а-2,6 является предпосылкой для адаптации вирусов птичьего гриппа к организму человека в качестве хозяина [7]. Поэтому идентификация мутаций RBD, которые позволили бы включить этот переключатель, могла бы иметь большое значение для подготовки к появлению пандемических штаммов. Дополнительные исследования также показывают, что взаимодействия HA-рецепторов более сложны, чем простая а-2,3 в сравнении с а-2,6-дихотомией. Помимо типа связи, сам терминал SA, а также размер и топология гликанов являются важными детерминантами аффинности связывания [65, 69-72].
Влияние точечных мутаций и тополо-
гии RBD на аффинность связывания рецепторов вируса гриппа А широко исследованы у вирусов, которые вызывали пандемию у людей (H1, H2 и H3), а также потенциально пандемических вирусов (H5 и H9). Недавние достижения в области технологий микрочипов гликанов коренным образом изменили понимание взаимодействия вирусов гриппа с рецепторами клеток-хозяев. Эта технология позволила определить с высокой степенью точности различия между связыванием НА с сотнями различных гликанов, прикрепленных к одному чипу [73]. Так было показано, что для адаптации к организму человека в качестве хозяина вирусов H2N2 и H3N2, вызвавших пандемию 1957 и 1968 гг. потребовалась замена всего двух аминокислот вблизи RBD (Q226L и G228S) для переключения их аффинности к связыванию с рецептором от а-2,3 к человеческому а-2,6 типу [74]. Тогда как две различные аминокислотные замены (E190D и G225D) в RBD вируса H1N1, который вызвал пандемию испанского гриппа 1918 года, опосредовали прямой переход от человека к человеку [73]. Несмотря на структурное сходство между HA-белками H5N1 и 1918 H1N1, мутация E190D / G225D не способствовала повышению сродства HA вируса HPAI H5N1 (A/ Vietnam/ 1203/2004) с а-2-6-связанной сиаловой кислотой гликанов чипа. При этом двойная мутация G226L / G228S (типичная для H2 и H3) не полностью повлияла на а-2,6-связанную SA-специфичность ге-магглютинина H5N1, несмотря на то, что в результате снизилась аффинность связывания НА с сиаловой кислотой [75]. Установлено, что другие мутации мембранного белка НА, такие как N182K и Q192R, усиливают связывание H5 с рецепторами у человека [76]. Было показано, что у вирусов H9N2 часто обнаруживается мутация Q226L, способствующая увеличению сродства вируса с а-2,6-связанными SA-рецепторами и повышению репликации в эпителиальных клетках дыхательных путей у человека [77-78]. Однако аминокислотные замены в RBD не всегда коррелируют с повышенной патогенностью вируса. Примером является мутация D222G в пандемическом вирусе H1N1 в 2009 году [79]. Следовательно, изменения в RBD, которые связаны с вирулентностью AIV у человека, сложны и зависят от подтипа вирусов.
Связывание с рецептором - лишь одна сторона успешности жизненного цикла вируса и уровня его патогенности. Полимераз-ные комплексы (PB2, PB1 и PA) необходимы для транскрипции и репликации вирусной РНК. Предполагают, что гены полиме-разы имеют решающее значение для адапта-
ции AIV к встраиванию в организм человека [80]. При замене комплекса гена полимеразы A/ Vietnam/ 1203/04 у вирусов штамма H5N1 снижается его патогенность. Это указывает на важность полимеразного комплекса для вирулентности вируса [81]. Так были определены маркеры птичьего вируса гриппа А, патогенного для человека. К этим маркерам относятся замены следующих последовательностей в белке PB2: A199S, E627K и K702R. Хотя эти маркеры были распределены между всеми генами, большинство из них были обнаружены в трех белках комплекса вирусных полимераз, особенно в доменах, где эти белки взаимодействуют [82-84].
Полагают, что из 3 белков (PB2, PB1 и PA) комплекса вирусных полимераз PB2 играет самую важную роль в адаптации вирусов к организму млекопитающих, особенно к человеку. Мутация E627K является одним из наиболее принципиальных детерминант па-тогенности, поскольку он позволяет вирусу, который обычно развивается при 40°C в кишечном тракте птиц, расти при более низкой температуре верхних дыхательных путей человека (33°C) [85]. Изменение E627K коррелирует с повышенной вирулентностью многих штаммов HPAI H5N1. При этом показано, что это изменение E627K необходимо для оптимального взаимодействия PB2 с NP и другими клеточными белками, участвующими в транскрипции и репликации [86]. Другая мутация PB2 (D701N), определяет адаптацию к росту клеток человека [87-88].
Эти мутации не были обнаружены в пандемическом вирусе H1N1 2009 (pdmH1N1), а их встраивание в клетку хозяина с помощью обратной транскрипции не увеличивало активность полимеразы или не влияло на репликацию вируса in vitro или in vivo [89-90]. Эти данные вызвали интерес к поиску других остатков PB2, которые могут способствовать усилению производительности репликации AIV pdmH1N1 в клетках млекопитающих. Мутации 590S и 591R были идентифицированы как важные остатки для активности по-лимеразы и эффективной репликации вируса [91]. Также были обнаружены и ряд других мутаций, в том числе, комбинация мутаций D253N / Q591K или M147L / E627K, которая приводила к получению полимеразы с более высокой активностью in vitro и повышению эффективности репликации вируса в бронхиальных эпителиальных клетках и мышцах человека [92-93].
Данные исследования могут способствовать разработке защитных вакцин и терапевтических средств предотвращения пандемии.
Современная эпизоотическая ситуация по гриппу птиц в мире и РФ
Более 50 стран в конце 2016 года сообщили о вспышках среди домашних и диких птиц высокопатогенного гриппа. Быстрое расширение географического ареала этих вспышек и количество штаммов вируса, циркулирующих одновременно в настоящее время, вызывают у ВОЗ огромную тревогу.
По данным Международного эпизоотического бюро, за период с 2016 по 2017 гг. наибольшее количество вспышек среди диких и домашних птиц, вызванных вирусом Н5К8, зарегистрировано во Франции (541) Венгрии (306), Германии (255), Румынии (135), Польше (133) и Италии (95). Помимо заболеваний, вызванных вирусом гриппа птиц Н5К8, в мире зарегистрированы случаи высокопатогенного гриппа, обусловленного подтипами вируса Н5Ш (22 страны), Н5№ (10 стран), Н5К6 (9 стран), Н5№ (Россия, США, Тайвань, Франция), Н5К9 (Франция), Н7К1 (Алжир), Н7К3 (Мексика), Н7К7 (Италия) и Н7К9 (Китай). Вирус Н5К6, приведший к вспышкам птичьего гриппа в странах Азии, а также Греции и Нидерландах, представляет собой новый штамм, возникший в результате обмена генами между 4 разными вирусами.
В России за последние 2 года вирус высокопатогенного гриппа Н5К8 впервые был обнаружен в 2016 г. в ходе активного мониторинга на озере Убсу-Нур в Тыве у павших в период весенней миграции диких птиц. Вирус этого подтипа в конце 2016 г. вызвал вспышки заболевания на крупных птицефабриках Астраханской и Ростовской областей и в личных подсобных хозяйствах на территории Калмыкии и Краснодарского края. В начале 2017 г. он привел к гибели редких видов птиц в воронежском зоопарке. В дальнейшем эпизоотическая ситуация по высокопатогенному гриппу птиц все более обострялась. Неблагополучными регионами в 2017 г. являлись: Московская область (11 эпизоотических вспышек), Республика Татарстан (7), Ростовская область (6), Краснодарский край (2), Республика Марий-Эл (2), а также Калининградская, Самарская, Нижегородская области, республики Чечня и Удмуртия - по 1 случаю. Кроме того, следует отметить, что на птицефабрике в Костромской области была впервые зарегистрирована вспышка заболевания, обусловленная серотипом Н5К2. Большая вероятность возникновения новых очагов инфекции в настоящее время сохраняется на территориях Центрального, Приволжского, Северо-Западного, Южного, Северо-Кавказского и Крымского федеральных округов.
Эпизоотическая ситуация по гриппу птиц в Южном и Северо-Кавказском федеральных округах. Меры контроля и профилактики распространения птичьего гриппа на территории Ростовской области
Южный федеральный округ и СевероКавказский регион относятся к зоне интенсивного развития птицеводства со сложной эпизоотической обстановкой по птичьему гриппу (рис. 1).
Рис. 1. Вспышки гриппа птиц на территории Южного и Северо-Кавказского ФО:
• - за период с 2016 по 2017 гг. (серотип Н5М8);
• - за период с 2007 по 2015 гг. (серотип Н5Ш).
Как видно из рисунка 1, за период с 2007 по 2015 гг. вспышки заболеваний птичьим гриппом на юге страны были обусловлены исключительно серотипом Н5Ш. В 2016 году в регионе появился новый высокопатогенный серовариант вируса гриппа №N8, который за последние 2 года привел к образованию 16 эпизоотических очагов.
Ростовская область относятся к наиболее неблагополучным регионам юга страны по распространению птичьего гриппа. Всего за период с 2007 по 2017 гг. на ее территории было зарегистрировано 12 эпизоотических вспышек высокопатогенного гриппа птиц (табл.).
В 2007 г было выявлено 4 случая заболевания птицы в Зерноградском и Целинском районах. С 2008 по 2015 гг. область была благополучной по данной инфекционной патологии. В 2016 г эпизоотия вновь вернулась в регион. В ООО «Евродон» в декабре было зарегистрировано 2 вспышки заболевания на площадках выращивания индейки №2 (Октябрьский район) и №10 (Красносулинский район, в 1,4 км от частного сектора г. Красный Сулин).
В 2017 г. в регионе эпизоотическая обста-
новка по гриппу птиц оставалась напряженной. За этот год было выявлено 6 эпизоотических очагов, из них 4 - на территории Октябрьского района (ООО ПТФ «Маркин-ская», участок доращивания индейки №7, участки подращивания №2 и №5 ООО «Ев-родон»), по 1 - на территориях Морозовского и Ремонтненского районов.
Следует отметить, что этиологическим агентом в 2007 г. являлся серотип Н5Ш, в 2016-2017 гг. - №N8 (рис. 2).
С целью недопущения распространения инфекции вся больная и восприимчивая птица в очагах заболевания была ликвидирована, что нанесло огромные убытки отрасли птицеводства.
По словам ветеринарных специалистов, меры по профилактике гриппа птиц в Ростовской области действуют в усиленном режиме еще с 2007 года, с того момента, когда на 1у-ляй-Борисовской птицефабрике был выявлен геном вируса гриппа птиц Н5Ш. Наиболее эффективными методами противоэпизо-отических мероприятий по контролю и нераспространению вируса птичьего гриппа среди промышленных предприятий птицеводческой отрасли, как в Ростовской области,
Таблица. Эпизоотическая ситуация по птичьему гриппу на территории __Ростовской области (2007-2017 гг.)__
п/п Дата возникновения очага Район Хозяйство Месторасположение Серо-тип Поголовье птицы Дата снятия карантина
заболело восприимчивое
1 01.12. 2007 Зерно-градский ЗАО ПТФ «Гуляй-Борисовская» х. Гуляй-Борисовка Ы5Ш 42 959 468 164 13.01. 2008
2 18.12. 2007 Целин-ский ЛПХ ст. Сладкая Балка Ы5Ш 71 6 868 18.01. 2008
3 19.12. 2007 Зерно-градский ЛПХ п. Шоссейный Ы5Ш 34 1 258 19.01. 2008
4 23.12. 2007 Целин-ский ЛПХ х. Северный Ы5Ш 59 5 455 23.01. 2008
5 29.12. 2016 Октябрьский ООО «Евродон» участок выращивания №2 Ы5Ы8 1 175 60 121 16.03. 2017
6 29.12. 2016 Красно-сулин-ский ООО «Евродон» участок выращива-ния№10 Ы5Ы8 755 161 368 16.03. 2017
7 17.04. 2017 Октябрьский ООО ПТФ «Маркинская» х. Маркин Ы5Ы8 63 999 299 074 19.07. 2017
8 21.04. 2017 Октябрьский ООО «Евродон» участок доращива-ния .№7 Ы5Ы8 60 99 350 07.07. 2017
9 28.04. 2017 Октябрьский ООО «Евродон» участок подращивания .№2 Ы5Ы8 1 900 99 524 07.07. 2017
10 28.04. 2017 Октябрьский ООО «Евродон» участок подращивания .№5 Ы5Ы8 6 323 249 200 07.07. 2017
11 20.10. 2017 Моро-зовский ЛПХ ст. Черт-ковская Ы5Ы8 27 1 919 05.12. 2017
12 15.11. 2017 Ремонт-ненский ЛПХ с. Ремонтное Ы5Ы8 3 ? 28.12. 2017
так и других регионах страны являются следующие:
1. Постоянное и всеобъемлемое наблюдение за вирусом гриппа А субтипов Н5 и Н7. На территории Ростовской области действует программа мониторинговых исследований птиц на грипп. Исследованиям подвергаются различные виды домашней, синантропной и дикой водоплавающей птицы. Поскольку известно, что только подтипы Н5 и Н7 могут образовывать высокопатогенные вирусы, то необходим скрининг (наблюдение), для определения, какие штаммы присутствуют в данном регионе. В лабораторию направляют пробы помета, трупы павшей птицы и другой биологический материал. Наблюдение, должно быть сфокусировано на следующих ключевых моментах: а) серологическом контроле среди промышленной птицы старше 12 недель; б) вирусологическом или серологическом контроле среди дикой и синантроп-ной птицы (здесь можно обнаружить подтипы, которые могут представлять угрозу промышленному птицеводству в будущем). Всего в Ростовскую облветлабораторию направ-
лено и подвергнуто мониторинговым исследованиям более 76 тыс. биоматериалов в 2016 г и более 85 тыс. - в 2017 г.
2. Тотальный контроль за передвижением живой птицы, птицеводческой продукции и перевозящего её транспорта. С появлением нового высокопатогенного гриппа Н5№ специалистами государственной ветеринарной службы усилился надзор за оформлением ветеринарных сопроводительных документов, а также за перевозкой живой птицы, инкубационного и пищевого яйца, мяса и других продуктов птицеводства.
3. Первичная защита стада. Заключается в соблюдении высокого уровня биозащиты предприятия и вакцинации поголовья (только при качественном и всестороннем наблюдении в соответствии с требованиями, изложенными в п. 1). За 12 месяцев 2016 г. вакцинировано с последующим контролем напряженности иммунитета более 2 млн. 35 тыс. голов птицы сельхоз назначения. За аналогичный период 2017 г привито более 2 млн. 476 тыс. голов.
4. Усиление ветеринарно-санитарного
Рис. 2. Вспышки птичьего гриппа на территории Ростовской области:
• - за период с 2016 по 2017 гг. (серотип Н5М8);
• - за период с 2007 по 2015 гг. (серотип Н5Ш).
контроля, соблюдение ветеринарно-сани-тарных требований и норм на птицеводческих предприятиях.
5. Кластерный подход развития птицеводческой отрасли на определенной территории. Эффективен в случае вспышки заболевания за счет эксклюзивного взаимодействия комбикормового завода, инкубатория, перерабатывающего предприятия и других участников кластера. Это необходимое условие для того, чтобы закрыть данную территорию и допустить вывоз конечного продукта, только когда он полностью безопасен для птицы и человека.
6. Быстрота реакции. Для мобилизации и проведения эффективных противоэпизоо-тических мероприятий необходимы быстрая система оповещения и наличие сертифици-
рованных диагностических лабораторий.
В заключение следует сказать, что эмер-джентная ситуация по гриппу птиц представляет собой уникальное явление. С каждым годом частота и тяжесть вспышек птичьего гриппа возрастают. Несмотря на то, что случаев передачи вируса гриппа А подтипа Н5 от птиц человеку в мире не выявлено, профилактическая вакцинация людей, в первую очередь птицеводов, против данной инфекционной патологии необходима. Методы предотвращения и ликвидации вспышек заболевания птичьим гриппом известны, однако необходимо делать упор на развитие стратегии предотвращения заболевания с включением координированных региональных, федеральных и международных структур.
Библиографический список:
1. Клименко А. И. Африканская чума свиней в Ростовской области / А. И. Клименко, Л. П. Миронова, С. Н. Карташов, А. М. Ермаков, А. А. Миронова // Ветеринарная патология. - 2011. - №» 3. - С. 29-32.
2. Аксенова П. В. Опасность микоплазмоза для
диких популяций зубра (Bison bonasus). Особенности эпизоотии и патогенеза / П. В. Аксенова, А. М. Ермаков, Л. П. Миронова, Е. Л. Цибизова // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. - 2014. - № 3. - С. 38-42.
3. Jong J. C. A pandemic warning? / J. C. de Jong, E. C. Claas, A. D. Osterhaus et al. // Nature. - 1997. - Vol. 389. - P. 554.
4. Becker W B. The isolation and classification of Tern virus: influenza A-Tern South Africa -1961 // J. Hyg. - 1966. - Vol. 64. - P. 309-320.
5. Cheng V. C. Two years after pandemic influenza A/2009/H1N1: what have we learned? / V. C. Cheng, K. K. To, H. Tse et al. // Clin. Microbiol. Rev. - 2012. -Vol. 25. - P 223-263.
6. Taubenberger J. K. 1918 Influenza: the mother of all pandemics / J. K. Taubenberger, D. M. Morens // Emerg. Infect. Dis. - 2006. - Vol.12. - P. 15-22.
7. Wright P. E Orthomyxoviruses / P IF Wright, G. Neumann, Y. Kawaoka // In: Knipe D. M., Howley P.M. editors. Philadelphia, PA. - 2007. - P. 1690-1740.
8. Olsen B. Global patterns of influenza A virus in wild birds / B. Olsen, V J. Munster, A. Wallensten et al. // Science. - 2006. - Vol. 312. - P 384-388.
9. Webster R. G. Evolution and ecology of influenza A viruses / R. G. Webster, W. J. Bean, O. T. Gorman et al.// Microbiol. Rev. - 1992. - Vol. 56. - P. 152-179.
10. Tong S. A distinct lineage of influenza A virus from bats / S. Tong, Y. Li, P. Rivailler et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 2012. - Vol. 109. - P. 4269-4274.
11. Diagnostic Techniques and Vaccines for Eoot-and-Mouth Disease, Classical Swine Eever, Avian Influenza and some other important OIE List A Diseases. Report of the Scientific Committee on Animal Health and Animal Welfare [Электронный ресурс]. - 2003. - Режим доступа: https:// ec.europa. eu/food/sites/food/files/safety/docs/sci-com_scah_ out93_en.pdf
12. Claas E. C. J. Human influenza virus A/ HongKong/156/97 (H5N1) infection / E. C. J. Claas, J. C. de Jong, R. van Beek et al. // Vaccine. - 1998. - Vol. 16. - P. 977-978.
13. Mandler J. Derivation of the nucleoproteins (NP) of influenza A viruses isolated from marine mammals / J. Mandler, O. T. Gorman, S. Ludwig et al. // Virol. -1990. - Vol. 176. - P. 255-261.
14. Reperant L. A. Avian influenza viruses in mammals / L. A. Reperant, G. I. Rimmelzwaan, T. Kuiken // Rev. Sci. Tech. Oie. - 2009. - Vol. 28. - P. 137-159.
15. Zhou J. Characterization of the H5N1 highly pathogenic avian influenza virus derived from wild pikas in China / J. Zhou, W. Sun, J. Wang et al. // J. Virol. - 2009. - Vol. 83. - P. 8957-8964.
16. Gibbs A. J. Erom where did the 2009 'swine-origin' influenza A virus (H1N1) emerge? / A. J. Gibbs, J. S. Armstrong, J. C. Downie // Virol. J. - 2009. - Vol. 6. - P 207.
17. Liu J. H. Phylogenetic analysis of hemagglutinin and neuraminidase genes of H9N2 viruses isolated from migratory ducks / J. H. Liu, K. Okazaki, W. M. Shi, H. Kida // Virus Genes. - 2003. - Vol. 27. - P 291-296.
18. Daly J. M. Transmission of equine influenza virus to english foxhounds / J. M. Daly, A. S. Blunden, S. MacRae et al. // Emerging Infectious Diseases. -2008. - Vol. 14(3). - P. 461-464.
19. Crawford P. C. Epidemiology: transmission of equine influenza virus to dogs / P. C. Crawford, E. J. Dubovi, W L. Castleman et al. // Science. - 2005. - Vol. 310(5747). - P. 482-485.
20. Cunha B. A. Influenza: historical aspects of epidemics and pandemics / B. A. Cunha // Infectious Disease Clinics of North America. - 2004. - Vol. 18(1). - P. 141-155.
21. Ma M. J. Comparison of commercial influenza A virus assays in detecting avian influenza H7N9 among poultry cloacal swabs / M. J. Ma, X.-X. Yang, X. Xia et al. // Journal of Clinical Virology. - 2014. -Vol. 59 (4). - P. 242-245.
22. Du Ry van Beest Holle M. Outbreak report: human-to-human transmission of avian influenza A/H7N7, The Netherlands, 2003 / M. Du Ry van Beest Holle, A. Meijer, M. Koopmans, C. M. de Jager //
Eurosurveillance. - 2005. - Vol. 10 (12). - I? 584.
23. Cheng V C. C. Infection of immunocompromised patients by avian H9N2 influenza A virus / V C C. Cheng, J. E W Chan, X. Wen et al. // Journal of Infection. - 2011. - Vol. 62 (5). - II 394-399.
24. Li E C. K. Finding the real case-fatality rate of H5N1 avian influenza / E C. K. Li, B. C. K. Choi, T. Sly, A. W 1! Pak // Journal of Epidemiology and Community Health. - 2008. - Vol. 62 (6). - II 555-559.
25. Boni M. E Homologous recombination is very rare or absent in human influenza A virus / M. E Boni, Y. Zhou, J. K. Taubenberger, E. C. Holmes // J. Virol. -2008. - Vol. 82. - I 4807-4811.
26. Hirst M. Novel avian influenza H7N3 strain outbreak, British Columbia / M. Hirst, C. R. Astell, M. Griffith et al. // Emerg. Infect. Dis. - 2004. - Vol. 10. - I 2192-2195.
27. Iasick J. Avian influenza: the Canadian experience / J. Iasick, Y. Berhane, K. Hooper-McGrevy // Revue Scient. Tech. - 2009. - Vol. 28. - I 349-358.
28. Iasick J. Intersegmental recombination between the haemagglutinin and matrix genes was responsible for the emergence of a highly pathogenic H7N3 avian influenza virus in British Columbia / J. Iasick, K. Handel, J. Robinson et al. // J. Gen Virol. - 2005. -Vol. 86. - I 727-731.
29. Webby R. J. Emergence of influenza A viruses / R. J. Webby, R. G. Webster // Ihilos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. - 2001. - Vol. 356. - I 1817-1828.
30. Dugan V. G. The evolutionary genetics and emergence of avian influenza viruses in wild birds / V. G. Dugan, R. Chen, D. J. Spiro et al. // ILoS Iathog. -2008. - Vol. 4. - e1000076.
31. Hass J. The role of swine as "mixing vessel" for interspecies transmission of the influenza A subtype H1N1: a simultaneous Bayesian inference of phylogeny and ancestral hosts / J. Hass, S. Matuszewski, D. Cieslik, M. Haase // Infect. Genet. Evol. - 2011. - Vol. 1. - I 437-441.
32. Capua I. Avian influenza and human health / I. Capua, D. J. Alexander // Acta Trop. - 2002. - Vol. 83. - I 1-6.
33. Morens D. M. Iandemic influenza's 500th anniversary / D. M. Morens, J. K. Taubenberger, G. K. Eolkers, A. S. Eauci // Clin. Infect. Dis. - 2010. - Vol. 51. - I 442-444.
34. Chen R. Avian influenza virus exhibits rapid evolutionary dynamics / R. Chen, E. C. Holmes // Mol. Biol. Evol. - 2006. - Vol. 23. - К 2336-2341.
35. Taubenberger J. K. Iandemic influenza-including a risk assessment of H5N1/ J. K. Taubenberger, D. M. Morens // Rev. Sci. Tech. - 2009. - Vol. 28.- I187-202.
36. Jagger B. W An Overlapping Irotein-Coding Region in Influenza A Virus Segment 3 Modulates the Host Response / B. W. Jagger, H. M. Wise, J. C. Kash et al. // Science. - 2012. - Vol. 37. - I 199-204.
37. Есмагамбетов И. Б. Конструирование рекомби-нантного аденовируса человека, экспрессиру-ющего гены консервативных антигенов вируса гриппа А ионного канала М2 и нуклеопротеина / И. Б. Есмагамбетов, Е. С. Седова, Д. Н. Щербинин и др. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. - 2014. - № 2. - С. 22-28.
38. Huang Y. Multiplex assay for simultaneously typing and subtyping influenza viruses by use of an electronic microarray / Y. Huang, H. Tang, S. Duffy et al. // Journal of Clinical Microbiology. - 2009. - Vol. 47 (2). - К 390-396.
39. Jourdain E. The pattern of influenza virus attachment varies among wild bird species / E. Jourdain, D. van Riel, V J. Munster et al. // ILoS One. - 2011. - Vol. 6. - e24155.
40. Munster V. J. Spatial, temporal, and species variation in prevalence of influenza A viruses in wild migratory birds / V J. Munster, C. Baas, I Lexmond et al. // ILoS Iathog. - 2007. - Vol. 3. - e61.
41. Olsen B. Global patterns of influenza a virus in wild
birds / B. Olsen, V J. Munster, A. Wallensten et al. // Science. - 2006. - Vol. 312. - P. 384-388.
42. Wille M. Extensive geographic mosaicism in avian influenza viruses from gulls in the northern hemisphere / M. Wille, G. J. Robertson, H. Whitney et al. // PLoS One. - 2011. - Vol. 6. - e20664.
43. Matrosovich M. Influenza receptors, polymerase and host range / M. Matrosovich, J. Stech, H. D. Klenk // Rev. Sci. Tech. - 2009. - Vol. 28. - P 203-217.
44. Yamnikova S. S. Differences between HA receptor-binding sites of avian influenza viruses isolated from Laridae and Anatidae / S. S. Yamnikova, A. S. Gambaryan, A. B. Tuzikov et al. // Avian Dis. - 2003.
- Vol. 47. - P. 1164-1168.
45. Gambaryan A. Receptor specificity of influenza viruses from birds and mammals: New data on involvment of the inner fragments of the carbohydrate chain / A. Gambaryan, S. Yamnikova, D. Lvov et al. // Virol. - 2005. - Vol. 334. - P 276-283.
46. Costa T. Distribution patterns of influenza virus receptors and viral attachment patterns in the respiratory and intestinal tracts of seven avian species / T. Costa, A. J. Chaves, R. Valle et al. // Vet. Res. - 2012. - Vol. 43. - P. 28.
47. Kuchipudi S. V. Differences in influenza virus receptors in chickens and ducks: Implications for interspecies transmission / S. V. Kuchipudi, R. Nelli,
G. A. White et al. // J. Mol. Genet. Med. - 2009. - Vol. 3. - P. 143-151.
48. Pillai S. P. Species and age related differences in the type and distribution of influenza virus receptors in different tissues of chickens, ducks and turkeys / S. P. Pillai, C. W Lee // Virol. J. - 2010. - Vol. 7. - P. 5.
49. Yu J. E. Expression patterns of influenza virus receptors in the respiratory tracts of four species of poultry / J. E. Yu, H. Yoon, H. J. Lee et al. // J. Vet. Sci.
- 2011. - Vol. 12. - P 7-13.
50. Hulse-Post D. J. Molecular changes in the polymerase genes (PA and PB1) associated with high pathogenicity of H5N1 influenza virus in mallard ducks / D. J. Hulse-Post, J. Franks, K. Boyd et al. // J. Virol. - 2007. - Vol. 81. - P 8515-8524.
51. Song J. The PA protein directly contributes to the virulence of H5N1 avian influenza viruses in domestic ducks / J. Song, H. Feng, J. Xu et al. // J. Virol.
- 2011. - Vol. 85. - P 180-2188.
52. Skehel J. J. Receptor binding and membrane fusion in virus entry: the influenza hemagglutinin / J. J. Skehel, D. C. Wiley // Annu Rev. Biochem. - 2000. -Vol. 69. - P. 531-569.
53. Stech O. Acquisition of a polybasic hemagglutinin cleavage site by a low-pathogenic avian influenza virus is not sufficient for immediate transformation into a highly pathogenic strain / O. Stech, J. Veits, S. Weber et al. // J. Virol. - 2009. - Vol. 83. - P 5864-5868.
54. Russell R. J. The structure of H5N1 avian influenza neuraminidase suggests new opportunities for drug design / R. J. Russell, L. F. Haire, D. J. Stevens et al. // Nature. - 2006. - Vol. 443. - P 45-49.
55. Munier S. A genetically engineered waterfowl influenza virus with a deletion in the stalk of the neuraminidase has increased virulence for chickens / S. Munier, T. Larcher, F. Cormier-Aline et al. // J. Virol.
- 2010. - Vol. 84. - P. 940-952.
56. Makarova N. V. Replication and transmission of influenza viruses in Japanese quail / N. V. Makarova,
H. Ozaki, H. Kida et al. // Virol. - 2003. - Vol. 310. - P. 8-15.
57. Wan H. Quail carry sialic acid receptors compatible with binding of avian and human influenza viruses / H. Wan, D. R. Perez // Virol. - 2006. - Vol. 346. - P. 278-286.
58. Sorrell E. M. Adaptation of influenza A/Mallard/ Potsdam/178-4/83 H2N2 virus in Japanese quail leads to infection and transmission in chickens / E. M. Sorrell, D. R. Perez // Avian. Dis. - 2007. - Vol. 51. -P264-268.
59. Sorrell E. M. A 27-amino-acid deletion in the neuraminidase stalk supports replication of an avian H2N2 influenza A virus in the respiratory tract of chickens / E. M. Sorrell, H. Song, L. Pena, D. R. Perez // J. Virol. - 2010. - Vol. 84. - P. 11831-11840.
60. Palese P. Orthomyxoviridae: The viruses and their replication / P. Palese, M. L. Shaw // In: Knipe DM, Howley PM, editors. Fields Virology. 5. -Philadelphia, PA. - 2007. - P. 1647-1689.
61. Du Bois R. M. Acid stability of the hemagglutinin protein regulates H5N1 influenza virus pathogenicity / R. M. Du Bois, H. Zaraket, M. Reddivari et al. // PLoS Pathog. - 2011. - Vol. 7. - e1002398.
62. Reed M. L. The pH of activation of the hemagglutinin protein regulates H5N1 influenza virus pathogenicity and transmissibility in ducks / M. L. Reed, O. A. Bridges, P. Seiler et al. // J. Virol. - 2010. - Vol. 84. - P. 1527-1535.
63. Brown J. D. Persistence of H5 and H7 avian influenza viruses in water / J. D. Brown, D. E. Swayne, R. J. Cooper et al. // Avian Dis. - 2007. - Vol. 51. - P. 285289.
64. Stallknecht D. E. Avian influenza virus in aquatic habitats: what do we need to learn? / D. E. Stallknecht, V H. Goekjian, B. R. Wilcox et al. // Avian Dis. - 2010. - Vol. 54. - P 461-465.
65. Chandrasekaran A. Glycan topology determines human adaptation of avian H5N1 virus hemagglutinin / A. Chandrasekaran, A. Srinivasan, R. Raman et al. // Nat. Biotechnol. - 2008. - Vol. 26. -P. 107-113.
66. Medina R. A. Influenza A viruses: new research developments / R. A. Medina, A. Garcia-Sastre // Nat. Rev. Microbiol. - 2011. - Vol. 9. - P. 90-603.
67. Nicholls J. M. Evolving complexities of influenza virus and its receptors / J. M. Nicholls, R. W. Chan, R. J. Russell et al. // Trends Microbiol. - 2008. - Vol. 16. - P 149-157.
68. Wilks S. A review of influenza haemagglutinin receptor binding as it relates to pandemic properties / S. Wilks, M. de Graaf, D. J. Smith, D. F Burke // Vaccine. - 2012. - Vol. 30. - P 4369-4376.
69. Gambaryan A. S. Differences between influenza virus receptors on target cells of duck and chicken and receptor specificity of the 1997 H5N1 chicken and human influenza viruses from Hong Kong / A. S. Gambaryan, A. B. Tuzikov, N. V Bovin et al. // Avian Dis. - 2003. - Vol. 47. - P 1154-1160.
70. Imai M. The role of receptor binding specificity in interspecies transmission of influenza viruses / M. Imai, Y. Kawaoka // Curr. Opin. Virol. - 2012. - Vol. 2. - P 160-167.
71. Ito T. Recognition of N-glycolylneuraminic acid linked to galactose by the alpha 2,3 linkage is associated with intestinal replication of influenza A virus in ducks / T. Ito, Y. Suzuki, T. Suzuki et al. // J. Virol. - 2000. - Vol. 74. - P. 9300-9305.
72. Suzuki Y. Sialic acid species as a determinant of the host range of influenza A viruses / Y. Suzuki, T. Ito, T. Suzuki et al. // J. Virol. - 2000. - Vol. 74. - P. 1182511831.
73. Stevens D. J. Haemagglutinin mutations responsible for the binding of H5N1 influenza A viruses to human-type receptors / D. J. Stevens, R. J. Russell, S. J. Gamblin et al. // Nature. - 2006. - Vol. 444. - P.
378-382.
74. Connor R. J. Receptor specificity in human, avian, and equine H2 and H3 influenza virus isolates / R. J. Connor, Y. Kawaoka, R. G. Webster, J. C. Paulson // Virol. - 1994. - Vol. 205. - P 17-23.
75. Stevens J. Glycan microarray technologies: tools to survey host specificity of influenza viruses / J. Stevens, O. Blixt, J. C. Paulson, I. A. Wilson // Nat. Rev. Microbiol. - 2006. - Vol. 4. - P 57-64.
76. Yamada S. Haemagglutinin muta tions responsible for the binding of H5N1 influenza A viruses to human-type receptors / S. Yamada, Y. Suzuki, T.
Suzuki et al. // Nature. - 2006. - Vol. 444. - I? 378-382.
77. Wan H. Amino acid 226 in the hemagglutinin of H9N2 influenza viruses determines cell tropism and replication in human airway epithelial cells / H. Wan,
D.R. Perez // J. Virol. - 2007. - Vol. 81. - P. 5181-5191.
78. Wan H. Replication and transmission of H9N2 influenza viruses in ferrets: evaluation of pandemic potential / H. Wan, E. M. Sorrell, H. Song et al. // PLoS One. - 2008. - Vol. 3. - e2923.
79. Belser J. A. Effect of D222G mutation in the hemagglutinin protein on receptor binding, pathogenesis and transmissibility of the 2009 pandemic H1N1 influenza virus / J. A. Belser, A. Jayaraman, R. Raman et al. // PLoS One. - 2011. -Vol. 6. - e25091.
80. Boivin S. Influenza A virus polymerase: structural insights into replication and host adaptation mechanisms / S. Boivin, S. Cusack, R. W Ruigrok, D. J. Hart // J. Biol. Chem. - 2010. - Vol. 285. - P. 2841128417.
81. Salomon R. The polymerase complex genes contribute to the high virulence of the human H5N1 influenza virus isolate A/Vietnam/1203/04 / R. Salomon, J. Franks, E. A. Govorkova et al. // J. Exp. Med. - 2006. - Vol. 203. - II 689-697.
82. Allen J. E. Conserved amino acid markers from past influenza pandemic strains / J. E. Allen, S. N. Gardner,
E. A. Vitalis, T. R. Slezak // BMC Microbiol. - 2009. -Vol. 9. - P. 77.
83. Finkelstein D. B. Persistent host markers in pandemic and H5N1 influenza viruses / D. B. Finkelstein, S. Mukatira, P. K. Mehta et al. // J. Virol. - 2007. - Vol. 81. - P 10292-10299.
84. Tamuri A. U. Identifying changes in selective constraints: host shifts in influenza / A. U. Tamuri, M. Dos Reis, A. J. Hay, R. A. Goldstein // PLoS Comput. Biol. - 2009. - Vol. 5. - e1000564.
85. Gabriel G. The viral polymerase mediates adaptation of an avian influenza virus to a mammalian host / G.
Gabriel, B. Dauber, T. Wolff et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 2005. - Vol. 102. - P 18590-18595.
86. Ng A. K. Influenza polymerase activity correlates with the strength of interaction between nucleoprotein and PB2 through the host-specific residue K/E627 / A. K. Ng, W H. Chan, S. T. Choi et al. // PLoS One. -2012. - Vol. 7. - e36415.
87. Li Z. Molecular basis of replication of duck H5N1 influenza viruses in a mammalian mouse model / Z. Li, H. Chen, P Jiao et al. // J. Virol. - 2005. - Vol. 79. - P. 12058-12064.
88. Steel J. Transmission of influenza virus in a mammalian host is increased by PB2 amino acids 627K or 627E/701N / J. Steel, A. C. Lowen, S. Mubareka, P. Palese // PLoS Pathog. - 2009. - Vol. 5. -e1000252.
89. Herfst S. Introduction of virulence markers in PB2 of pandemic swine-origin influenza virus does not result in enhanced virulence or transmission / S. Herfst, S. Chutinimitkul, J. Ye et al. // J. Virol. - 2010. - Vol. 84. - P 3752-3758.
90. Jagger B. W An Overlapping Protein-Coding Region in Influenza A Virus Segment 3 Modulates the Host Response / B. W. Jagger, H. M. Wise, J. C. Kash et al. // Science. - 2012. - Vol. 337. - P 199-204.
91. Mehle A. Adaptive strategies of the influenza virus polymerase for replication in humans / A. Mehle, J. A. Doudna // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 2009. -Vol. 106. - P 21312-21316.
92. Mok C. K. Amino acid residues 253 and 591 of the PB2 protein of avian influenza virus A H9N2 contribute to mammalian pathogenesis / C. K. Mok, H. L. Yen, M. Y. Yu et al. // J. Virol. - 2011. - Vol. 85. - P. 9641-9645.
93. Wang J. Mouse-adapted H9N2 influenza A virus PB2 protein M147L and E627K mutations are critical for high virulence / J. Wang, Y. Sun, Q. Xu et al. // PLoS One. - 2012. - Vol. 7. - e40752.
References:
1. Klimenko A. I. Afrikanskaya chuma sviney v 3-36. Vide supra.
Rostovskoy oblasti [African swine fever in the 37.EsmagambetovI.B.Konstruirovanierekombinantnogo
Rostov region] / A. I. Klimenko, L. I Mironova, S. adenovirusa cheloveka, ekspressiruyushchego geny
N. Kartashov, A. M. Ermakov, A. A. Mironova // konservativnykh antigenov virusa grippa A ionnogo
Veterinarnaya patologiya. - 2011. - # 3. - S. 29-32. kanala M2 i nukleoproteina [Construction of
2. Aksenova I V Opasnost mikoplazmoza dlya dikih Recombinant Adenoviral Vector Expressing Genes
populyatsiy zubra (Bison bonasus). Osobennosti of the Conservative Influenza Iroteins M2 and
epizootii i patogeneza [Danger of mycoplasmosis Nucleoprotein] / I. B. Esmagambetov, E. S. Sedova,
for wild bison populations (Bison bonasus). Eeatures D. N. Shcherbinin et al. // Molekulyarnaya genetika,
of epizootic and pathogenesis] / I V Aksenova, mikrobiologiya i virusologiya. - 2014. - № 2. - S.
A. M. Ermakov, L. I. Mironova, E. L. Tsibizova // 22-28.
Rossiyskiy veterinarnyiy zhurnal. Melkie domashnie 38-93. Vide supra. i dikie zhivotnyie. - 2014. - # 3. - S. 38-42.
Zelenkova G. A., Karantysh G. V., Tambiev T. S., Malysheva L. A., Kapelist I. V., Ermakov A. M.
BIRD FLU: ECOLOGY, MORPHOLOGY, MOLECULAR MARKERS OF VIRUS PATHOGENICITY, MODERN EPISOCTICAL SITUATION
Key Words: bird, influenza A virus, ecology, morphology, pathogenicity of the virus, epizootic situation, Rostov Region.
Abstract: New threats of avian influenza associated pandemics among humans determine the importance of controlling the spread of the disease among animals. The analysis of literature data on epizootics caused by the avian influenza virus during the XX-XXI centuries is presents. The problems of ecology of influenza A virus, interspecies transmission and genomic diversity of membrane proteins of the pathogen of infection are considered. The latest data on the structure, molecular markers of pathogenicity and the influenza A virus life cycle of the are presented. A modern epizootic situation of avian influenza in our country and abroad, as well as measures to control and prevent the spread of this infectious pathology, in particular in the territory of the Rostov region are show in the article.
Сведения об авторах:
Зеленкова Галина Александровна, доктор с.-х наук, профессор кафедры «Биология и общая патология» Донского государственного технического университета; д. 1, пл. Гагарина, г. Ростов-на-Дону, Ростовская область, Россия, 344000; тел.: +7 (961) 309 62 44; e-mail: zelenkovalex@rambler.ru
Карантыш Галина Владимировна, доктор биол. наук, профессор кафедры «Биология и общая патология» Донского государственного технического университета; д. 1, пл. Гагарина, г. Ростов-на-Дону, Ростовская область, Россия, 344000; тел.: +7 (928) 138 88 57; e-mail: karantyshgv@mail.ru
Тамбиев Тимур Сергеевич, канд. вет. наук, доцент кафедры «Биология и общая патология» Донского государственного технического университета; д. 1, пл. Гагарина, г. Ростов-на-Дону, Ростовская область, Россия, 344000; тел.: +7 (906) 425 61 34; e-mail: tim.tambieff-earl@yandex.ru
Малышева Людмила Александровна, доктор вет. наук, профессор; тел.: +7 (903) 436 52 92
Капелист Иван Васильевич, доктор с/х наук, профессор
Ермаков Алексей Михайлович, доктор биол. наук, профессор, заведующий кафедрой «Биология и общая патология» Донского государственного технического университета; д. 1, пл. Гагарина, г. Ростов-на-Дону, Ростовская область, Россия, 344000; тел.: +7 (928) 214 33 44; e-mail: amermakov@yandex.ru
Author affiliation:
Zelenkova Galina Alexandrovna, D. Sc. in Agriculture, Professor of the Department of Biology and General Pathology of the Don State Technical University; house 1, Gagarin square, Rostov-on-Don city, Rostov Region, Russia, 344000; phone: +7 (961) 309 62 44; e-mail: zelenkovalex@rambler.ru
Karantysh Galina Vladimirovna, D. Sc. in Biology, Professor of the Department of Biology and General Pathology of the Don State Technical University; house 1, Gagarin square, Rostov-on-Don city, Rostov Region, Russia, 344000; phone: +7 (928) 138 88 57; e-mail: karantyshgv@ mail.ru
Tambiev Timur Sergeevich, Ph. D. in Veterinary Medicine, Associate Professor of the Department of Biology and General Pathology of the Don State Technical University; house 1, Gagarin square, Rostov-on-Don city, Rostov Region, Russia, 344000; phone: +7 (906) 425 61 34; e-mail: tim.tambieff-earl@yandex.ru
Malysheva Lyudmila Alexandrovna, D. Sc. in Veterinary Medicine, Professor; phone: +7 (903) 436 52 92
Kapelist Ivan Vasil'evich, D. Sc. in Agriculture, Professor
Ermakov Alexey Mikhailovich, D. Sc. in Biology, Professor, Head of the Department of Biology and General Pathology of the Don State Technical University; house 1, Gagarin square, Rostov-on-Don city, Rostov Region, Russia, 344000; phone: +7 (928) 214 33 44; e-mail: amermakov@yandex.ru
УДК 619:616-07 Баруздина Е. С.
ПРОГНОСТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ ИЗМЕНЕНИЙ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У СОБАК, БОЛЬНЫХ ПАРВОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Ключевые слова: парвовирусный энтерит, собаки, лейкоформула, эритропения, лейкопения, тромбоцитопения, гематокрит, прогностическая ценность, морфология крови, лейкоцитарный сдвиг влево.
