CC BY
53
PROBLEMS OF VIROLOGY. 2016; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
reviews
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017 УДК 615.281.8:578.8
Глотова Т.И., Никонова А.А., Глотов А.Г.
ПРОТИВОВИРУСНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И ПРЕПАРАТЫ, ЭФФЕкТИВНЫЕ В
отношении вируса вирусной диареи крупного рогатого скота
ФГБУН «Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий» РАН, Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока, 630501, Новосибирская область, Новосибирский район, пос. Краснообск
Вирус вирусной диареи — болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота (BVDV) принадлежит к роду Pestivirus, семейству Flaviviridae. Он вызывает многообразные клинические формы инфекции, приводя к значительным экономическим потерям в мясном и молочном животноводстве во всем мире. Кроме того, вирус является контаминантом биологических препаратов (эмбриональная сыворотка, перевиваемые линии культур клеток, вакцины для медицины и ветеринарии, интерфероны, трипсин, биотехнологические препараты, эмбрионы, стволовые клетки и другие) и используется в качестве тестового объекта при отработке методик их деконтаминации. В некоторых странах инструментом контроля инфекций, вызываемых вирусом, является вакцинация, основанная на применении живых и инактивированных вакцин с различной эффективностью. Противовирусные соединения представляют собой потенциальную меру борьбы в случаях недостаточной эффективности вакцин. их преимущество в борьбе с BVDV-инфекцией заключается в способности обеспечить немедленную защиту животных групп риска в случае вспышки болезни. В настоящем обзоре обобщено современное состояние знаний относительно противовирусных соединений против BVDV. Установлено, что благодаря использованию передовых биомедицинских технологий наметилась тенденция к поиску препаратов, потенциально эффективных для противовирусной терапии BVDV, на что указывают многочисленные исследования новых соединений и противовирусной эффективности известных лекарственных средств, применяющихся в медицине. У вируса, помимо хорошо известных противовирусных мишеней RdRp, IMPDH, NS3, открыт новый — протеин p7, механизм действия на который еще предстоит изучить. Сделан вывод, что потенциал борьбы с BVDV путем использования противовирусных препаратов значителен, но пока еще не реализован. Отсутствие демонстрации эффективности идентифицированных соединений in vivo является самым большим препятствием для их коммерческой реализации. Дополнительные исследования должны быть направлены на разработку методов групповой доставки эффективных лекарственных средств.
Ключевые слова: обзор; вирус вирусной диареи — болезни слизистых оболочек; крупный рогатый скот; противовирусные препараты; мишени; ингибиторы.
Для цитирования: Глотова Т.И., Никонова А.А., Глотов А.Г. Противовирусные соединения и препараты, эффективные в отношении вируса вирусной диареи крупного рогатого скота. Вопросы вирусологии. 2017; 62(5):204-210. DOI: http://dx.doi.org/ 10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
Glotova T.I., Nikonova A.A., Glotov A.G. ANTIVIRAL COMPOUNDS AND PREPARATIONS EFFECTIVE AGAINST BOVINE VIRAL DIARRHEA
Siberian Federal Scientific Centre of Agro-Biotechnologies, Krasnoobsk, Novosibirsk region, 630501, Russian Federation
Bovine viral diarrhea virus (BVDV) belongs to the genus Pestivirus, family Flaviviridae. It causes various clinical forms of infection leading to significant economic losses in beef and dairy industry worldwide. Furthermore, the virus is a contaminant of biological preparations (bovine fetal serum, continuous cell cultures, vaccines for human and veterinary medicine, interferons, trypsin, biotechnological preparations, embryos, stem cells, etc.). It is used as a test object when developing methods of decontamination. In some countries, a tool for monitoring the infection caused by the virus is vaccination based on the use of live and inactivated vaccines with varying efficiency. The antiviral compounds are a potential means of control in case of insufficient efficacy of vaccines. Their advantage for BVDV control is the ability to provide immediate protection for animals at risk in the case of an outbreak of the disease. This review summarizes the current state of knowledge about antiviral compounds against BVDV. It was noted that due to the use of advanced biomedical technologies there is a tendency to search for drugs that might be effective for antiviral therapy of BVDV, as indicated by numerous studies of new compounds and the antiviral efficacy of known drugs used in medical practice. In addition to the well-known antiviral targets for the virus, such as the RdRp, IMPDH, NS3, new targets were discovered, such as protein p7. Its mechanism of action remains to be explored. It can be concluded that there is a great potential for BVDV control through the use of antiviral drugs which has not yet implemented. The biggest obstacle for commercial implementation of identified compounds is the lack of demonstration of their efficacy in vivo. Further studies should be performed to develop a method for administering effective drugs to groups of animals.
K e y w o r d s: review; bovine viral diarrhea virus; cattle; antiviral drugs; antiviral target; inhibitor.
For citation: Glotova T.I., Nikonova A.A., Glotov A.G. Antiviral compounds and preparations effective against bovine viral diarrhea. Voprosy Virusologii (Problems of Virology, Russian journal). 2017; 62(5): 204-210. (In Russ.). DOI: http://dx.doi.org/ 10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
For correspondence: Tatyana I. Glotova, Dr. Sci. Biol., Head of laboratory, Siberian Federal Scientific Centre of Agro-Biotechnologies, Krasnoobsk, Novosibirsk region, 630501, Russian Federation. E-mail: t-glotova@mail.ru
Для корреспонденции: Глотова Татьяна Ивановна, д-р биол. наук, зав. лабораторией вирусологии Сибирского федерального научного центра агробиотехнологий РАН, 630501, Новосибирская обл., Новосибирский район, пос. Краснообск. E-mail: t-glotova@mail.ru
вопросы вирусологии. 2017; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
обзоры
Information about authors:
Glotova T.I., http:// orcid.org/0000-0003-3538-8749
Nikonova A.A., http://orcid.org/0000-0003-4554-1612; Glotov A.G., http:// orcid.org/0000-0002-2006-0196
Acknowledgments. The study had no sponsorship.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Received 23 March 2017 Accepted 25 April 2017
Введение
Вирус вирусной диареи — болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота (В"УСУ) принадлежит к роду Pestivirus, семейству Flaviviridae. Он представлен двумя различными генетическими типами: В"УСУ1 и В"УСУ2, а также двумя фенотипами: цитопатогенным и нецитопатогенным [1]. По данным некоторых исследователей, насчитывается не менее 21 субтипа В"УСУ1 [2—3] и 4 субтипа BVDV 2 (2а .... 2d) [4].
Вирус вызывает многообразные клинические формы инфекции, приводя к значительным экономическим потерям в мясном и молочном животноводстве во всем мире. BVDV-инфекщия сопровождается патологией воспроизводства, болезнями респираторного тракта, дисфункцией иммунной системы, изнуряющими хроническими заболеваниями с предрасположенностью к развитию вторичной бактериальной и другой вирусной инфекции. Отличительной чертой пестивирусов является их способность преодолевать плацентарный барьер и в зависимости от сроков стельности инфицировать плод, приводя к развитию персистентной инфекции (ПИ) [5]. Животные с ПИ выделяют инфекционный вирус на протяжении всей жизни, что создает проблему в борьбе с заболеванием. Хотя острая форма инфекции встречается довольно часто, нередко она сопровождается лишь слабыми клиническими признаками, что способствует быстрому распространению вируса в стаде [6].
В некоторых странах инструментом контроля инфекций, вызываемых BVDV, является вакцинация, основанная на применении живых и инактивированных вакцин с различной эффективностью, в других — стратегия сдерживания, включающая карантин, выявление и убой ПИ-животных или комбинированные стратегии, основанные на элементах двух первых [7]. Чтобы быть эффективной, вакцинация против BVDV должна защищать от виремии с целью предотвращения диссеминации вируса среди восприимчивых животных, блокировать инфекцию клеток-мишеней репродуктивной и лимфатической систем для препятствия инфицированию плода и имму-носупрессии соответственно. Наличие генетического разнообразия BVDV осложняет разработку эффективных вакцин [8].
Кроме того, вирус является контаминантом биологических препаратов (эмбриональная сыворотка, перевиваемые линии культур клеток, вакцины для медицины и ветеринарии, интерфероны, трипсин, биотехнологические препараты, эмбрионы, стволовые клетки и другие) и используется в качестве тестового объекта при отработке методик их деконтаминации. Учитывая высокую гомологию с другим представителем семейства Flaviviridae вирусом гепатита С, цитопатогенные штаммы BVDV используют в качестве суррогатной модели при изучении противовирусной активности препаратов относительно данного заболевания человека [9—12].
Противовирусные соединения представляют собой потенциальную меру борьбы в тех случаях, когда вак-
цинация оказывается недостаточно эффективной. Их преимущество в борьбе с BVDV-инфекцией заключается в способности обеспечить немедленную защиту животных групп риска при вспышке болезни.
Применение противовирусных препаратов может снизить экономические потери, связанные с контаминацией биологических препаратов, использованием ПИ-животных для племенных целей, ограничением в международной торговле животными, а также может быть полезно в качестве дополнения к специфической профилактике болезни в стационарно-неблагополучных хозяйствах.
Необходимость дальнейшего развития противовирусной химиотерапии BVDV-инфекции весьма актуальна и имеет большое научное и практическое значение.
В настоящем обзоре обобщено современное состояние знаний относительно антивирусных соединений против BVDV.
Группу противовирусных препаратов составляют лекарственные средства, оказывающие прямое или косвенное воздействие на вирусы и способствующие частичной или полной элиминации их из организма.
Несмотря на постоянно проводимый во всем мире поиск новых противовирусных препаратов, их количество ограничено. В значительной степени это объясняется особенностями паразитизма вирусов, поражающих геном клетки. С этим связано важное требование к противовирусным препаратам: они должны либо непосредственно воздействовать на сам вирус, не повреждая клетки, в которых он паразитирует, либо обладать способностью к активации выработки эндогенного интерферона, направленного на недопущение распространения вируса в организме.
К соединениям, оказывающим прямое действие на вирус в различные стадии его жизненного цикла, относятся только химиопрепараты.
Все этапы жизненного цикла вируса представляют собой потенциальные мишени для противовирусного действия. В настоящее время, как правило, в качестве антивирусных препаратов используют лекарственные средства, ингибирующие ферменты, которые участвуют в репликации или экспрессии генома вируса. Однако недавние успехи, включая определение структуры, свойств и функций капсида и вириона, а также событий, связанных с взаимодействием между компонентами вирусной частицы или между ними и молекулами клеток-хозяев, открыли новые пути для разработки лекарственных средств, действующих непосредственно на вирусную частицу [13].
В современной вирусологии с точки зрения действия на определенные мишени известны следующие препараты: средства, блокирующие внутриклеточные процессы, необходимые для синтеза вируса; ингибиторы вирусной сборки, созревания, раздевания или выхода вируса из клетки; препараты, препятствующие проникновению вируса в клетку. В обзоре приведены сведения о соединениях, активных в отношении BVDV (см. таблицу).
problems of virology. 2016; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
reviews
Сведения о противовирусных препаратах и химических соединениях, тестированных в отношении BVDV
Природа соединений Возможный механизм Исследованы
действия in vitro
in vivo
Азотистые гетероциклические соединения [14], соединения ароматических катионов [15], кислородсодержащие гетероциклические соединения [14, 16—20], нуклеозидные соединения [24—27], азосое-динения [28—31]
Соединение класса ароматических катионов DB772 [15, 32—36] ИФН [66—69], индукторы ИФН [71] Форзитозид A [72]
Нуклеозидные аналоги [37, 38], производные микофеноловой кислоты [39
Малые интерферирующие РНК [40, 41], плазмиды, экспрессирующие shRNA [42, 43]
Борная кислота и ее аналоги [47, 48], пиримидиновые нуклеозиды [49] Иминосахара и их производные [51—55]
Амантадин [61], соединение BIT225, производное дифенилметана
соединение SH-595A [63], каприлат [64]
Бактериальные культуры Bacillus spp. B555, B584 и B616 [64]
Ингибирование репликации генома
Ингибирование инозинмоно-
фосфатдегидрогеназы Подавление функциональной
активности генов Ингибирование сериновой про-теазы
Нарушение фолдинга гликопро-теинов вируса Препятствие проникновению вируса в клетку Ингибирование адсорбции вируса на клетку
Исследованы Не исследованы
Исследованы Не исследован
Ингибиторы репликации генома BVDV
Действие на NS5B. NS5B, или РНК-зависимая РНК-полимераза (RdRp), играет ключевую роль в синтезе и репликации вирусной РНК. Большинство известных противовирусных соединений, активных в отношении BVDV, действуют на RdRp вируса.
Синтезирован и изучен в условиях in vitro ряд азотистых гетероциклических соединений, оказывающих ингибирующее действие на репликацию BVDV за счет внесения единичных мутаций в RdRp вируса. Среди них производные акридина, бензимидазола, карболина, пиридина, хинолина, тиазепина, пиримидинамина (LZ37), триазиноиндола, алинина, замещенные производные пиримидина. Соединения класса тиазол мочевины и производные циклических мочевин [14] также ингиби-ровали RdRp. Подавление репликации BVDV вызывали соединения ароматических катионов [15]. Предполагают, что противовирусный эффект данных молекул связан с подавлением RdRp вируса, однако точный механизм их действия пока не установлен.
Способность ингибировать RdRp вируса была открыта у некоторых кислородсодержащих гетероциклических соединений [14, 16—20]. Однако при их использовании происходила быстрая селекция резистентных вариантов BVDV [21—23]. Антивирусная активность установлена также у нуклеозидных соединений, которые действуют как антиметаболиты на специфические ферментные системы вирусной частицы, в том числе на RdRp [24—27].
Некоторые исследованные азосоединения, тиосеми-карбазоны и 2-фенилбензимидазол также подавляли репликацию BVDV в условиях in vitro, воздействуя на RdRp [28—31].
Из соединений, ингибирующих RdRp in vitro, лишь некоторые испытывали in vivo. Так, соединение DB772 из класса ароматических катионов испытано in vivo на ПИ у телят. Его применение привело к снижению виремии, но не полному освобождению животных от персистирую-щего вируса [32]. Внутривенное введение DB772 перед интраназальным заражением вирулентным штаммом вируса успешно предотвращало инфицирование серонега-
тивных телят. Однако эти животные становились восприимчивыми к ВУСУ после снижения защитного уровня концентрации соединения в организме [33]. Кроме того, установлено, что данное соединение обладает выраженной почечной токсичностью [34]. Несмотря на это, авторы считают, что DB772 может найти другое применение в борьбе с болезнью. Известно, что ароматические кати-онные соединения ранее использовали для устранения ВУЭУ-инфекции культур клеток и эмбрионов [15, 35], а эмбрионы крупного рогатого скота, культивируемые с этим соединением, были успешно имплантированы реципиентам с последующим рождением здоровых телят с нормальной репродуктивной способностью [36].
Ингибиторы IMPDH. Инозинмонофосфат-дегидроге-наза (IMPDH) является ферментом, ограничивающим образование гуаниновых нуклеотидов, что приводит к выраженному снижению уровня внутриклеточного гуанозинтрифосфата и сопровождается подавлением синтеза вирусной РНК и вирусспецифических белков. Таким образом, ингибиторы IMPDH могут давать анти-пролиферативный и противовирусный эффект.
Существуют 2 пути ингибирования IMPDH: через аналоги субстрата, такие как инозинмонофосфат, или через аналоги кофактора, например никотинамидаде-ниндинуклеотид [27].
По типу субстрата действуют некоторые нуклеозидные аналоги, такие как рибавирин [37] и мизорибин [38]. По всей видимости, кроме ингибирования IMPDH, они используют и другие механизмы воздействия на вирус. По типу кофактора действуют производные микофеноловой кислоты, обладающие антивирусной активностью в отношении В"УВУ [39].
Препарат рибавирин, применяемый в медицине для лечения гепатита С, ингибирует репликацию новых ви-рионов, обеспечивая снижение вирусной нагрузки, селективно подавляет синтез вирусной РНК, не влияя на синтез РНК в нормально функционирующих клетках. Для ветеринарии разработан комплексный препарат, включающий рибавирин и антибактериальные препараты: триметоприм и энрофлоксацин. Он рекомендован
вопросы вирусологии. 2017; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
обзоры
для лечения смешанных вирусно-бактериальных инфекций молодняка сельскохозяйственных животных. Однако препарат токсичен, дает выраженный тератогенный эффект и не может использоваться при лечении репродуктивных животных. Нет экспериментальных данных о его эффективности. В медицине прошел клинические испытания препарат липосомального рибавирина с пониженной токсичностью и более высокой терапевтической эффективностью, чем рибавирин. Однако его применение у животных ограничено высокой стоимостью.
Препараты, влияющие на экспрессию гена
Применение методов современной молекулярной биологии позволяет разработать препараты, способные подавлять функциональную активность любого из известных генов. Антисмысловая терапия основана на остановке синтеза специфических белков при помощи коротких нуклеотидных последовательностей — антисмысловых олигонуклеотидов, комплементарных матричной РНК. Доставка олигонуклеотидов в клетки при этом может осуществляться методами РНК-интерференции.
В условиях in vitro установлена умеренная противовирусная активность в отношении BVDV1 сконструированных синтетических малых интерферирующих РНК (миРНК) с активностью, направленной на белки оболочки вируса (Ems, E1 и E2) и высококонсервативную область генома вириона 5'-нетранслируемый регион (5'UTR) [40]. Выраженная противовирусная активность in vitro выявлена у миРНК (C, NS4B и NS5A), направленных на 5'UTR и белки BVDV. Кроме того, авторы исследования обнаружили противовирусное действие у коротких РНК, образующих BVDV-специфические шпильки (shRNA) [41]. Позже были созданы плазмиды, экспрессирующие shR-NA, направленные на консервативные области генома вируса, подавляющие репликацию BVDV типа 1, субтипов a, b и c [42]. Их удалось встроить в геном овцы и получить культуру эпителиальных клеток почки трансгенных животных с экспрессией shRNA, устойчивую к заражению различными субтипами BVDV1. Можно предположить, что РНК-интерференция позволит в перспективе создать трансгенных животных с повышенной устойчивостью к BVDV [43].
Несмотря на возросший в последние годы интерес к РНК-терапии, исследователи сталкиваются с проблемой неспецифического действия антисмысловых олигонуклеотидов на ткани организма, сопровождающегося побочными эффектами [44].
В литературе описан ряд соединений, ингибирующих репликацию BVDV, механизм действия которых еще предстоит определить [45, 46].
Ингибиторы созревания и вирусной сборки
Действие на NS3. Белок NS3 играет большую роль в жизненном цикле всех представителей семейства Flavi-viridae, проявляя протеазную, нуклеозидтрифосфатаз-ную и хеликазную ферментативную активность.
Сериновая протеиназа разрезает полипротеин вируса, в результате чего образуются зрелые белки NS4A, NS4B, NS5A и NS5B. Ингибитором сериновой протеиназы является борная кислота [47]. Получен ее аналог DPC-AB9144-00, ингибирующий белок NS3 BVDV [48].
Известно, что пиримидиновые нуклеозиды проявляют высокую субстратную активность по отношению к NTP-азе/хеликазе вирусов семейства Flaviviridae. Описано соединение из этой группы, эффективно подавляю-
щее репликацию BVDV [49]. Противовирусная активность, основанная на воздействии на NS3, установлена у известного антигельминтного препарата ивермектин в отношении некоторых вирусов этого семейства: денге, лихорадки Западного Нила, желтой лихорадки. Однако данных о его активности в отношении BVDV нет [50].
Несмотря на успешные опыты в условиях in vitro, описанные препараты не были испытаны in vivo.
Нарушение фолдинга гликопротеинов вируса
Одними из наиболее перспективных лекарственных препаратов могут стать иминосахара и их производные. Они ингибируют глюкозидазы эндоплазматической сети, приводя к нарушению фолдинга гликопротеинов вируса [51]. Большое количество исследований in vitro подтверждает выраженную противовирусную активность имино-сахаров в отношении BVDV [52—55], но нет данных об экспериментах in vivo с этими соединениями.
Препятствие проникновению вируса в клетку
Проникновение вириона в клетку — необходимый процесс цикла размножения всех вирусов, поскольку они не способны к самостоятельной репликации. Стратегия создания ингибитора, препятствующего проникновению вируса в клетку, очень перспективна. Она может предотвратить различные негативные воздействия на клеточный цикл и оставить вирион уязвимым для иммунной системы хозяина.
Действие на гликопротеины оболочки вируса. Белки оболочки (E) вирусов семейства Flaviviridae играют ключевую роль в процессах сборки, морфогенеза и инфицирования клеток. Получено несколько соединений, активных в отношении вируса денге [56, 57], но сведений о подобных работах в отношении BVDV не найдено.
Действие на полипептид p7. Полипептид p7, образуемый при процессинге белка E2, относится к виропоринам. Это небольшие и обычно гидрофобные многофункциональные белки вирусов. Они способны формировать оли-гомерные ионные каналы или поры в мембране клетки-хозяина, что делает ее проницаемой и облегчает выход вирионов из клетки. Нарушение функционирования p7 приводит к потере инфекционности вируса [58, 59]. Установлено, что функции p7 протонного канала могут быть заблокированы небольшими молекулами-ингибиторами. Это приводит к блокаде воспроизводства вирусных частиц [60]. Подтверждена функция белка p7 вируса гепатита C человека как ионного канала в искусственном липид-ном бислое. Эксперименты in vitro продемонстрировали возможность прекращения работы канала, образованного белком p7, при помощи амантадина [61]. Недавно описано низкомолекулярное соединение BIT225, ингибирую-щее p7 у BVDV и вируса гепатита C [62].
Таким образом, соединения, подобные BIT225, могут стать новыми препаратами, эффективными в борьбе с BVDV.
Ингибиторы проникновения вируса в клетку с неустановленным механизмом действия. При исследовании производных дифенилметана установлено, что некоторые из них влияют на репликацию BVDV за счет инги-бирования синтеза РНК. Однако противовирусное действие одного из этих соединений, SH-595A, не удалось объяснить только данным эффектом. Показано, что оно влияет на проникновение вируса в клетку, но механизм этого действия неясен [63]. Противовирусный эффект в отношении BVDV обнаружен у трех (B555, B584 и B616)
problems of virology. 2016; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
reviews
бактериальных культур Bacillus spp., изолированных из тканей морской губки Petromica citrina. Он основан на ингибировании адсорбции вируса на клетки [64].
Установлено вируцидное действие каприлата в отношении BVDV, механизм которого, возможно, обусловлен способностью к проникновению в оболочку вируса и ее разрыхлению, что создает препятствия для слияния капсида вируса с мембраной клетки [65].
Интерфероны
Интерфероны (ИФН) представляют собой семейство ци-токинов с широким спектром биологической активности, в том числе ингибирования репликации вируса, противоопухолевой активности, индукции главного комплекса гистосовместимости антигенов класса I и II, а также Fc-рецепторов [66]. Проведены исследования, свидетельствующие об активности экзогенных ИФН в отношении BVDV in vitro [67]. Эксперименты по изучению антивирусной активности ИФН in vivo не были достаточно успешными. Так, подкожное введение рекомбинантного ИФН крупного рогатого скота (boIFN) в дозе 106 ед/кг 5 раз в неделю в течение 2 нед приводило лишь к незначительному снижению вирусной нагрузки ПИ BVDV у животных [68]. По данным других авторов, boIFN подавляет активность вируса in vitro и снижает степень виремии у животных. Введение рекомбинантного человеческого ИФН-а2а телятам с ПИ нецитопатогенным BVDV1 сопровождалось выработкой сывороточного ИФН в течение периода лечения и его сохранением до 2 нед после прекращения курса [69].
Производство альфа- и бета-ИФН в ответ на действие вирусной РНК (dsRNA) является первой линией обороны против вирусных инфекций. Установлено, что Erns-гликопротеин BVDV может действовать как ингибитор dsRNA-индуцированной реакции клеток [70].
Таким образом, хотя исследования in vitro продемонстрировали хорошие результаты, низкая эффективность in vivo и необходимость длительных курсов лечения ограничивают практическое применение ИФН.
Индукторы ИФН и иммуномодуляторы
Индукторы ИФН — группа разнообразных по составу, высоко- и низкомолекулярных природных и синтетических соединений, способных вызывать в организме образование эндогенного ИФН. Иммуномодуляторы — это группа препаратов, обладающих способностью воздействовать на различные звенья системы иммунитета. Индукторы ИФН и иммуномодуляторы широко применяют для профилактики и лечения вирусных заболеваний животных, особенно препараты растительного происхождения, имеющие низкую себестоимость.
Препарат, разработанный на основе РНК пекарских дрожжей, являющийся индуктором ИФН, проявил выраженное противовирусное действие in vitro за счет подавления репликации вируса. Аналогичные результаты получены в опытах на телятах, естественно инфицированных BVDV. Препарат в дозе 0,5 мг/кг при введении телятам с субклинической формой BVDV-инфекции привел к сокращению сроков выделения вируса с носовыми секретами, нормализации температуры тела и гематологических показателей [71].
Изучено противовирусное действие препарата фор-зитозид A (FTA) — полифенольного вещества, получаемого из плодов форзиции (Forsythia suspensa), которые используют в китайской народной медицине в качестве иммуностимулятора и антиоксиданта. Установлено, что
FTA защищает мононуклеарные клетки периферической крови от инфекции BVDV, активирует T-клеточный иммунный ответ, ингибирует репликацию вируса и подавляет его цитопатическое действие [72].
Заключение
Благодаря использованию передовых биомедицинских технологий наметилась тенденция к поиску препаратов, потенциально эффективных для противовирусной терапии вирусной диареи крупного рогатого скота. На это указывают многочисленные исследования новых соединений и противовирусной эффективности известных лекарственных препаратов для медицины. У вируса, помимо хорошо известных противовирусных мишеней RdRp, IMPDH, NS3, открыты новые, например протеин p7, механизм действия на который еще предстоит изучить. Многие соединения показали высокую эффективность in vitro, но они либо не тестировались, либо не проявляли активность in vivo. Помимо специфических химио-препаратов, перспективы для дальнейшего применения в ветеринарии имеют индукторы ИФН и иммуномодуля-торы, получаемые из природных источников.
Особое значение имеет определение места для противовирусной терапии ПИ высокоплеменных животных. В настоящее время наиболее эффективными методами являются своевременное их выявление и выбраковка, так как лечение достаточно сложно и экономически невыгодно.
При транзитной BVDV-инфекции экономические и трудовые затраты на противовирусную терапию будет трудно оправдать в связи с низкой смертностью и часто слабыми клиническими признаками инфекции. В таких случаях выгоднее осуществлять профилактическую вакцинацию, а не лечение животных.
Тем не менее стратегическое использование противовирусных препаратов в стационарно неблагополучных очагах инфекции может предприниматься для защиты от инфицирования и сохранения ценного племенного скота, а также редких зоологических коллекций и видов, находящихся под угрозой исчезновения. В настоящее время получены доказательства BVDV-инфекции у представителей более 50 семейств отряда парнокопытных, включающих несколько редких и исчезающих видов [73]. До сих пор не разработаны методы для их защиты от этой инфекции.
Применение противовирусных препаратов с целью профилактики в ветеринарной медицине пока находится в стадии разработки, но имеет большие перспективы. Их преимущество заключается в обеспечении мгновенной защиты животных от инфицирования. Одним из способов групповой профилактики вирусной диареи у продуктивных и племенных животных могут быть кормовые добавки, содержащие противовирусные препараты или индукторы ИФН. Это особенно необходимо в тех случаях, когда происходит смешивание животных с неизвестным иммунным статусом в молочных и мясных стадах, особенно поступающих по импорту.
Несмотря на проводимую вакцинацию телят, отсрочка иммунной защиты обеспечивает временной промежуток для воздействия вируса, когда возможно их инфицирование и заболевание. В таком случае противовирусные препараты могли бы обеспечить адекватную защиту до формирования поствакцинального иммунитета.
Особое значение в трансконтинентальных масштабах приобретает поиск противовирусных препаратов
вопросы вирусологии. 2017; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
обзоры
и способов их применения для деконтаминации биологических препаратов, полученных на основе перевиваемых культур клеток, инфицированных вирусом, а также контаминированной эмбриональной сыворотки. Клеточные культуры нашли широкое применение во многих областях, таких как искусственное оплодотворение, лабораторная диагностика, производство биофармацевтических препаратов и вакцин, исследования в области рака, скрининг и разработка лекарственных препаратов, генная и клеточная терапия, тканевая инженерия, а также испытания на токсичность. Поэтому в настоящее время особую актуальность приобретают исследования по деконтаминации эмбриональных сывороток и культур клеток, используемых в стремительно развивающейся отрасли биологической промышленности.
Таким образом, потенциал борьбы с BVDV путем использования противовирусных препаратов весьма значителен, но пока не реализован. Отсутствие демонстрации эффективности идентифицированных соединений in vivo является самым большим препятствием для их коммерческой реализации. Дополнительные исследования должны быть направлены на разработку методов групповой доставки эффективных лекарственных средств. Наличие и применение таких соединений будут неоценимыми в борьбе со вспышками заболеваний, обеспечивая немедленную направленную защиту от вируса.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА (п.п. 1—5, 7—10, 12—48, 50—65, 67—69, 71, 72 см. REFERENcES)
6. Глотов А.Г., Глотова Т.И., Семенова О.В., Котенева С.В., Ни-
конова А.А. Индикаторы циркуляции вируса вирусной диареи
(болезни слизистых оболочек) крупного рогатого скота на мо-
лочных комплексах в условиях Сибири. Сельскохозяйственная
биология. 2016; 51(4): 483—90.
11. Урываев Л.В., Ионова К.С., Дедова А.В., Дедова Л.В., Селиванова Т.К., Прасюк Н.А. и др. Анализ контаминации культур пе-стивирусом BVDV и микоплазмами. Вопросы вирусологии. 2012; (5): 15—21.
49. Иванов М.А., Иванов А.В., Красницкая И.А., Смирнова О.А., Карпенко И.Л., Беланов Е.Ф. и др. Новые фурано- и пирроло [2,3-D] пиримидиновые нуклеозиды и их 5-трифосфаты: синтез и биологические свойства. Биоорганическая химия. 2008; (5): 661—70. 66. Глотова Т.И., Кунгурцева О.В., Глотов А.Г. Действие препаратов экзогенного интерферона на вирус вирусной диареи-болезни слизистых крупного рогатого скота. Аграрный вестник Урала. 2012; (5): 34—6.
70. Ямковая Т.В., Глотова Т.И., Глотов А.Г., Семенова О.В., Ямковой В.И., Панин Л.Е. Активность препарата Виталанг-2 в отношении возбудителя вирусной диареи — болезни слизистых оболочек КРС. Ветеринария. 2014; (3): 10—4.
REFERENCES
1. King A.M.Q., Adams M.J., Carstens E.B., Lefkowitz E.J., eds. Virus Taxonomy: Ninth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. San Diego: Academic Press; 2011.
2. Giammarioli M., Ceglie L., Rossi E., Bazzucchi M., Casciari C., Pe-trini S. et al. Increased genetic diversity of BVDV-1: recent findings and implications thereof. Virus Genes. 2015; 50(1): 147—51.
3. Factor C., Yus E., Eiras C., Sanjuan M.L., Cervino M., Arnaiz I. et al. Genetic diversity of bovine viral diarrhea viruses from the Galicia region of Spain. Vet. Rec. Open. 2016, 3(1): e000196.
4. Deng M., Ji S., Fei W., Raza S., He C., Chen Y. et al. Prevalence study and genetic typing of bovine viral diarrhea virus (BVDV) in four bovine species in China. PLoS ONE. 10(4): e0121718.
5. Hessman B.E., Sjeklocha D.B., Fulton R.W., Ridpath J.F., Johnson
B.J., McElroy D.R. Acute bovine viral diarrhea associated with extensive mucosal lesions, high morbidity, and mortality in a commercial feedlot. J. Vet. Diagn. Invest. 2012; 24(2): 397—4.
6. Glotov A.G., Glotova T.I., Semenova O.V., Koteneva S.V., Nikon-ova A.A. The bovine viral diarrhea indicators in the cattle on the big dairy farms in Siberia. Sel'skokhozyaystvennaya biologiya. 2016; 51(4): 483—90. (in Russian)
7. Moennig V., Becher P. Pestivirus control programs: how far have we come and where are we going? Anim. Health Res. Rev. 2015; 16(1): 83—7.
8. Kalaycioglu A.T. Bovine viral diarrhoea virus (BVDV) diversity and vaccination. A review. Vet. Q. 2007; 29(2): 60—7.
9. Pinheiro de Oliveira T.F., Fonseca A.A. Jr, Camargos M.F., de Oliveira A.M., Pinto Cottorello A.C., Souza Ados R. et al. Detection of contaminants in cell cultures, sera and trypsin. Biologicals. 2013; 41(6): 1—8.
10. Buckwold V.E., Beer B.E., Donis R.O. Bovine viral diarrhea virus as a surrogate model of hepatitis C virus for the evaluation of antiviral agents. Antiviral Res. 2003; 60(1): 1—15.
11. Uryvaev L.V., Ionova K.S., Dedova A.V., Dedova L.V., Selivanova T.K., Prasyuk N.A. et al. Analysis of the cell tissue culture contamination with the bovine viral diarrhea virus and mycoplasmas. Vo-prosy virusologii. 2012; (5): 15—21. (in Russian)
12. Uryvaev A.V., Dedova L.V., Dedova K.S., Ionova K.S., Parasjuk N.A., Selivanova T.K. et al. Contamination of cell cultures with bovine viral diarrhea virus (BVDV). Bull. Exp. Biol. Med. 2012; 153(1): 77—81.
13. Menendez-Arias L., Gago F. Antiviral agents: structural basis of action and rational design. Subcell. Biochem. 2013; 68: 599—30.
14. Newcomer B.W., Givens M.D. Approved and experimental counter-measures against pestiviral diseases: Bovine viral diarrhea, classical swine fever and border disease. Antiviral Res. 2013; 100(1): 133—50.
15. Givens M.D., Dykstra C.C., Brock K.V., Stringfellow D.A., Kumar A., Stephens C.E. et al. Detection of inhibition of bovine viral diarrhea virus by aromatic cationic molecules. Antimicrob. Agents Chemother. 2003; 47(7): 2223—30.
16. Buckwold V.E., Wilson R.J., Nalca A., Beer B.B., Voss T.G., Turpin J.A. et al. Antiviral activity of hop constituents against a series of DNA and RNA viruses. Antiviral Res. 2004; 61(1): 57—2.
17. Mazzei M., Nieddu E., Miele M., Balbi A., Ferrone M., Fermeglia M. et al. Activity of Mannich bases of 7-hydroxycoumarin against Flaviviridae. Bioorg. Med Chem. 2008; 16(5): 2591—605.
18. Giampieri M., Balbi A., Mazzei M., La Colla P., Ibba C., Loddo R. Antiviral activity of indole derivatives. Antiviral Res. 2009; 83(2): 179—85.
19. Zhang N., Liu Z., Han Q., Chen J., Lou S., Qiu J. et al. Inhibition of bovine viral diarrhea virus in vitro by xanthohumol: comparisons with ribavirin and interferon-alpha and implications for the development of anti-hepatitis C virus agents. Eur. J. Pharm. Sci. 2009; 38(4): 332—40.
20. Ibrahim M.M., Mazzei M., Delogu I., Szabö R., Sanna G., Loddo R. Activity of bis (7-hydroxycoumarin) Mannich bases against bovine viral diarrhoea virus. Antiviral Res. 2016; 134: 153—60.
21. Chezal J.M., Paeshuyse J., Gaumet V., Canitrot D., Maisonial A., Lar-tigue C. et al. Synthesis and antiviral activity of an imidazo [1,2-a] pyrrolo [2,3-c] pyridine series against the bovine viral diarrhea virus. Eur. J. Med.. Chem. 2010; 45(5): 2044—7.
22. Paeshuyse J., Letellier C., Froeyen M., Dutartre H., Vrancken R., Canard B. et al. A pyrazolotriazolopyrimidinamine inhibitor of bovine viral diarrhea virus replication that targets the viral RNA-dependent RNA polymerase. Antiviral Res. 2009; 82(3): 141—7.
23. Baginski S.G., Pevear D.C., Seipel M., Sun S.C., Benetatos C.A., Chunduru S.K. et al. Mechanism of action of a pestivirus antiviral compound. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000; 97(14): 7981—6.
24. Manfredini S., Angusti A., Veronese A.C., Durini E., Vertuani S., Na-lin F. et al. Hindered nucleoside analogs as antiflaviviridae agents. Pure Appl. Chem. 2004; 76: 1007—5.
25. Pierra C., Amador A., Badaroux E., Storer R., Gosselin G. Synthesis of 2'-Cmethylcytidine and 2'-C-methyluridine derivatives modified in the 3'-position as potential antiviral agents. Coll. Czech. Chem. Comm. 2006; 71: 991—1010.
26. Angusti A., Manfredini S., Durini E., Ciliberti N., Vertuani S., Sola-roli N. et al. Design, synthesis and anti flaviviridae activity of N(6)-, 5',3'-O- and 5',2'-O-substituted adenine nucleoside analogs. Chem. Pharm. Bull. (Tokyo). 2008; 56(4): 423—32.
27. Finkielsztein L.M., Moltrasio G.Y., Caputto M.E., Castro E.F., Ca-vallaro L.V., Moglioni A.G. What is known about the antiviral agents active against bovine viral diarrhea virus (BVDV)? Curr. Med. Chem. 2010; 17(26): 2933—55.
28. Giliberti G., Ibba C., Marongiu E., Loddo R., Tonelli M., Boido V. et al. Synergistic experimental/computational studies on arylazoenamine derivatives that target the bovine viral diarrhea virus RNA-dependent RNA polymerase. Bioorg. Med. Chem. 2010; 18(16): 6055—8.
problems of virology. 2016; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-5-204-210
reviews
29. Finkielsztein L.M., Castro E.F., Fabián L.E., Moltrasio G.Y., Campos R.H., Cavallaro L.V. et al. New 1-indanone thiosemicarbazone derivatives active against BVDV. Eur. J. Med. Chem. 2008; 43(8): 1767—3.
30. Castro E.F., Fabian L.E., Caputto M.E., Gagey D., Finkielsztein L.M., Moltrasio G.Y. et al. Inhibition of bovine viral diarrhea virus RNA synthesis by thiosemicarbazone derived from 5,6-dimethoxy-1 -indanone. J. Virol. 2011; 85: 5436—5.
31. Tonelli M., Simone M., Tasso B., Novelli F., Boido V., Sparatore F. et al. Antiviral activity of benzimidazole derivatives. II. Antiviral activity of 2 phenylbenzimidazole derivatives. Bioorg. Med. Chem. 2010; 18(8): 2937—3.
32. Newcomer B.W., Marley M.S., Galik P.K., Walz P.H., Zhang Y., Riddell K.P. et al. Antiviral treatment of calves persistently infected with bovine viral diarrhoea virus. Antivir. Chem. Chemother. 2012; 22(4): 171—9.
33. Newcomer B.W., Marley M.S., Galik P.K., Zhang Y., Riddell K.P., Boykin D.W. et al. Effect of treatment with a cationic antiviral compound on acute infection with bovine viral diarrhea virus. Can. J. Vet. Res. 2013; 77(3): 170—6.
34. Newcomer B.W., Neill J.D., Marley M.S., Ridpath J.F., Givens M.D. Mutations induced in the NS5B gene of bovine viral diarrhea virus by antiviral treatment convey resistance to the compound. Virus Res. 2013; 96(1—2): 127—9.
35. Givens M.D., Stringfellow D.A., Riddell K.P., Galik P.K., Carson R.L., Riddell M.G. et al. Normal calves produced after transfer of in vitro fertilized embryos cultured with an antiviral compound. The-riogenology. 2006; 65(2): 344—5.
36. Givens M.D., Marley M.S., Riddell K.P., Galik P.K., Stringfellow D.A. Normal reproductive capacity of heifers that originated from in vitro fertilized embryos cultured with an antiviral compound. Anim. Reprod. Sci. 2009; 113(1—4): 283—6.
37. Escuret V., Parvaz P., Hantz O., Petit M.A., Trepo C., Zoulim F. Study of the antiviral mechanism of action of ribavirin in the bovine viral diarrhea virus model. Gastroenterol. Clin. Biol. 2002; 26(6—7): 584—90. (in French)
38. Yanagida K., Baba C., Baba M. Inhibition of bovine viral diarrhea virus (BVDV) by mizoribine: synergistic effect of combination with interferon-alpha. Antiviral Res. 2004; 64(3): 195—201.
39. Stuyver L.J., Lostia S., Patterson S.E., Clark J.L., Watanabe K.A., Otto M.J. et al. Inhibitors of the IMPDH enzyme as potential antibovine viral diarrhoea virus agents. Antivir. Chem. Chemother. 2002; 13(6): 345—52.
40. Mishra N., Rajukumar K., Kalaiyarasu S., Behera S.P., Nema R.K., Dubey S.C. Small interfering RNAs targeting viral structural envelope protein genes and the 5'-UTR inhibitreplication of bovine viral diarrhea virus in MDBK cells. Acta Virol. 2011; 55(3): 279—82.
41. Lambeth L.S., Moore R.J., Muralitharan M.S., Doran T.J. Suppression of bovine viral diarrhea virus replication by small interfering RNA and short hairpin RNA-mediated RNA interference. Vet. Microbiol. 2007; 119(2-4): 132—43.
42. Ni W., Hu S., Qiao J., Yu Y., Wang D., Tong Q. et al. Suppression of bovine viral diarrhea virus replication by single and dual short hairpin RNA-mediated RNA interference. Res. Vet. Sci. 2012; 93(1): 544—8.
43. Ni W., Qiao J., Ma Q., Wang J., Wang D., Zhao X. et al. Development of sheep kidney cells with increased resistance to different subgenotypes of BVDV-1 by RNA interference. J. Virol. Methods. 2015; 218: 66—70.
44. Chery J. RNA therapeutics: RNAi and antisense mechanisms and clinical applications. Postdoc J. 2016; 4(7): 35—50.
45. Fischer M.A., Smith J.L., Shum D., Stein D.A., Parkins C., Bhinder B. et al. Flaviviruses are sensitive to inhibition of thymidine synthesis. J. Virol. 2013; 87(17): 9411—9.
46. Hoover S., Striker R. Thiopurines inhibit bovine viral diarrhea virus production in a thiopurine methyltransferase-dependentmanner. J. Gen. Virol. 2008; 89(Pt. 4): 1000—9.
47. Koehler K.A., Lienhard G.E. 2-phenylethaneboronic acid, a possible transition-state analog for chymotrypsin. Biochemistry. 1971; 10(13): 2477—3.
48. Bukhtiyarova M., Rizzo C.J., Kettner C.A., Korant B.D., Scarnati
H.T., King R.W. Inhibition of the bovine viral diarrhea virus NS3 serine protease by a boron-modified peptidyl mimetic of its natural substrate. Antivir. Chem. Chemother. 2001; 12: 367—3.
49. Ivanov M.A., Ivanov A.V., Krasnitskaya I.A., Smirnova O.A., Karpenko
I.L., Belanov E.F. et al. New furano- and pyrrolo[2,3-d]pyrimidine nucleosides and their 5'-O-triphosphates: Synthesis and biological properties. Bioorganicheskaya khimiya. 2008; (5): 661—70. (in Russian)
50. Baharuddin A., Hassan A.A., Sheng G.C., Nasir S.B., Othman S., Yusof R. et al. Current approaches in antiviral drug discovery against the flaviviridae family. Curr. Pharm. Des. 2014; 20(21): 3428—44.
51. Alonzi D.S., Dwek R.A., Butters T.D. Improved cellular inhibitors for glycoprotein processing alpha-glucosidases: biological charac-
terization of alkyl- and arylalkyl-N-substituted deoxynojirimycins. Tetrahedron Asymmetry. 2009; 20: 897—1.
52. Mehta A., Ouzounov S., Jordan R., Simsek E., Lu X., Moriarty R.M. et al. Imino sugars that are less toxic but more potent as antivirals, in vitro, compared with N-n-nonyl DNJ. Antivir. Chem. Chemother. 2002; 13(5): 299—4.
53. Whitby K., Taylor D., Patel D., Ahmed P., Tyms A.S. Action of celgosivir (6 O-butanoyl castanospermine) against the pestivirus BVDV: implications for thetreatment of hepatitis C. Antivir. Chem. Chemother. 2004; 15(3): 141—51.
54. Durantel D., Branza-Nichita N., Carrouee-Durantel S., Butters T.D., Dwek R.A., Zitzmann N. Study of the mechanism of antiviral action of iminosugar derivatives against bovine viral diarrhea virus. J. Virol. 2001; 75(19): 8987—8.
55. Du Y., Ye H., Gill T., Wang L., Guo F., Cuconati A. et al. N-Alkylde-oxynojirimycin derivatives with novel terminal tertiary amide substitution for treatment of bovine viral diarrhea virus (BVDV), Dengue, and Tacar-ibe virus infections. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013; 23(7): 2172—6.
56. Poh M.K., Yip A., Zhang S., Priestle J.P., Ma N.L., Smit J.M. et al. A small molecule fusion inhibitor of dengue virus. Antiviral. Res. 2009; 84(3): 260—6.
57. Yennamalli R., Subbarao N., Kampmann T., McGeary R.P., Young P.R., Kobe B. Identification of novel target sites and an inhibitor ofthe dengue virus E protein. J. Comput. Aided. Mol. Des. 2009; 23(6): 333—41.
58. Griffin S.D., Beales L.P., Clarke D.S., Worsfold O., Evans S.D., Jaeger J. et al. The p7 protein of hepatitis C virus forms an ion channel that is blocked by the antiviral drug, Amantadine. FEBS Lett. 2003; 535(1—3): 34—8.
59. Harada T., Tautz N., Thiel H.J. E2-p7 region of the bovine viral diarrhea virus polyprotein: processing and functional studies. J. Virol. 2000; 74(20): 9498—6.
60. Griffin S.D.C., Harvey R., Clarke D.S., Barclay W.S., Harris M., Rowlands D.J. A conserved basic loop in hepatitis C virus p7 protein is required for amantadine-sensitive ion channel activity in mammalian cells but is dispensable for localization to mitochondria. J. Gen. Virol. 2004; 85(Pt. 2): 451—61.
61. Foster T.L., Verow M., Wozniak A.L., Bentham M.J., Thompson J., Atkins E. et al. Resistance mutations define specific antiviral effects for inhibitors of the hepatitis C virus p7 ion channel. Hepatolodgy. 2011; 54(l): 79—90.
62. Luscombe C.A., Huang Z., Murray M.G., Miller M., Wilkinson J., Ewart G.D. A novel Hepatitis C virus p7 ion channel inhibitor, BIT225, inhibits bovine viral diarrhea virus in vitro and shows syn-ergism with recombinant interferon-alpha-2b and nucleoside analogues. Antiviral Res. 2010; 86(2): 144—3.
63. Bastos J.C., Kohn L.K., Fantinatti-Garboggini F., Padilla M.A., Flores E.F., da Silva B.P. et al. Antiviral activity of Bacillus sp. isolated from the marine sponge Petromica citrina against bovine viral diarrhea virus, a surrogate model of the hepatitis C virus. Viruses. 2013; 5(5): 1219—30.
64. Johnston A., Uren E., Johnstone D., Wu J. Low pH, caprylate incubation as a second viral inactivation step in the manufacture of albumin. Parametric and validation studies. Biologicals. 2003; 31(3): 213—1.
65. Baron S., Tyring S.K., Fleischmann W.R., Coppenhaver D.H., Niesel D.W., Klimpel G.R. et al. The interferons: mechanisms of action and clinical applications. JAMA. 1991; 266(10): 1375—3.
66. Glotova T.I., Kungurtseva O.V., Glotov A.G. The drugs exogenous interferon in BVDV. Agrarnyy vestnik Urala. 2012; (5): 34—6. (in Russian)
67. Kohara J., Nishikura Y., Konnai S., Tajima M., Onuma M. Effects of interferon-tau on cattle persistently infected with bovine viral diarrhea virus. Jpn. J. Vet. Res. 2012; 60(2—3): 63—70.
68. Peek S.F., Bonds M.D., Schaele P., Weber S., Friedrichs K., Schultz R.D. Evaluation of antiviral activity and toxicity of recombinant human interferon alfa-2a in calves persistently infected with type 1 bovine viral diarrhea virus. Am. J. Vet. Res. 2004; 65(6): 865—70.
69. Iqbal M., Poole E., Goodbourn S., McCauley J.W. Role for bovine viral diarrhea virus Erns glycoprotein in the control of activation of beta interferon by double-stranded RNA.J. Virol. 2004; 78(1): 136—5.
70. Yamkovaya T.V., Glotova T.I., Glotov A.G., Semenova O.V., Yamkovoy V.I., Panin L.E. The drug activity Vitalang 2 against virus of bovine viral diarrhea - mucosal disease. Veterinariya. 2014; (3): 10—4. (in Russian)
71. Song Q., Weng X.G., Cai D.J., Zhang W., Wang J.F. Forsythoside A Inhibits BVDV Replication via TRAF2-Dependent CD28-4-1BB Signaling in Bovine PBMCs. PLoS One. 2016; 11(9): e0162791.
72. Passler T., Walz P.H. Bovine viral diarrhea virus infections in heter-ologous species. Anim. Health Res. Rev. 2010; 11(2):191—5.
Поступила 23.03.17 Принята в печать 25.04.17
