CC BY
55
УДК 615.214
С.М. Гуляев
ПРОТИВОТРЕВОЖНОЕ ДЕЙСТВИЕ PHLOJODICARPUS SIBIRICUS
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
В настоящей работе с использованием тестов конфликтной ситуации (Vogel) и приподнятого крестообразного лабиринта изучено влияние экстракта и. настойки, вздутоплодника сибирского на поведенческие характеристики крыс. Испытуемые средства оказывают, анксиолитическое действие: увеличивают, число наказуемых взятий воды и выходов в открытые рукава по сравнению с контролем.
Ключевые слова: тревожность, анксиолитическое действие, Phlojodicarpus sibiricus
anxiolytic action of phlojodicarpus sibiricus
S.M. Gulyaev
Institute of General and Experimental Biology SB RAS (Ulan-Ude)
The article presents the results of study of the effects of Phlojoidicarpus sibiricus extracts and tincture in the Vogel conflict test, elevated, plus maze in rats. Results showed, that Phlojoidicarpus sibiricus increased the number of punished, drinking and entrances in the open arms, indicating that presents an anxiolytic activity. Key words: anxiety, anxiolytic action, Phlojodicarpus sibiricus
Тревожность является симптомом многих психоневротических состояний и неизменно сопутствует целому ряду соматической и неврологической патологии. В основе развития тревожности, как известно, лежит дисбаланс нейромедиаторного обмена в структурах головного мозга [13].
Для коррекции эмоциональных нарушений обычно используют препараты, влияющие на синаптические процессы (ингибиторы обратного захвата серотонина, бензодиазепины и др.). В то же время их применение нередко ограничивается развитием побочных реакций, лекарственной несовместимостью или другими причинами [3].
Между тем, средства растительного происхождения издавна используются при тревожноневротических расстройствах: они, как правило, отличаются мягким действием, низкой токсичностью, усиливают и дополняют влияние специфической медикаментозной терапии. Несмотря на это эффективность применения их при соматических и неврологических заболеваниях может быть недостаточной из-за устойчивых кортико-висцеральных и/или других патологических паттернов. Поэтому целесообразным является поиск и применение средств полимодального типа действия, сочетающих в себе нейромодулирующий (анксиолитиче-ский или седативный), противострессорный (адаптивный) и другие фармакологические эффекты. Перспективным в этом плане мы считаем изучение вздутоплодника сибирского (Phlojoidicarpus sibiricus K. Pol.): по данным литературы средства из него оказывают седативное, гиполипидемическое, сосудорасширяющее действия [4, 5]. Перечисленные свойства обусловлены содержанием кумариновых соединений [1, 2, 6, 9], а также ряда эссенциальных микроэлементов (Cu, Zn, Sе и др.) [4].
Целью настоящей работы явилось определение анксиолитического действия средств из вздуто-
плодника сибирского (ВС) на моделях тревожных состояний у животных.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Экстракты из корней вздутоплодника сибирского получены путем экстракции 50% спиртоводным раствором (соотношение сырье/экстрагент
— 1/5) с последующим выпариванием в роторном испарителе и высушиванием (при t —50 °С) — для получения сухих экстрактов. Для приготовления 20% настойки экстрагируемую смесь фильтровали и разводили дистиллированной водой.
В работе использовали крыс линии Wistar обоего пола с исходной массой 160—180 г. Исследования выполнены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. № 755).
Животные были распределены на 6 групп (n = 8, в каждой группе). Первую контрольную группу составили животные, получавшие per os дистиллированную воду в объеме 0,5 мл/100 г массы 1 раз в день в течение 7 суток. Крысам второй контрольной группы вводили в аналогичном объеме и режиме спиртоводную 20% смесь. Крысы 3, 4 и 5 группы получали водный раствор сухого экстракта вздутоплодника сибирского соответственно в дозах 10, 50 и 250 мг/кг, животные 6 группы — настойку этого растения, при этом испытуемые средства вводили в эквиобъемных количествах по вышеуказанной схеме.
До проведения эксперимента животных лишали воды на 48 часов без ограничения потребления корма. Далее обучали их навыку взятия воды из поилки, помещая поочередно каждую крысу в специальную камеру (250 х 250 х 200 мм) с электрифицированным полом и поилкой с водой без нанесения наказания. На 7 сутки у крыс вызывали конфликтную ситуацию (по методу Vogel) [7]: за
каждое взятие воды наносили электроболевое раздражение (1 мА), при этом для удовлетворения питьевой мотивации крыса должна преодолеть чувство страха перед наказанием. Регистрировали число наказуемых взятий воды за 10 мин нахождения их в камере.
На 8 сутки эксперимента проводили тестирование животных в «крестообразном приподнятом лабиринте» (КПЛ) [7]. Установка лабиринта пред-
ставляла собой центральную квадратную площадку (10 х 10 см), от каждой стороны ее отходили четыре «рукава» (дощечки шириной 10 см и длиной 50 см). Два из них противоположно расположенных «закрытых рукава» ограничивались с боков и торцов стенками высотой 40 см, а два «открытых рукава» были без стенок. Установка была приподнята на высоту 50 см от уровня пола и освещалась сбоку лампой мощностью 50 Вт.
8 і 7 -6 -5 -4 -3
Число наказуемых взятий воды
2 -' |
0----■-
Ц Контроль ^ Экстракт ВС | | Настойка ВС
КонтрольІ Контроль II 10 мг/кг 50 мг/кг 250 мг/кг 0,5 мл/100г
*
*
*
Рис. 1. Влияние экстрактов и настойки вздутоплодника сибирского на число (M ± m) наказуемых взятий воды животными в конфликтной мотивации по Vogel; здесь и далее * - означает, что различия значимы по сравнению с контролем
I при p < 0,05.
Количество выходов крыс в открытые рукава
I
■ Контроль в Экстракт ВС □ Настойка ВС
Контроль I Контроль II 10 мг/кг 50 мг/кг 250 мг/кг 0,5 мл/100г
Рис. 2. Влияние экстрактов и настойки вздутоплодника сибирского на количество (M ± m) выходов крыс в открытые рукава КПЛ.
Время пребывания крыс в закрытых рукавах (в сек.)
300
290
280
270
260
250
240
230
220
■ Контроль
□ Экстракт ВС
□ Настойка ВС
Контроль I Контроль II 10 мг/кг 50 мг/кг 250 мг/кг 0,5 мл/100г
рис. 3. Влияние экстрактов и настойки вздутоплодника сибирского на время (M ± m) пребывания крыс в закрытых рукавах КПЛ.
Крысу помещали на центральную площадку мордочкой к открытому рукаву, после чего регистрировали число переходов в закрытые и открытые рукава, а также общее время, проведенное в них. Наблюдения за поведением каждого животного проводили в течение 5 минут.
результаты
Установлено, что курсовое внутрижелудочное введение животным испытуемых экстрактов в дозах 10, 50, 250 мг/кг и настойки в объеме 0,5 мл/100 г оказывало анксиолитическое действие: в тесте конфликтной ситуации отмечали увеличение числа наказуемого взятия воды соответственно в 2,1 — 3,8 —
4.2 и 4,0 раза (р < 0,05) по сравнению с контролем (рис. 1). В КПЛ количество выходов крыс в открытые рукава было выше (соответственно в 3,7— 6,0 — 6,0 и
9.2 раза) контрольных показателей (р < 0,05) (рис. 2). Причем, у крыс, получавших настойку ВС, указанные значения были выше в сравнении с таковыми у животных, принимавших экстракт ВС. Общее время, пребывания опытных крыс в закрытых рукавах было меньше (соответственно на 7,5—12,2— 6,7 и 9,8 %) чем в контроле (рис. 3).
заключение
В работе продемонстрированы анксиолитические свойства экстрактов и настойки ВС: курсовое введение испытуемых средств увеличивало число наказуемых взятий воды в тесте Vogel по сравнению с контролем, а также количество выходов крыс в открытые рукава КПЛ и время пребывания в них. Анксиолитический эффект был более выражен при использовании настойки ВС, чем при применении экстрактов ВС: вероятно, в данном случае, имело место потенцирование действий нейроактивных веществ.
Известно, что анксиолитический эффект препаратов (бензодиазепинов, барбитуратов), а также этилового спирта обусловлен взаимодействием их с ГАМКа рецепторами. Результатом стимулирующего влияния их является увеличение потоков ионов хлора внутрь клетки, приводящего к гиперполяризации мембран нейронов, модуляции функций нейронных сетей и нормализации нейромедиаторного обмена в структурах головного мозга при их нарушении [3].
По данным литературы, кумариновые соединения (фуранокумарины, пиранокумарины) являются аллостерическими агонистами ГАМКа-бензодиазепиновых рецепторов [8, 10]. Возможно, анксиолитический эффект испытуемых средств реализуется через вышеуказанный механизм. Кроме того, умбеллиферон, императорин и другие кумари-ны проявляют седативное, гипотензивное, гиполипи-демическое, анитоксидантное свойства [9, 11, 12, 13]. В этой связи, можно предположить, что в комплексе они способны оказывать сочетанное нейромодулирующее, спазмолитическое, цереброваскулярное, нейропротективное и гипотензивное действия, что особенно важно для коррекции, как эмоциональных
Сведения об авторах:
нарушений, так и патологических состояний при неврологических и соматических заболеваниях.
Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о выраженном анксиоли-тическом действии экстрактов и настойки вздутоплодника сибирского при стрессовых состояниях у животных. Испытуемые средства могут быть рекомендованы для коррекции тревожных расстройств при различных патологических состояниях.
литература
1. Антонова О.К. Кумарины корней Phlojodi-carpus sibiricus / О.К. Антонова, Б.В. Шемерянкин // Химия природные соединения. — 1981. — № 6. - С. 797-798.
2. Георгиевский В.П. Биологически активные вещества растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Ко-мисаренко, С.Е. Дмитрук. — М., 1990. — 333 с.
3. Клиническая фармакология по Гудману и Гилману / под ред. А.Г. Гилмана. — М., 2006. — Т. 1. — 520 с.
4. Ловкова М.Я. Почему растения лечат / М.Я. Лов-кова, А.М. Рабинович. — М., 1990. — 256 с.
5. Носаль М.А. Лекарственные растения и способы их применения в народе / М.А. Носаль, И.М. Носаль. — Киев, 1960. — 256 с.
6. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Rutaceae — Elaeagnaceae. — Л. : Наука, 1988.— 357 с.
7. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых лекарственных веществ / Р.У. Хабриев. — М., 2005. — 832 с.
8. Furanocoumarins with affinity to brain benzodiazepine receptors in vitro / O. Bergendorff [et al.] // Phytochemistry. — 1997. — Vol. 44, N 6. — P. 1121 — 1124.
9. Antioxidant properties of Cortex Fraxini and its simple coumarins / C.R. Wu [et al.] // Food Chemistry. — 2007. — Vol. 104, № 4. — P. 1464—1471.
10. Characterization of the furanocoumarin phellopterin as a rat brain benzodiazepine receptor partial agonist in vitro / K. Dekermendjian [et al.] // Neuroscience Letters. — 1996. — Vol. 219, N 3. — P. 151 — 154.
11. Hoult J.R.S. Pharmacological and biochemical actions of simple coumarins: Natural products with therapeutical potential / J.R.S. Hoult, M. Paya // General Pharmacology: The Vascular System. — 1996. — Vol. 27 — P. 713 — 722.
12. Kleiner H.E. Effects of naturally occurring coumarins on hepatic drug-metabolizing enzymes in mice / H.E. Kleiner, X. Xia, J. Zhang // Toxicology and Applied Pharmacology. — 2008. — Vol. 232, N 2.
— P. 337 — 350.
13. Stein M.B. Biology of anxiety disordes / M.B. Stein, T.W. Uhde // In the American Psychiatric Press Textbook of Psychopharmacology. — 1998. — P. 609 — 628.
Гуляев Сергей Миронович, 670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН. Тел.: 8 (3012) 43-37-13, e-mail: [email protected]
