CC BY
24
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 5
ингибирование от 55 до 92 % активности гистондеаце- онкогенеза, что, возможно, связано с модификацией со-тилазы. Уровень ингибирования является высоким даже става жирных кислот фосфолипидов митохондриальных по сравнению с трихостатином, известным ингибитором мембран, в то же время снижается интенсивность набу-гистондеацетилазы. Проведенные in vivo исследования хания митохондрий. ЦГК 1—10 в комбинированной терапии с цисплатином Заключение. Введение ю3-полиненасыщенных жирных и циклофосфаном на опухолях лейкемии Р388 и лейкемии кислот до и после трансплантации карциномы Герена при-L1210 показали, что ЦГК обладают выраженной хемосен- водит к снижению интенсивности процессов перекисного сибилизирующей противоопухолевой активностью, увели- окисления липидов в митохондриальной фракции печени чивают продолжительность жизни животных в 1,5—2 раза. крыс, что выражается в снижении уровня первичных и вто-ЦГК 1—10 также проявляли антиметастатический эффект ричных продуктов перекисного окисления липидов в пе-при полихимиотерапии меланомы В16. риод интенсивного роста опухоли в организме. Таким Заключение. ЦГК являются потенциальными препа- образом, применение ю3-полиненасыщенных жирных ратами для лечения онкологических заболеваний. кислот в комбинации с противоопухолевыми препаратами может повысить противоопухолевый эффект последних А.И. Александрова. О.В. Кеца. И.А. Шмараков и способствовать защите от процессов перекисного окис-ВЛИЯНИЕ ю3-ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ ления липидов в мембранах митохондрий. КИСЛОТ НА ПРОЦЕССЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ Е.Н. Александрова. Д.А. Церковский. Ю.П. Истомин ФРАКЦИИ ПЕЧЕНИ КРЫС ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ С ТРАНСПЛАНТИРОВАННОЙ КАРЦИНОМОЙ ГЕРЕНА ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ Черновицкий национальный университет им. Ю. Федьковича, С ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОМ ФОТОЛОН Черновцы, Украина В КОМБИНАЦИИ С ЦИСПЛАТИНОМ Введение. Развитие опухоли в организме сопровожда- В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VITRO ется интенсификацией свободнорадикальных процессов ГУ«РНПЦОМР им. Н.Н. Александрова», в субклеточных органеллах отдаленных органов. Интенси- агрогородок Лесной, Республика Беларусь фикация перекисного окисления липидов мембран мито- Введение. Одним из путей повышения эффективно-хондрий может привести к набуханию последних и, сти фотодинамической терапии является ее комбини-как следствие, к потере органеллами их основной функ- рование с методами, в основе которых лежат принципи-ции — способности синтезировать аденозинтрифосфат. ально иные механизмы повреждения опухолевой клетки Полиненасыщенные жирные кислоты могут проявлять (химиотерапия). протекторное действие на мембраны митохондрий, по- Цель исследования — изучение противоопухолевой эф-скольку являются их основными структурными компонен- фективности фотодинамической терапии с фотосенсиби-тами. С другой стороны, ю3-полиненасыщенные жирные лизатором фотолон в комбинации с цисплатином (ЦП) кислоты служат источником для синтеза эйкозаноидов, вли- в эксперименте на культуре клеток HeLa. яющих на процессы клеточного деления и дифференциации, Материалы и методы. Монослойную культуру опухо-что делает их перспективными для использования в качестве левых клеток HeLa в логарифмической стадии роста инку-профилактических средств в условиях онкогенеза. бировали в течение 24 ч в питательной среде DMEM (РН-Цель работы — изучение процессов перекисного окис- ПЦ ЭМ) с добавлением 10 % эмбриональной телячьей ления липидов в митохондриальной фракции печени крыс сыворотки и 50 мкг/мл гентамицина. После добавления с трансплантированной карциномой Герена в условиях ЦП (Цитоплатин-ЛЭНС, АО «ВЕРОФАРМ») в дозах 0,05; введения ю3-полиненасыщенных жирных кислот. 0,1 и 0,2 мкг/мл флаконы с культурой клеток инкубирова-Материалы и методы. Исследования проводили на самках ли в течение 24 ч в термостате при температуре 37 °С. Затем белых беспородных крыс. Источником ю3-полиненасы- на 3 ч добавляли раствор фотосенсибилизатора фотолон щенных жирных кислот служил рыбий жир, в состав кото- (РУП «Белмедпрепараты», 1 мкг/мл). Фотооблучение осу-рого входили 32 % эйкозапентаеновой кислоты и 24 % ществляли полупроводниковым лазером «УПЛ ФДТ» (LEMT, докозагексаеновой кислоты. Декапитацию животных про- РБ, X = 661 нм) в экспозиционной дозе 0,25 Дж/см2. Спустя водили под легким эфирным наркозом на 7, 14 и 21-е сут- 21 ч монослой клеток диспергировали 0,02 % раствором ки после трансплантации карциномы Герена, что для опу- Версена и проводили подсчет живых клеток в камере Го -холеносителей соответствует латентной, логарифмической ряева. С помощью регрессионного анализа данных опре-и стационарной стадиям онкогенеза. деляли показатель торможения роста ЭК50 — концентрацию Результаты. По мере роста в организме карциномы ЦП, вызывающую торможение роста культуры опухолевых Герена в митохондриальной фракции печени крыс по- клеток на 50 % по сравнению с контролем. Статистиче-вышается уровень первичных и вторичных продуктов скую обработку результатов проводили c использованием перекисного окисления липидов с максимальными зна- пакета программ Origin Pro 7.0 и STATISTICA 8.0. Крити-чениями в стационарную фазу онкогенеза, что приводит ческий уровень значимости (р) принимался равным 0,05. к набуханию митохондрий. Введение ю3-полиненасыщен- Результаты. Инкубация клеток с ЦП без фотолона ных жирных кислот приводит к снижению уровня про- и фотооблучения в течение 48 ч приводила к дозозави-дуктов перекисного окисления липидов в митохондри- симому угнетению пролиферации: выживаемость клеток альной фракции печени крыс в логарифмическую фазу для ЦП в дозах 0,05, 0,1 и 0,2 мкг/мл составила 65, 54 и 48 %
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
6 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
соответственно по отношению к контролю. Данный пока- кологических заболеваний. Перспективным является из-затель для группы фотооблучения с фотолоном составил учение условий получения наиболее активных химических 55 % по отношению к контролю. Показатель цитостатиче- соединений этого ряда, в том числе подбор порфиринов ского эффекта ЭК50 составил 0,17 ± 0,03 мкг/мл для ЦП, с наибольшим выходом долгоживущих перекисей, параме-0,05 ± 0,01 мкг/мл — для ЦП с фотооблучением. Отмечено тров и длин волн излучения в спектре их поглощения, оп-сокращение количества опухолевых клеток HeLa с 59,33 ределения времени их существования в различных средах ± 4,86 х 104 (ЦП 0,05 мкг/мл) до 44,0 ± 2,39 х 104 для ЦП и биологических объектах, а также накопления в патоло-0,05 мкг/мл с фотооблучением (p = 0,022); с 46,0 ± 2,26 х гически измененных тканях. 104 (ЦП 0,1 мкг/мл) до 38,5 ± 2,26 х 104 для ЦП 0,1 мкг/мл с фотооблучением (p = 0,044); с 43,88 ± 4,13 х 104 (ЦП Н.Н. Андронова1, С.А. Цурка2. Ж.Р. Черкасова2, 0,2 мкг/мл) до 33,25 ± 2,14 х 104 для ЦП 0,2 мкг/мл с фото- Г.Б. Смирнова1, Ю.А. Борисова1, Е.М. Трещалина1 облучением (p = 0,048). БИОДОСТУПНОСТЬ ПЕРОРАЛЬНОГО Заключение. Полученные результаты в эксперименте а-ФЕТОПРОТЕИНСОДЕРЖАЩЕГО на культуре клеток карциномы шейки матки человека HeLa НЕКОВАЛЕНТНОГО КОМПЛЕКСА АИМПИЛА свидетельствуют о синергетическом действии комбинации НА МОДЕЛИ «ВЫВЕРНУТЫХ МЕШОЧКОВ» фотодинамической терапии с фотолоном и ЦП. ИЗОЛИРОВАННОГО ОТРЕЗКА ТОНКОЙ КИШКИ КРЫС Ю.В. Алексеев1, Е.В. Давыдов2, Г.В. Пономарев3, 1ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; В.Ю. Шленский2, А. В. Иванов4 2ООО «ФармАксесс», Москва ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ПРОДУКТОВ Введение. Для пероральных белковых нековалентных ФОТОЛИЗА 2,4-ДИ(1-МЕТОКСИЭТИЛ) — комплексов, в том числе комплекса а-фетопротеина и из-ДЕЙТЕРОПОРФИРИНА-IX (ДИМЕГИНА) вестного индуктора апоптоза (Аимпила), всасывание проВ КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ исходит, как правило, в нижних отделах тонкой кишки, 1ФГБУ ГНЦЛМФМБА России, Москва; а попадание во внутреннюю среду организма — различны-2Ветеринарная клиника «Велес-Текстильщики», Москва; ми вариантами пиноцитоза. Прохождение агента через 3ФГБНУ«НИИбиомедицинской химии стенку кишки (интернализация) контролируют с помощью им. В.Н. Ореховича», Москва; люминисцентной метки в транспортной части комплекса. ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Доказательство интернализации комплекса Аимпила при Москва пероральном введении является необходимым этапом для Введение. Известно, что продукты фотолиза фотосен- проведения доклинического изучения на животных. сибилизаторов порфиринового ряда, в том числе их долго- Цель исследования — оценка биодоступности перо-живущие перекиси, обладают биологической активностью, рального комплекса Аимпила на модели перфузии изоли-сохраняя при этом тропность, присущую порфиринам рованного отрезка тонкой кишки крыс. к пролиферирующим клеткам и микроорганизмам. При- Задачи исследования. 1. Модификация методики получе-менение растворов облученных порфиринов может найти ния изолированного отрезка тонкой кишки крысы для Аим-широкое применение в различных областях медицины. пила. 2. Изучение всасывания комплекса Аимпила в тонкой Цель исследования — изучить воздействие продуктов кишке крыс по динамике концентрации акридиновой метки. фотолиза димегина на ряд микроорганизмов in vitro. Материалы и методы. Исследование выполнено на кры-Материалы и методы. В работе были использованы: сах-самках с массой тела 150—200 г. Метод «вывернутых лазерный аппарат «АСТ» (ООО «Панков-медикал») мощ- мешочков» изолированных отрезков тонкой кишки моди-ностью 0,8 Вт, X = 405 нм; музейные штаммы Escherichia фицирован заменой перевязки отрезка кишки фиксацией coli, Salmonella enteritidis, Enterococcus faecalis, Staphylococcus их клипсами с двух сторон без перфузии. Использованы aureus; питательная среда для выращивания хемооргано- комплекс Аимпила в пероральной лекарственной форме трофных бактерий мясопептонный агар; растворы диме- (ООО «ФармАксесс», РФ) и акридин NHS-эфир (Toronto гина с различной концентрацией. К 0,5 мл бактериальных Pharmaceuticals, Канада) для люминисцентного окраши-культур добавляли 0,5 мл облученного раствора димегина вания препаратов. Комплекс Аимпила — акридин в кон-с последующим посевом на специальные среды. Облучение центрации 1,0 мкг/мл добавляли в инкубационную среду проводилось в стеклянной кювете 1,0 мл диаметром 1 см2 (раствор Рингера—Локка, t = 37 °C). Прохождение мече-с расстояния 5 см в течение 5 мин (240 Дж/см2). Контролем ного соединения через стенку кишки фиксировали через являлось добавление к бактериальным культурам соответ- 30 мин после введения в инкубационную среду (время жиз-ствующих концентраций необлученного димегина. неспособности отрезка) и трехкратной отмывки отрезков Результаты. В опытной группе наблюдалось подавле- под контролем люминесцентной метки. Интенсивность ние роста всех бактерий при концентрации димегина люминесценции измеряли в относительных световых еди-0,0001 и 0,00001 мг в 0,5 мл, более выраженное для S. aureus ницах (RLU, relative light units), 1 RLU = 1,0 фемтомоль и S. enteritidis. В контрольной группе подавления роста (10-15 моль) аденозинтрифосфата. не наблюдалось. Результаты. Показано, что исходное значение люми-Заключение. Результаты исследований подтверждают несценции комплекса Аимпила — акридин в инкубацион-возможность использования продуктов фотолиза порфи- ной среде составляло 1073714 RLU. Уровень люминесцен-ринов в практических целях и, вероятно, при терапии он- ции меченого препарата в просвете отмытых «вывернутых
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
