CC BY
104
Противолучевые свойства экстракта пихты сибирской
В.Ю. Сафонова, д.б.н., профессор, Оренбургский ГПУ; В.А. Сафонова, д.б.н., профессор, Оренбургский ГАУ
Для повышения общей резистентности организма в народной медицине широко применяются препараты, называемые адаптогенами. К ним относят зоопрепараты, фитопрепараты, многокомпонентные смеси, иммуномодуляторы. Вместе с тем адаптогены способны стимулировать возрастание уровня эндогенного фона радиорезистентности, активировать антиокисли-тельные, а также репаративные процессы систем, мобилизовать противолучевые и общебиологические защитные ресурсы организма. Среди них особый интерес вызывают фитопрепараты природного происхождения, поскольку они более доступны, как правило, не токсичны, а потому их применение не вызывает побочных эффектов. Доказательством тому является успешное применение препаратов женьшеня, элеутерококка, китайского лимонника для повышения как общей сопротивляемости организма к неблагоприятным факторам, так и радиорезистентности организма [1]. В литературе описан единичный случай применения водного раствора экстракта пихты сибирской в комплексе с хитозаном для терапии острой лучевой болезни крыс [2].
С целью профилактики острой лучевой патологии применяются фармакохимические соеди-
нения, механизм действия которых направлен на снятие негативных физико-химических и химических процессов, возникающих в организме в период первичной реакции на облучение. Зачастую эти препараты вводятся за короткое время перед облучением в высоких нефизиологических дозах и тем самым вызывают побочные эффекты в организме [3].
В связи с этим нами для исследования был взят фитопрепарат флорента. Он представляет собой концентрированный экстракт зелени пихты сибирской, светло-коричневого цвета, со специфичным запахом хвои. Изготовитель — фирма «Биолит» г. Томска. Флорента в своём составе содержит комплекс растительных полифенолов, фитонцидные фракции и микроэлементы и, по данным производителя, обладает адаптогенными свойствами.
Учитывая вышеизложенное, мы сочли необходимым изучить влияние флоренты на некоторые показатели антиоксидантной и иммунной систем у крыс, подвергнутых внешнему воздействию радиации. Выбор этих систем для оценки радио-защитных свойств фитопрепарата обусловлен механизмом действия радиации. Так, в период первичной реакции на облучение в организме накапливается большое количество перекисных соединений, которые играют основную роль в развитии патологических реакций в критиче-
ских системах организма, к которым относится иммунная система. Поэтому изучение возможности коррекции некоторых показателей анти-оксидантной и иммунной защиты у облучённых животных с применением флоренты явилось основной задачей наших исследований.
Методика исследования. Опыты проведены на белых беспородных крысах-самцах с массой тела 180—210 г. Выбор животных для проведения исследований обусловлен тем, что при одинаковых уровнях доз облучения организм крыс проявляет относительно малую степень различия радиационных эффектов для радиочувствительных органов, тканей и систем. Белые крысы имеют несущественные сезонные изменения биологических процессов, поэтому являются удобным экспериментальным объектом.
Животные по принципу аналогов были разделены на четыре группы: биологический контроль (1-я); облучённый контроль (2-я); флорента + облучение (3-я); облучение + флорента (4-я). Однократное облучение животных в дозе 6,0 Грей (Гр) проводили на гамма-установке «Агат-С» при мощности дозы 6,0 Гр/мин. с источником излучения 60Со. Крысы 3-й и 4-й групп принимали фитопрепарат ежедневно в течение недели до и после облучения соответственно в объёме 2,5 мл/кг концентрированного раствора с водой вволю. Кровь и печень для исследования брали при убое животных декапитацией через 24 часа и 7, 15 суток после облучения. Выбранные сроки исследования отражают первичную реакцию на облучение (24 часа) и разгар болезни. Интенсивность перекисного окисления липидов по накоплению малонового диальдегида (МДА) и состояние антиоксидантной системы по активности глутатионредуктазы (ГР) в печени крыс определяли общепринятыми методами [4, 5]. Титры аутоантител к лизату собственных эритроцитов (ЛСЭ) и количество бляшкообразующих клеток (БОК) в периферической крови определяли реакциями Уанье и Йерне соответственно. Статистическую обработку результатов осуществляли по Стъюденту.
Результаты исследования. Результаты исследований показали, что однократное внешнее общее облучение крыс в дозе 6,0 Гр (ЛД50/30) подавляет активность глутатионредуктазы, которая является одним из компонентов анти-оксидантной защиты организма. Достоверное понижение активности ГР на 38% приходится на латентный период острой лучевой болезни (7-е сутки). Снижение активности антиоксидантного фермента влечёт за собой достоверный прирост малонового диальдегида в соответствующий период болезни.
Известно, что облучение способствует образованию свободных радикалов и накоплению перекисных соединений в организме. Действи-
тельно, концентрация МДА в печени крыс, подвергнутых радиации, достоверно возрастает во все сроки исследования, отражающие период первичной реакции на облучение (24 часа), латентный период (7-е сутки) и разгар болезни (15-е сутки). Скармливание флоренты до воздействия радиации снижает прирост МДА в указанные периоды на 45,5; 28 и 34,4% соответственно и тем самым поддерживает функциональную активность глутатионредуктазы. Эффект коррекции показателей антиоксидантной системы организма крыс посредством приёма флоренты после облучения наблюдался, но был несколько слабее.
Результаты исследований свидетельствуют о том, что в норме у крыс обнаруживаются антитела к лизату собственных эритроцитов и оцениваемые реакцией Уанье как «следы». Облучение в дозе 6,0 Гр (ЛД50/30) вызывает накопление аутоантител в периферической крови облучённых животных с оценкой реакции Уанье как положительная и резко положительная. Резко положительных значений (2—4 балла) реакция достигала на 5-е—7-е сутки после облучения. Клетки-продуценты аутоантител в периферической крови у интактных крыс регистрировались в пределах 1—2%. Воздействие радиации в указанной дозе увеличивало их содержание во все сроки исследования. Так, количество бляшек лизиса эритроцитов периферической крови на 3-и, 7-е и 15-е сутки после облучения достигало 3,35±0,13; 5,90±0,16; 3,80±0,06% соответственно, с достоверной разницей в период разгара болезни (7-е сутки). Введение флоренты крысам с водой способствовало ослаблению аутоиммунных реакций. Разница в титрах аутоантител к лизату собственных эритроцитов и в количестве бляшкообразующих клеток в крови у животных 3-й и 4-й групп, которым вводили флоренту до и после облучения, была достоверной в сроки, характеризующие латентный период и разгар болезни.
Выводы. Таким образом, внешнее общее однократное облучение крыс ЛД50/30 сопровождается подавлением антиоксидантной защиты организма, что проявляется в снижении глута-тионредуктазы и нарастании концентрации в печени малонового диальдегида, способствует развитию аутоиммунных реакций, определяемых титрами аутоантител к лизату собственных эритроцитов и содержанием бляшкообразующих клеток в периферической крови. Ежедневное, в течение недели, пероральное введение крысам фитопрепарата флорента в дозе 5—7 мл/кг с водой или кормом обладает радиозащитным действием, обеспечивая достоверную коррекцию изучаемых показателей антиоксидантной и иммунной системы при остром лучевом воздействии в среднелетальной дозе.
Полученные результаты могут быть использованы для практического применения экстракта зелени пихты сибирской с целью повышения радиорезистентности животных в экологически неблагоприятных условиях, связанных с повышенным радиационным фоном.
Литература
1. Кудряшов Ю.Б., Гончаренко Е.Н. Современные проблемы противолучевой химической защиты организмов // Ра-
диационная биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. № 2—3. С, 197-211.
2. Гулик Е.С., Костеша Н.Я. Противолучевая активность хитозана в водном экстракте пихты сибирской // Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. Т. 44. № 5. С, 563-565.
3. Владимиров В.Г., Красильников И.И., Арапов О.В. Радиопротекторы — структура и функции. Киев: Наук, думка, 1989. 259 с.
4. Современные методы в биохимии / под ред. В.Н. Орехо-вича. М.: Медицина, 1977. 391 с.
5. Методы биохимических исследований / под ред. М.И. Прохоровой. JL: Изд-во ЛГУ, 1982. 272 с.
