CC BY
24
ПРОТЕКТИВНЫЕ СВОЙСТВА КОМПЛЕКСНОГО БИОПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ АЗОКСИМЕРА БРОМИДА И СОМАТИЧЕСКОГО АНТИГЕНА TRICHINELLA SPIRALIS ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТРИХИНЕЛЛЕЗЕ
Руднева О.В., Бережно В.К., Написаноеа Л.А.
ФГБНУ «ВНИИП фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И.Скрябина» (gny.vigis@yandex.ru, rudneva.olga79@gmail.com)
Введение. Иммунопрофилактика, основу которой составляют специфические антигенные препараты, является важным звеном в системе мер борьбы с различными патогенами, в том числе и с гельминтами. Основным компонентом специфической профилактики является антиген, который обусловливает развитие гуморально-клеточных механизмов направленного действия, блокирующих жизненно важные функции паразита, обеспечивающий развитие иммунитета к последующему заражению. Применение антигена из личинок трихинелл с иммунопрофилактической целью успешно ведется во многих странах мира. Так, применение вакцины на базе автоклавированных личинок трихинелл (ATSLV) показывает непредсказуемую реакцию на последующее экспериментальное заражение Trichinella spiralis [3], тем не менее, исследователи отмечают снижение количества личинок T.spiralis при проверочном заражении. Применение клеточных антигенов протосколексов E.multilocularis разного возраста обеспечивают защиту от последующего заражения эхинококком в пределах 75% [2]. В настоящее время опубликованы многочисленные данные об использовании различных иммуностимулирующих препаратов для профилактики паразитарных заболеваний. Протективное действие иммуномодулятора ронколейкина (в пределах 40%) установлено при эхинококкозе собак [1]. Также имеются данные о защитном действии иммуномодулятора циклоферон при экспериментальном трихинеллезе мышей [4]. На модели экспериментального альвеолярного эхинококоза установлено протективное действие иммуностимулирующего препарата риботан в комплексе с клеточным антигеном [5]. Защитное действие иммуностимулирующего противопаразитарного средства на основе цитварного семени отмечено при экспериментальном трихинеллезе [6]. Исходя из этих данных, можно предположить, что эффективность протективного действия специфических антигенов из гельминтов можно повысить использованием иммуностимулирующих средств, разработав на основе этих составляющих безопасный комплексный биопрепарат для иммунопрофилактики гельминтозов.
Цель работы - оценить протективные свойства комплексного иммунопрепарата с различным содержанием специфического антигена-экстракта из личинок T.spiralis, а именно 13 мкг/мышь и38 мкг/мышь и азоксимера бромида.
Материалы и методы. Для приготовления комплексных иммунопрепаратов был использован соматический экстракт личинок трихинелл в дозах 13 и 38 мкг/мышь и подобранный в предварительных испытаниях иммуностимулятор азоксимера бромид, доза которого составила - 0,004 мг/мышь. Опыт провели на 3
группах белых беспородных мышей массой 18-20 г по 7 животных в каждой. Первая группа мышей - контрольная, получала стерильный раствор 0,9% NaCl в дозе 0,2 мл/мышь. Вторая и третья - иммуностимулятор в дозе 0,004 мг/мышь с соматическим экстрактом из личинок T.spiralis (СЭТ) 13 и 38 мкг белка /мышь соответственно. Препарат вводили в 0,2 мл стерильного физиологического раствора дважды внутримышечно с интервалом 48 часов. Заражение подопытных мышей личинками T.spiralis в дозе 40±5 личинок/мышь, включая контрольную группу, проводили через 12 дней после последнего введения соответствующих препаратов.
Протективное действие испытуемых иммуностимулирующих препаратов оценивали с 40-45 дня после заражения подопытных мышей личинками T.spiralis. Мыши каждой группы, включая контрольную, (отдельно), были подвергнуты убою в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» и перевариванию в ИЖС с последующим промыванием и подсчетом обнаруженных личинок трихинелл у каждой мыши в группе. Для оценки протективного эффекта определяли среднее количество обнаруженных личинок по каждой группе животных, получавших препараты, с аналогичными данными контрольной группы мышей.
Результаты. Анализ данных по оценке протективного действия этих препаратов свидетельствует о том, что наибольший эффект защиты достигнут в группе №3 при применении специфического комплексного иммунопрофилактического препарата, состоящего из СЭТ в дозе 38 мкг белка /мышь и азоксимера бромида в дозе 0,004 мг/мышь (табл.).
Таблица
Протективная эффективность комплексных биопрепаратов при экспериментальном трихинеллезе на мышах по количеству обнаруженных личинок Trichinella spiralis (в среднем на животное)
Групп ы Вводимый препарат Доза Кол-во обнаруженных личинок трихинелл Эффектив ность защиты, %
1 Стерильный физиологический раствор, 0,2 мл 0,2 мл в/м 2258,2+1372,35 0%
2 СЭТ + азоксимера бромид 13 мкг/мышь +0,004 мг/мышь 138,25+89,02 93,88 %
3 СЭТ + азоксимера бромид 38 мкг/мышь +0,004 мг/мышь 12+34 99,47 %
Количество обнаруженных личинок, в среднем, в этой группе составило 12±34 лич./мышь. Количество личинок трихинелл на мышь в контрольной группе №1 (в среднем) было равно 2258,2±1372,35, а в группе №2, получавшей комплексный препарат с меньшей дозой специфического антигена в составе препарата -
402
138,25±89,02 личинок на мышь в среднем. Таким образом, количество личинок трихинелл у мышей группы №3 и группы №2 было в 188,2 ив 16,3 раза меньше, чем у мышей группы №1 (контроль).
Заключение. На основании полученных нами данных по оценке протективных свойств комплексного биопрепарата на базе азоксимера бромида и соматического антигена T.spiralis в разных комбинациях на экспериментальной модели трихинеллеза установлено, что наибольший защитный эффект достигался при использовании азоксимера бромида в комплексе с соматическим антигеном в дозе 38 мкг белка/мышь. Таким образом, можно считать данный подход перспективным с точки зрения иммунопрофилактики трихинеллеза, однако требующим дальнейшей работы по отработке иммунопрофилактических доз комплексного биопрепарата.
Литература: 1.Бережко В.К., Сасикова М.Р //Сб.мат. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М.-2010.-Вып. 11.-С. 55-58. 2.Руднева О.В., Бережко В.К./Яам же.-М.-2005.-Вып.6.-С. 306-309. 3.Eissa М., el-Azzouni Z., Baddour N., Boulos L.//Journal of the Egyptian Society of Parasitology 05/2003; 33(l):219-28. Source: PubMed. 4.Napisanova L.A., Rudneva O.V., Berezhko V.K., Thakahova A.A.//VII International Scientific Agriculture Symposium "Agrosym 2016", Jahorina, October 06 - 09, 2016.-P.2487-2490. 5.Rudneva O.V., Berezhko V.K., Sasikova M.R.//Ad Alta: Journal oflnterdisciplinary Research.-2016.-Vol. 6 Issue 1.-P.88-91.4p. 6.Rudneva O.V., Napisanova L.A., Berezhko V.K.//Proceedings of the XXX GIRI Meeting; 2016 Sep 09-11; Netherland. Int JHighDilutionRes. 2016;15(4):17-17.
Protective properties of complex biological agent based on azoximer bromide and Trichinella spiralis somatic antigen at experimental T.spiralis infection. Rudneva O.V., Berezhko V.K., Napisanova L.A. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute ofFundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants.
Summary. The results of investigation of immunoprophylactic properties of complex biological agent consisting of T. spiralis larvae somatic extract (SET) and immunostimulant azoximer bromide at experimental T. spiralis infection on mice were represented. It was found that protective effect of complex biological agent obtained from somatic protein extract at dose levels of 13 and 38 ^g protein/mouse in combination with immunostimulant azoximer bromide at dose level of 0,004 mg/mouse was 93,88% and 99,47% respectively. It was concluded about prospects of that approach in immunoprophylaxis of T. spiralis infection and necessity for further determination of immunoprophylactic dose of a complex biological agent against T. spiralis infection.
