CC BY
44
УДК 591.35:599.323
ИИ. МАЛЫШЕВ, Л.П. РОМАНОВА
ПРОЛИФЕРАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ ГЕПАТОЦИТОВ ПЛОДОВ И НОВОРОЖДЕННЫХ КРЫСЯТ ПОСЛЕ МЕХАНИЧЕСКОЙ ТРАВМЫ ПЕЧЕНИ
Ключевые слова: крысы, плоды, новорожденные, печень, механическая травма, гепатоци-ты, регенерация.
Описан процесс заживления механического повреждения печени у плодов крыс, которым травму наносили во внутриутробном периоде. Установлено, что после нанесения повреждения в печени возникает активация пролиферативных процессов со стороны гепатоцитов, несмотря на это участок погибшей ткани печени заживает рубцеванием.
I.I. MALYSHEV, L.P. ROMANOVA PROLIFERATIVE HEPATOCYTES ACTIVITY OF FETUS AND NEWBORN RATS AFTER MECHANICAL HEPATIC TRAUMAS
Key words: rats, fetus, newborn, hepatocytes, regeneration.
Mechanical hepatic injuries of fetus rats, which were traumatized in intrauterine period, last against marked regeneratory processes, manifested by division activation. In spite of it the part of injury heals by cicatrisation.
Из литературы известно, что у молодых животных в постнатальном онтогенезе деление гепатоцитов протекает интенсивнее, чем у взрослых и старых [5, 6]. Однако до настоящего времени малоизученным является вопрос о пролиферативной активности гепатоцитов у плодов млекопитающих.
Цель исследования - изучение пролиферативной активности гепатоцитов у плодов крыс после механической травмы печени в естественных условиях живого организма.
Материалы и методы. Работа выполнена на 36 беременных самках крыс массой 225-276 г. Объектом исследования явилась печень 154 плодов крыс, которым внутриутробно, по описанной методике [4], наносили механическую травму печени. Оперированные плоды, выделенные из матки с помощью кесарева сечения, и самостоятельно родившиеся крысята забивались эфиром в сроки от 1 до 30 суток после операции. Печень оперированных животных целиком заключали в парафин, изготавливали гистотопографические серийные срезы, которые окрашивали гематоксилином и эозином, по ван Ги-зону, железным гематоксилином по Гейденгайну, выполняли реакцию Фёль-гена. Для изучения пролиферативной активности производили подсчет митозов и двуядерных гепатоцитов (на 7000 клеток при увеличении х900). Количество ДНК в ядрах гепатоцитов определяли в световом микроскопе Биолам-70 с помощью фотометрирования с использованием микрофотонасадки ФМЭЛ-1 и фотометра ФЭУ-79А в проходящем свете с запирающим светофильтром с максимумом светопропускания на длине волны 570 нм с подаваемым напряжением 900 В. Результаты подвергали обратному десятичному логарифмированию по формуле A= lg U/U0, где А - оптическая плотность, Ui - показания вольтметра на ядре, U0 - показания вольтметра на неокрашенных участках препарата. Диплоидным эталоном служили лимфоциты периферической крови и малые лимфоциты лимфатических узлов. Статистическая обработка цифровых данных проводилась по программе «Статистика» на компьютере Pentium 166 ММХ. Статистическую достоверность определя-
ли критерием Стьюдента (0. В качестве контрольных были взяты 100 животных того же возраста, что и подопытные.
Результаты исследования. В первые сутки после нанесения травмы на этом месте возникает щелевидный участок некроза печеночной ткани, в котором обнаруживаются большое количество эритроцитов и единичные сохранившиеся гепатоциты с дистрофическими изменениями. На 2-е и, особенно, на 3-и сутки после операции вокруг очага повреждения возникает клеточная реакция, представленная большим количеством молодых мезенхимальных элементов. На 5-е и 7-е сутки очаг травмы постепенно освобождался от некротизированной ткани, а характер клеточной реакции становился преимущественно фибробластическим. По периферии травмированного участка начинала формироваться грануляционная ткань, которая его постепенно заполняла. На 11-е сутки и позднее (до 30-х суток) на месте очага некроза определяется зрелая волокнистая соединительная ткань
Параллельно с заживлением очага повреждения в сохранившейся печеночной ткани возникали процессы пролиферативного характера. В табл. 1 представлена митотическая активность гепатоцитов плодов крыс после механической травмы.
Из приведенных в табл. 1 данных можно видеть, что в первые сутки после операции показатели митотической активности у опытных животных даже несколько ниже, чем в контроле, но начиная со 2-х суток митотический индекс у них резко возрастает. Наибольшее значение митотический индекс у экспериментальных животных приобретает на 5-е сутки после операции. На 7-е сутки количество митозов резко уменьшается, на 11-е сутки и позднее в печени
Таблица 1
Митотическая активность гепатоцитов плодов и новорожденных крысят в зависимости от времени, прошедшем после операции и в контроле, %о
Время после операции, сутки Число митозов у опытных животных, М±м Число митозов у контрольных животных, М±м
1 1,1±0,4 1,6±0,7
2 4,0±1,4* 1,1±0,7
3 4,9±2,3* 0,4±0,03
5 6,2±1,9 -
7 2,1±0,8 -
9 1,0±0,4 -
Примечание. * р<0,001.
практически митозы не прослеживаются. У контрольных животных уже на 3-и сутки (1-2-й дни жизни) в гистологических препаратах встречаются немногочисленные митозы. Таким образом, наибольшая митотическая активность гепатоцитов на нашем материале приходилась на 2-5-е сутки после операции, что в целом подтверждается и литературными данными [7].
Основным принципом регенерации является восстановление суммарного генома органа [2]. Это осуществляется или делением клеток, или их поли-плоидизацией. В настоящее время полиплоидизацию считают эквивалентом клеточного размножения [2, 10]. В ходе нашего эксперимента также имело место изменение плоидности у плодов и новорожденных крысят после механической травмы печени (табл. 2).
Как можно видеть из табл. 2, начиная со 2-х суток после операции в печени экспериментальных крысят значительно увеличивается количество тетраплоид-ных гепатоцитов за счет уменьшения числа диплоидных клеток. Также в препа-
Таблица 2
Кариометрические данные плоидности ядер гепатоцитов у плодов и новорожденных крысят в эксперименте, %о
Время после операции, сутки Диплоид- ные ядра Тетрап- лоиные ядра Октап- лоидные ядра 1 6п-плоид-ные ядра
1 60,3 39,4 0,3 -
2 40,3 51,5 7,6 0,6
3 27,4 62,3 8,4 1,9
5 31,8 56,1 9,1 3,0
7 30,6 58,4 8,6 2,4
9 31,7 59,2 7,0 2,1
11 42,5 53,3 3,3 0,9
15 60,5 36,4 2,6 0,5
20 64,6 34,2 1,2 -
30 63,3 35,8 0,9 -
ратах отмечалось появление октаплоидных и 16п-плоицных гепатоцитов. Начиная с 11-х и особенно с 15-х суток после операции число тетраплоидных ядер уменьшалось.
В контроле основную массу ядер гепатоцитов составляли диплоидные (до 89,1% у ин-тактных плодов крысят того же возраста и у 70,9% новорожденных); октаплоидные и 16п-плоидные ядра практически отсутствовали.
Одним из показателей интенсификации регенераторных
процессов в печени является увеличение содержания двуядерных гепатоцитов [3, 7, 8]. Механизм их происхождения не совсем ясен. Большинство исследователей в настоящее время отрицает амитотическое деление ядер в любой ткани. В то же время появились косвенные подтверждения тому, что значительная часть митозов в печени является ацитокинетическими, что и приводит к образованию двуядерных гепатоцитов [3].
По литературным данным, количество двуядерных гепатоцитов в печени половозрелых животных может достигать очень высоких цифр. Чаще в литературе приводятся более скромные цифры содержания числа двуядерных гепатоцитов после воздействия на печень различных дестабилизирующих факторов: 34%0 [1], 20,7%о [5].
В нашем исследовании также отмечалось значительное увеличение количества двуядерных гепатоцитов у оперированных животных по сравнению с контрольными крысятами начиная
Таблица 3
Количество двуядерных гепатоцитов у плодов и новорожденных крысят в эксперименте и контроле, %о
с 7-х суток после операции. Это время совпадает с падением числа митозов гепатоцитов (табл. 3)
Биологический смысл двуядерных гепатоцитов долгое время оставался неясным. В настоящее время большинство исследователей полагает, что образование двуядерных гепатоцитов из одноядерных при репаративной регенерации представляет собой резерв полиплоидиза-ции [2, 9, 10].
Время после операции, сутки Двуядерные гепатоциты в опыте, М±м Двуядерные гепатоциты в контроле, М±м
1 15,0±1,7 14,6±2,7
2 14,4±2,1 16,7±2,6
3 15,2±2,6 15,7±2,8
5 16,2±2,7 15,2±2,6
7 20,3±4,6* 11,7±2,7
9 25,4±5,7* 12,6±2,8
11 27,2±5,4* 13,3±2,7
15 26,0±3,7* 16,1±3,8
20 21,8±2,6* 12,6±2,4
30 27,1±1,3 14,8±1,8
Примечание. *р<0,001.
Таким образом, заживление механической травмы печени у плодов крыс происходит на фоне выраженных регенераторных процессов, проявляющихся митотическим делением и полиплоидизацией гепатоцитов.
Литература
1. Бобылева Н.А. Изучение особенностей восстановительных процессов в печени после многократных резекций органа / Н.А. Бобылева, Е.А. Ладыгина // Проблема регенерации патологически измененных органов и обратимости патологических изменений. Горький, 1975. С. 141-146.
2. Бродский В.Я. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка / В.Я. Бродский, И.В. Урываева. М.: Наука, 1981. 259 с.
3. Залетаева Т.А. Регенерация некоторых ультраструктур клеток печени после продолжительного голодания / Т.А. Залетаева// Цитология. 1964. Т. 6. С. 343-345.
4. Романова Л.П. Морфологические изменения печени плодов крыс после механической травмы / Л.П. Романова // Столичное здравоохранение: материалы науч.-практ. конф. Чебоксары, 2004. С. 80-81.
5. Рябинина З.А. Полиплоидия и гипертрофия клеток в процессах роста и восстановления / З.А. Ря-бинина, В.А. Бенюш. М.: Медицина, 1973. 208 с.
6. Сидорова И.Ф. Возраст и регенерационная способность / И.Ф. Сидорова // Условия регенерации органов у млекопитающих. М., 1972. С. 74-103.
7. Солопаев Б.П. Регенерация нормальной и патологически измененной печени / Б.П. Солопаев. Горький, 1980. 239 с.
8. Ступин И.В. Регенерация печени после ее резекции путем ионизированной плазмы / И.В. Сту-пин, П.А. Карманов, А.И. Новокшенов, Г.Г. Белоус, Г.К Карасюк, В.С. Сергеева // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1995. № 4. С. 431-432.
9. Туманишвили Г.Д. О действии на гепатоциты ядерной фракции гомогената печени / Г.Д. Туманишвили, И.Г. Кахидзе, П.В. Челидзе// Арх. анат., гистол. и эмбриол. 1975. Т. 69, N° 11. С. 19-25.
10. Урываева И.В. Полиплоидизирующие митозы и биологический смысл полиплоидизации в клетках печени / И.В. Урываева // Цитология. 1979. Т. 21, № 12. С. 1427-1437.
МАЛЫШЕВ ИГОРЬ ИВАНОВИЧ. См. с. 130. РОМАНОВА ЛЮБОВЬ ПЕТРОВНА. См. с. 130.
УДК 616.-006:314.4
Л.В. СТЕКОЛЬЩИКОВ
СМЕРТНОСТЬ ОТ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ НАСЕЛЕНИЯ ТРУДОСПОСОБНОГО ВОЗРАСТА ЧУВАШСКОЙ РЕСПУБЛИКИ
Ключевые слова: смертность, злокачественные новообразования, мужчины, женщины, трудоспособный возраст, онкологическая патология, трудовой потенциал.
Рассмотрены динамика и структура смертности населения трудоспособного возраста от злокачественных новообразований в Чувашской Республике. Отмечены особенности смертности среди мужчин и женщин от онкологической патологии. Рассчитан экономический ущерб от преждевременной смертности от злокачественных новообразований в трудовом возрасте.
L.V. STEKOLSCHIKOV MORTALITY RATES IN THE CHUVASHIA REPUBLIC CAUSED BY MALIGNANT TUMOURS AMONG ABLE - BODIED PERSONS
Key words: mortality rates, malignant tumors, males, females, able- bodied persons, oncological pathology, labour potential.
The author studied trends of mortality rates caused by malignant tumors among able — bodied persons in the Chuvashia Republic.He assessed great mortality rates among males and females caused by oncological pathology. Economic losses due to mortality caused by oncological pathology have been calculated
Среди медико-демографических критериев оценки здоровья населения на популяционном уровне показатели смертности считаются наиболее информативными и точными в силу высокой надежности и объективности, обеспеченной системой государственной статистики смертности [2, с. 80].
