CC BY
66
УДК 613.24
ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРЕРЫВИСТОЙ РАЗГРУЗОЧНО-ДИЕТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ У ЛИЦ С ИЗБЫТОЧНОЙ МАССОЙ ТЕЛА
© Кобзева Г.Д., Прокопенко Л.Г., Сергеев С. С.
Кафедра биологической химии Курского государственного медицинского университета
Иммунометаболический статус лиц с избыточной массой тела, дающих отрицательную реакцию на пробу с 48-часовым голоданием по тесту усиления аутологичного розеткообразования, нормализуется после прерывистой разгрузочно-диетической терапии, проводимый по схеме "голодание 24 ч + интервал 48 ч" и "голодание 24 ч + интервал 72 ч", повторенные 5 раз. Нормализация иммунометаболического статуса лиц, дающих положительную реакцию на пробу с кратковременным голоданием, наступает при сочетании разгрузочно-диетической терапии с введением композиции антиоксидантных соединений олигогил-Se.
Ключевые слова: прерывистая разгрузочно-диетическая терапия, аутологичные розеткообразующие антиоксиданты.
PROGNOSTICATING LOW-CALORIE AND INTERRUPTED DIETETIC THERAPY IN PATIENTS
WITH EXCESSIVE BODY MASS Kobzeva G.D., Prokopenko L. G., Sergeev S.S.
Biochemistry Department of the Kursk State Medical University
The immunometabolic state of persons with excessive body weight and negative reaction on rosette forming cell increase test within 48-hour fasting normalizes after administrating the interrupted low- calorie dietetic therapy according to the scheme 24 hr fasting + interval 48 hr and 24hr fasting + interval 72 hr, repeated 5 times. The correction of immunometabolic status of persons with positive reaction on the test with short-term fasting occurs in combination of low- calorie dietetic therapy with administration of "Oligogil-Se" antioxidant compounds.
Key words: interrupted low-calorie dietetic therapy, autologic rosette forming antioxidants.
Длительное поступление в организм избыточных количеств высококалоригенных соединений приводит к развитию ожирения различной степени тяжести, усилению генерации активных форм кислорода, увеличению интенсивности перекисного окисления липидов биологических мембран, нарушению их структуры, угнетению функций клеток различных физиологических систем, возникновению вторичного иммунодефицита и обусловленному им снижению резистентности к возбудителям инфекционных заболеваний, повышению риска возникновения иммунопатологических процессов и злокачественной трансформации клеток [2, 5, 14]. Медикаментозное лечение лиц с ожирением малоэффективно, а попытки снижения массы тела путем многодневного прекращения приема пищи приводят к усилению многочисленных метаболических отклонений и существенному усилению выраженности нарушений иммунологических функций [6, 13, 20]. Особый интерес вызывает изучение перспективности
иммунометаболического действия прерывистого прекращения пищи, а также возможности его усиления антиоксидантами и регуляторами энергетического обмена [18].
Интегральным показателем выраженности изменений биохимического состава крови при различных формах стресса и патологии является состояние мембраны эритроцитов, оцениваемое по электрокинетическому потенциалу, адсорбционным и адгезивным свойствам этих клеток [15, 16]. Для прогнозирования выраженности иммунометаболи-ческих последствий нарушения липидного обмена и эффекта их коррекции фармакологическими и физиотерапевтическими средствами можно использовать тесты, основанные на модификации реакции аутологичного ро-зеткообразования [1]. В связи с этим изучена информативность теста модификации аутоло-гичного розеткообразования при оценке эффективности прерывистой разгрузочно-диетической терапии (ПРДТ), применяемой
для снижения массы тела и нормализации показателей нарушений липидного обмена.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Эритроциты выделяли по ВеиЙег (1985) и фракционировали в градиенте плотности яичного альбумина. Получали две фракции клеток - легкие (ё < 1,07) и тяжелые (ё > 1,117) клетки.
При постановке реакции аутологичного розеткообразования соотношение лимфоцитов и эритроцитов равнялось 1:100.
Антиоксидантый статус эритроцитов оценивали по активности супероксиддисмутазы (СОД) и глутатионредуктазы (ГР) [10].
Энергетический статус эритроцитов определяли по активности транскетолазы (ТК) [21], содержанию 2, 3-бифосфоглицерата (БФГ) и аденозинтрифосфата (АТФ) [4].
Состояние обмена липидов оценивали по концентрации в сыворотке тригилцеридов (ТГ) и холестерина (Хол) [9]. Интенсивность перекисного окисления липидов определяли по содержанию в сыворотке диеновых конъ-югатов полиненасыщенных жирных кислот (ДК) и малонового диальдегида (МДА) [22] в плазме, ацилгидроперикиси (АГП) и МДА в эритроцитах, по степени их перекисного гемолиза (СПГ) [3].
Состояние мембран гепатоцитов оценивали по активности аланин- и аспартатами-нотрансфераз (АЛТ и АСТ), щелочные фос-фатазы (ЩФ) - по концентрации общего билирубина (ОБ) [9].
Иммуносупрессорный потенциал сыворотки крови оценивали по концентрации N ацетилнейраминовой кислоты (АНК) [8], гликолиз аминогликанов (ГАГ) [12] - по активности антипротеолитических белков - альфа-1-антипротеаз и альфа-2-макроглобулинов (ААП и АМГ) [19].
Иммунологический статус организма оценивали по содержанию в крови лизоцима, Е-РОК, М-РОК, 1§М, 1§0 и 1§А, поглотительную активность полиморноядерных лейкоцитов - по величине фагоцитарного числа (ФЧ) и фагоцитарного индекса (ФИ). Метаболическую активность мононуклеаров периферической крови определяли по показателям спонтанного и индуцированного зимозаном НСТ-
теста [23].
Клинические наблюдения проведены на 102 лицах с избыточной массой тела (ЛИМТ) в возрасте от 20 до 60 лет (средний возраст составил 43,7 ± 5,02), 37 мужчинах и 65 женщинах. У всех пациентов отсутствовали клинические признаки атеросклероза. У 42 отмечалась ангиодистония с различными проявлениями вегетативных нарушений. Контрольную группу составили 72 человека с избыточной массой тела, у которых не применялась ПРДТ.
Всем пациентам в начале и конце лечения проводили антропометрические измерения, ЭКГ, ультразвуковое исследование печени, желчного пузыря, поджелудочной железы, почек. Степень ожирения оценивали по индексу массы тела (Кетле), форму ожирения -по отношению окружности талии (ОТ) к окружности бедер (ОБ). При абдоминальной форме ОТ/ОБ > 0,8 у женщин и > 0,9 у мужчин. При бедренно-ягодичной форме ОТ/ОБ < 0,8 у женщин и < 0,9 у мужчин, 100 пациентов имели абдоминальную форму ожирения, 2 - бедренно-ягодичную.
Проводили по пять 24-часовых голодания с интервалом 72 часа. Вечером накануне голодания пациент принимал солевые слабительные.
Проводили тюбаж с сернокислой магнезией и минеральной водой (при отсутствии желчекаменной болезни, по данным УЗИ), вечером назначалась очистительная клизма. Рекомендовали прием кипяченой воды до 22,5 литров в день. Кроме ПРДТ все пациенты получали одинаковую бальнео-, гидротерапию (углекислые ванны, циркулярный душ, контрастные ванны), дозированные физические нагрузки (бассейн, терренкур, ЛФК).
Полученные данные подвергали статистической обработке. Вычисляли средние арифметические величины и их стандартные ошибки. Существенность различия средних оценивали по критерию Стьюдента [7], Вил-коксона и Манна-Уити [7]. Рассчитывали коэффициенты парной, множественной и парциальной корреляции [11].
Предварительные наблюдения проведены на 56 людях с избыточной массой тела (ЛИМТ) без явных признаков атеросклероза. Контрольную группу составляли лица (54 человека) с нормальной массой тела (ЛНМТ).
Всех людей обследовали на способность к аутологичному розеткообразованию после 48-часового голодания. Свойство эритроцитов вступать в реакцию розеткообразования с аутологичными и аллогенными лимфоцитами (ауто-РОК и алло-РОК) определяли до голодания и после него.
Нефракционные эритроциты ЛИМТ формировали большее число ауто-РОК, чем эритроциты здоровых людей. Постановка реакции с различными фракциями эритроцитов здоровых людей показала, что ауто-РОК формируется преимущественно с легкими эритроцитами. Тяжелые клетки слабо взаимодействуют с аутологичными лимфоцитами.
Количество формируемых алло-РОК не отличалось от числа ауто-РОК, образующихся в суспензиях клеток ЛИМТ по сравнению с ЛНМТ, что обусловлено изменением структуры мембраны эритроцитов, а не является следствием модификации лимфоцитов.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В предварительных исследованиях выявляли формирование ауто-РОК с различными популяциями эритроцитов до и после 48-часового голодания. Основная часть работы была посвящена изучению возможности использования теста формирования ауто-РОК после 48-часового голодания для прогнозирования эффективности ПРДТ.
Проведение пробы на изменение аутоло-гичного розеткообразования после кратковременного прекращения приема пищи показало, что ЛНМТ не чувствительны к 48-часовому голоданию по тесту на образование ауто-РОК. Об этом свидетельствует отсутствие существенного различия средних количеств формируемых эритроцитами ЛНМТ ау-то-РОК до проведения пробы и после нее (до пробы - 3,1 ± 0,4 после пробы - 3,6 ± 0,6; р > 0,05). Различия распределений в диапазонах также было несущественным по критерию Колмогорова-Смирнова.
В отличие от этого большая часть ЛИМТ по тесту на образование ауто-РОК оказалась чувствительной к 48-часовому голоданию.
Число ауто-РОК, формируемое эритроцитами ЛИМТ, до проведения пробы равнялось 8,6 ± 0,8, а после пробы 16,1 ± 1,4 (р < 0,05).
Выявление различий в диапазонах показало, что по критерию Колмогорова-Смирнова существенное различие имеет место в диапазоне 10-12 ауто-РОК на 10 кариоцитов. Это показывает, что 22 человека из числа обследованных ЛИМТ дают отрицательную реакцию на пробу голоданием (ЛОПГ), а 34 - положительную реакцию (ЛППГ). Можно предположить, что лица выявленных групп будут неодинаково реагировать на ПРДТ.
Способность эритроцитов вступать в реакцию розеткообразования с аутологичными кариоцитами в значительной степени определяется химическим составом крови и сорбцией на мембране или встраиванием в нее различных соединений плазмы крови [17]. Учитывая это, было изучено влияние сыворотки здоровых людей и ЛИМТ на розеткообра-зующие свойства эритроцитов здоровых людей.
Различающиеся по плотности эритроциты здоровых людей экстракорпорально обрабатывали сыворотками ЛОПГ и ЛППГ. Обработка сывороткой ЛОПГ не влияла на способность эритроцитов формировать ауто-РОК. После обработки сывороткой ЛППГ количество образующихся с легкими эритроцитами ауто-РОК было в 4,9 раза выше, чем после инкубации эритроцитов с сывороткой здоровых людей. Розеткообразующие свойства тяжелых эритроцитов после обработки сывороткой ЛНМТ не изменялись.
Эти наблюдения дают основание считать, что модификация розеткообразующих свойств эритроцитов происходит в сосудистом русле под влиянием сывороточных субстанций, таких как ЛНП и ГАГ.
Лечение ПРДТ получали 102 ЛИМТ. Отрицательную реакцию на 48-часовое голодание по тесту аутологичного розеткообразова-ния давали 42 человека, положительную - 60 человек.
Распределение людей, лечившихся ПРДТ, по возрасту и массе тела, а также изменение массы после лечения представлены в таблице 1.
У мужчин и женщин в возрасте от 20 до 60 лет не выявлено существенной разницы снижения массы тела в абсолютном и процентном выражении по отношению к исходному уровню. Вместе с тем можно констатировать, что у лиц старшей возрастной группы
Таблица 1
Изменение массы тела после прерывистой разгрузочно-диетической терапии
Показатели Возраст (лет)
20-30 31-40 41-50 51-60
1 2 3 4
А Мужчины:
Число людей 5 7 16 9
Разница массы 4,9±0,5 4,3±0,6 3,8±0,5 2,6±0,3*1-3
Процент изменения 3,9±0,4 3,9±0,5 4,3±0,6 2,4±0,3*1-3
Женщины:
Число людей 3 19 26 17
Разница массы 3,7±0,5 3,9±0,5 4,1 ±0,5 2,7±0,4*1-3
Процент изменения 4,2±0,6 4,2±0,7 4,6±0,7 2,3±0,3*1-3
Примечание: * - р<0,05 относительно соответствующей группы.
степень снижения массы тела менее выражена, чем у людей молодого и среднего возраста. Это, вероятно, обусловлено снижением чувствительности клеток гипоталамуса к физиологическим регуляторным сигналам.
При ультразвуковом исследовании у всех ЛИМТ выявлены диффузные изменения печени (жировая инфильтрация) различной степени выраженности, без увеличения (23,3%) и с увеличением размеров (76,7%) органа. После ПРД у всех обследованных лиц уменьшались явления жировой инфильтрации, нормализовались размеры печени (в 68,4%). У лиц с сопутствующей дискинезией желчного пузыря по гипомоторному типу размеры желчного пузыря возвращались к норме, исчезли постоянные ноющие боли в правом подреберье.
ПРДТ, проводимая по схемам - (Г24+И48)5 и (Г24+И72)5, вызывала примерно одинаковый эффект. Для усиления эффекта ПРДТ ЛИМТ применяли олигогил-Бе (Югославия), содержащий органически связанный селен (0,1 мг) и витамины А (1500 МЕ), Е (45 МЕ), С (90 мг). Препарат принимали по 1 капсуле в день в течение всего периода проведения ПРДТ.
При изучении биохимических параметров сыворотки у ЛОПГ наблюдалось увеличение показателей, характеризующих состояние ли-
пидного обмена (ТГ и Хол), выраженности перекисного окисления липидов (ДК и МДА) и активности антипротеаз (ААП и АМГ). После ПРДТ все показатели у лип этой группы нормализовались. Более выраженные изменения сывороточных показателей имели место у лиц с положительной реакцией на пробу голоданием. ПРДТ у этих людей оказалась малоэффективной. Сочетание ПРДТ с введением антиоксидантов приводило к нормализации величины всех изучавшихся биохимических показателей сыворотки крови (рис. 1).
В биохимических параметрах эритроцитов наблюдалось существенное различие между ними у ЛОПГ и ЛППГ. У первых не наблюдалось сдвигов показателей, характеризующих метаболический статус эритроцитов. У вторых имело место увеличение содержания продуктов перекисного окисления липи-дов (АГП и МДА) и значительное увеличение СПГ эритроцитов. ПРДТ не оказывала существенного влияния на величину биохимических параметров эритроцитов у ЛППГ. в сочетании с антиоксидантами ПРДТ нормализовала эти параметры (рис. 2).
При определении иммунологического статуса было выяснено, что у ЛОПГ имело место увеличение показателей спонтанного и индуцированного НСТ-теста. У ЛППГ пока-
ТГ
ТГ
ААП
АМГ ХОЛ
/Г 7 \ / / V
\\ / \
ДКААП
ГАГ
МДА
ДК
АНК
АНК
А
Б
ТГ
ААП
ДК
АНК
В
Обозначения: А - ЛОПГ + ПРДТ Б - ЛППГ + ПРДТ В - ЛППГ + ПРДТ + АО
- — контроль
- до лечения
________- после ПРДТ
--------------после ПРДТ + АО
Ф - существенность различий (р < 0,05) относительно контроля
Рис. 1. Динамика биохимических показателей сыворотки крови при применении ПРДТ и АО.
ТК ТК
А
Б
ТК
МДА
АТФ
ГП
Обозначения: А - ЛОПГ и ЛППГ Б - ЛППГ + ПРДТ В - ЛППГ + ПРДТ + АО
- - ЛППГ до лечения
------------- ЛОПГ до лечения
---------после ПРДТ
------------- - после ПРДТ + АО
• - см. рис. 1.
В
Рис. 2. Изменение биохимических показателей эритроцитов при применении ПРДТ и АО.
затели НСТ-теста не отличались от контроля.
Вместе с тем у них была снижена активность лизоцима, уменьшена фагоцитарная активность, уменьшено количество Т-лимфоцитов, увеличена активность В-лимфоцитов. ПРДТ не оказывала существенного влияния на показатели иммунного статуса ЛПГП, а сочетание ПРДТ с введением антиоксидантов повышало активность лизо-цима, фагоцитарную активность мононуклеа-ров и их метаболическую активность (НСТ-тест) и уменьшало содержание активных В-лимфоцитов (рис. 3).
Расчет коэффициентов парных корреляций показал, что до лечения параметры эритроцитов и мононуклеаров наиболее тесно связаны с содержанием МДА и ГАГ, а также активностью ААП сыворотки крови. Величины этих показателей находятся в обратной корреляционной зависимости с активностью СОД И ГП эритроцитов и в прямой зависимости со СПГ этих клеток. Рост величин МДА, ГАГ и ААП сыворотки коррелирует с уменьшением показателей ФЧ и НСТ-теста мононуклеаров, а также количества Е-РОК. Прямая зависимость выявлена между содержанием в сыворотке АНК и лизоцима и фагоцитарной активностью мононуклеаров.
После применения ПРДТ и введения ан-тиоксидантов корреляционные связи между указанными показателями существенно ослабевали. Это, вероятно, обусловлено взаимодействием с мембраной эритроцитов и моно-нуклеаров введенных лекарственных соединений и тех метаболитов, которые накапливаются в сыворотке после прерывистого прекращения приема пищи.
Рассчитаны также коэффициенты множественной и частичных (парциальных) корреляций между положительно связанными друг с другом триадами ФЧ-АНК-лизоцим и СПГ-МДА-ГАГ. Оказалось, что коэффициент множественной корреляции для указанных триад выше, чем их парные корреляции (г, соответственно, 0,82 и 0,89). Следовательно, фагоцитарная активность мононуклеаров в значительной степени определяется сочетан-ным влиянием на клетки АНК и лизоцима, а степень перекисного гемолиза эритроцитов
зависит от совместного действия на их мембрану МПА и ГАГ.
Расчет частных (парциальных) корреляций позволил выяснить выраженность участия каждого из этих соединений в реализации усиления фагоцитарной активности мо-нонуклеаров и повышении перекисного гемолиза эритроцитов. Показано, что корреляция ФЧ по лизоциму без участия АНК сильнее (г = 0,54), чем ФЧ по АНК без участия лизоцима (г = 0,36), а корреляция СПГ по МДА без участия ГАГ сильнее (г = 0,65), чем СПГ по ГАГ без участия МДА (г = 0,42). Это позволяет сделать вывод о том, что эффективным способом повышения ФЧ может быть увеличение содержания в крови лизоцима, а снижения СПГ - ограничение образования МДА.
В заключение следует подчеркнуть принципиально важное значение возможности прогнозирования чувствительности людей с алиментарным нарушением липидного обмена к ПРДТ с помощью пробы на усиление ау-тологичного розеткообразования после 48-часового голодания. У людей с отрицательной пробой на усиление аутологичного ро-зеткообразования иммунометаболический статус может быть восстановлен после применения ПРДТ. В то же время иммуномета-болический статус лиц, дающих положительную пробу, нормализуется только при сочетании ПРДТ с введением антиоксидантных препаратов.
Учитывая принципиальное сходство им-мунометаболических изменений, возникающих при голодании и таких формах стресса, как физическая нагрузка, охлаждение, острая кровопотеря, есть основания ожидать, что проба на усиление аутологичного розеткооб-разования после 48-часового голодания может оказаться информативной не только при алиментарном нарушении липидного обмена, но и при других состояниях, характеризующихся энергетическим дисбалансом. Вместе с тем результаты проведенных наблюдений можно рассматривать как обоснование перспективности поиска других информативных функциональных проб на чувствительность к действию стрессоров, патогенов и лечебных средств.
ЛИЗ
ЛИЗ
IgM
М- РОК
ФЧ
НСТ-сп. IgM
\
НСТ- инд. М-РОК
НСТ-сп.
НСТ-инд.
Е-РОК
Е-РОК
А
Б
ЛИЗ
НСТ-сп.
НСТ-инд.
Е-РОК
Обозначения: А - ЛОПГ и ЛППГ Б - ЛППГ + ПРДТ В - ЛППГ + ПРДТ + АО
--ЛППГ до лечения
------------- ЛОПГ до лечения
---------после ПРДТ
.............- после ПРДТ + АО
• - см. рис. 1.
В
Рис. 3. Динамика иммунологических показателей под воздействием ПРДТ и АО.
ЛИТЕРАТУРА
1. Байбурин Ф.Я., Бровкина И.Л., Прокопенко Л. Г. Коррекция иммунометаболических последствий нарушений липидного обмена. -Курск, 2000. - 140 с.
2. Байбурин Ф.Я., Утешев Б.С., Прокопенко Л.Г. Иммуномодулирующее и антиоксидантное действие ß-каротина и эссенциале при нарушении липидного обмена // Эксперим. и кли-нич. фармакология. - 1998. - № 2. - С. 41-44.
3. Бенисович В.И., Идельсон Л.И. Образование перекисей непредельных жирных кислот в оболочке эритроцитов при болезни Маркиа-фава-Микели // Вопр. мед. химии. - 1973. -Т. 19. - № 6. - С. 596-599.
4. Виноградова И.Л., Багрянцева С.И., Дервиз Г. В. Метод одновременного определения 2,3-ДФГ и АТФ в эритроцитах // Лаб. дело. -1980. - № 6. - С. 424-426.
5. Влияние алиментарной белковой недостаточности у самок крыс на состояние иммуноком-петентной системы потомства / Волга-рев М.Н., Сергеева К.В., Трушина Э.И. и др. // Вопр. питания. - 1986. - № 3. - С. 35-37.
6. Волгарев М.Н., Сергеева К.В., Трушина Э.И. Влияние алиментарной белковой недостаточности в раннем постнатальном периоде на состояние иммунной системы крыс // Вопр. питания. - 1986. - № 4. - С. 41-43.
7. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавание патологических процессов. -Л., 1978. - 294 с.
8. Колб В.Г., Камышников В.С. Клиническая биохимия. - Минск, 1975. - 312 с.
9. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник / Под ред. В.В. Меньшикова. -М., 1987. - 366 с.
10. Макаренко Е.В. Комплексное определение активности супероксиддисмутазы и глутати-онредуктазы в эритроцитах у больных с хроническими заболеваниями печени // Лаб. дело. - 1988. - № 11. - С. 48-50.
11. Мисюк Н.С., Мастыкин А.С., Кузнецов Г.П. Корреляционно-регрессивный анализ в клинической медицине. - М., 1975. - 192 с.
12. Мурашов Б.Ф., Асачук М.А., Капустин В.М. Содержание гликозаминогликанов в сыворот-
ке крови при вирусном гепатите // Лаб. дело. -1986.- № 12. - С. 715-716.
13. Определение активности транскетолазы и ТДФ-эффекта как показатель обеспеченности тиамином / Спиричев В.Б., Блажевич А.В., Исаев. И. А. и др. // Вопр. питания. - 1973. -№ 6. - С. 6-10.
14. Плецитый А.Д., Плецитый Г.Д. Иммунологические нарушения при дефиците витаминов А и Bi // Вопр. питания. - 1987. - № 3. -С. 45-47.
15. Прокопенко Л.Г., Байбурин Ф.Я., Конопля А.И. Питание, гиперлипидемия и иммунитет. - Курск, 1997. - 140 с.
16. Прокопенко Л.Г., Бровкина И.Л. Иммуноме-таболические нарушения и их коррекция // Окислительный энергетический и иммунный гомеостаз (нарушение и коррекция). -Курск. - 2003. - С. 13-34.
17. Прокопенко Л.Г., Конопля А.И., Бровкина И.Л. Метаболическая иммуносупрессия и ее коррекция // Метаболическая иммуномодуля-ция. - Курск. - 2000. - С. 8-27.
18. Прокопенко Л.Г., Конопля А.И., Ласкова И.Л. и др. Эритроциты и метаболическая иммуно-модуляция. - Курск, 1995. - 166 с.
19. Прокопенко Л.Г., Николаева И.А., Байбурин Ф.Я., Кательникова Л.В. Иммуномодулирующее действие прерывистого голодания при температурных, токсических и алиментарных нагрузках // Патол. физиол. и экспер. терапия. - 1999. - № 2. - С. 15-17.
20. Русаков С.В., Кубышкин А.В. Микрометод определения в крови агингибитора протеаз и а2-макроглобулина // Лаб. дело. - 1995. -№ 1. - С. 8-10.
21. Саскинд Р.М. Иммунологический статус организма при недостатках питания // Иммунологические аспекты инфекционных заболеваний. - М., 1982. - С. 233-247.
22. Стальная И.Д., Геришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. -М., 1977. - С. 66-68.
23. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Истамов Х.Н. Экологическая иммунология. - М., 1996. -220 с.
