CC BY
83
DOI: 10.21294/1814-4861-2016-15-5-25-32 УДК: 618.146-006:616-091.818
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ зНАЧЕНИЕ Ki67, ЦИКЛООКСИГЕНАзы-2 (COX-2) И p16ink4a у БОЛЬНЫХ
местнораспространенным раком шейки матки
О.Н. Чуруксаева1, Л.А. Коломиец12, О.В. Савенкова1, В.В. Недосеков2, М.К. Ибрагимова1
Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук, г Томск1
ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г Томск2 634009, г Томск, пер. Кооперативный, 5. e-mail: churuksaevaon@mail.ru1
Аннотация
Исследование, проведенное у больных местнораспространенным раком шейки матки (МРРШМ), показало, что высокий уровень экспрессии маркера пролиферации Ю67 у первичных больных, повышенные уровни циклооксигеназы-2 (СОХ-2) и белка р16тк4а после проведения неоадъювантной химиотерапии коррелируют с неблагоприятным прогнозом, что позволяет использовать эти показатели в мониторинге течения заболевания. Показано, что до начала противоопухолевого лечения уровень экспрессии Ю67 был максимально высоким у тех больных, у которых впоследствии наблюдалось про-грессирование заболевания, и достигал 85 %. Выявлено, что у больных МРРШМ с уровнем экспрессии Ю67<50 %, показатели 5-летней общей выживаемости статистически значимо превышают аналогичные показатели больных МРРШМ с уровнем экспрессии Ю67>50 %. Уровень экспрессии циклооксигеназы СОХ-2, определяемый после химиотерапевтического лечения, коррелирует с общей выживаемостью больных МРРШМ. Так, 5-летняя выживаемость больных МРРШМ при уровне экспрессии СОХ-2<50 % составила 84 %, а при экспрессии >50 % - 66 %. Показано, что уровень экспрессии белка р16тк4а коррелирует с показателями безрецидивной выживаемости.
Ключевые слова: местнораспространенный рак шейки матки, №67, СОХ-2, p16ink4a, факторы прогноза.
Рак шейки матки (РШМ) занимает ведущее место в структуре онкологической женской заболеваемости и смертности [1]. Отдаленные результаты лечения больных РШМ остаются неудовлетворительными, рецидивы после специального лечения чаще возникают через 12-20 мес и наблюдаются в 32-78,3 % случаев [2]. До 45 % больных погибают в течение первых 5 лет от прогрессирования заболевания [3]. Наряду с совершенствованием методов лечения, значимым аспектом в проблеме местно-распространенного рака шейки матки (МРРШМ) является поиск и оценка факторов прогноза заболевания. Доказано влияние на течение заболевания таких прогностических факторов, как размер первичной опухоли, глубина инвазии, гистотип опухоли, наличие опухолевых эмболов в лимфатических сосудах, длительность облучения. В то же время существует ряд молекулярных маркеров, связанных с биологическим поведением опухоли, которые часто являются более значимыми в плане исхода заболевания, чем терапевтический эффект [4-6]. Рецепторы гормонов, биохимические маркеры, экспрессия онкогенов и антигенов, связанная с пролиферацией, а также другие молекулярные маркеры признаны прогностически значимыми
[6-8]. В то же время данные литературы о роли таких показателей, как VEGF, EGFR, СОХ-2, Ю67, р 16тк4а при местнораспространенном раке шейки матки достаточно противоречивы. Несомненно, что знание биологических маркеров позволит понять злокачественный потенциал опухоли, прогнозировать течение заболевания и определить индивидуальную тактику лечения.
Цель исследования - изучить прогностическое значение показателей Ю67, СОХ-2, р16тк4а у больных МРРШМ, получивших комбинированное лечение с использованием неоадъювантной химиотерапии.
Материал и методы
Изучались возможности маркера пролифератив-ной активности Ю67, белка р 16тк4а, являющегося ингибитором циклинзависимых киназ, и циклоок-сигеназы СОХ-2 в определении прогноза течения местнораспространенного РШМ. Материалом исследования служила ткань опухоли шейки матки, полученная от 25 больных. Средний возраст пациенток составил 38,04 ± 1,6 года.
Оценивалась первоначальная экспрессия перечисленных иммуногистохимических маркеров
Чуруксаева Ольга Николаевна, churuksaevaon@mail.ru
в опухоли и после проведения 2 курсов плати-носодержащей неоадъювантной химиотерапии (НАХТ). Иммуногистохимическое исследование проводилось по стандартной методике на депа-рафинированных срезах с блоков тканей шейки матки, полученных от препаратов резекций или биопсий шейки матки. Все препараты пересматривались патоморфологом для уточнения гистологического диагноза и соответствия блоков выбранным срезам. Для антитела p16ink4a использовали фирменный набор CINtec histology kit (производство mtm laboratories AG, Германия). Для остальных антител использовались следующие МКА: COX-2 (клон CX-294, мышиное, рабочее разведение 1:150, производство Dako, демаскировка в ЭДТА буфере pH=9,0); Ki67 (клон MIB1, мышиное, готовое к применению, производство Dako, демаскировка в цитратном буфере pH=6,0). При ИГХ-реакции использовался непрямой двухшаговый стрептовидин-биотиновый метод. Окраска проводилась диаминобензидином и гематоксилином.
Оценку результатов окрашивания проводили с применением светового микроскопа Carl Zeiss Microimaging (Германия). Для всех маркеров оценивали локализацию окрашивания в клетке (ядро, цитоплазма, мембрана). Результаты ИГХ-анализа оценивали количественно и качественно по интенсивности окрашивания цитоплазмы: 0 - окрашивание отсутствует, 1 - слабое окрашивание, 2 -окрашивание средней интенсивности, 3 - сильное окрашивание. Количественно оценивали процент окрашенных клеток (от 0 до 100 %) и содержание их в максимально насыщенных слоях эпителия.
Для оценки пролиферативной активности (ПА) опухоли подсчитывали количество Ki67 положительных клеток на 200-300 опухолевых клеток. Индекс Ki67 определяли по формуле: ПА = число Ki67 положительных клеток х 100 / общее количество клеток.
Неоадъювантная химиотерапия проводилась по схеме цисплатин в дозе 75 мг/м2 в 1-й день и гемцитабин в дозе 1 250 мг/м2 в 1-й и 8-й дни, с последующими сочетанной лучевой терапией по радикальной программе или оперативным лечением в случае резектабельности опухоли с адъювантной лучевой терапией.
Непосредственные результаты неоадъювантной химиотерапии оценивались с помощью шкалы RE-CIST (Response Evaluation Criteria In Solid Tumors). Оценка объективного ответа подтверждалась результатами клинического, ультразвукового и КТ/ МРТ исследований.
Материалом для исследования на ВПЧ служили соскобы из цервикального канала (эндоцервикс). Проводилось генотипирование 12 типов (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59) вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска (ВПЧ ВКР) с определением вирусной нагрузки методом
ПЦР-диагностики в режиме «реального времени» с применением диагностических тест-систем «Амплисенс FRT ВПЧ ВКР скрининг» и «Ампли-сенс FRT ВПЧ ВКР генотип» (Россия) на основе мультипраймерной типоспецифической ПЦР, на 6-канальном амплификаторе RotorGene 6000 фирмы Corbett Research, Австралия.
Для статистической обработки полученных результатов использовали критерии Стьюдента и Манна - Уитни, Вилкоксона, Мак-Немара, критерий Фишера, критерии согласия Шапиро - Уилкса, Колмогорова - Смирнова, Лиллефорса. Достоверность различий оценена по лог-ранговому критерию (Survival Analysis). Кривые общей, скорректированной и безрецидивной выживаемости строились по методу Каплана - Майера. Значимость различий в выживаемости между группами оценена по критерию Гехана - Вилкоксона или F-критерию Кокса. Статистическая обработка полученных результатов проводилась с помощью пакета программ Statistica for Windows, версия 8.0.
Результаты и обсуждение
У всех пациенток верифицирован плоскоклеточный рак шейки матки, из них у 9 (25 %) диагностирована ИВ стадия, у 16 (64 %) - ШВ стадия заболевания. Умеренная дифференцировка опухоли отмечалась у 12 (48 %), низкодифферен-цированная опухоль - у 13 (52 %) пациенток. ВПЧ-инфекция высокого канцерогенного риска (ВПЧ ВКР) обнаружена в 20 (80 %) случаях, 5 (20 %) пациенток были ВПЧ-отрицательными. В 15 (75 %) наблюдениях выявлен 16 тип ВПЧ ВКР, в остальных случаях - 18, 31, 39 и 56 типы.
Было выявлено, что индекс пролиферации в среднем у больных МРРШМ составил 60 % (рис. 1). Высокий и очень высокий уровень экспрессии (более 50 %) наблюдался у 16 (64 %) больных МРРШМ (рис. 2), слабый уровень экспрессии Ki67 - у 4 (16 %) пациенток (рис. 3). Полученные результаты согласуются с данными авторов, утверждающих, что уровень пролиферативной активности плоскоклеточного рака шейки матки предопределяет отдаленные результаты лечения, а также является предсказательным фактором для определения чувствительности к химио- и лучевой
Нетэкспрессии До25% 26-50% 51-75% Более75%
Рис. 1. Экспрессия Ki67 как показателя пролиферативной активности у больных МРРШМ
Рис. 4. Экспрессия циклооксигеназы СОХ-2 у больных МРРШМ
Рис. 2. Микрофото. ИГХ-исследование. Индекс метки К1-67 выше 80 % в опухолевых гнездах умеренно дифференцированной плоскоклеточной карциномы шейки матки, х400
Рис. 3. Микрофото. ИГХ-исследование. Высокодифференци-рованная плоскоклеточная карцинома шейки матки. Низкая пролиферативная активность опухолевых клеток. Индекс метки К1-67 <15 %, х200
терапии [9]. Кроме того, имеются данные о том, что пролиферативная активность эпителиальных клеток при предраковых поражениях шейки матки зависит от наличия ВПЧ ВКР [10]. В то же время есть исследования, не обнаруживающие такой зависимости и указывающие, что пролиферативная активность при РШМ может варьировать в широких пределах, отличаясь у разных больных более чем в 10 раз [11]. Ряд авторов предлагают определять экспрессию PCNA, К167 и р16тк4а, служащих суррогатными маркерами экспрессии вирусных онкогенов, с целью предсказывания активности вирусных генов Е6/Е7 [12-14].
Проведена оценка экспрессии циклооксигеназы СОХ-2, являющейся индуцибельной изоформой фермента, участвующего в образовании проста-гландинов из арахидоновой кислоты, у больных МРРШМ (рис. 4). Анализ полученных данных показал, что экспрессия СОХ-2 выявлялась у 19 (76 %) больных МРРШМ. Высокий уровень экс-
Рис. 5. Экспрессия белка р161пк4а у больных МРРШМ
прессии наблюдался у 5 (20 %), низкий уровень экспрессии СОХ-2 - у 19 (56 %) больных. Полученные данные не противоречат результатам других авторов [15]. Ряд исследователей сообщают о вовлеченности СОХ-2 в цервикальный канцерогенез и свидетельствуют об ассоциации этого маркера с распространенными стадиями заболевания, плохим прогнозом и рецидивами [16, 17]. В других работах значимость СОХ-2 как фактора прогноза отрицается [18]. Одни авторы обнаруживают корреляционную связь между экспрессией СОХ-2 и ВПЧ, утверждая, что онкобелки Е6 и Е7 увеличивают транскрипцию СОХ-2 через ЕОБЯ-сигнальный путь, другие указывают на отсутствие связи экспрессии СОХ-2 с наличием ВПЧ-инфекции [19, 20].
В современной литературе в качестве одного из прогностических факторов, ассоциированного с худшим течением РШМ, рассматривается повышенная экспрессия белка р16тк4а, продуцируемого геном ШК4а, этот протеин принадлежит к группе ингибиторов циклинзависимых киназ (рис. 5). Нами выявлено, что значимо чаще белок р16тк4а экспрессировался в клетках больных МРРШМ - в 20 (80 %) случаях. Уровень экспрессии в среднем у этих пациенток составил 47 % (рис. 6). У 8 (40 %) больных МРРШМ отмечалась высокая и очень высокая экспрессия этого белка, низкая экспрессия (до 25 %) наблюдалась в 6 (24 %) случаях.
Результаты анализа взаимосвязи наличия ВПЧ-инфекции с белком р16тк4а представлены на рис. 7. Известно, что у больных МРРШМ актив-
Рис. 6. Микрофото. ИГХ-исследование. Фокальная экспрессия протеина p16ink4a в ядрах клеток опухолевой ткани шейки матки, х200
ность p16ink4a повышается при экспрессии ряда вирусных или клеточных онкогенов. Полученные результаты свидетельствуют, что в большинстве случаев экспрессия белка p16ink4a сочетается с наличием ВПЧ-инфекции онкогенных типов. У больных МРРШМ такое сочетание наблюдается в 68 % случаев. Возможно, что гиперэкспрессия этого белка у ВПЧ-инфицированных больных объясняется взаимодействием белкового продукта онкогена Е7 ВПЧ с Rb, что приводит к инактивации последнего. Доказано, что, в свою очередь, по механизму обратной связи усиливается транскрипция гена, кодирующего белок p16ink4a [21].
Рядом исследований показано, что появление клеток, экспрессирующих белок p16ink4a, отмечается уже на ранних стадиях опухолевого процесса. Так, при раке in situ наблюдается четкий сдвиг в сторону фокального и диффузного окрашивания, которое является преобладающим в инвазивных карциномах. В то же время отсутствие экспрессии p16INK4a в ткани плоскоклеточной карциномы, возможно, указывает на иной механизм развития
Рис. 7. Экспрессия белка p16ink4a у вирус-ассоциированных больных МРРШ
последней, не ассоциированный с ВПЧ [22]. Было выявлено, что присутствие генома HPV высокого риска не является необходимым условием для осуществления экспрессии белка p16ink4a в опухолевых клетках. Этот белок отмечался и в тканях больных раком молочной железы, легкого и мочевого пузыря. В то же время причины его повышенной экспрессии до конца не выявлены.
С целью изучения прогностического значения параметров Ki67, COX-2 и p16INK4a была проанализирована динамика этих показателей у больных МРРШМ до лечения и после 2 курсов ПХТ (табл. 1). После 2 курсов НАХТ полная регрессия опухоли наблюдалась у 1 (4 %) больной, частичная регрессия - у 22 (88 %), стабилизация процесса - у 2 (8 %) пациенток. Клинический эффект НАХТ у больных местнораспространенным раком шейки матки проявлялся в статистически значимом уменьшении объема опухоли шейки матки, уменьшении частоты межменструальных кровянистых выделений, болевого синдрома, контактных кровянистых выделений.
Таблица 1
Частота встречаемости экспрессии №67, СОХ-2, p16ink4a у больных МРРШМ
до и после проведения НАХТ
Уровень экспрессии Иммуногистохимические показатели
Ю67 СОХ-2 р16тк4а p
До лечения После ПХТ До лечения После ПХТ До лечения После ПХТ
Нет экспрессии
До 25 %
26-50 %
51-75 %
Более 75 %
4 (16%)
5 (20 %) 5 (20 %)
p2 11 (44 %)
6 (24 %)
Р1
4 (16 %)
7 (28 %)
8 (32 %)
6 (24 %)
13 (52 %)
1 (4 %)
2 (8 %) 3 (12 %)
15 (60 %) р3
9 (36 %) 1 (4 %)
5 (20 %)
6 (24 %) 4 (16 %)
3 (12 %)
7 (28 %)
12 (48 %) р4
5 (20 %)
3 (12 %)
1 (4 %)
4 (16 %)
p1=0,0111 p2=0,0251 p3=0,0218 p4=0,00641
Примечание: р1 - уровень статистической значимости по показателю Ю-67 до лечения и после ХТ (по критерию Фишера); р2 - уровень статистической значимости по показателю Ю-67 до лечения и после ХТ (по критерию Фишера); р3 - уровень статистической значимости по показателю СОХ-2 до лечения и после ХТ (х2); р4 - уровень статистической значимости по показателю р16тк4а до лечения и после ХТ (х2).
Таблица 2
Динамики уровня экспрессии №67, СОХ-2 и р16шк4а до и после курсов НАХТ у 18 операбельных больных МРРШМ, получивших комбинированное лечение
Ki67
До лечения После НАХТ
Иммуногистохимические показатели COX-2
До лечения После НАХТ
p16ink4a До лечения После НАХТ
53,9 %
31,5 %
43,7 %
7,5 %*
27,5 %
16,7 %**
Примечание: * - статистическая значимость различий показателя СОХ-2 до и после НАХТ, р=0,04 (SignTest); ** - статистическая значимость различий показателя р16тк4а до и после НАХТ, р=0,04 (SignTest).
Анализ иммуногистохимических маркеров, определяемых до начала противоопухолевого лечения и после 2 курсов НАХТ у больных МРРШМ, выявил достоверное снижение удельного веса опухолей шейки матки, экспрессирующих Ю67, циклооксигеназу СОХ-2 и ингибитор циклинзави-симых киназ - белок р16тк4а, после завершения курсов химиотерапии. Показано, что если до начала лечения показатель пролиферативной активности К167 выявлялся у всех больных МРРШМ, то после курсов НАХТ 6 (24 %) пациенток не экспрессировали этот антиген. Среднее его значение уменьшилось с 60 до 42 % (р<0,05), т.е. менее половины опухолевых клеток находилось в митотическом периоде клеточного цикла. Доля случаев с высокой и очень высокой экспрессией К167 снизилась в 2 раза по сравнению с показателями до лечения - с 64 до 32 %.
Отчетливая экспрессия циклооксигеназы СОХ-2, оказывающей влияние на подавление апоп-тоза, активацию неоангиогенеза и адгезию опухолевых клеток, выявлялась у 19 (76 %) больных МРРШМ. После проведения НАХТ отмечается значимое снижение опухолей, экспрессирующих СОХ-2, - до 10 (40 %) наблюдений, причем в 9 (36 %) случаях наблюдается слабая экспрессия СОХ-2 - до 25 %.
Анализ экспрессии белка-ингибитора циклинза-висимых киназ р16тк4а после проведения НАХТ показал его достоверное снижение. До лечения р16тк4а экспрессировался у 20 (80 %) пациенток МРРШМ, после лечения - у 13 (52 %) больных. Также отмечается снижение уровня экспрессии: если до лечения экспрессия более 50 % отмечалась у 10 (40 %) больных МРРШМ, то после лекарственной терапии высокая и очень высокая экспрессия выявлялась в 2 раза реже.
Проведен анализ динамики уровня экспрессии показателей К167, СОХ-2, р16тк4а у 18 больных МРРШМ, прооперированных после 2 курсов НАХТ (табл. 2). Анализ динамики уровня циклооксигеназы СОХ-2 и белка р16тк4а установил значимое уменьшение экспрессии этих маркеров у пациенток, перешедших после НАХТ в группу операбельных и достигших полной регрессии опухоли после завершения комбинированного лечения. Со стороны индекса пролиферативной активности К167 отмечалась положительная дина-
мика снижения экспрессии антигена К167, однако значимых различий не выявлено.
В работе была проанализирована связь К167, СОХ-2, р16тк4а с отдаленными результатами лечения у больных МРРШМ (рис. 8). Выявлено, что у больных МРРШМ с уровнем экспрессии К167 менее 50 % показатели 5-летней общей выживаемости значимо превышают аналогичные показатели у больных с экспрессией К167>50 % (Gehan'sWilcoxon р=0,01056, Log-RankTest р=0,00899, Cox-MantelTest р=0,01011). В группе больных с экспрессией Ю67 ниже 50 % 5-летняя общая выживаемость составила 100 %, среди пациенток с высоким уровнем пролиферативной активности (Ю67>50 %) - 67 %. Показатели безрецидивной 5-летней выживаемости у пациенток МРРШМ с различным уровнем экспрессии Ю67 значимо не отличались.
Значимой взаимосвязи исходных уровней СОХ-2 и р16тк4а у больных МРРШМ с показателями выживаемости не выявлено. Однако установлено, что экспрессия этих показателей после НАХТ сопряжена с отдаленными результатами лечения. Так, 5-летняя выживаемость больных МРРШМ при экспрессии СОХ-2<50 % составила 84 %, при экспрессии >50 % - 66 %. Анализ зависимости безрецидивной выживаемости от уровня экспрессии белка р16тк4а после НАХТ показал, что безрецидивная выживаемость больных МРРШМ, у которых экспрессии данного белка не отмечалось, значимо
Cumulative Proportion Surviving (Kaplan-Meier) Complete Censored
= Ш
p<0,05
- Ki67<50% Ki67>50%
n 1П ?f) ЯП 4П ЯП fif) 7П ЯП ЯП "
Time
Месяцы
Рис. 8. Общая выживаемость больных МРРШМ в зависимости от исходного уровня маркера пролиферативной активности Ю67
Рис. 9. Безрецидивная выживаемость в зависимости от экспрессии р161пк4а после проведения курсов НАХТ (р<0,05)
превышала аналогичный показатель у пациенток с высокой и очень высокой экспрессией этого белка (рис. 9). Показатель 3-летней безрецидивной выживаемости у р16тк4а-отрицательных больных составил 50 %, у пациенток с низкой экспрессией - 40 %, с высокой экспрессией - 25 %. Пятилетняя безрецидивная выживаемость у больных МРРШМ с отсутствием экспрессии и низким ее уровнем не отличалась и достигала 20 %, больных с высокой экспрессией белка p16ink4a в этом сроке наблюдения не было. Аналогичные результаты получены другими авторами [9, 16]. Отсутствие значимых различий в ряде случаев, вероятно, может быть связано с небольшим количеством пациенток, что
ЛИТЕРАТУРА
1. Ferlay J., Shin H.R., Bray F. GLOBOCAN 2008 v1.2 Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC Cancer Base No. 10 [Internet]. Lyon, France: International Agency for Reserch on Cancer; 2010 [cited 2012 April]. Available from: http: globocan.iarc.fr.
2. Коломиец Л.А., Чуруксаева О.Н.. УразоваЛ.Н.. Чернышова А.Л., Молчанов С.В., Мунтян А.Б., Замкова О.В., ВидяеваИ.Г. Вакцинация против ВПЧ - первичная профилактика рака шейки матки. Томск: Печатная мануфактура, 2011, 116 с.
3. Максимов С.Я., Гусейнов К.Д. Комбинированное лечение рака шейки матки // Практическая онкогинекология: избранные лекции / Под ред. А.Ф. Урманчеевой, С.А. Тюляндина, В.М. Моисеенко. СПб.: Центр ТОММ, 2008: 168-180.
4. Карапетян В.Л., Степанова Е.В., Барышников А.Ю., Никого-сян С.О., Кузнецов В.В. Молекулярно-биологические факторы прогноза рака яичников начальных стадий. Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. 2011. Т. 22, № 1: 37-41.
5. Calado R.T., Chen J. Telomerase: not just for the elongation of telomeres. Bioessays. 2006 Feb; 28 (2): 109-12.
6. Samir R., Asplund A., Tot T., Pekar G., Hellberg D. Tissue tumor marker expression in smokers, including serum cotinine concentrations, in women with cervical intraepithelial neoplasia or normal squamous cervical epithelium. Am J Obstet Gynecol. 2010 Jun; 202 (6): 579.e1-7. doi: 10.1016/j.ajog.2009.11.034.
7. Song S.H., Park H.M., Eom D.W., Lee J.K., Lee N.W., Kim A.R., Hur J.Y., Lee K.W., Park Y.K., Saw H.S. The expression of p16 (INK4a) and Ki67 in relation to high-risk human papilloma viral load and residual disease after conization with positive margins. Int J Gynecol Cancer. 2007 Jul-Aug; 17 (4): 858-67.
8. Su Mi Kim, Jeong Uee Lee, Dae Woo Lee, Min Jung Kim, Hae Nam Lee. The prognostic significance of p16, Ki67, p63, and CK17 expression determined by immunohistochemical staining in cervical intraepithelial neoplasia 1. Korean J Obstet Gynecol. 2011; 54 (4): 184-191.
9. Пожарисский К.М., Винокуров В.Л., Жаринов Г.М., Болда-рян Н.А., Кузнецова М.Е., Гаспарян Н.А., Самсонова Е.А. Иммуно-гистохимические маркеры в качестве прогностических критериев в онкогинекологии. Вопросы онкологии. 2008; 4: 463-470.
предполагает продолжение исследований в данном направлении.
Таким образом, высокий уровень пролифера-тивной активности Ki67 у первичных больных, гиперэкспрессия COX-2 и белка p16ink4a после проведения неоадъювантной химиотерапии коррелируют с неблагоприятным прогнозом. Высокие уровни экспрессии Ki67 и COX-2 значимо влияют на 5-летнюю общую выживаемость, а уровень экспрессии белка p16ink4a сопряжен с показателями безрецидивной выживаемости. Результаты проведенного исследования указывают на важное значение изученных параметров и подтверждают их предиктивную роль в прогнозе МРРШМ.
10. Cambruzzi E., Zettler C.G., Alexandre C.O. Expression of Ki67 and squamous intraepithelial lesions are related with HPV in endocervical adenocarcinoma. Pathol Oncol Res. 2005; 11 (2): 114-20.
11. Carriho C., Gouveia P., CantelM., AlbertoM., Buane L., DavidL. Characterization of human papillomavirus infection, p53 and Ki67 expression in cervix cancer of Mozambican women. Pathol Res Pract. 2003; 199 (5): 303-11.
12. Heideman D., Snijders P., Berkhof J., Verheijen R.H., Helmer-horst T.J., Meijer C.J. Vaccination against HPV: indications for women and the impacton the cervical screening programme. BJOG 2008; 115: 938-46. doi: 10.1111/j.1471-0528.2008.01779.x.
13. Kiviat N.B., Hawes S.E., Feng Q. Screening for cervical cancer in the era of the HPV vaccine - the urgent need for both new screening guidelines and new biomarkers. J Natl Cancer Inst. 2008 Mar 5; 100 (5): 290-1. doi: 10.1093/jnci/djn038.
14. NauclerP., Ryd W., Tornberg S., Strand A., Wadell G., ElfgrenK., Radberg T., StranderB., Forslund O., HanssonB.G., Hagmar B., Johansson B., RylanderE., Dillner J. Efficacy of HPV DNA testing with cytology triage and/or repeat HPV DNA testing in primary cervical cancer screening. J Natl Cancer Inst 2009; 101 (2): 88-99. doi: 10.1093/jnci/djn444.
15. Hammes L.S., Tekmal R.R., Naud P., Edelweiss M.I., Kirma N., Valente P.T., Syrjanen K.J., Cunha-Filho J.S. Up-regulation of VEGF, c-fms and COX-2 expression correlates with severity of cervical cancer precursor (CIN) lesions and invasive disease. Gynecol Oncol. 2008 Sep; 110 (3): 445-51. doi: 10.1016/j.ygyno.2008.04.038.
16. Dursun P., Yuce K., Usubutun A., Ayhan A. Cyclooxygenase-2 expression in cervical intraepithelial neoplasia III and squamous cell cervical carcinoma, and its correlation with clinicopathologic variables. Int J Gynecol Cancer. 2007; 17 (1): 164-73.
17. Mitchell A., Newton J.M., Brite K., Einspahr J., Ellis M., Davis J., Nuno T., Alberts D.S., Garcia F. Cyclooxygenase 2 expression in cervical intraepithelial neoplasia and vulvar cancer. J Low Genit Tract Dis. 2007 Apr; 11 (2): 80-5.
18. SalesK.J., KatzAA., HowardB., SoetersR.P,MillarR.P, JabbourH.N. Cyclooxygenase-1 is up-regulated in cervical carcinomas: autocrine/paracrine regulation of Cyclooxygenase-2, prostoglandine receptors, angiogenic factors by Cyclooxygenase-1. Cancer Res. 2002 Jan 15; 62 (2): 424-32.
19. Gadducci A., Guerrieri M.E., Greco C. Tissue biomarkers as prognostic variables of cervical cancer. Crit Rev Oncol Hematol. 2013 May; 86 (2): 104-29. doi: 10.1016/j.critrevonc.2012.09.003.
20. Sarian L.O., Derchain S.F., Yoshida A., Vassallo J., Pignataro F., De Angelo Andrade L.A. Expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) and Ki67 as related to disease severity and HPV detection in squamous lesions of the cervix. Gynecol Oncol. 2006 Sep; 102 (3): 537-41.
21. Ozgul N., Cil A.P., Bozdayi G., Usubutun A., Bulbul D, Rota S., Kose M.F., Biri A., Haberal A. Staining characteristics of p16INK4a: is
there a correlation with lesion grade or high-risk human papillomavirus positivity? J Obstet Gynaecol Res. 2008 Oct; 34 (5): 865-71.
22. KuoK.T., ChangH.C., Hsiao C.H., LinM.C. Increased Ki67 proliferative index and absence of p16INK4a in CIN-HPV related pathogenic pathways different from cervical squamous intraepithelial lesion. Br J Ophthalmol. 2006 Jul; 90 (7): 894-9.
Поступила 18.05.16 Принята в печать 5.09.16
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Чуруксаева Ольга Николаевна, доктор медицинских наук, старший научный сотрудник отделения гинекологии с группой профилактики, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: churuksaevaon@mail.ru. SPIN-код: 4769-0636. Коломиец Лариса Александровна, доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заведующая отделением гинекологии с группой профилактики, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук; профессор кафедры онкологии, Сибирский государственный медицинский университет (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: kolomietsla@oncology.tomsk.ru. SPIN-код: 6316-1146. Савенкова Ольга Владимировна, кандидат медицинских наук, младший научный сотрудник отделения патологической анатомии и цитологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г. Томск, Российская Федерация). SPIN-код: 2647-4457.
Недосеков Василий Васильевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры патологической анатомии, Сибирский государственный медицинский университет (г. Томск, Российская Федерация).
Ибрагимова Марина Константиновна, младший научный сотрудник лаборатории онковирусологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: imk1805@yandex.ru. SPIN-код: 2340-1628.
Авторы данной статьи подтвердили отсутствие финансовой поддержки / конфликта интересов, о котором необходимо сообщить
PROGNOSTIC SIGNIFICANCE OF Ki67, CYCLOOXYGENASE-2 (COX-2) AND p16ink4a IN PATIENTS WITH LOCALLY ADVANCED CERVICAL CANCER
O.N. Churuksaeva1, L.A. Kolomiets12, O.V. Savenkova1, V.V. Nedosekov2, M.K. Ibragimova1
Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Medical
Sciences, Russia, Tomsk1
Siberian State Medical University, Russia, Tomsk2
5, Kooperativny Street, 634009-Tomsk, Russia, e-mail: churuksaevaon@mail.ru1
Abstract
The increased expression levels of Ki67, cyclooxygenase-2 (COX-2) and p16ink4a proteins after neoadjuvant chemotherapy for locally advanced cervical cancer were shown to correlate with unfavorable prognosis. The level of Ki67 expression before treatment was 85 % in patients, who subsequently developed disease progression. The overall 5-year survival rates were significantly higher in cervical cancer patients with Ki67 expression of <50 % than in patients with Ki67 expression >50 %. We found the correlation between COX-2 expression and overall survival of patients with locally advanced cervical cancer. Thus, the 5-year survival rates were 84 % and 66% in cervical cancer patients with COX-2 expressions of <50 % and >50 %, respectively. The correlation between p16ink4a expression and disease-free survival was found.
Key words: locally advanced cervical cancer, Ki67, COX-2, p16ink4a, prognostic factors.
REFERENCES
1. Ferlay J., Shin H.R., Bray F. GLOBOCAN 2008 v1.2 Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC Cancer Base No. 10 [Internet]. Lyon, France: International Agency for Reserch on Cancer; 2010 [cited 2012 April]. Available from: http: globocan.iarc.fr.
2. KolomietsL.A., Churuksaeva O.N., YrazovaL.N., Chernyshova A.L., Molchanov S.V., Muntyan A.B., Zamkova O.V. Vaccine against HPV as a primary prevention of cervical cancer. Tomsk; 2011, 116 p. [in Russian]
3.MaximovS.Ya., GuseinovK.D. Combined modality treatment of cervical cancer / Ed. by A.F. Urmancheeva, S.A. Tjuljandin, V.M. Moiseenko. SPb; 2008: 168-180. [in Russian]
4. Karapetyan V.L., Stepanova E.V., Baryshnikov A.Yu., Nikogo-syan S.O., Kuznetsov V.V. Molecular and biological predictors for early stage ovarian cancer. 2011. 22 (1): 37-41. [in Russian]
5. Calado R.T., Chen J. Telomerase: not just for the elongation of telomeres. Bioessays. 2006 Feb; 28 (2): 109-12.
6. Samir R., Asplund A., Tot T., Pekar G., Hellberg D. Tissue tumor marker expression in smokers, including serum cotinine concentrations, in women with cervical intraepithelial neoplasia or normal squamous cervical epithelium. Am J Obstet Gynecol. 2010 Jun; 202 (6): 579.e1-7. doi: 10.1016/j.ajog.2009.11.034.
7. Song S.H., ParkH.M., Eom D.W., Lee J.K., Lee N.W., Kim A.R., Hur J.Y., Lee K.W., Park Y.K., Saw H.S. The expression of p16 (INK4a) and Ki67 in relation to high-risk human papilloma viral load and residual disease after conization with positive margins. Int J Gynecol Cancer. 2007 Jul-Aug; 17 (4): 858-67.
8. Su Mi Kim, Jeong Uee Lee, Dae Woo Lee, Min Jung Kim, Hae Nam Lee. The prognostic significance of p16, Ki67, p63, and CK17 expression determined by immunohistochemical staining in cervical intraepithelial neoplasia 1. Korean J Obstet Gynecol. 2011; 54 (4): 184-191.
9. PozharisskiyK.M., Vinokurov V.L., ZharinovG.M, BoldaryanN.A., Kuznetsova M.E., Samsonova E.A. Pozharisskij K.M., Vinokurov V.L., Zharinov G.M., Boldarjan N.A., Kuznecova M.E., Gasparjan N.A., Samsonova E.A. Immunohistochemical markers as predictive factors in gynecological cancer. Voprosy onkologii. 2008; 4: 463-470. [in Russian]
10. Cambruzzi E., Zettler C.G., Alexandre C.O. Expression of Ki67 and squamous intraepithelial lesions are related with HPV in endocervical adenocarcinoma. Pathol Oncol Res. 2005; 11 (2): 114-20.
11. Carriho C., GouveiaP., CantelM., AlbertoM., BuaneL., DavidL. Characterization of human papillomavirus infection, p53 and Ki67 expression in cervix cancer of Mozambican women. Pathol Res Pract. 2003; 199 (5): 303-11.
12. HeidemanD., Snijders P., Berkhof J., VerheijenR.H., Helmerhorst T.J., Meijer C.J. Vaccination against HPV: indications for women and the impacton the cervical screening programme. BJOG 2008; 115: 938-46. doi: 10.1111/j.1471-0528.2008.01779.x.
13. Kiviat N.B., Hawes S.E., Feng Q. Screening for cervical cancer in the era of the HPV vaccine - the urgent need for both new screening guidelines and new biomarkers. J Natl Cancer Inst. 2008 Mar 5; 100 (5): 290-1. doi: 10.1093/jnci/djn038.
14. Naucler P., Ryd W., Tornberg S., Strand A., Wadell G., Elfgren K., Rädberg T., StranderB., ForslundO., HanssonB.G., HagmarB., Johansson B., Rylander E., Dillner J. Efficacy of HPV DNA testing with cytology
triage and/or repeat HPV DNA testing in primary cervical cancer screening. J Natl Cancer Inst 2009; 101 (2): 88-99. doi: 10.1093/jnci/djn444.
15. Hammes L.S., Tekmal R.R., Naud P., Edelweiss M.I., Kirma N., Valente P.T., Syrjanen K.J., Cunha-Filho J.S. Up-regulation of VEGF, c-fms and COX-2 expression correlates with severity of cervical cancer precursor (CIN) lesions and invasive disease. Gynecol Oncol. 2008 Sep; 110 (3): 445-51. doi: 10.1016/j.ygyno.2008.04.038.
16. Dursun P., Yuce K., Usubutun A., Ayhan A. Cyclooxygenase-2 expression in cervical intraepithelial neoplasia III and squamous cell cervical carcinoma, and its correlation with clinicopathologic variables. Int J Gynecol Cancer. 2007; 17 (1): 164-73.
17. Mitchell A., Newton J.M., Brite K., Einspahr J., Ellis M., Davis J., Nuno T., Alberts D.S., Garcia F. Cyclooxygenase 2 expression in cervical intraepithelial neoplasia and vulvar cancer. J Low Genit Tract Dis. 2007 Apr; 11 (2): 80-5.
18. Sales K.J., KatzA.A., Howard B., Soeters R.P., Millar R.P., Jab-bour H.N. Cyclooxygenase-1 is up-regulated in cervical carcinomas: autocrine/paracrine regulation of Cyclooxygenase-2, prostoglandine receptors, angiogenic factors by Cyclooxygenase-1. Cancer Res. 2002 Jan 15; 62 (2): 424-32.
19. Gadducci A., Guerrieri M.E., Greco C. Tissue biomarkers as prognostic variables of cervical cancer. Crit Rev Oncol Hematol. 2013 May; 86 (2): 104-29. doi: 10.1016/j.critrevonc.2012.09.003.
20. Sarian L.O., Derchain S.F., Yoshida A., Vassallo J., PignataroF., De Angelo Andrade L.A. Expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) and Ki67 as related to disease severity and HPV detection in squamous lesions of the cervix. Gynecol Oncol. 2006 Sep; 102 (3): 537-41.
21. Ozgul N., Cil A.P., Bozdayi G., Usubutun A., Bulbul D., Rota S., Kose M.F., Biri A., Haberal A. Staining characteristics of p16INK4a: is there a correlation with lesion grade or high-risk human papillomavirus positivity? J Obstet Gynaecol Res. 2008 Oct; 34 (5): 865-71.
22. KuoK.T., ChangH.C., Hsiao C.H., LinM.C. Increased Ki67 proliferative index and absence of p16INK4a in CIN-HPV related pathogenic pathways different from cervical squamous intraepithelial lesion. Br J Ophthalmol. 2006 Jul; 90 (7): 894-9.
Received 18.05.16 Accepted 5.09.16
ABOUT THE AUTHORS
Churuksaeva Olga N., MD, DSc, Senior Researcher, Department of Gynecology with the Group of Cancer Prevention, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russian Federation). E-mail: churuksae-vaon@mail.ru. SPIN-code: 4769-0636.
Kolomiets Larisa A., MD, DSc, Professor, Honored Science Worker of Russian Federation, Head of Gynecology Department, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences; Professor, Oncology Department, Siberian State Medical University (Tomsk, Russian Federation). E-mail: kolomietsla@oncology.tomsk.ru. SPIN-code: 6316-1146. Savenkova Olga V., MD, PhD, Researcher, Department of Pathological Anatomy and Cytology, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russian Federation). SPIN-code: 2647-4457. Nedosekov Vasiliy V., MD. PhD, Associate Professor, Department of Pathological Anatomy, Siberian State Medical University (Tomsk, Russian Federation).
Ibragimova Marina K., Junior Research, Laboratory of Viral Oncology, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russian Federation). E-mail: imk1805@yandex.ru. SPIN-code: 2340-1628.
Authors declare lack of the possible conflicts of interests
