CC BY
28
ДОСТИЖЕНИЯ НАУКИ В ПРАКТИКУ
УДК 616.24-036.12-037
© Т.А. Уклистая, Г.Т. Гусейнов, Х.М. Галимзянов, О.С. Полунина, Н.В. Никифорова, 2012
Т.А. Уклистая, Г.Т. Гусейнов, Х.М. Галимзянов, О.С. Полунина, Н.В. Никифорова
ПРОГНОСТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ
ЛЕГКИХ С ЧАСТЫМИ ОБОСТРЕНИЯМИ
ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России
Изучено распределение частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов каталазы (С-262Т), интерлейкина-ip (С+3953Т) и фактора некроза опухоли-а (G-308A) у больных хронической обструктивной болезнью легких с различной частотой обострения. Установлено влияние полиморфизма С-262Т гена каталазы на частоту обострения заболевания. Риск развития фенотипа ХОБЛ с частыми обострениями у лиц носителей генотипа СС по полиморфизму гена С+262Т каталазы составил 3,73 (доверительный интервал 1,59:8,73). Согласно результатам множественного регрессионного анализа достоверно на частоту обострений при ХОБЛ влияет так же показатель насыщения артериальной крови кислородом.
Ключевые слова: хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), обострение, полиморфизм генов.
T.A. Uklistaya, G.T. Guseynov, H.M.Galimzyanov, O.S. Polunina, N.V. Nikiforova
THE PROGNOSTIC FACTORS OF CHRONIC OBSTRUCTIVE LUNG DISEASE WITH FREQUENT ACUTENESS
There were studied the distribution of alleles frequency and genotype of polymorphic gene markers catalase (C-262T), inerleukin - 1p (C+3953T) and tumor necrosis factor-a (G-308A) in patients with chronic obstructive lung disease (COLD) with different frequency of acuteness. It was found out the influence of polymorphism C-262T gene catalase to the frequency of disease acuteness. The risk of development of phenotype COLD with frequent acuteness in persons having genotype CC according to polymorphism of gene C+262T catalase was 3,73 (average interval 1,59 : 8,73). According to the results of multiple regressive analysis to the frequency of acuteness in COLD the index of presence of oxygen in the arterial blood may also have the influence.
Key words: chronic obstructive lung disease (COLD), acuteness, gene polymorphism.
Введение. В настоящее время большое значение придается изучению фенотипов при хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ). Фенотипы ХОБЛ отражают определенные особенности пациентов, которые могут быть важными с точки зрения диагностики, лечения и прогноза заболевания [1, 2]. Фенотип складывается в результате взаимодействия наследственных свойств организма -генотипа и условий среды обитания [5]. Потенциальными фенотипами ХОБЛ, на которые обращают внимание исследователи, является сочетание астмы и ХОБЛ, раннее начало ХОБЛ, «молодые» больные, ХОБЛ у женщин, ХОБЛ с частыми обострениями и др. [1]. Эпизоды обострений ХОБЛ играют существенную роль в увеличении смертности и затрат на лечение заболевания. Частое развитие обострений у больных ХОБЛ приводит к более низкому качеству жизни, быстрому снижению функции легких и прогрессированию заболевания [3]. Поиск биологических маркеров, участвующих в различных звеньях патогенеза при ХОБЛ, которые могут помочь оценить прогноз болезни, является актуальной задачей пульмонологии.
Цель: выявить клинические и генетические предикторы прогнозирования формирования ХОБЛ с частыми обострениями.
Материалы и методы. Обследовано 90 больных ХОБЛ, находившихся на лечении в терапевтическом отделении ГБУЗ АО «Городская клиническая больница № 4 им. В.И. Ленина». В зависимости от частоты обострений в год (согласно данным анамнеза и изучения медицинской документации) было выделено две группы больных: первую составили 58 пациентов, имевшие меньше трех обострений за год, вторую - 32 больных с большей частотой обострений. За обострение ХОБЛ принимали длительное ухудшение состояния больного, по своей тяжести выходящее за пределы нормальной суточной вариабельности симптомов, характеризующееся острым началом и требующее изменения схемы обычной те-
рапии (GOLD, 2010). Всем больным выполнено обследование, включавшее в себя определение индекса курения, общий анализ крови, общий анализ мочи, исследование крови на СРБ, исследование мокроты, спирографию, пульсоксиметрию, ЭКГ, эхокардиоскопию, исследование в крови уровня провоспалитель-ных цитокинов (интерлейкин-ф, фактора некроза опухоли-а), малонового диальдегида, активности ката-лазы. Определение уровней провоспалительных цитокинов в сыворотке крови проводили иммунофер-ментным методом (с использованием коммерческих наборов реагентов ProCon IL-ip и TNFa, производства ООО «Протеиновый контур», Санкт-Петербург, Россия), наличие С-реактивного белка (СРБ) - по методике латекс-теста, уровня малонового диальдегида (МДА) - спектрофотометрически (на биохимическом автоматическом анализаторе «HumaStar-80», Германия, при длине волн 535 нм и 570 нм по методу K. Jagi (1968) в модификации M. Uchiyama, M. Mihara (1995 г.)), активности каталазы - спектрофотометрически (по методу М.А. Королюк с соавт. (1988)). Генетическое исследование выполнялось в лаборатории пренатальной диагностики наследственных болезней ФГБУ «Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта» Северо-западного отделения РАМН (г. Санкт-Петербург). Был изучен полиморфизм в 3 генах: интерлейкина-ф (IL-ф) (С+3993Т), фактора некроза опухоли-а (TNF-а) (G-308A), каталазы (САТ) (С-262Т). ДНК выделяли из ядер лимфоцитов цельной венозной крови. Определение полиморфных вариантов генов проводили методом полимеразной цепной реакции. При необходимости выполнялись велоэргометрия, суточное мониторирование ЭКГ, компьютерная томография органов грудной клетки.
Статистическая обработка данных выполнена с помощью пакета прикладных программ Statis-tica 6.0 for Windows. Для сравнения частот признаков между различными группами использовали метод %2. Об ассоциации факторов риска, аллелей или генотипов с патологическим фенотипом судили по величине отношения шансов (ОШ).
Результаты и их обсуждение. При анализе клинических, лабораторных и инструментальных данных у больных ХОБЛ с различной частотой обострения (табл. 1) выявлены достоверно более низкие показатели SaO2 (р = 0,012) и активности каталазы в крови (р = 0,037) у пациентов с частотой обострения 3 и более раз за год. Имело место тенденция к увеличению числа больных с тяжелой и крайне тяжелой степенью ХОБЛ среди пациентов с частыми обострениями заболевания.
Таблица 1
Данные клинических, лабораторных и инструментальных методов исследования _в зависимости от частоты обострения у больных ХОБЛ_
Признак Больные с частотой обострения менее 3 за год (п = 58) Больные с частотой обострения 3 и более раз в год (n = 32) Достоверность различий
Пол, м/ж 41/17 23/9 р = 0,905
Возраст, лет 62,1 ± 11,4 64,4 ± 8,3 р = 0,304
Длительность ХОБЛ, лет 16,7 ± 8,9 19,4 ± 7,1 р = 0,145
Число больных с сопутствующими заболеваниями сердечно-сосудистой системы (ИБС, артериальная гипертония) 37 18 р = 0,064
Индекс курения, пачка/лет 29,6 ± 21,2 28,2 ± 19,8 р = 0,758
Объем форсированного выдоха за 1 с (ОФВ1), % 43,4 + 15,9 38,2 ± 14,4 р = 0,129
Насыщение крови кислородом ^а02), % 92,2 ± 2,3 90,6 ± 3,4 р = 0,012
Уровень среднего давления в легочной артерии (СрДЛА), мм рт.ст. 26,1 ± 7,2 26,7 ± 7,2 р = 0,727
Количество лейкоцитов в крови, х 109/л 7,6 ± 2,3 7,3 ± 1,9 р = 0,502
СОЭ, мм/ч 16,3 ± 6,7 14,9 ± 6,1 р = 0,351
Положительный тест на СРБ 23 15 р = 0,368
Уровень интерлейкина-1р в крови, пг/мл 93,0 ± 54,4 102,1 ± 46,1 р = 0,425
Уровень фактора некроза опухоли-а в крови, пг/мл 35,7 ± 24,0 39,8 ± 24,6 р = 0,513
Уровень малонового диальдегида в крови, мкмоль/л 3,2 ± 1,3 3,5 ± 1,2 р = 0,365
Уровень активности каталазы крови, мкат/л 20,5 ± 3,4 19,0 ± 2,7 р = 0,037
Результаты изучения полиморфизма генов провоспалительных цитокинов и каталазы у больных ХОБЛ в зависимости от частоты обострения заболевания представлены в табл. 2. Частота гено-
типа СС полиморфного локуса С-262Т гена каталазы была достоверно выше среди больных ХОБЛ с частотой обострений 3 и более раз за год. Не выявлено различий в распределении частот генотипов и аллелей по изучаемым полиморфизмам генов провоспалительных цитокинов.
Таблица 2
Распределение частот аллелей и генотипов полиморфных локусов С+3953Т гена IL-ip,
G-308A гена TNF-g и С-262Т гена CAT при различной частоте обострений ХОБЛ_
Изучаемый полиморфизм Группы больных Аллель Генотип
С+3953Т гена IL-ip С Т СС СТ+ТТ
первая 91 17 40 18
вторая 59 13 23 9
р = 0,683 р = 0,773
G-308A гена TNF-a G A GG GA+AA
первая 92 16 45 13
вторая 62 10 23 9
р = 0,819 р = 0,546
C-262T гена каталазы С T CC CT+TT
первая 60 48 10 48
вторая 49 23 14 18
р = 0,093 р = 0,006
С целью определения величины связи между частотой обострений и учтенными в исследовании факторами риска (наличие сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), пол, возраст, продолжительность заболевания, индекс курения, показатели ОФВЬ СрДЛА, SaO2, генетические факторы (полиморфизм генов IL-1P, TFN-а, CAT) был проведен множественный регрессионный анализ (рис.).
Рис. Результаты анализа силы влияния изучаемых факторов на частоту обострений при ХОБЛ
Сравнительная оценка влияния факторов риска на частоту обострений при ХОБЛ показала, что достоверное значение имели только такие факторы, как генотип по полиморфизму С+262Т гена каталазы (В = 0,768, р = 0,001) и насыщение крови кислородом (В = -0,123, р = 0,004). Риск развития фенотипа ХОБЛ с частыми обострениями у лиц носителей генотипа СС по полиморфизму гена С+262Т каталазы составил 3,73 (ДИ 1,59 : 8,73).
Выводы. В патогенезе ХОБЛ важную роль играет дисбаланс в системе «оксиданты-антиоксиданты» [4]. Вместе с тем до настоящего времени отсутствует единая концепция в оценке значимости реакций перекисного окисления липидов и систем их регуляции в формировании отдельных фенотипов при ХОБЛ. Полученные результаты свидетельствуют о важной роли состояния анти-оксидантной защиты и ее генетической составляющей в предрасположенности к возникновению частых обострений у больных ХОБЛ. 116
Список литературы
1. Авдеев, С. Н. Определение клинических фенотипов хронической обструктивной болезни легких : новый подход к терапии заболевания / С. Н. Авдеев // Терапевтический архив. - 2011. - № 3. - С. 66-74.
2. Аверьянов, А. В. Фенотипы больных хронической обструктивной болезнью легких / А. В. Аверьянов, А. Г. Чучалин, А. Э. Поливанова и др. // Терапевтический архив. - 2009. - № 3. -С.9-14.
3. Баймаканова, Г. Е. Обострение ХОБЛ : диагностическое и прогностическое значение биологических маркеров : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Г. Е. Баймаканова. - М., 2012. - 49 с.
4. Соодаева, С. К. Окислительный стресс и антиоксидантная терапия при заболеваниях органов дыхания / С. К. Соодаева // Пульмонология. - 2006. - № 5. - С. 122-126.
5. Rice, J. P. Definition of the phenotype / J. P. Rice, N. L. Saccone, E. Rasmussen // Adv. Genet. -2001. - Vol. 42. - Р. 69-76.
Уклистая Татьяна Ароновна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры внутренних болезней педиатрического факультета, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Гусейнов Гаджи Тахирович, аспирант кафедры внутренних болезней педиатрического факультета, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Галимзянов Халил Мингалиевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой инфекционных болезней, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Полунина Ольга Сергеевна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой внутренних болезней педиатрического факультета, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Никифорова Наталья Викторовна, ассистент кафедры восстановительной медицины и лечебной физкультуры, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
