CC BY
55
УДК 635.52/58.083.37:619:615.3
ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ И ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА БИФИНОРМ С ПРЕБИОТИЧЕСКИМ КОМПОНЕНТОМ
Г.Ф. БОВКУН
ФГВОУ ВПО «Брянская государственная сельскохозяйственная академия»
Установлена высокая терапевтическая и профилактическая активность препарата Бифинорм с пребио-тическим компонентом
Многолетняя тенденция заболеваемости новорожденных телят диарейными заболеваниями в условиях РФ имеет однонаправленную динамику в сторону повышения. Многие исследователи [2] отмечают наиболее высокие положительные темпы прироста заболеваемости в хозяйствах, относящихся к экологически неблагополучным районам, где диарейные заболевания протекают в тяжелой форме.
В современных условиях получения, выращивания и использования продуктивных животных (с учетом кризиса экосистемы и антропогенных аномалий внешней среды) возникла необходимость в разработке нового подхода к пониманию причин возникновения и развития патологии у молодняка сельскохозяйственных животных, позволяющего обосновать с эколого-адаптационных позиций более эффективную стратегию защиты их здоровья [2,7].
В этиологии и патогенезе желудочно-кишечных заболеваний молодняка крупного рогатого скота важное значение имеет состояние микробной экологии, поэтому этиологическая значимость дисбиотичсских нарушений при диарейных заболеваниях у телят признана мно-1шш учеными, В связи с чем шратегии профилактики и лечения таких заболеваний должна быть основана на применении пробиотических препаратов, способных модифицировать микробную экологию кишечника молодняка и создать условия непригодные для колонизации кишечника условно-патогенными микроорганизмами и возбудителями и оптимальные для выживания и размножения полезных микроорганизмов, прежде всего бифидобактерий, выполняющих защитную, антитоксическую, синтезирующую, пищеварительную функции.
Современное направление совершенствования терапевтической и профилактической эффективности пробиотиков - это применение бифидогенных веществ, используемых бифи-добактериями в качестве субстрата для размножения. Самое известное в мире бифидоген-нос вещество- лактулоза. представляющую собой галактозилфруктозу, получаемую из лактозы. Микроэкологически обусловленные заболевания в основном связаны с дефицитом би-фидо-, лактофлоры, поэтому концепция «поддержки», которая заключается в повышении выживаемости и адгезивности облигатной бифидофлоры, лактобактерий может быть использована для их профилактики и лечения.
Цель работы - изучение лечебного и профилактического действия пробиотического препарата Бифинорм, содержащего лактулозу при лиарейных заболеваниях у телят, обусловленных микроэкологическими нарушениями, наличием патогенных простейших.
Влияние жидкой лактулозы на пролиферацию бифидобактерий при культивировании испытывали на производственном штамме БПЯс1оЬас1егшт adolesceпtis МС -42. Активность пролиферации бифидобактерий под действием разных доз лактулозы сравнивали с максимальным накоплением Ьё КОЕ/мл испытуемой культуры, выращенной на кукурузно-лактозной среде (КЛС).
Препарат Бифинорм готовили согласно инструкции по приготоатению и технических условий (ТУ 9383-001-00484759-02, утвержденных МСХ РФ 24.04.02г.), но с добавлением в питательную среду лактулозы синтетического происхождения производства ООО Фелицата Холдинг.
Клинический диагноз у 15 больных новорожденных возрастом от 2 до 9 дней черно-пестрой породы из хозяйств Новозыбковского района и УОХ «Кокино» устанавливали по топике поражения органов пищеварения. Учитывали осложнения: дегидратацию, поражение нервной, сердечно-сосудистой, дыхательной систем, симптомы почечной недостаточности.
Пробы фекалий брали из прямой кишки стерильным резиновым катетором и исследовали в течение 2-х часов с момента забора материала.
Микробную экологию толстого кишечника изучали сог ласно Методическим рекомендациям по лабораторной диагностике дисбтктериоза кишечника молодняка сельскохозяйственных животных, утвержденных РАСХН (2008г.). Полученные данные сравнивали с показателями микробиоценоза кишечника клинически здоровых телят.
Возбудителей эшерншш исключали бактериологическим исследованием фекалий, руководствуясь Методическими указаниями по бактериологической диагностике этого заболевация [3].
Исследования смешанной кишечной инфекции проводили по Методическому указанию по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка [4].
Ооцисты криптоспоридий, кокцидии исключали в фекалиях, содержащих примеси крови, микроскопией мазков, окрашенных по Цилю- Нильсену.
Проводили гематологические исследования, определяя у обследуемых телят количество лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина, белка, показатель гематокрита, СОЭ.
Полученные цифровые данные обрабатывали статистически с целью определения достоверности средних арифметических показателей.
Клиническую эффективность Бифинорма, содержащего лактулозу, испытывали на 163 больных новорожденных телятах СПК «Комсомолец», СПК «Решительный», УОХ «Кокино» согласно Наставлению по применению препарата [5]. О выздоровлении животных судили по исчезновению признаков диареи, патологических примесей в фекалиях, метеоризма, спазмов, болевых ощущений, улучшению общего состояния, появлению аппетита. Результаты учитывали по сохранности.
Профилактическое действие Бифинорма, содержащего лактулозу, изучали на 167 телятах в тех же хозяйствах. Новорожденным телятам выпаивали препарат согласно Наставлению по применению препарата [5]. Наблюдения вели в течение трех месяцев. Результаты учитывали также по сохранности.
Результаты и обсуждение
Основанием для изучения влияния концентрата жидкой лактулозы синтетического происхождения на активность пролиферации и биологические свойства бифидобактерий послужили исследования Н.Ш<1ака. [8] о селективной утилизации фрукгоолигосахаридов бифидофлорой, ее пребиотические свойства при выращивании молодняка крупного рогатого скота [1 ].
Таблица 1
Активность пролиферации бифидобактерий под действием лактулозы
Наименование штамма КЛС КОЕ/г Концентрация латулозы, % накопление ^ КОЕ/мл, % увеличения
1 0,1
МС-42 9,3 12,69/36,3 12,47/34,08
Концентрация лактулозы 55 мкг/мл (1%) стимулировала пролиферацию бифидобактерий производственного штамма МС-42: накопление биомассы- 12,69 КОЕ/мл, нарастание количества бифидобактерий к контролю -3,39 процент увеличения - 36,3.
Накопление биомассы производствешюго штамма МС-42 при концентрации лактулозы 5,5 мкг/мл (0,1%) - 12,47 1§ КОЕ/мл, нарастание количества бифидобактерий к контролю -3,17 процент увеличения - 34,08. Установленные показатели пролиферации незначительно отличались от показателей роста при десятикратном увеличении концентрации лактулозы, процент накопления был всего на 2.22 меньше.
По данным Э.Г. Щербаковой [6] лактулоза синтетического происхождения оказывала бифидогенное действие на производственный штамм В.Ый(1ит при концентрациях 100 - 10 мкг/мл, при этом нарастание количества бифидобактерий составляло 3 - 4
Применение 1% лактулозы в составе питательной среды при приготовлении препарата также стимулировало пролиферацию бифидобактерий, накопление которых в составе препарата составляло Ю10- 10й, увеличивало кислотообразующую активность и усиливало жизнеспособность популяций при пересевах, что упрощало технологию приготовления препарата.
Перед клиническим испытанием препарата Бифинорм с пребиотическим компонентом мы провели клиническое обследование новорожденных телят, установили этиологическую значимость микрофлоры у 30 телят с диарейным синдромом в СПК «Комсомолец», СПК «Решительный», Новозыбковского радона, УОХ «Кокино» Выгоничского района.
В СПК «Комсомолец» телята неонатального возраста болели энтероколитом, характерным признаком которого была диарея с примесью слизи, крови; метеоризм; болевые
ощущения в кишечнике. Заболевание протекало без осложнений при нормальной температуре тела. Телята старшего возраста имели клинические признаки авитаминоза.
При бактериологическом исследовании фекалий больных телят установлены дисбиотические нарушения в кишечнике, обусловленные наличием условно-патогенных энтеробак-терий, увеличением пула кишечной палочки, энтерококков на фоне пониженного содержания лактобацилл и бнфидобактерий. Перечисленные нарушения микроэкологии свидетельствовали о развитое токсического дисбактериоза. Возбудителя эшерихиоза не выделяли.
В примесях крови больных обнаружены ооцисты криптоспоридий, которые на фоне токсического дисбактериоза повреждали слизистую кишечника.
Гематологические исследования у телят с клиническими признаками авитаминоза установили низкие показатели гемоглобина (7,2±0,96г%) гематокрита (22±2,67%), подтверждающие анемию.
В СПК «Решительный» новорожденные телята имели клинические признаки гипотрофии и энтероколита. У большинства телят энтероколит был катаральной природы (в фекалиях отмечали примеси слизи). Фекалии некоторых больных, в том числе старшего возраста, содержали примеси крови. Кроме специфических для энтероколита клинических признаков, других свидетельствующих об осложнениях не установлено.
Бактериологическим исследованием фекалий больных установлены дисбиотические нарушения в кишечнике соответствующие деструктивному дисбактериозу и обусловленному наличием протеев, дрожжеподобных грибов, пониженным содержанием лактобацилл и бифидобактерий.
В примесях крови фекалий больных телят 10-дневного и 30-дневного возраста обнаружены ооцисты криптоспоридий, которые на фоне деструктивного дисбактериоза повреждали слизистую кишечника.
Бактериологическим исследованием фекалий был исключен возбудитель эшерихиоза.
Гематологические исследования у гелят старшего возраста свидетельствовали о развитии анемии (показатель гемоглобина 7,8 ±0,56 г%; гематокрита 24,5± 1,34% .
Несмотря на то, что исследования проводили в разных хозяйствах Новозыбковского района, различия в полученных результатах были незначительными.
У больных телят УОХ «Кокино» отмечали нормальную температуру тела, уплотнения в сычуге, метеоризм и спазмы в тонком и толстом отделах кишечника, сильную диарею с примесью слизи и крови в фекалиях. У больных телят были выявлены признаки угнетения, ослабления работы сердца и дыхательной системы на фоне дегидратации.
Дисбиотические нарушения в кишечнике больных характеризовались статистически достоверным снижением количества лактобацилл и бифидобактерий (Р<0,05). Количество эшерихий соответствовало норме. Выявленные нарушения количественного состава лакто-
бацилл и бифидофлоры способствовали пролиферации факультативных микроорганизмов, таких как протеи у 20% обследуемых, дрожжеподобных грибов, условно-патогенных энге-робактерий у 80%, гемолитических гнилостных бацилл у 20%. У всех больных установлено значительное количество сульфитредупирующих клостридий 8,15 ^ КОЕ/г.
Перечисленные микроорганизмы не входили в состав биоценоза клинически здоровых телят и могли проникнуть в кишечник при выпаивании загрязненного почвой молозива. У всех больных было установлено количественное преимущество энтерококков, что подтверждалось статистически.
Наличие примесей крови в фекалиях больных, свидетельствующее о значительных деструктивных изменениях слизистой тонкого и толстого кишечника, послужили основанием для исключения криптоспоридий, кокцидий. Микроскопией мазков фекалий, окрашенных по Цилю-Нильсену, а также исследование фекалий по Фюллеборну с последующей микроскопией не обнаружены ооцисты криптоспоридий, кокцидий.
При исследовании 10 проб фекалий не установлено ни одного случая выделения возбудителя эшерихиоза.
Нарушения микробиоценоза кишечника обусловленные пролиферацией сульфитре-дуцирующих клостридий, условно-патогенных энтеробактерий, гемолитических гнилостных бацилл, дрожжеподобных грибов на фоне дефицита лактобацилл и бифидобактерий, мы характеризовали как третью степень выраженности дисбиотических нарушений, способствующих развитию деструктивных изменений слизистой кишечника, всасыванию токсинов и метаболитов факультативной микрофлоры в кровь с развитием выраженного эндотоксикоза, что в совокупности обусловливало разлитие токсического дисбактериоэа и клинически проявлялось гастроэнтероколитом, дегидратацией организма, угнетением центральной нервной, сердечно-сосудистой и дыхательной систем.
Таким образом, использование микроэкологического подхода в лабораторной диагностике диарей позволил расшифровать их этиологию.
Таблица 2
Этиология диарей у телят
Наименование хозяйства Топический диагноз Этиологический фактор
СПК «Комсомолец» Энтероколит.анемия Токсический дисбактериоз, криптос-поридиоз
СПК «Решительный» Энтероколит,гипотрофия, анемия Деструктивный дисбактериоз, крип-тоспоридиоз
УОХ «Кокино» Гастроэнтерок о. 1ит Токсический дисбактериоз
Этиологическое значение дисбиотических нарушений при диареях подтверждено у больных в обследуемых хозяйствах. В С1Ж «Комсомолец» и в УОХ «Кокино» они имели одинаковую степень выраженности и специфичность, но в СПК «Комсомолец» дисбиотические нарушения были усугублены наличием микроскопических паразитов: криптоспоридий. Клиническое
течение токсического дисбактериоза было различным, что было связано с присутствием крип-тоспоридий. У телят в СГ1К «Решительный», больных гипотрофией, энтероколит был обусловлен диструктивным дисбактериозом, а у некоторых осложнен криптоспоридиозом.
Таблица 3
Результаты профилактического и лечебного действия препарата Бифинорм
с пребиотическим компонентом
Хозяйства Количество испытуемых животных, гол.,эффективность,%
Лечение Эффективность,% Профилактика Эффективность.%
СПК «Комсомолец» 32 72 30 90
СПК «Решительный» 30 83,3 45 100
УОХ «Кокино» 66 96,97 32 100
Итого 128 84,09 107 96,6
Лечение диареи, обусловленной токсическим дисбактериозом и криптоспоридиозом, у телят СПК «Комсомолец» обеспечивало 72%-ный лечебный эффект. Профилактический эффект в этом хозяйстве составлял 90%.
В СПК «Решительный» терапевтический эффект от препарата у больных телят с деструктивным дисбактериозом, осложненным криптоспоридиозом, составлял 83,3%, а профилактический -100%.
Лучшее терапевтическое действие препарата отмечали в УОХ «Кокино» при лечении токсических дисбактериозов - 96,97%, а профилактический эффект -100%.
Таблица 4
Терапевтический и профилактический эффект препарата после проведения противокриптоспоридиозных мероприятий
Количества испытуемых животных, гол.. эффективность^
ЛШЯпС 1НЯ Лечение Э ффективиость,% Профилактика Эффективность,%
СПК «Комсомолец» 15 80 30 100
СПК «Решительный» 20 90 30 100
Итого 35 85 60 100
В СПК «Комсомолец» лечебный эффект препарата после проведения противокриптоспоридиозных мероприятий - 80%, профилактический 100%.
В СПК «Решительный» лечебный эффект после исключения патогенного действия криптоспоридий -90%, профилактический - 100%. В среднем лечебный эффект по двум хозяйствам 85%, а профилактический 100%.
Наблюдения за 60 телятами, получавшим препарат с целью профилактики, вели в течение 3 месяцев. За период наблюдения не отмечали диарейных заболеваний и сохранность телят составляла 100 процентов.
В целом лечебный эффект у 163 больных - 84,45%, а профилактический у 167 телят - 98,3%.
Заключение. В спектре этиологических факторов при диарейных заболеваниях телят дисбиотическим нарушениям принадлежит ведущая роль, а паразитирование криптоспори-
дий усугубляет тяжесть клинического проявления диареи.
Концентрация лактулозы 55 мкг/мл (1%) стимулировала пролиферацию бифидобактерий производственного штамма МС-42: накопление биомассы- 12,69 lg КОЕ/мл, нарастание количества бифидобактерий к контролю -3,39 lg, процент увеличения - 36,3. Применение 1% лактулозы в составе питательной среды при приготовлении препарата также стимулировало пролиферацию бифидобактерий, накопление которых в составе препарата составляло Ю10- 10п, увеличивало кислотообразующую активность и повышало жизнеспособность популяций при пересевах, что упрощало технологию приготовления препарата Бифинорм с пребиотическим компонентом.
Выпаивание препарата Бифинорм с пребиотическим компонентом новорожденным телятам обеспечивало 100%-ную сохранность в УОХ «Кокино», СПК «Решительный». Профилактическая эффективность препарата у телят СПК «Комсомолец» составляла - 90%.
Лечебная эффективность препарата Бифинорм с пребиотическим компонентом у 163 больных телят составляла 85%, наилучшей она была в УОХ «Кокино» -96,97%, наименьшей - 72% в СПК «Комсомолец».
ЛИТЕРАТУРА
1. Бовкун Г.Ф. Использование пребиотических добавок при выращивании телят в условиях загрязнения окружающей среды радиоцезием//Материалы международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы кормления сельскохозяйственных животных». Дубровицы. 2007.- С. 374-379.
2. Кашин А.С. Экологические проблемы патологии сельскохозяйственных животных// Мат. Междуиарод. коордишщ. совещания «Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных». Воронеж, 1997. С. 17-20.
3. Методические указании по бак териологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями.-Угв. ГУВ МСХ СССР 1999. 18с.
4. Методические указания по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных.-Утв. Департаментом ветеринарии МСХ РФ 2002.- 20с.
5. Наставление по применению пробютаческого препарата Бифинорм. Утв. МСХ РФ 2002.- 4с.
6. Щербакова Э.Г. Изучение бифидогенного действия сиропа Лактусан// Лактусан лечебно-профилактические свойства и применение лактулозного сиропа. Информация для врачей. М., 2002.-84с.
7. Шахов А.Г. Желудочно-кишечные болезни телят//В сб. Комплексная экологическая безопасносная система ветеринарной защиты здоровья животных.-М.:ФГНУ «Росин-формагротех». 2000.-С.132-150.
8. Hidaka Н. Fructooligossarides enzymatia preparation and biofunc - tions//Carbogidrate Chem.-1991.-№10.- P.509-522.
