CC BY
80
ИММУНОПАТОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
ИММУНОПАТОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 616.24-002.5-078.33
Р.Р. Хасанова, О.И. Уразова, О.В. Воронкова, В.В. Новицкий, З.К. Хаитова, И.Е. Есимова, Е.Г. Чурина, А.А. Кошкина
ПРОДУКЦИЯ IL-12B МОНОНУКЛЕАРНЫМИ ЛЕЙКОЦИТАМИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СПЕКТРА ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Кафедра патофизиологии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России, г Томск (654050, г Томск, Московский тракт, 2)
В работе представлены результаты исследования продукции интерлейкина (IL)-12p мононуклеарными лейкоцитами крови у больных туберкулезом легких в зависимости от спектра лекарственной устойчивости инфицирующего штамма M. tuberculosis. Показано, что уровень спонтанной и стимулированной секреции IL-12P зависит от спектра лекарственной бактериорезистентности. Так, у больных с монорезистентным лекарственно-устойчивым туберкулезом легких (ЛУТЛ) зарегистрировано повышение базальной и угнетение индуцированной продукции цитокина, свидетельствующее об истощении функционального (И-12р-секреторного) резерва клеток. При поли- и мультирезистентном ЛУТЛ уровень базальной секреции IL-12P снижен, однако в первом случае клетки проявляют IL-12P-секреторный ответ на индукцию липидным микобактериальным антигеном, в то время как при туберкулезе легких с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) клетки не отвечают повышением цитокиновой секреции на действие как белкового, так и липидного антигенов, что, по мнению авторов, объясняет более выраженные нарушения Т-клеточного ответа при МЛУ-туберкулезе.
К л ю ч е в ы е с л о в а : туберкулез легких, IL-12fi, лекарственная устойчивость M. tuberculosis
R.R. Hasanova, O.I. Urazova, O.V. Voronkova, V.V Novitskiy, Z.K. Khaitova, I.E. Esimova, E.G. Churina, A.A. Koshkina IL-12B PRODUCTION BY MONONUCLEAR BLOOD LEUCOCYTES IN PATINETS WITH PULMONARY TUBERCULOSIS, DEPENDING ON THE RANGE OF DRUG RESISTANCE OF MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
The work presents the results of research of IL-12P production by mononuclear blood leucocytes in patients with pulmonary tuberculosis, depending on the range of drug resistance of the infecting M. Tuberculosis strain. It has been shown that the level of spontaneous and stimulated IL-12P secretion depends on the range of drug bacterioresistance. Thus, patients with monoresistant drug-resistant pulmonary tuberculosis were registered to have an increase in basal cytokine production as well as oppression of induced cytokine production, which speaks of exhaustion of the functional (IL-12p-secretory) cell reserve. In case of poly- and multi-resistant multi-drug resistant pulmonary tuberculosis the level of IL-12P basal secretion is reduced; however, in the first case the cells demonstrate IL-12p-secretory response to induction by the lipid mycobacterial antigen, whereas in case of multidrug-resistant pulmonary tuberculosis the cells respond with the increase in the cytokine secretion neither to the action of protein antigens, nor to the action of lipid ones. This, in authors' opinion, explains more explicit disorders in T-cell response under multidrug-resistant tuberculosis.
K e y w o r d s : pulmonary tuberculosis, IL-12fi, drug resistance of M. tuberculosis
Введение. В настоящее время наибольшую опасность в эпидемиологии туберкулеза, с одной стороны, представляет рост числа больных с осложненными остропрогрессирующими формами туберкулезной инфекции при заражении Mycobacterium tuberculosis, резистентными к специфическим химиопрепаратам, с другой - достаточно высокий уровень смертности среди больных лекарственно-устойчивым туберкулезом.
Первичную и вторичную лекарственную устойчивость микобактерий туберкулеза (МБТ) по спектру разделяют на монорезистентность - устойчивость к одному из противотуберкулезных препаратов (ПТП) основного (первого) ряда, полирезистентность - устойчивость к 2 и более базовым
Хасанова Резеда Рахматулловна (Khasanova Rezeda Rakhmatullovna), e-mail: [email protected]
ПТП, но не к рифампицину и изониазиду одновременно, и мультирезистентность или множественную устойчивость МБТ одновременно к изониазиду, рифампицину и любому другому ПТП [6, 7, 10, 18, 23]. В настоящее время выделяют еще один тип устойчивости - широкую, характеризующуюся резистентностью возбудителя туберкулеза к препаратам первой линии (изониазиду и рифампицину), любым фторхино-лонам и по крайней мере к одному из трех инъекционных ПТП второй линии. Данный вариант является наиболее неблагоприятным [15].
Согласно современным представлениям, формирование устойчивости к отдельным ПТП у МБТ связано главным образом с мутациями в их генах. Наряду с этим высказывается предположение о том, что ослабление иммунной системы организма может служить одним из факторов развития лекарственно-устойчивого туберкулеза при микстинфекции штаммами МБТ с различающейся чувствительностью к ле-
- 115 -
ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2013
карственной терапии с последующим отбором в ходе эволюции инфекционного процесса и на фоне лечения наиболее агрессивных вариантов возбудителя, устойчивых к действию лекарственных средств и факторов противоинфекционной защиты [1, 6, 9, 11, 13, 15, 21, 22, 25]. Установлено также, что у больных туберкулезом, выделяющих лекарственноустойчивые МБТ, нарушения индуктивной и эффекторной стадий иммунного ответа носят более выраженный характер, чем у больных, выделяющих чувствительные к ПТП МБТ, и усугубляются по мере расширения спектра лекарственной бактериорезистентности [15]. Однако молекулярные механизмы этого феномена до настоящего времени остаются неизученными.
В связи с этим целью настоящей работы явилось изучение особенностей продукции мононуклеарными лейкоцитами крови in vitro у больных с моно-, поли- и множественно-лекарственно-устойчивым туберкулезом легких (ЛУТЛ) одного из основных цитокинов индуктивной фазы иммунного ответа на M. tuberculosis - IL-12p.
Материал и методы. Под наблюдением находился 51 пациент (39 мужчин и 12 женщин) 18-55 лет с впервые выявленным инфильтративным и диссеминированным ЛУТЛ. Диагноз туберкулеза легких устанавливали на основании клинической картины заболевания, рентгенологического исследования легких, данных микроскопического и бактериологического исследования мокроты. Возбудитель туберкулеза выявляли методом прямой световой микроскопии мазка мокроты, окрашенного по Цилю-Нильсену, а также методом люминесцентной микроскопии с использованием флюоро-хромов (аурамина). Для видовой идентификации МБТ и определения их чувствительности к ПТП методом абсолютных концентраций производили посев мокроты на плотные питательные среды Левенштейна-Йенсена и Финн-2.
Сформированы 3 группы больных ЛУТЛ: 1-я группа составили 14 пациентов, инфицированных монорезистентными МБТ, 2-я - 16 больных, выделяющих МБТ с лекарственной полирезистентностью, 3-я - 21 пациент с МЛУ-тубер-кулезом легких.
Группу сравнения - 35 здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту, не имеющих в анамнезе хронических инфекционных заболеваний, аллергических реакций, заболеваемость которых острыми респираторными вирусными и бактериальными инфекциями была не чаще 2-3 раз в год.
Материалом исследования служили мононуклеарные лейкоциты периферической крови. Выделение мононуклеа-ров из цельной крови осуществляли методом градиентного центрифугирования с использованием фиколл-урографина (p = 1077 кг/м3). Культивирование мононуклеарных лейкоцитов проводили в полной питательной среде, состоящей из 90% среды RPMI-1640, 10% инактивированной эмбриональной телячьей сыворотки, 0,3 мг/мл L-глутамина, 100 мкг/мл гентамицина, 2 мМ/мл HEPES. Количество клеток в суспензии стандартизировали до 2,5 • 106/мл. Для определения уровня IL-12P в суточных супернатантах культуральных суспензий использовали твердофазный иммуноферментный "сандвиче-вый" метод (ELISA). Для стимуляции цитокинпродуцирую-щей функции мононуклеарных лейкоцитов в пробы вносили предоставленные Институтом инфекционной биологии Макса Планка (Германия) комплексные белковый и липидный антигены, выделенные из M. tuberculosis, принадлежащих к пекинскому семейству Beijing, в дозе 20 и 50 мкг/мл соответственно. Для оценки резерва секреции IL-12P рассчитывали индекс стимуляции, представляющий собой коэффициент, равный отношению показателей индуцированной и базальной (без стимуляции) продукции цитокина.
Анализ полученных данных проводили с помощью программы Statistica for Windows Version 6.0 ("StatSoft Inc.", США). Для оценки нормальности распределения использовали критерий Колмогорова-Смирнова. Поскольку исследо-
ванные количественные признаки в группах сравнения не подчинялись нормальному распределению для попарного сравнения выборочных показателей применяли критерии U Манна-Уитни для независимых групп и Вилкоксона для зависимых групп. Для всех количественных признаков в сравниваемых группах вычисляли медиану, 25% и 75% квартили. Критическое значение уровня статистической значимости при проверке нулевых гипотез принимали равным 0,05. В случае превышения достигнутого уровня значимости статистического критерия этой величины принималась нулевая гипотеза.
Результаты и обсуждение. Антигенпрезенти-рующие клетки (АПК), а именно альвеолярные макрофаги/ моноциты и дендритные клетки, являясь представителями естественной иммунологический резистентности, оказывают решающее влияние на формирование антимикобактериального иммунитета. АПК обеспечивают первый этап иммунного ответа: связывание, поглощение и расщепление инфектогена, его презентацию Т-лимфоцитам и синтез цитокинов, активирующих Т-клеточное звено иммунитета. Так, патогенассоциированные молекулярные паттерны (PAMP), в роли которых выступает LAM-фактор клеточной стенки МБТ, связываются с toll-подобными (toll-like) рецепторами типа 2 (TLR2) на поверхности моноцитов/макрофагов и дендритных клеток. После активации toll-подобных рецепторов происходит их олигомеризация, активация внутриклеточных киназ, адаптерных белков (MyD88) и транскрипционных факторов (NF-kB), которые транслоцируются в ядро клетки и активируют транскрипцию контролируемых ими генов (в частности, гена IL12E), связываясь с их промоторной областью. Таким образом, в АПК происходит наработка IL-12P, а также молекул, формирующих "иммунологический синапс" c Т-лимфоцитами. IL-12P является основным цитокином ТЫ-иммунного ответа. Он активирует дифференцировку и пролиферацию Т-хелперов типа 1 (Th1) и секрецию ими IL-2, интерферона (IFN) у, фактора некроза опухолей (TNF) р и других медиаторов. Кроме того, IL-12P является мощным индуктором образования IFN-y натуральными киллерами (NK-клетки), NKT-клетками, dТ-клетками и цитотоксическими CD8+-Т-лимфоцитами. В свою очередь IFN-y также стимулирует секрецию IL-12P и бактерицидные свойства макрофагов, экспрессию на их поверхности молекул костимуляции, секрецию ими активированных метаболитов кислорода (включая оксид азота) и эйкозаноидов [2-5, 8, 12, 16, 17, 19, 20, 26]. Дефекты реализации ТЫ-иммунного ответа являются фактором микробной диссеминации и клинической манифестации туберкулезной инфекции. При этом не исключается тот факт, что модулирующее влияние на уровень секреции IL-12P у больных туберкулезом легких могут оказывать биологические свойства возбудителя. Показано, в частности, что МЛУ-штаммы МБТ могут дезактивировать клетки системы мононуклеарных фагоцитов, подавлять их переваривающую и цитокинсекреторную активность [14].
Согласно результатам проведенного исследования, у больных ЛУТЛ с полирезистентностью и МЛУ МБТ к ПТП регистрировалось статистически значимое снижение (относительно контрольных значений) базальной продукции IL-12p. В то же время у больных ЛУТЛ с монорезистентностью МБТ уровень базальной секреции исследуемого цитокина оказался повышенным в 3 раза по сравнению с нормой и в 13,9 и 9,5 раза относительно такового у больных ЛУТЛ с полирезистентностью и МЛУ МБТ к ПТП соответственно (табл. 1).
Уровень белокстимулированной секреции IL-12P у здоровых доноров оказался в 4,6 раза выше показателя базальной продукции цитокина, в то время как в группе больных с монорезистентным ЛУТЛ он был существенно (в 13,3 раза) ниже, чем при отсутствии действия индуктора (см. табл. 1). У больных с поли- и МЛУ-туберкулезом легких секреция IL-12P при действии белкового антигена МБТ не претерпевала вы-
- 116 -
ИММУНОПАТОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
Таблица 1 Концентрация IL-12P в супернатантах культуральных суспензий мононуклеарных лейкоцитов периферической крови у больных лекарственно-устойчивым туберкулезом легких в зависимости от спектра лекарственной устойчивости M tuberculosis, Ме (Q1-Q3)
Группы обследованных лиц
Концентрация цитокина, пг/мл здоровые доноры больные, выделяющие монорезистентные МБТ больные, выделяющие полирезистентные МБТ больные, выделяющие МБТ с множественной лекарственной устойчивостью
Базальная (при спонтанной секреции) 73,72 (64,54-103,08) 224,36 (165,42-353,44) р1<0,01 16,13 (10,15-68,68) рх < 0,01, р2 < 0,001 23,54 (16,85-77,24) р1 < 0,01, р2 < 0,001
При индукции белковым антигеном M. tuberculosis 337,83 (218,05-481,43) р4 < 0,001 16,93 (12,14-31,63) р1 < 0,001, р4 < 0,001 12,13 (11,12-51,97) р1 < 0,001 16,96 (2,94-31,63) р1 < 0,001
При индукции липидным антигеном M. tuberculosis 43,85 (37,89-53,67) Р4 < 0,05 5,18 (3,07-7,84) р1 < 0,05, р4 < 0,001 77,24 (65,09-82,55) pi < 0,05, р2 < 0,001, р4 < 0,001 11,12 (6,74-12,55) pi < 0,05, р2 < 0,05, р3 < 0,01, Р4 < 0,01
П р и м е ч а н и е . Здесь и в табл. 2: МБТ - микобактерии туберкулеза; р1 - уровень статистической значимости различий по сравнению с соответствующими показателями у здоровых доноров, р2 - по сравнению с соответствующими показателями у больных, выделяющих монорезистентные МБТ, р3 - по сравнению с соответствующими показателями у больных, выделяющих полирезистентные МБТ, р4 - по сравнению с показателем спонтанной (базальной) секреции.
раженных изменений по сравнению с базальной секрецией медиатора, но по-прежнему сохранялась ниже, чем у здоровых доноров (см. табл. 1).
Вероятно, столь выраженное снижение ГЬ-12р-проду-цирующей активности мононуклеарных лейкоцитов крови in vitro у больных с полирезистентным и МЛУ туберкулезом легких не только на базальном уровне, но и при стимуляции клеток белковым антигеном МБТ семейства Beijing свидетельствует о том, что при расширении спектра лекарственной резистентности возбудитель оказывает более значительный ингибиторный эффект на секрецию IL-12p. При этом отсутствие прироста продукции IL-12P при белокопосредо-ванной индукции клеток in vitro у больных с полирезистентным и МЛУ туберкулезом легких следует рассматривать как проявление гипоергии клеток-продуцентов цитокина на действие микобактериального антигена. Доказательством этому может служить значительно более высокий резерв ГЬ-12р-секреторной активности мононуклеарных лейкоцитов периферической крови при индукции белковым антигеном у больных с поли- и МЛУ-туберкулезом легких по сравнению с группой больных, выделяющих МБТ, устойчивые только к одному ПТП основного ряда (табл. 2).
При индукции клеток липидным антигеном МБТ семейства Beijing изменения продукции IL-12P носили несколько иной характер (см. табл. 1). Так, у больных, выделяющих моно- и мультирезистентные МБТ, она оказалась ниже нормы (в 8,5 и 3,9 раза соответственно) и базальной продукции цитокина (в 43,3 и 2,1 раза, как и в группе здоровых доноров - в 1,7 раза). Указанные изменения в сочетании со снижением индекса стимуляции продукции IL-12P у больных с монорезистентным ЛУТЛ (см. табл. 2) свидетельствуют о истощении ГБ-12р-секреторного резерва мононуклеарных лейкоцитов крови. Однако у больных ЛУТЛ с полирезистентно-
стью МБТ к ПТП уровень липидиндуцированной секреции IL-12P был существенно (в 1,8 раза) выше такового в группе здоровых доноров и базальной продукции цитокина (в 4,8 раза), что наряду с увеличением резерва секреции IL-12P у данной категории пациентов характеризует гиперергическую реакцию клеток на действие липидного антигена МБТ.
Таким образом, на основании полученных результатов можно заключить, что уровень секреции IL-12P (базальной и индуцированной) при туберкулезе легких коррелирует со спектром лекарственной бактериорезистентности. Ввиду того что у больных туберкулезом легких имеют место угнетение пролиферации лимфоцитов крови и выраженный дефицит IL-2 (основного фактора роста Т-лимфоцитов) [14], обуславливающие дисфункцию Т-клеточного звена иммунитета, можно предположить, что в ее основе при поли- и мультирезистентном ЛУТЛ лежит гипоергия моноцитов/ма-крофагов на белковый антиген МБТ, а при монорезистентном ЛУТЛ (учитывая существенное снижение индекса стимуляции цитокиновой секреции при индукции белковым и липидным антигенами МБТ) - гиперергическое истощение IL-12P-продуцирующей активности моноцитов/макрофагов.
С другой стороны, развитие Т-клеточного дефицита в условиях установленной при монорезистентном ЛУТЛ базальной гиперсекреции IL-12P могут быть дефекты экспрессии на ThO-лимфоцитах Р2-субъединицы рецептора к IL-12 или дефицита внутриклеточных тирозиновых киназ (Jak2, Tyk2) и транскрипционных факторов (прежде всего STAT4), участвующих в трансдукции IL-12-опосредованного сигнала пролиферации и дифференцировки Th1. Известно также, что подавлять ТЫ-стимулирующий эффект IL-12P могут образующиеся в избытке гомодимеры данного цитокина (р40-р40) и противовоспалительный цитокин с иммуносупрессорной активностью - трансформирующий фактор роста (TGF) р, об-
Таблица 2
Резерв продукции IL-12P мононуклеарными лейкоцитами периферической крови in vitro у больных лекарственно-устойчивым туберкулезом легкихв зависимости от спектра лекарственной устойчивости M. tuberculosis, Ме (Q1-Q3)
Индексы стимуляции продукции IL-12p Группы обследованных лиц
здоровые доноры больные, выделяющие монорезистентные МБТ больные, выделяющие полирезистентные МБТ больные, выделяющие МБТ с множественной лекарственной устойчивостью
При индукции белковым антигеном M. tuberculosis 4,583 (4,390-4,869) 0,075 (0,027-0,142) р1 < 0,001 0,752 (0,699-0,843) pi < 0,001, р2 < 0,05 0,719 (0,648-0,800) р1 < 0,001, р2 < 0,05
При индукции липидным антигеном M. tuberculosis 0,594 (0,483-0,630) 0,023 (0,010-0,045) р3 < 0,001 4,795 (4,390-5,000) р1 < 0,001, р2 < 0,001 0,472 (0,380-0,528) р2 < 0,001, р3 < 0,01
- 117 -
ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2013
ладающий способностью дезактивировать тирозиновые киназы и транскрипционные факторы IL-12P и блокировать антигенспецифический и костимуляторный сигналы индуктивной фазы Т-клеточного иммунного ответа [16, 19, 20, 23, 24].
Между тем, как показано в работе, при полирезистентном ЛУТЛ клетки-продуценты IL-12P проявляют повышенную реактивность в ответ на действие липидного антигена МБТ, в то время как при монорезистентном и МЛУ-вариантах туберкулезной инфекции их ГЬ-12р-секреторная реакция на липидный антиген МБТ является пониженной. По-видимому сочетанная гипоергия клеток-продуцентов IL-12P на действие как белкового, так и липидного антигенов МБТ при туберкулезе легких с МЛУ МБТ объясняет более выраженные нарушения ТЫ-иммунного ответа при данном варианте заболевания.
Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (государственный контракт №16.512.11.2046) и РФФИ (проект №11-04-98057-р).
ЛИТЕРАТУРА
1. Ахматова Н.К., Киселевский М.В. Врожденный иммунитет: противоопухолевый и противоинфекционный. М.: Практическая медицина. 2008.
2. Ешану В.С. Цитокины и их биологические эффекты при некоторых болезнях печени. Клинические аспекты гастроэнтерологии, гепатологии. 2004; 5: 11-6.
3. Ковальчук Л.В., Хорева М.В., Никонова А.С. Распознающие рецепторы врожденного иммунитета (NLR, RLR и CLR). Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2011; 1: 93-100.
4. Ковальчук Л.В. Учение о воспалении в свете новых данных: развитие идей И.И. Мечникова. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2008; 5: 10-5.
5. Козлов И.Г. Сигнальные рецепторы врожденного иммунитета: новая молекулярная мишень для диагностики и терапии воспалительных заболеваний. Вестник российской АМН. 2011; 1: 42-50.
6. Мишин В.Ю. Туберкулез легких с лекарственной устойчивостью возбудителя: учебное пособие. М.: ГЭОТАР-Медиа. 2009.
7. Филинюк О.В., Янова Г.В., СтрелисА.К. и др. Множественнолекарственно устойчивый туберкулез легких: медико-
социальные особенности и эффективность стационарного этапа лечения. Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008; 8: 23-8.
8. Учанкин П.Н., Учанкина О.Н., Тобин Б.В., Ершов Ф.И. Нейроэндокринная регуляция иммунитета. Вестник РАМН. 2007; 9: 26-31.
9. Перельман М.И. Фтизиатрия: национальное руководство. М.: 2007.
10. Репин Ю.М. Лекарственно-устойчивый туберкулез легких СПб.: Гиппократ. 2007.
11. Байрамов А.Л., Воропаева Е.А., Афанасьев С.С. и др. Роль и биологическое значение толл-подобных рецепторов в анти-
инфекционной резистентности организма. Вестник Российской АМН. 2008; 1: 45-54.
12. Симбирцев А.С. Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы Физиология и патология иммунной системы. 2004; 10: 3-10.
13. Тунгусова О.С., Марьяндышев А.О. Молекулярные механизмы формирования лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза (обзор литературы). Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2001; 6: 48-9.
14. Филинюк О.В. Факторы риска, ассоциированные с множественно-лекарственно-устойчивым туберкулезом: Ав-тореф. дис. ...д-ра мед. наук. Томск; 2011.
15. Филинюк О.В., Уразова О.И. Факторы, сопряженные с МЛУ-туберкулезом. Российско-немецкая конференция в рамках российско-немецкого года образования, науки и инноваций "Молекулярные основы инфекционных заболеваний": Материалы конференции (Новосибирск, 14-15 июня 2011 г). -Новосибирск; 2011; 33-4.
16. Фрейдлин И.С. Современные представления о фагоцитарной теории // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2008; 5: 4-10.
17. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии. Иммунология. 2001; 4: 4-6.
18. Andre P.G., Charles P. Mercado Evaluation of Task Shifting in community-Based DOTS program as an effective control strategy for tuberculosis. The Scientific World journal. 2011; 11: 2178-86.
19. Alarm K., Ghousunnissa S., Nair S. et al.Glutathione-redox balance regulates c-rel-driven IL-12 production in macrophages: possible implications in antituberculosis immunotherapy. J. Immunol. 2010; 184: 2918-29.
20. Hamza T., Barnett J.B., LiB. Interleukin 12 a key immunoregula-tory cytokine in infection applications. International Journal of Molecular Sciences. 2010; 11: 789-806.
21. RadM.E., Bifani P., Martin C. et al. Mutations in putative mutator genes of Mycobacterium tuberculosis strains of the W-Beijing family. Emerg. Infect. Dis. 2003; 9 (7): 838-45.
22. Co D.O., Logan L.H., Kim S.I., SandorM. Mycobacterial granulomas: keys to a long-lasting host-pathogen relationship. Clin. Immunol. 2004; 113 (2): 130-6.
23. Sinha A., Salam N., Guptf S., Natarajan K. Mycobacterium tuberculosis and dendritic cells: recognition, activation and function implications. Indian journal of biochemistry and biophysics. 2007; 44 (10): 279-88.
24. Wei X-Q., Rogers H., Lewis M.A.O., Williams D.W. The role of the IL-12 cytokine family in directing T-cell responses in Oral candidosis. Clinical and development immunology. 2011; 5: 1-10.
25. Quesniaux V., Fremond C., Jacobs M. et al. Toll-like receptor pathways in the immune responses to mycobacteria. Microbes Infect. 2004; 6(10): 946-59.
26. Zhou D., Collins C.A., Wu P., Brown E.J. Protein tyrosine phosphatase SHP-1 positively regulates TLR-induced IL-12p40 production in macrophages through inhibition of phosphatidylinosi-tol 3-kinase. Journal of leukocyte biology. 2010; 87 (5): 845-9.
Поступила 13.05.12
- 118 -
