CC BY
132
VetPharma №4 | СЕНТЯБРЬ 2015
БОЛЕЗНИ ЛОШАДЕЙ
ПРИМЕНЕНИЕ ТЕХНОЛОГИИ PLASMOLIFTING-ANIMAL
при лечении хирургической патологии у лошадей. клинические случаи
THE APPLICATION OF THE TECHNOLOGY PLASMOLIFTING-ANIMAL IN THE SURGICAL TREATMENT OF HORSES' PATHOLOGY. CLINICAL CASES
УДК: 619:616.001:636.1
Б.С. СЕМЕНОВ, Т.Ш. КУЗНЕЦОВА, В.А. ГУСЕВА
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА:
РLasmoLifting-animaL, тромбоцитарная аутоплазма, тромбоциты, факторы роста, лошади
B. SEMENOV,
T. KUZNETCOVA,
V. GUSEVA
KEY wORDS:
the technology Plasmolifting-аnimal,
autological platalets plasma, platelets, growth factors, horses
АННОТАЦИЯ
Р^тшИ^^д-ашт^ - современная технология приготовления тромбоцитарной аутоплазмы, применение которой способствует ускорению регенерации повреждённых тканей животного и оказывает противовоспалительное действие. Эффективность применения тромбоцитарной аутоплазмы доказана как в экспериментальных случаях, так и в практической работе.
summary
Plasmolifting-animal is a modern technology of the preparation of the autological platelets plasma, the application of which helps to speed up the regeneration of the damaged tissues of the animal and makes an anti-inflammatory effect. The efficiency of using the autological platelets plasma was proved in the experimental data, as well as in practice.
Введение
Технология PLasmoLifting-animaL -новый, современный, удобный и безопасный способ приготовления тромбоцитарной аутоплазмы. Ветеринарные врачи, специализирующиеся на болезнях лошадей, применяют обогащенную тромбоцитами плазму для лечения травм сухожилий [4, 5]. Однако область применения тромбоцитарной аутоплазмы намного шире. Технология PLasmoLifting-animaL отличается от общепринятого метода применения обогащённой тромбоцитами плазмы тем, что не требует двойного центрифугирования и добавления активаторов, а также в полученной плазме количество тромбоцитов
находится в референтом диапазоне для данного вида животного. По мнению разработчиков технологии PLasmoLiftingТМ для гуманной медицины Р.Р. Ахмерова и РФ. Зарудия, нет необходимости в концентрировании тромбоцитов, а можно использовать увеличенный объем вводимой плазмы [1].
На основании технологии PLasmoLiftingТМ на базе кафедры акушерства и оперативной хирургии ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ» разрабатывается технология PLasmoLifting-animaL, основанная на проведении опытов по исследованию эффективности применения тромбоци-тарной аутоплазмы у животных. Концентрация тромбоцитов в ау-
топлазме, полученной по технологии PLasmoLifting-animaL составляла 189 ± 32, 07 х 109/л. Активировать тромбоциты также не требуется, поскольку в специализированных пробирках содержится антикоагулянт - натриевый гепарин высокой степени очистки.
Сначала были проведены опыты по лечению экспериментальных ран у лошадей. В эксперименте лошадям наносили раны в области шеи под гривой, площадь раневой поверхности составляла 5 см2. Животные были разделены на две группы, в каждой группе было по 10 голов. Раны у лошадей контрольной группы лечили общепринятыми методами, а экспериментальной - с применени-
помни о жизни | MEMENTO VIVERE
77
БОЛЕЗНИ ЛОШАДЕЙ
VetPharma №4 | СЕНТЯБРЬ 2015
Табл. 1 Основные факторы роста и другие белки, содержащиеся в альфа-гранулах тромбоцитов
Факторы роста Функции факторов роста
Тромбоцитарный фактор роста отвечает за дифференцирование стволовых клеток и усиливает метаболизм костной ткани и ангиогенез, является стимулятором репарации тканей.
Эпидермальный фактор роста Стимулирует пролиферацию фибробластов и остеобластов. Стимулирует синтез фибринонектина. Побуждает клеточный рост и дифференцировку эпителиального покрова.
инсулиноподобный фактор роста Регуляция процессов роста, развития и дифференцировки клеток. Синтез коллагена. Стимулирует метаболизм костной ткани и дифференцирование стволовых клеток.
«Семейство» трансформирующего фактора роста Контроль пролиферации и дифференцировки клеток. Стимулирует ангиогенез. Синтез коллагена. обладают несколькими функциями. индуцируют дифференцирование мезенхимальных клеток. отвечают за продукцию других факторов роста.
Фактор роста фибробластов вызывает экспрессию в костной ткани, ангиогенез, участвует в оссификации. индуцирует продукцию «семейства» трансформирующего фактора роста.
Фактор роста эндотелия сосудов всего 4 вида: А, B, C и D. Стимулируют ангиогенез и индуцируют пролиферацию эндотелиальных клеток сосудов.
Фактор роста эндотелиальных клеток Поддерживает целостность кровеносных сосудов. оказывает стимулирующее действие на эндотелиальные клетки и обладает ангиогенным эффектом.
Плацентарные факторы роста Стимулируют действие фактора роста эндотелия сосудов. Улучшают проницаемость сосудов.
остеонектин Регулирует пролиферацию и взаимодействие клеток с матриксом. Связывается с в-цепью тромбоцитарного фактора роста.
Фибринонектин Стимулирует клеточный рост, миграцию и дифференциацию клеток, связывается с агрегирующимися проколлагеновыми фибриллами и меняет кинетику образования фибрилл в прецеллюлярном матриксе.
Тромбоспондин опосредует адгезию костных клеток.
ем технологии PLasmoLifting-animaL. После лечения экспериментальных ран были сделаны выводы, что применение тромбоцитарной аутоплазмы ускоряет процессы регенерации, способствует заживлению ран лошадей, и также тромбоцитарная аутоплазма способствует купированию гнойно-экссудативного процесса в ранах у лошадей [2, 3]. Данные были подтверждены гистологическими и цитологическими исследованиями, которые подтвердили данные визуального наблюдения. Пос-
ле подтверждения эффективности тромбоцитарной аутоплазмы в эксперименте мы стали применять её на практике. Подробно о некоторых клинических случаях мы расскажем в этой статье.
Механизм действия основывается на том, что тромбоцитарная аутоплазма ускоряет регенерацию тканей и оказывает противовоспалительное действие. Ускорение регенерации тканей достигается за счет действия биологически активных веществ, содержащихся в аль-
фа-гранулах тромбоцитов (тромбо-цитарный фактор роста, трансформирующий фактор роста, фактор роста фибробластов, фактор роста эндотелия сосудов, инсулиноподобный фактор роста, эпидермальный фактор роста) (Табл. 1) и в бета-гранулах тромбоцитов медиаторов (серотонин, гистамин, АДФ и АТФ) (Табл. 2). Противовоспалительный эффект действия тромбоцитарной аутоплазмы достигается за счет наличия в тромбоцитах и плазме крови лизоцима и медиаторов бета-гранул [1].
Биологически активные вещества во всём своём разнообразии и многофункциональности воздействуют на все стадии регенеративных процессов и позволяют оказывать противовоспалительный эффект, что объясняет высокую эффективность лечения тромбоцитарной аутоплазмой.
Материалы и методы
Для лечения лошадей с раной в области седалищного бугра, с потёртостью от амуниции и с гнойным бурситом в области правого локтевого бугра применяли тром-боцитарную аутоплазму в комплексе с другими препаратами. Для получения тромбоцитарной аутоплазмы использовали специализированные пробирки Плазмо-лифтинг-Анимал (Россия) с разделительным гелем. Кровь у лошадей брали из ярёмной вены в пробирку в объеме 8 мл, затем центрифугировали со скоростью 2500 оборотов в минуту в течение 5 минут (центрифуга СМ-6 ELMI, Латвия). В результате центрифугирования плазма и тромбоциты остаются над разделительным гелем, а другие форменные элементы остаются под ним. Далее тромбоцитарную аутоплазму извлекали в шприц и вводили животному в места повреждения. Для каждой лошади схема лечения подбиралась индивидуально.
78
помни о жизни | MEMENTO VIVERE
VetPharma №4 | СЕНТЯБРЬ 2015
БОЛЕЗНИ ЛОШАДЕЙ
Мерин Благополучный. Диагноз: гнойный бурсит в области локтевого бугра
Результаты исследований
Мерин по кличке Благополучный (Рис. 1), диагноз: гнойный бурсит в области локтевого бугра. Бурсит лечили традиционными методами: проводили вскрытие полости бурсы и дренирование, применяли системную и местную антибиотикотерапию, промывание полости гипертоническими растворами. После проведенного лечения гнойного бурсита в области локтевого бугра в течение года сохранялся свищевой канал с рецидивирующей гнойной инфекцией (Рис. 2). Было принято решение провести лечение тромбоцитарной аутоплазмой, которую вводили в объёме 20 мл: 10 мл в полость свищевого канала и 10 мл в стенку свищевого канала (по 5 мл). Всего было сделано 2 лечебные процедуры с интервалом в 2 недели. Через 5 суток после последней обработки тромбоцитарной аутоплазмой свищевой канал закрылся, и гнойная инфекция была полностью устранена (Рис. 3). В области поражения остался незначительный косметический дефект, который для лошади, работающей в прокате, значения не имеет. Данный клинический случай наиболее ярко демонстрирует, что применение
тромбоцитарной аутоплазмы в виде инъекций способствует ускорению регенерации и оказывает противовоспалительное действие.
В другом клиническом случае тромбоцитарную аутоплазму использовали в виде аппликации. У мерина Дмитрия (Рис. 4) наблюдали потертость в области спины (Рис. 5) из-за неправильно подобранного седла. Ориентировочно площадь
поражённой поверхности кожи составляла 400 см2. Тромбоцитарную аутоплазму наносили в виде аппликаций по всей поражённой поверхности в объёме 20 мл. Всего было сделано 3 процедуры с интервалом трое суток. Дополнительно применяли аэрозоль для обработки раневой поверхности с алюминием и экстрактом подорожника и чистотела. В результате лечения произошло
Мерин Дмитрий. Диагноз: потертость в области спины
помни о жизни | MEMENTO VIVERE
79
БОЛЕЗНИ ЛОШАДЕЙ
VetPharma №4 | СЕНТЯБРЬ 2015
Кобыла Метель. Диагноз: резано-рваная рана в области седалищного бугра
заживление потёртости и восстановление шерстного покрова (Рис. 6).
У кобылы Метель (Рис. 7) лечили резано-рваную рану площадью 121 см1 2 3 4 в области седалищного бугра. Глубина раны была 2,5-3 см, в ране наблюдали обильный гнойный экссудат (Рис. 8). После удаления гнойного экссудата раневая поверхность имела цвет от светло-розового до бардового, края раны неровные, эпидермальный ободок отсутствовал, имелись очаги грануляционной ткани. Тромбоцитарную аутоплазму вводили в объёме 15 мл на границе раневой поверхности и здоровой кожи, распределив полученный объём на 4 инъекции. Аутоплазму инъецировали в пределах здоровой кожи по направлению под дно раны на глубину 1-1,5 см. Тромбо-
цитарную аутоплазму вводили 1 раз в 7 суток, всего 4 раза. Через сутки после первого введения тромбоци-тарной аутоплазмы гнойный процесс был купирован (Рис. 9), рецидивов не наблюдалось. Через 30 суток от начала лечения наблюдали уменьшение площади раневой поверхности на 50%, и она составила 58 см2 (Рис. 10). Результаты, полученные в этом клиническом случае, коррелируют с нашими данными лечения экспериментальных кожных ран у лошадей с применением тромбоцитарной аутоплазмы [2].
Заключение
Таким образом, все представленные результаты лечения являются предварительными, демонстрируют высокую эффективность
применения тромбоцитарной аутоплазмы в дерматологии, лечении ран и гнойных бурситов у лошадей. Использование технологии PLas-moLifting-animaL актуально в практической ветеринарной медицине, так как данный метод безопасен, аутологичен, гипоаллергенен, а также позволяет сократить курс антибиотикотерапии. ■
литература
1. Ахмеров Р.Р. Регенеративная терапия в неврологической практике на основе тромбоцитарной аутологичной плазмы. Технология PLasmoLifting, 2014. [Электронный ресурс]. URL: http://www.doctor-akhmerov.ru_
2. Семенов Б.С., Кузнецова Т.Ш.,
Гусева в.А. Лечение кожных экспериментальных ран с применением тромбоцитарной аутоплазмы // Международный вестник ветеринарии. - 2014. - № 3, - С. 19-23.
3. Гусева В.А. [Электронный ресурс]. URL: http://PLasmoLifting-animaL. com/veterinamye-issLedovanija/
4. Wes Sutter. PRP: PLateLet rich pLasma. [Электронный ресурс]. URL: http:// www.vet-stem.com/pdfs/sutter.pdf
Табл. 2 Медиаторы, содержащиеся в бета-гранулах тромбоцитов
Медиаторы Функции медиаторов
Серотонин Вазоконстрикция, увеличение проницаемости капилляров, привлечение макрофагов.
Гистамин Повышает проницаемость капилляров. Привлекает и активирует макрофаги.
АДФ (аденозиндифосфат) Ингибирует агрегацию тромбоцитов.
АТФ (аденозинтрифосфат) Принимает участие в реакции тромбоцитов при взаимодействии их с коллагеном.
80
помни о жизни | MEMENTO VIVERE
