CC BY
88
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 209-215
Раздел III
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ БИОЛОГИЯ (03.01.00)
Section III
PHYSICAL AND CHEMICAL BIOLOGY (03.01.00)
УДК: 678.048:615.322:612.67:577.73 DOI: 10.24411/1609-2163-2018-15930
ПРИМЕНЕНИЕ РАДИОПРОТЕКТОРОВ В ГЕРОНТОЛОГИИ
Б.Л. ИХЛОВ
ФГУП «Особое конструкторское бюро «Маяк», ул. Данщина, 19, г. Пермь, 614068, Россия, e-mail: [email protected]
Аннотация. Теоретически и экспериментально обоснован новый метод в свободно-радикальной теории старения, где мишенью являются не свободные радикалы, а молекулы ДНК, как митохондриальные, так и ядерные; при этом в качестве антиоксидантов предлагаются некоторые радиопротекторы, ранее применяемые для защиты организма от радиационного поражения. Приведен краткий обзор различных стратегий и методов в геронтологии, отмечены их недостатки. В квазикристаллической модели ДНК рассмотрена роль примесных уровней. Произведен расчет электронных спектров оснований ДНК квантово-химическим расширенным методом Хюккеля, что дало зонную структуру ДНК. Оценена роль саморепарации ДНК в биологических системах. В качестве радиопротекторов при облучении лабораторных мышей изотопом Ро-210 использовались те, мишенью которых является ДНК, в частности, оротовая, тиоротовая кислоты, оротилглицин и другие антиок-сидантные вещества. Получено максимальное повышение выживаемости лабораторных мышей при инъекции такого радиопротектора, валентный n-уровень которого располагается ближе к середине запрещенной зоны ДНК; произведено сравнение предлагаемого метода применения радиопротекторов с другими методами в геронтологии. Сделан вывод, что применение в качестве геропротекторов определенных радиопротекторов вполне обосновано; такие вещества, которые в то же время являются антиоксидантами, в дозах, далеких от летальной, обладают рядом преимуществ перед другими геропротекторами,
Ключевые слова: радиопротектор, запрещенная зона, геронтология
Введение. Вещества, могущие достоверно замедлить старение человеческого организма, как стохастический процесс, пока отсутствуют. Применение таких препаратов, как рапамицин [9], метформин [17], продлевает жизнь модельных организмов - дрозофилы фруктовой, нематоды, серой крысы, домовой мыши и пр.). Возможно, появятся синтетические аналоги гормона голодания [18], используют также ин-дралин, амифостин и т.д. Предполагается также наличие генетической программы старения, в виду нестареющих и даже «омолаживающихся», т.е. возвращающихся к предыдущим жизненным циклам, обращающим вспять процесс дифференциации клеток организмов.
Предлагается новая стратегия предохранения от негативных возрастных изменений, направленная на защиту от повреждений ДНК. Эти повреждения могут быть вызваны в том числе свободными радикалами (СР). В рамках т.н. СР-теории старения [4,6,8] предполагается, что старение происходит вследствие того, что СР, такие, как гидроксильный радикал НО-, Н2О2, синглетный кислород О- и супероксид О2-повреждают макромолекулы - липиды, белки и, главным образом, РНК и ДНК [6,8,17]
СР-механизм старения подтверждается экспериментально [8,9]. Видовая продолжительность жизни прямо коррелирует с содержанием р-каротина, а-токоферола и мочевой
кислоты в сыворотке крови. В соответствии с этим из всех групп геропротекторов выбирается группа антиоксидантов.
Например, имеются данные о продлении жизни животных при повышенном содержании в организме природных веществ - гормона ди-гидроэпиандростерона, витаминов А, C, Е (а-токоферола), янтарной кислоты, карнозина, каротиноидов, пигментов фруктов. Упоминаются также витамины D, K, B5, содержащая селен глутатион-пероксидаза, интерферон. К синтетическим геропротекторам относят фул-лерены, а также препарат, названный по фамилии автора, Скулачева - SkOl (10Е (6'пластохинонил) децилтрифенилфосфоний) [14], также 10-(6-убихинолил) децилтрифенил-фосфоний и др.
Действие антиоксидантов сводится к их реакциям с активными мишенями. Так, витамин С связывает водорастворимые СР, b-каротин - жирорастворимые СР, мелатонин - и те, и другие.
В данной статье предлагается радикальная модификация СР-теории старения. А именно: выбираются те антиоксиданты, мишенью которых является ДНК, как митохондриальные, так и ядерные.
Направление на защиту ДНК от повреждений выбрано в том числе в связи с тем, что повреждения ДНК в клетке сопоставимы со старением полимерных цепочек (например, в органическом стекле) под воздействием солнечного света. Это альтернативный взгляд на причину старения организма в целом. Такой способ защиты ДНК может стать существенной в антиоксидантной системе витаукта.
Д. Синклэйр и др. исследовали группу генов, сиртуинов. Были выведены мыши без одного из них. У мышей возникли признаки старения, но при этом уровни всех белков в клетках были нормальными, кроме тех, что кодирует митохондриальная ДНК.
Обнаружено, что на молекулярном уровне ключевую роль в процессе старения играет нарушение координации между геномами ядра клетки и ее митохондрий. Раскоординация начинается с падения уровня соединения нико-тинамид-аденин-динуклеотида, который
уменьшается с возрастом. Без него белок, который кодируется сиртуином, не может контро-
лировать активность одного из транскрипционных факторов - молекул, участвующих в транскрипции генетической информации с ДНК. Сиртуины также утрачивают способность регулировать процессы апоптоза. Уровень указанных факторов повышается, и это нарушает нормальную коммуникацию двух геномов. С течением времени из-за этого страдает способность клеток производить энергию, и организм стареет.
Удалось замедлить старение червей при помощи никотинамид-мононуклеотида, молекулы-предшественника никотинамид-аденин-динуклеотида, который превращается в клетках в никотинамид-аденин-динуклеотид и восстанавливает механизм коммуникации геномов в клетке. Старым мышам 22-месячного возраста делали инъекции в течение недели и обнаружили, что их мышечная ткань стала похожей на ткань 6-месячных грызунов, что соответствует у человека 64-м и 18 годам.
В то же время данная работа не снимает проблемы защиты самих ДНК от повреждений.
В других стратегиях также считается, например, что ключевую роль в процессе старения играют митохондрии, которые продуцируют СР. Полагают, что такие старческие заболевания, как диабет или болезнь Альцгеймера, возникают из-за необратимых мутаций в ДНК митохондрий.
Еще одна стратегия связана с защитой клетки, в том числе ДНК, от воздействия СР - путем воздействия на СР [17], где в качестве антиокси-дантов рассматриваются селен-производные. В рамках данной стратегии внимание так же концентрируется на митохондриях - из-за того, что в митохондриях происходят активные окислительные процессы, связанные с метаболизмом, в них постоянно образуются СР, повреждающие клетку, а также ДНК митохондрий. С возрастом накапливаются повреждения и мутации, вызванные этими веществами.
В [17] было, в частности, показано, что применение липофильных катионов для транспортировки биоактивных молекул внутрь митохондрий значительно увеличивает их эффективность [9] Так, 10-(6-убихинолил) децилтрифенилфос-фоний уже в микромолекулярных концентрациях селективно блокирует окислительные повреждения митохондрий и предотвращает апоптоз, ин-
дуцируемый пероксидом [15]). Однако разница между анти- и прооксидантными концентрациями данного реагента невелика [7].
Для снижения риска прооксидантной активности было предложено использовать пластохи-нон вместо убихинона [1]. Синтезированная молекула получила название SkQ1. Этот препарат препятствует, в частности, возрастным нарушениям у аутбредных мышей, его применение увеличивало выживаемость и среднюю продолжительность жизни на 92%. Но при этом - снижало двигательную активность и выносливость. Что естественно при снижении концентрации радикалов кислорода. То есть, в данном случае анти-оксиданты действуют как ловушки для СР. При этом сами авторы предупреждают, что чистка митохондрий от СР может привести к перерождению клетки в раковую.
Цель исследования - обосновать применение радиопротекторов как геропротекторов.
Материалы и методы исследования. В данное время стала возможной публикация материалов 1-й и 2-й форм допуска, соответственно, открылись широкие возможности для использования методов радиобиологии в геронтологии.
Соответственно, для замедления старения организма предлагается использовать те вещества, которые ранее были использованы в качестве протекторов от радиационного поражения ядерных ДНК. При этом для подбора протекторов предлагается использовать те, чьи п-уровни «встраиваются» в середину запрещенной зоны системы уровней молекулы ДНК.
Для защиты от поражения проникающей радиацией используются различные протекторы. Одним из видов протекторов являются те, мишенью которых является ДНК. Они призваны залечить поражение именно ДНК от воздействия радиации, донируя электрон ионизированной в результате попадания у-кванта ДНК.
Таким образом, в основу предлагаемого метода положен механизм саморепарации, существующий в ДНК. Это, в частности, обобществленная я-система, «распределяющая» возбуждение по всей длине ДНК. Она возникла в ходе эволюции, в отсутствие атмосферы, в условиях жесткого ультрафиолета и гамма-излучения. Потому, скажем, ДНК сине-зеленых водорослей сохранила максимальную способ-
ность к саморепарации, что позволяет им выживать в ядерном реакторе. В тканях организма человека содержится примерно 0,1 мГ урана на 1 кГ, т.е. медленно действующего радиоактивного яда. Он проникает в организм вместе с водой и пищей. Если бы у ДНК (и у клетки) отсутствовала бы система саморепарации, существование животного мира было бы невозможно (ранее Г. М. Баренбойм полагал, что ДНК защищается исключительно от излучения Ва-вилова-Черенкова, возникающего в клетках при распаде естественной примеси радиоактивных элементов, на самом деле, как мы предполагаем - от всего спектра распада).
Репарируется большинство повреждений ДНК, но небольшая часть сохраняется. Так, у крыс в каждой клетке ежедневно происходит 105 окислительных повреждений ДНК. Если скорость саморепарации не достигает скорости возникновения повреждений, число спонтанных повреждений ДНК увеличивается [16]. Существует связь между продолжительностью жизни вида и скоростью репарации ДНК после воздействия радиации или высокочастотного ультрафиолета [10].
Радиационная повреждаемость ДНК стволовых клеток кишечного эпителия мышей разных линий и возраста примерно одинакова, однако, скорость репарации этих повреждений с возрастом снижается. Способность диплоидных фибробластов человека к репарации индуцированных у-излучением однонитевых разрывов ДНК достоверно снижается с увеличением возраста донора [5].
В рамках описания воздействия гамма-излучения на ДНК с точки зрения зонной теории макромолекула ДНК представляется как квазипериодический кристалл.
При рассмотрении зонной структуры ДНК обнаружено, что система энергетических уровней образуется вкладом отдельных оснований, причем при взаимодействии оснований каждый уровень размывается, образуя зону. Переходы происходят, в основном, между зонами оснований одного типа. Относительное смещение уровней оснований пренебрежительно мало.
Примерная ширина запрещенной зоны составляет по нашим расчетным данным приблизительно 3,83 эВ, по экспериментальным дан-
ным - 4 эВ. Расчеты производились в п-приближении.
При воздействии гамма-излучения после релаксации уровней происходит возбуждение п-электронной системы ДНК. При этом электроны с высшего занятого уровня п-системы переходят на ее низшее незанятое, или происходит ионизация молекулы. После прекращения действия излучения возбуждение мигрирует по ДНК и приводит либо к рекомбинации электронов и дырок, либо к повреждению молекулы.
Роль п-уровней ДНК аналогична роли примесных уровней в полупроводниках, где наибольшее влияние на скорость рекомбинации оказывают глубокие примесные уровни, лежащие вблизи середины запрещенной зоны - между валентной зоной и зоной проводимости кристалла (для металлов эта зона отсутствует). При удалении от середины вероятность перехода (донирования) снижается. В связи с этим можно предположить, что п-уровни необходимы для предохранения от возбуждения п-системы ДНК.
Необходимо отметить, что в свободном состоянии основания ДНК являются неустойчивыми к гамма-излучению. Отсюда также следует, что кооперация электронных оболочек играет главную роль в действии предохранительного механизма.
Методом итерационного РМХ рассчитаны электронные уровни ряда известных имеющих большую радиозащитную активность известных радиопротекторов, мишенью которых является ДНК: тиомочевины, меркамина, этирона и их производных. Оказалось, что энергии их валентных п-уровней, соответствует середине или лежит близко к середине запрещенной зоны п-системы ДНК. Удаление от середины приводит к снижению радиозащитной активности, выход за пределы запрещенной зоны (серин, парафенилендиамин, мочевина и др.) уменьшает активность до нуля.
Итак, наиболее эффективными оказываются именно те протекторы, п-уровни которых «встраиваются» в середину, располагаются ближе к середине запрещенной зоны.
Для подтверждения был взят ряд радиопротекторов, мишенью которых является ДНК: оро-тилглицин, тиоротилглицин, оротовая кислота, тиоротовая кислота, селеноротовая кислота.
Протекторы вводили мышам-гибридам линии (СВАхС57В16)^ массой 0,013-0,020 кг, по 20 мышей в опыте, внутрибрюшным способом за 20 мин. до облучения, в 2% крахмальном растворе в эквимолярных дозах 0,1-0,25 летальной дозы ЛД16. Облучение производили изотопом Ро-210 (5,3 МэВ, на установке «ИГУР» мощностью 0,8 Гр/мин.), в течение 10 мин.
Максимальную радиозащитную активность обнаружили селеноротовая кислота при ЛД95/30 и тиоротилглицин при ЛД60-70/30. Соотношение эффективной и токсической доз для них - 60-70%.
Расчет с помощью РМХ показал, что их п-уровни наиболее близко из всех перечисленных протекторов располагаются к середине запрещенной зоны ДНК.
Результаты и их обсуждение. Ранее предполагалось, что наличие у соединения элек-тронно-донорных свойств является необходимым (хотя и не всегда достаточным) условием осуществления ими радиозащитного действия путем заполнения протектором-донором электронной вакансии, в биологических макромолекулах. При этом считалось, что зная энергию наивысшей заполненной молекулярной орбиты, мы тем самым получаем величину потенциала ионизации, которая может служить мерой элек-тронно-донорной способности молекулы, и радиозащитная активность нарастает с увеличением числа донорных радикалов в молекуле.
В данной же работе показано, что наибольшим защитным эффектом обладают селе-норотовая кислота и тиоротилглицин, п-уровни которых находятся близко к середине запрещенной зоны системы уровней ДНК.
Вопрос о механизме сближения протектора с мишенью очевиден: сближение ДНК и протектора имеет статистический (броуновский) характер и обусловливается водородной связью, возможно, с образованием эксимера.
Очевидно также, что модели ДНК, в отличие от полупроводника, где влияние на скорость рекомбинации определяется наибольшей вероятностью перехода (середина зоны), взаимодействие протектора с я-системой ДНК носит существенно неусредненный, квантовый характер.
Предлагаемый подход не лишает ДНК ее нормальной жизни под воздействием радикалов: протектор воздействует на саму ДНК, которой грозит повреждение.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 209-215
В данном методе не требуются сильные ан-тиоксиданты, которые могли бы снизить активность радикалов кислорода, антиоксиданты с большой разницей с прооксидантами, а нужны те, электронная структура которых является подходящей для оснований ДНК.
В данном методе не требуются катионы, введение которых само по себе негативно сказывается на клетке. При этом концентрация антиоскиданта-протектора может варьироваться в широком диапазоне.
Кроме того, при применении вышеуказанных геропротекторов-антиоксидантов наблюдаются тяжелые побочные эффекты: увеличение частоты развития аденом островков поджелудочной железы (бета-каротин), усиление канцерогенеза в толстой кишке (витамин Е), увеличение концентрации холестерина и уси-
ление его отложение в аорте (селен), индукция опухоли печени (дегидроэпиандростерон).
Применение радиопротекторов в дозах 10-5 ЛД50 не вызывает побочных эффектов.
Очевидно также, что есть возможности моделировать протекторы других рядов антиок-сидантов с заранее заданными свойствами, которые были бы более доступны и п-уровни которых встраивались бы в середину запрещенной зоны.
Выводы. Таким образом, применение радиопротекторов, служащих для защиты от радиационного излучения, может оказаться перспективным для предохранения ДНК, РНК, белков, организма в целом от старения.
APPLICATION OF THE RADIOPROTECTORS IN GERONTOLOGY
B.L. IKHLOV
FSUE "Special Design Bureau" Mayak ", Danshin St., 19, Perm, 614068, Russia, e-mail: [email protected]
Abstract. A new method in the free-radical theory of aging is theoretically and experimentally validated, where the target is not free radicals, but DNA molecules, both mitochondrial and nuclear. At the same time, some radioprotectors, previously used to protect the body from radiation damage, are offered as antioxidants. The brief review of various strategies and methods in gerontology is given, their shortcomings are noted. In the quasi-crystalline model of DNA, the role of impurity levels is considered. The electronic spectra of DNA bases were calculated by the quantum-chemical extended Huckel method, which gave the band structure of DNA. The role of DNA self-repair in biological systems is evaluated. As radioprotectors when irradiated with laboratory mice, the Po-210 isotope was used by those whose target is DNA, in particular, orotic, thioric acid, orotylglycine and other antioxidant substances. The maximum survival rate of laboratory mice was obtained by injecting a radioprotector whose valency n-level is located closer to the middle of the forbidden DNA zone; a comparison is made of the proposed method of using radioprotectors with other methods in gerontology. It was concluded that the use of certain radioprotectors as geroprotectors is completely justified; such substances, which at the same time are antioxidants, in doses far from lethal, have a number of advantages over other geroprotectors.
Key words: radioprotector, bandgap, gerontology.
Литература
1. Антоненко Ю.Н., Аветисян А.В., Бакеева Л.Е. Производное пластохинона, адресованное в митохондрии, как средство. Прерывающее программу старения: катионные производные пластохинона: синтез и исследование in vitro. // Биохимия. 2008. Т. 73, №12. С. 1589-1606.
References
1. Antonenko YUN, Avetisyan AV, Bakeeva LE. Proizvod-noe plastokhinona, adresovannoe v mitokhondrii, kak sredstvo. Preryvayushchee programmu stareniya: kation-nye proizvodnye plastokhinona: sintez i issledovanie in vitro [Derived plastoquinone addressed to mitochondria as a medium. Interrupts aging program: plastoquinone cationic derivatives: synthesis and in vitro investigation.]. Biokhimiya. 2008;73(12):1589-606. Russian.
2. Племенков В.В. Природные соединения селена и 2. Plemenkov VV. Prirodnye soedineniya selena i zdo-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 209-215
здоровье человека // Вестник РГУ им. И. Канта. 2007. Вып. 1. Естественные науки. С. 63-68.
3. Юрова М.Н., Забежинский М.А., Пискунова Т.С., Тындык М.Л., Попович И.Г., Анисимов В.Н. Влияние митихондриального антиоксиданта Бк01 на старение, продолжительность жизни и спонтанный канцерогенез у мышей трех линий // Успехи геронтологии. 2010. Т. 23, №3. С. 430-441.
4. Ames B.N., Shigenaga M.K., Hogen T.M. Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. Vol. 90. P. 7915-7921.
5. Anisimov V.N. Carcinogenesis and Aging // Boca Raton: CRC Press. 1987. Vol. 1. P. 165.
6. Cutler R. Oxidative stress: its potential relevance to human disease and longevity determinants // Age. 1995. Vol. 18. P. 91-96.
7. Doughan A.K., Dikalov S.I. Mitochondrial redox cycling of mitoguinone leads to superoxide prodiction and cellular apoptosis // Antioxid Redox Signal. 2007. Vol. 9(11). P. 1825-1836.
8. Harman D. Free-radical theory of aging: invreasing the functional life span // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. Vol. 717. P. 1-15.
9. Gregory J. Gatto, Gregory J. Gatto, Michael T. Boyne, Neil L. Kelleher // Journal of the American Chemical Society. 2006. Vol. 128, Iss. 11. P. 3838-3847.
10. Likhachev A.J. Effects of age on DNA repair in relation to carcinogenesis. Cancer and Aging. A. Macieira-Coelho, B. Nordenskjold, eds. Boca Raton, FL: CRC Press, 1990. P. 97-108.
rov'e cheloveka [Natural selenium compounds and human health]. Vestnik RGU im. I. Kanta. 2007;1(Estestvennye nauki):63-8. Russian.
3. YUrova MN, Zabezhinskij MA, Piskunova TS, Tyndyk ML, Popovich IG, Anisimov VN. Vliyanie mitikhondri-al'nogo antioksidanta SkQ1 na starenie, prodolzhi-tel'nost' zhizni i spontannyj kancerogenez u myshej trekh linij [The effect of the mitochondrial antioxidant SkQ1 on aging, life expectancy, and spontaneous carcinogenesis in three-line mice]. Uspekhi gerontologii. 2010;23(3):430-41. Russian.
4. Ames BN, Shigenaga MK, Hogen TM. Oxidants, anti-oxidants, and the degenerative diseases of aging. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993;90:7915-21.
5. Anisimov VN. Carcinogenesis and Aging. Boca Raton: CRC Press. 1987;1:165.
6. Cutler R. Oxidative stress: its potential relevance to human disease and longevity determinants. Age. 1995;18:91-6.
7. Doughan AK, Dikalov SI. Mitochondrial redox cycling of mitoguinone leads to superoxide prodiction and cellular apoptosis. Antioxid Redox Signal. 2007;9(11):1825-36.
8. Harman D. Free-radical theory of aging: invreasing the functional life span. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994;717:1-15.
9. Gregory J Gatto, Gregory J Gatto, Michael T. Boyne, Neil L. Kelleher. Journal of the American Chemical Society. 2006;128(11):3838-47.
10. Likhachev AJ. Effects of age on DNA repair in relation to carcinogenesis. Cancer and Aging. A. Macieira-Coelho, B. Nordenskjold, eds. Boca Raton, FL: CRC Press; 1990.
11. Orr W.C., Sohal R.S. Extension of life-span by overexpression of superoxide dismutase and catalase in Drosophila melanogaster // Science. 1994. Vol. 263. P. 1128-1130.
12. Papa S., Skulachev V.P. Reactive oxygen species, mitochondria, apoptosis and aging // Molec. Cell. Bio-chem. 1997. Vol. 174. P. 305-319.
13. Parkes T.L., Elia A.J., Dickinson D., Hilliker A.J., Phillips J.P., Boulianne G.L. Extension of Drosophila lifespan by over-expression of human SOD1 in moto-neurons // Nature Genetics. 1998. Vol. 19. P. 171-174.
11. Orr WC, Sohal RS. Extension of life-span by overexpression of superoxide dismutase and catalase in Drosophila melanogaster. Science. 1994;263:1128-30.
12. Papa S, Skulachev VP. Reactive oxygen species, mitochondria, apoptosis and aging. Molec. Cell. Bio-chem. 1997;174:305-19.
13. Parkes TL, Elia AJ, Dickinson D, Hilliker AJ, Phillips JP, Boulianne GL. Extension of Drosophila lifespan by over-expression of human SOD1 in motoneurons. Nature Genetics. 1998;19:171-4.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 209-215
14. Skulachev V.P., Anisimov V.N., Antonenko Y.N., Bakeeva L.E., Chernyak B.V. An attempt to prevent senescence: A mitochondrial approach // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics. 2009. V. 1787, Iss. 5. P. 437-461.
14. Skulachev VP, Anisimov VN, Antonenko YN, Bakeeva LE, Chernyak BV. An attempt to prevent senescence: A mitochondrial approach. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics. 2009;1787(5):437-61.
15. Tauskela J.S. MitoO - a mitochondria-targeted antioxidant // Drugs. 2007. Vol. 10, №6. P. 339-412.
16. Vijg J. DNA sequence changes in aging: How frequent, how important? // Aging. Clin. Exp. Res. 1990. Vol. 2. P. 105-123.
17. Wouter De Haes, Lotte Frooninckx, Roel Van Assche, Arne Smolders, Geert Depuydt // Proceedings of the National Academy of Sciences. 2014. Vol. 111, Iss. 24. P. E2501-E2509.
15. Tauskela JS. MitoO - a mitochondria-targeted antioxidant. Drugs. 2007;10(6):339-412.
16. Vijg J. DNA sequence changes in aging: How frequent, how important? Aging. Clin. Exp. Res. 1990;2:105-23.
17. Wouter De Haes, Lotte Frooninckx, Roel Van Assche, Arne Smolders, Geert Depuydt. Proceedings of the National Academy of Sciences. 2014;111(24):E2501-9.
18. Zhang Y., Xie Y., Berglund E.D., Coate K.C., He T.T., Katafiuchi T., Xiao G., Potthoff M.J., Wei W., Yi-hong W., Yu R.T., Evans R. M., Kliewer S.A., Mangelsdorf D.J. The starvation hormone, fibroblast growth factor-21, extends lifespan in mice. // Elife. 2012. №1. P. e00065. DOI: http://dx.doi.org/10.7554/eLife.00065
18. Zhang Y, Xie Y, Berglund ED, Coate KC, He TT, Katafiuchi T, Xiao G, Potthoff MJ, Wei W, Yihong W, Yu RT, Evans RM, Kliewer SA, Mangelsdorf DJ. The starvation hormone, fibroblast growth factor-21, extends lifespan in mice. Elife. 2012;1:e00065. DOI: http://dx.doi.org/10.7554/eLife.00065
