SCIENCE TIME
ПРИМЕНЕНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ МАСТИТА У ЛАКТИРУЮЩИХ КОРОВ
Решетка Михаил Борисович, Федеральное государственное научное учреждение Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт, г. Краснодар
E-mail: [email protected]
Аннотация: В данной статье представлены результаты по сравнению профилактической эффективности пробиотического средства со средством «В1ра1», (производитель ЭеЬауа1 - Швеция). Также были проведены исследования по влиянию его на бактериальную обсемененность кожи сосков вымени и молока коров. Получены данные по воздействию пробиотического препарата на показатели качества молока и количество соматических клеток в молоке.
Ключевые слова: мастит, молочная железа, пробиотики, лактирующие коровы, профилактики мастита, бактериальная обсемененность
Развитие молочного скотоводства и рост его продуктивности в значительной степени сдерживаются из-за различных болезней животных и в первую очередь мастита [3].
Мастит является одним из наиболее распространенных заболеваний. Инфицирование молочной железы происходит, как правило, галактогенно -через сосковый канал, особенно после доения, когда он в течение 1-2 часов остается открытым, а местная противомикробная защита оказывается сниженной [2]. Для профилактики маститов у лактирующих коров разработано значительное количество противомаститных программ с использованием различных дезинфицирующих средств [1]. Многие дезинфицирующие средства оказывают неблагоприятный эффект на кожу как животного, так и человека, кроме того, они не являются экологически чистыми препаратами. В свою очередь, применение пробиотических препаратов восстанавливает естественный экологический микробиологический баланс, благотворно действует на иммунную систему человека и животных, снижает риск всех инфекционных заболеваний. В настоящее время в связи со вступлением в ВТО остро встают вопросы качества и экологической безопасности используемых средств. Поэтому
одним из приоритетных направлений является разработка и внедрение пробиотических средств, с целью профилактики и лечения заболеваний животных [4].
Цель работы - Определение бактериальной обсемененности кожи сосков вымени и молока до и после применения пробиотического средства и оценка его профилактической эффективности для обработки сосков вымени после доения у лактирующих коров.
Материалы и методы. Общую микробную обсеменённость кожи сосков вымени и секрета молочной железы до и после применения пробиотического препарата изучали на 12 клинически здоровых коровах. Животные были распределены на 2 группы по 6 коров. Доение коров проводилось в коровнике с линейной дойкой. Животным опытной группы на соски вымени сразу после доения наносили пробиотическое средство при помощи распрыскивателя типа «Росинка». Животным контрольной группы соски вымени обрабатывали средством после доении «В1ра1» методом погружения соска в пластиковый стаканчик с препаратом.
Перед дойкой 1 раз в неделю в течение 5 недель у коров опытной и контрольной группы брали смывы с поверхности кожи соска вымени, до обмывания вымени и после него, при помощи стерильного зонд-тампона -тупфер, для подсчета общей микробной обсемененности. Пробы секрета из всех долей вымени брали в стерильный контейнер для сбора биологических жидкостей.
Для проведения испытаний делают ряд последовательных десятикратных
разведений пробы (смыва) до 10-20. Берут по 1,0 см3 образца из каждой пробирки
и по отдельности вносят в пробирки с 9 см стерильной дистиллированной воды,
"2 "2 получая первое разведение смыва, затем 1 см3 переносят во 2-ю пробирку с 9 см3
-2
стерильной дистиллированной воды, получая разведение 10" . Операцию
-20
повторяют до разведения 10 . После тщательного перемешивания стерильно переносят по 1 см3 разведенного образца из каждой пробирки в микробиологические чашки, в которые стерильно заливают по 15 см расплавленного и охлажденного до 45°С мясопептонного агара. Чашки помещают в термостат на 24 часа при температуре 37°С. Учет результатов производят через 24 часа путем подсчета выросших колоний на число жизнеспособных клеток в млн/см и определяют по формуле:
Х=Кх10р, где
К- количество выросших колоний
р- порядковый номер десятикратного разведения.
Для определения количества микроорганизмов семейства ЕйегоЬа^епасеае делают последовательные десятикратные разведения, а затем из каждой пробирки переносят по 1 см полученного образца в стерильную чашку Петри и
"5
заливают по 15 см расплавленным и охлажденным до 45°С агаром Эндо. Определение количества микроорганизмов семейства Б1арЫ1ососси8 осуществляют аналогично, используя в качестве питательной среды желточно -солевой агар. Для определения лактобактерий применяют лактобакагар. Посевы помещают в термостат при температуре 37°С на 24 ч. Учет результатов осуществляют путем подсчета выросших колоний по формуле, указанной выше.
Для сравнения профилактической эффективности пробиотического средства, предназначенного для профилактики различных форм мастита был поставлен опыт со средством «В1ра1», (производитель ЭеЬауа1 - Швеция), которое наиболее часто применяется в хозяйствах Краснодарского края и содержит в качестве действующего вещества йод, а также вспомогательный смягчающий компонент сорбитол.
В опыте было задействовано 104 животных принадлежащих ООО ХКА Агрофирме «Россия» Тимашевского района Краснодарского края. Все животные до начала эксперимента обрабатывались средством для обработки вымени после доения «Э1ра1». Животных разделили на две группы: опытную и контрольную (по 52 дойных коровы в каждой группе). Животным опытной группы на соски вымени сразу после доения наносили пробиотическое средство при помощи распрыскивателя типа «Росинка». Животным контрольной группы соски вымени обрабатывали средством после доении «Э1ра1» методом погружения соска в пластиковый стаканчик с препаратом. Расход препаратов на одну обработку сосков одного животного составляло 5мл.
За животными вели постоянное наблюдение в течение месяца и проводили контрольные дойки на скрытый мастит с использованием экспресс диагностикума - КегЬаТББТ через каждые 14 дней. При положительном результате теста на мастит проводили повторное тестирование через 24 часа и при повторном положительном результате диагностировали скрытый мастит.
Также при каждой контрольной дойке отмечали наличие трещин на сосках вымени.
Во время проведения контрольных доек отбиралось молоко у коров опытной и контрольной групп для проведения лабораторного анализа, который включал в себя определение соматических клеток в молоке после использования препаратов, а также определения жира, белка, плотности и СОМО в молоке, при помощи анализатора молока «Клевер-2М».
Результаты исследований. Анализ полученных результатов по микробной обсеменённости кожи сосков вымени представлен в таблице 1.
Таблица 1
Общая микробная обсемененность кожи сосков вымени коров
Группа Кол-во проб Общая бактериологическая обсеменённость кожи сосков на1см2 Бактерии рода Bacillus Бактерии рода Enterococcus и Lactobacillus Бактерии семейства Entero-bacteriaceae
Опытная (до обмывания) 6 1,5±1,5х1015 8,9±8,2х105 6,0±0,5х106 1,1±0,4х108
Опытная (после обмывания вымени) 6 1,3±1,1х107 2,0±0,3х103 1,1±0,4х104 1,1±0,5х104
Контрольная (до обмывания вымени) 6 3,4±3,4х1014 1,0±0,5х102 2,7±1,5х102 3,9±3,2х1010
Контрольная (после обмывания вымени) 6 2,0±0,8х106 1,5±0,7х101 6,6±2,9х101 5,2±3,0х105
Из полученных нами данных видно, что в контрольной группе до обмывания вымени общая бактериальная обсемененность кожи сосков вымени составляет 3,4±3,4х1014 на 1 см2, а после обмывания вымени - 2,0±0,8х106. В опытной группе до обмывания вымени общая бактериальная обсемененность кожи сосков вымени составила 1,5±1,5х1015, а после - 1,3±1,1х107 , что в 10 раз больше, чем в контрольной группе. Следует отметить, что до начала опыта общая бактериальная обсемененность кожи сосков вымени была примерно одинакова с контрольной группой, но после обработки пробиотическим средством она выросла в 10 раз.
По результатам микробиологических исследований установлено, что возрастание общей бактериальной обсемененности кожи сосков вымени в опытной группе происходило за счет преобладания бактерий рода Bacillus и Enterococcus. Также отмечено, что в опытной группе уменьшалось количество условно-патогенной микрофлоры по сравнению с контролем.
Проведенный анализ бактериологической обсемененности молока у здоровых коров в опытной группе снижалась по сравнению с контролем (таблица 2).
Таблица 2
Общая микробная обсемененность секрета вымени
Группы Бактериологическая обсемененность молока, КОЕ
энтеробактерии стафилококки лактобактерии общая обсемененность молока
Опытная группа - 5,6±4,9х103 9,0±4,4х102 6,8±4,7х104
Контрольная группа - 2,6±1,2х105 1,7±0,7х103 2,6±1,6х105
Так количество стафилококков в молоке опытной группы составило 5,6±4,9*10 , а в контрольной группе они составляли 2,6±1,2*10 , что примерно в 100 раз выше, чем в опытной группе. Количество лактобактерий в опытной
группе составило 9,0±4,4х10 , а в контрольной группе их было в 10 раз больше и
-5
составляло
1,7±0,7х103. Такая же тенденция наблюдалась и в отношении общей обсемененности молока, которая в опытной группе составляла 6,8±4,7х104, а в контроле была в 10 раз выше и составляла 2,6±1,6х105. Следует отметить, что бактерии группы кишечной палочки в молоке обеих групп отсутствовали.
Сравнение профилактической эффективности пробиотического средства со средством «В1ра1», (производитель БеЬауа1 - Швеция) производилось на 104 животных принадлежащих ООО ХКА Агрофирме «Россия». Животных разделили на две группы: опытную и контрольную (по 52 дойных коровы в каждой группе). Животным опытной группы на соски вымени сразу после доения наносили пробиотическое средство при помощи распрыскивателя типа «Росинка». Животным контрольной группы соски вымени обрабатывали средством после доении «Э1ра1» методом погружения соска в пластиковый стаканчик с препаратом.
В результате проведения опыта были получены следующие результаты (таблица 3).
Таблица 3
Профилактическая эффективность пробиотического средства и «Э1ра1» предназначенных для обработки сосков вымени после доения
Клинический Скрытый ма- Трещины сос-
Группы Время исследования мастит стит ков вымени
жив. % жив. % жив. %
1-я неделя 3 5,7 4 7,7 14 26,9
Опытная 3-я неделя 1 1,9 3 5,7 8 15,4
(п=52) 5-я неделя 0 0 8 15,4 8 15,4
Среднее на одну проверку 1,33 2,5 5 9,6 10 19,2
1-я неделя 2 3,8 9 17,3 18 34,6
Контрольная 3-я неделя 3 5,7 4 7,7 12 23,0
(п=52) 5-я неделя 0 0 8 15,4 14 26,9
Среднее на одну проверку 1,67 3,2 7 13,4 14,7 28,1
По результатам наблюдения за животными установлено, что к концу первой недели использования пробиотического средства количество коров больных клиническим маститом составило 5,7%, в то время как в контрольной группе он составлял 3,8 %. На третьей неделе опыта процент коров больных маститом в первой группе снизился до 1,9%, а в контрольной поднялся до 5,7%. По итогам пятой недели животные больные клиническим маститом не выявлены.
Анализируя заболеваемость коров скрытым маститом, прослеживается явная тенденция снижения заболеваемости в опытной группе. К концу первой недели использования пробиотического средства заболеваемость коров составила 7,7%, а в контрольной группе 17,3%. На третьей неделе опыта, коров больных скрытым маститом в опытной группе было на 2% меньше чем в
контрольной и составило 5,7% и 7,7% соответственно. Однако к пятой неделе опыта количество животных больных скрытым маститом в обеих группах было одинаково по 8 коров в каждой группе.
Проведенные исследования состояния сосков вымени на наличие трещин показало, что на протяжении всего опыта у коров опытной группы данное заболевание уменьшалось. И в среднем составило 19,2%, в то время как в группе, где применяли <^ра1» трещины сосков вымени встречались в 28,1%
В ходе проверки профилактической эффективности пробиотического средства была проведена проверка показателей качества молока и подсчет соматических клеток в молоке (таблица 4).
Таблица 4
Показатели качества молока и количество соматических клеток в молоке коров
Показатели Опытная группа Контрольная группа
Начало опыта Конец опыта Начало опыта Конец опыта
Массовая доля жира, % 3,118±0,195 3,323±0,108 2,992±0,205 3,235±0,101
Массовая доля белка, % 3,245±0,07 3,457±0,094 3,075±0,055 3,31±0,087
Плотность, кг/м3 29,413±0,494 30,443±0,523 28,888±0,497 30,002±0,265
СОМО 8,362±0,108 8,517±0,177 8,365±0,101 8,39±0,074
Соматические клетки, тыс./мл 105±6,583 97,5±5,59 112,5±6,801 104,167±5,974
В ходе проверки показателей качества молока на начало и конец опыта, каких-либо отклонений от физиологической нормы не установлено, также на всем протяжении опыта показатели качества молока не изменялись и находились на относительно одном и том же уровне. При подсчете соматических клеток в молоке было установлено, что на всем протяжении опыта они находились на физиологическом уровне и каких-либо достоверных отклонений в опытной и контрольной группе не наблюдалось. То есть за весь промежуток исследований число соматических клеток в опытной и контрольной группе не превышало физиологической нормы.
Вывод:
1. При использовании пробиотического средства увеличивается бактериальная обсемененность сосков вымени, но при этом отмечается преобладание бактерий рода Bacillus и Enterococcus. и уменьшение количества условно-патогенной микрофлоры по сравнению с группой контроля.
2. Тестируемое пробиотическое средство снижает количество общей бактериальной обсемененности молока в 10 раз по сравнению с группой контроля.
3. Использование пробиотического средства в течение 5 недель позволяет профилактировать клинический мастит в 97,5%, скрытый мастит в 90,4% и трещины сосков вымени в 80,8% случаев. Средство «Dipal» профилактирует
клинический мастит в 96,8%, скрытый мастит в 86,8% и трещины сосков вымени в 71,9% случаев.
4. Тестируемое пробиотическое средство не ухудшает качества молока. Количество соматических клеток, жира, плотности и СОМО в молоке находились на физиологическом уровне, и каких-либо достоверных отклонений относительно к контрольной группе не наблюдалось.
Литература:
1. Баркова А.С. Болезни сосков молочной железы коров / А.С. Баркова, А.Ф. Колчина, А.В. Елесин // LAP LAMBRET Academic Publishing, Germany. - 2012. -233 с.
2. Париков В.А., Мисайлов В.Д., Нежданов А.Г. Состояние и перспективы научных исследований по борьбе с маститом у коров / В.А. Париков, В.Д. Мисайлов, А.Г. Нежданов // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Междунар науч.-практ. конф. Воронеж, 5-7 октября 2005г. мат. конф. - Воронеж: Европолиграфия, 2005 - С. 38.
3. Решетка М.Б., Коба И.С. Применение нового фитопрепарата при гнойно-катаральном мастите / М.Б. Решетка, И.С. Коба // Вестник АПК Ставрополья. 2013. № 2 (10). С. 226-227.
4. Турченко А.Н., Коба И.С., Новикова Е.Н. Перспектива решения акушерско-гинекологической патологии у коров на промышленной ферме / Труды Кубанского государственного аграрного университета 1(34), 2012 - 194-196с.