CC BY
37
чувствительность и специфичность "сэндвич"- ИФА по отношению к антигенам различного происхождения зависит от сочетания пар МкА. В результате проведенных экспериментов подобран вариант, позволяющий идентифицировать и количественно определять уровень как мономерного сывороточного IgA, так и sIgA в различных секретах (слезы, слюна, молозиво, молоко, носовые секреты крупного рогатого скота).
На основе полученных МкА к IgM и IgA рогатого скота приготовлены реагенты для количественного определения уровня иммуноглобулинов классов М и А в РИД и ИФА. Данные реагенты можно использовать для анализа гуморального звена иммунитета крупного рогатого скота и овец [4].
Практически первыми из открытых на мембране лимфоцита молекул были иммуноглобулины. Поверхностные иммуноглобулины (S-Ig) ориентированы своей Fab-областью по направлению к внешней среде, тогда как Fc-фрагмент погружен в липидный бислой мембраны клетки. S-Ig на В-клетках являются рецептором для антигена и идентичны его секретируемой форме - антителу. Модуляция их количества или блокировка антителами приводит к изменению иммунных реакций организма. Помимо мембраносвязанной формы иммуноглобулинов В-клеток существует также и цитоплазматическая, которая является показателем уровня дифференцировки лимфоцитов. Экспрессия цитоплазматического ^М на поверхность клетки играет важную роль в В-клеточном онтогенезе, поскольку s-^М вместе с другими молекулами (цепи Iga и IgP) образуют рецепторный комплекс зрелой В-клетки. Поверхностный репертуар иммуноглобулинов меняется в процессе созревания, дифференцировки и иммуногенеза за счет транспорта этих молекул из клетки и обратно.
Одним из способов исследования функционального состояния В-лимфоцитов является метод определения поверхностных иммуноглобулинов. Их уровень оценивают с помощью различных методов световой и электронной микроскопии, в которых используются антитела против иммуноглобулинов, меченные флуорохромомами, радиоактивными изотопами и ферментами.
В наших исследованиях количество В-клеток в крови телят в возрасте 1 месяца определяли по наличию на мембране клетки иммуноглобулинов класса М методом иммунопероксидазного окрашивания клеток с использованием в качестве первых антител -моноклональных антител к IgM крупного рогатого скота, а вторых - антител к Ig мыши, конъюгированных с пероксидазой. Определяли s-IgM по появлению специфического окрашивания лимфоцитов под микроскопом (х900). Клетки, окрашенные по периферии, считали IgM^-лимфоцитами или В-клетками. При микроскопическом исследовании препаратов установлено, что клетки крови телят, экспрессирующие мембрасвязанный IgM (sIgM^-клетки), составляют - 19,2%±0,8. Также в крови были обнаружены клетки с цитоплазматическим IgM (dgM). Эти клетки не окрашиваются по периметру клетки, т.е. поверхностные иммуноглобулины отсутствуют. dgM-клетки могут быть пре-В-клетками с цитоплазматическими p-цепями или плазматическими клетками.
Таким образом, с помощью моноклональных антител определены показатели концентрации иммуноглобулинов класса М и А в биологических жидкостях организма и количество В-клеток в крови крупного рогатого скота, что имеет важное прогностическое значение при вакцинации, так как у животных с низкими данными параметрами возможна недостаточная эффективность специфической профилактики.
Литература
1. Штамм гибридных культивируемых клеток животных Mus.musculus, используемый для получения моноклональных антител к ^М рогатого скота / Федоров Ю.Н., Сологуб В.К., Феоктистова Т.А. и др. // Авторское свидетельство №1560549 от 3.01.1990 г.
2. Моноклональные антитела к иммуноглобулинам класса А рогатого скота: получение, характеристика, применение / Т.А.Феоктистова, Ю.Н.Федоров, И.Ю.Ездакова, В.К.Сологуб// Труды ВИЭВ.-2003.- Т. 73.- С. 197-200.
3. Ездакова И.Ю. Получение и характеристика моноклональных антител к иммуноглобулину класса М рогатого скота: Дис.... канд.биол.наук/ И.Ю.Ездакова; ВИЭВ.- Москва, 1994.-134с.
4. Ездакова И.Ю., Чеботарева Т.А. Методические наставления по использованию моноклональных антител для оценки уровня иммуноглобулинов классов М и А в биологических жидкостях крупного рогатого скота и овец //Совр. средства и методы обеспечения ветеринарного благополучия по инфекционной и протозойной патологии животных.-М:ООО»Агенство творческих технологий» .-20П.-СЛ01-107.
5. Ройт А, Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.Мир, 2000, 592с.
Кузьминова Е.В.,1 Семененко М.П.2
'Доктор ветеринарных наук, Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт, 2 доктор ветеринарных наук, Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт ПРИМЕНЕНИЕ ЛИКОПИНА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ АКУШЕРСКО-ГИНЕКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У
КОРОВ
Аннотация
Разработан препарат на основе каротиноида ликопина, дана краткая характеристика его изучения на коровах в предотельный период. Экспериментально доказано, что фармакологическая активность ликоцинола проявляется улучшением обменных процессов организма животных, а также он является эффективным средством профилактики акушерскогинекологических заболеваний у крупного рогатого скота.
Ключевые слова: ликопин, коровы, акушерская патология
Kuzminova E.V.1, .Semenenko M.P.2
'D.Sc. (veterinary), Krasnodar research veterinary institute of the Russian academy of agricultural scienes ;2 D.Sc. (veterinary), Krasnodar research veterinary institute of the Russian academy of agricultural scienes APPLICATION OF LYKOPIN FOR PREVENTING OBSTETRICAL AND GYNECOLOGICAL DISEASES OF COWS
Abstract
Preparation was developed on the basis of the carotenoid lycopin, brief characteristics of its study was presented on cows before birth. Experimentally was proved that the pharmacological activity of likotsinol improved metabolic processes of animals, and it is an effective means ofpreventing obstetric and gynecological diseases of cattle.
Keywords: lycopin, cows, obstetrical pathology
В обеспечении устойчивого роста продукции животноводства, важное значение придается вопросам профилактики бесплодия и улучшения воспроизводства крупного рогатого скота, что обуславливает необходимость внедрения новых средств предупреждения и лечения акушерско-гинеколо-гических заболеваний у животных, в том числе, с применением препаратов, обладающих разносторонней биологической активностью и безвредностью для организма [2].
Перспективным в этом плане является растительный пигмент каротиноидного ряда - ликопин. Каротиноиды представляют собой многочисленную группу пигментов, входящих в состав клеток микроорганизмов, высших растений, животных и человека, кроме этого, существуют каротиноиды антропогенного происхождения - искусственно синтезированные человеком [1].
Ликопин относится классу терпеноидов, структура которого представлена длинными ветвящимися углеводородными цепями, содержащими 11 сопряженных двойных связей. То есть, фактически ликопин является алифатическим изомером каротина с эмпирической формулой С40Н56, но содержит вместо бета-ионовых два псевдоионовых кольца.
100
Известно, что ликопин является мощным антиоксидантом, причем, интерес к этому каротиноиду резко возрос в последнее десятилетие, после того как были продемонстрированы его свойства усиливать защитные функции организма, тормозить дегенеративные процессы в тканях, снижать риск инициации и развития онкологических, сердечно-сосудистых и других патологий [3,4].
Целью нашей работы было изучение применения препарата ликопина (ликоценола - маслянного раствора ликопина с массовой долей действующего вещества 0,2 %.) для профилактики акушерско-гинекологических заболеваний у коров.
Для опытов были сформированы 2 группы коров-аналогов, находящихся в сухостойном периоде, по 10 животных в каждой. В первой опытной группе ликоцинол задавали ежедневно с кормом по 40 мл на животное до отела, коровы второй контрольной группы служили интактным контролем. За животными обеих групп вели клинические наблюдения во время родов и послеродовом периоде, при этом учитывали частоту задержаний последа, заболеваемость острым послеродовым эндометритом, а также определяли состояние яичников через месяц после отела. Биохимическими исследованиями в динамике оценивали влияния ликоцинола на уровень обменных процессов у коров.
Установлено, что у животных опытной группы к концу экспериментального периода в сравнении с группой отрицательного контроля уровень общего белка достоверно возрос на 9,4%, а в сравнении с фоновыми значениями - на 20,6%, при одновременном увеличении количества альбуминовой фракции, в то время как в группе контрольных животных этот показатель остался за нижней границей нормы.
При применении ликоцинола зарегистрировано снижение активности аспартатаминотрансферазы - в 1,34 и аланинаминотрансферазы - в 1,58 раза, в сравнении с показаниями контрольной группы, где их активность к концу эксперимента возросла от исходных значений.
Анализируя данные по витаминному составу крови, в группе опытных животных установили достоверное увеличение концентраций каротиноидов в 1,9 раз и витамина А - на 35,4%. При оценке показателей минерального обмена отмечено увеличение содержания цинка на 23,6%, железа - на 34,5%.
В ходе эксперимента был изучен уровень эндогенной интоксикации организма коров по концентрации молекул средней массы (МСМ). Установлено, что к концу опыта в группе животных, получавших ликоцинол, концентрация МСМ снизилась в 1,74 раза, в сравнении с фоновыми исследованиями, в то время как в контроле их уровень возрос в 1,14 раза.
Применение ликоцинола оказало влияние на степень развития акушерско-гинекологической патологии у коров опытной группы, у которых в сравнении с контролем, было отмечено снижение задержаний последа на 10%, острого гнойно-катарального эндометрита - на 20%, гипофункции яичников - на 10%. Период бесплодия сократился на 7,9 дней (таблица).
Таблица - Профилактическая эффективность ликоцинола при акушерско-гинекологических заболеваниях у коров
Показатели Опытная группа Контрольная группа
животных % животных %
Задержание последа 1 10 2 20
Послерод. эндометрит 2 20 4 40
Гипофункция яичников 20 20 3 30
Продолжительность бесплодия, дней 77,4±2,1 85,3±1,9
Таким образом, проведенные исследования, характеризующие фармакологическую активность препарата, показали, что ликопин является высокоэффективным средством профилактики задержания последа и возникновения послеродового эндометрита. Его применение снижает количество гипофункциональных расстройств яичников и сокращает период бесплодия у коров.
Литература
1. Антипов В.А. Бета-каротин: значение для животных и птиц, их воспроизводства и продуктивности / В. А. Антипов, А.Н. Турченко, В.С. Самойлов, Р.В. Казарян, Е.В. Кузьминова, Л.В. Полищук. Краснодар, 2006. - с.91.
2. Беляев, В.А. Лечебно-профилактическая эффективность Экстраселена при патологиях послеродового периода у коров / В.А. Беляев, Е.В. Сафоновская, И.И. Летов // Зоотехния. - 2010. - № 9. - С.26-27.
3. Клебанов, Г.И. Антиоксидантные свойства ликопина / Г.И. Клебанов, А.Б. Капитанов, Ю.О. Теселкин // Биол. Мембраны -1998 - №15(2) - С.227-237.
4. Патент РФ № 2423109 Кузьминова Е.В., Семененко М.П., Кощаев А.Г., Соловьев В.С. Средство для нормализации обменных процессов у животных //Патент России. Опубл. 10.07.2011. Бюл. № 19.
Акимов Д.Ю.1, Шадыева Л.А.2, Щеголенкова А.Е.3, Индирякова Т.А.4
'Аспирант; 2Доцент, кандидат биологических наук, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина»; 3Аспирант;
4Доцент, кандидат биологических наук, ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина»
ФОРМЫ ПРОЯВЛЕНИЯ ПИРОПЛАЗМОЗА У ДОМАШНИХ СОБАК НА РАЗНЫХ ЭТАПАХ ОНТОГЕНЕЗА
Аннотация
В работе рассматриваются особенности проявления пироплазмоза у собак разных возрастных групп города Ульяновска.
Ключевые слова: пироплазмоз, пироплазма, формы клинического проявления, возрастные особенности, возрастные группы.
Akimov D.Y.1, Shadyeva L.A.2, Schegolenkova A.E.3, Indiryakova T.A4
'Graduate student; Candidate of biological Sciences, assistant Professor of biology, veterinary genetics, Parasitology and ecology, chief of the Ulyanovsk state agricultural Academy them. P.A. Stolypin, Ulyanovsk, b-R New Crown 1; 3Graduate student; Candidate of biological Sciences, assistant Professor of biology, veterinary genetics, Parasitology and ecology, chief of the Ulyanovsk state agricultural Academy
them. P.A. Stolypin, Ulyanovsk, b-R New Crown 1.
FORMS PIROPLASMOSIS DOMESTIC DOGS ON VARIOUS STAGES OF ONTOGENESIS
Abstract
The paper discusses the features of manifestation ofpiroplasmosis in dogs of different age groups in Ulyanovsk.
Keywords: piroplasmosis, piroplazmy, forms of clinical manifestations, age characteristics, age groups.
Пироплазмоз - широко распространенное протозойное заболевание собак, возбудителем которого являются одноклеточные паразиты рода Piroplasma: P. canis, реже P. gibsoni или P. vogeli. Переносчиками пироплазмоза собак являются иксодовые клещи (семейство Ixodidae) родов Dermacentor и Rhipicephalus. Вспышки инвазии постоянно регистрируются повсеместно в Европе, Азии, Южной и Северной Америке. Согласно статистическим данным, за последние 10 лет заболеваемость собак пироплазмозом многократно возросла.
В определённой степени это связано с увеличением миграции населения (развитием туризма, пригородного садоводства), в результате чего расширился ареал клещей, что привело к новым очагам инвазии. Кроме того, с тех пор как прекратились обработки лесных массивов пестицидами, размножение клещей практически не регулируется, их популяция постоянно растёт. В последнее десятилетие в населённых пунктах, особенно в городах, резко возросло количество собак, а отсутствие специальных выгульных
101
