Summary. The levels of nitric oxide metabolites, nitrates and nitrites (NOx) were examined in cestode Triaenophorus nodulosus using fluorimetric method. The levels of the nitric oxide metabolites increased during incubation of parasites in cold condition. Some differences in levels of the nitric oxide metabolites were noted under different temperature regimes at incubation of cestodes.
ПРИМЕНЕНИЕ ХИТОЯНА В КОМПЛЕКСЕ С ФЕЗОЛОМ ДЛЯ БОРЬБЫ С ГАЛЛОВОЙ НЕМАТОДОЙ НА РАСТЕНИЯХ ОГУРЦА
*Удалова В.Б., **Удалова Ж.В., **Зиновьева С.В.
*ВНИИ гельминтологии им. К.И.Скрябина ** Центр паразитологии ИПЭЭ РАН
Введение. В основе создания современных средств защиты растений от различных патогенных организмов, в том числе нематод, лежит способность некоторых соединений влиять на иммунный статус растения. Известен целый ряд таких соединений природного и синтетического происхождения, среди которых хитозан является одним из наиболее доступных и эффективных. Хитозан не токсичен, подвергается биодеградации, биосовместим с окружающей средой, обладает антимикробными свойствами. При проникновении патогенных организмов в растение аминополисахариды индуцируют в ткани комплексную биохимическую защитную реакцию. Включение системы защиты в ответ на внедрение паразитических организмов не всегда достаточно эффективно и адекватно. Использование хитозана позволяет ускорить процессы защитных реакций, что вызвано генетически запрограммированными взаимоотношениями между растением-хозяином и хитинсодержащим паразитическим организмом (Озерецковская, 1995).
Известно, что хитозан. обладает высокой сорбционной способностью в отношении большого числа органических и неорганических веществ и используется в качестве биоразлагаемого носителя (Котельникова и др. 2003). Что позволяет создавать препараты направленного и пролонгированного действия. Нами была предпринята попытка совместить внесение двух соединений: низкомолекулярного хитозана и препарата из группы
бензимидазолов - фезола для защиты растений огурца от галловой нематоды Meloidogyne incognita.
Препараты на основе бензимидазолов обладают широким спектром действия. Они оказывают фунгицидное и нематицидное действия, а также могут обладать рострегулирующей активностью (Козлова, Шашенкова, 1978; Baum, Chen, 1986; Матевосян, Кононенко, 2006, Magnucka, Suzuki, Pietr et al., 2007). Они хорошо усваиваются через корни и разносятся вверх по сосудистой системе. Не фитотоксичны, т.е. не обжигают растения. Механизм
470
нематицидного действия заключается в блокировке фумаратредуктазы и нарушении энергетического метаболизма гельминтов. Для бензимидазолов характерно наличие овоцидного и лярвицидного действия. Бензимидазолы малотоксичны для человека. Но они слабо растворимы в воде. Среди бензимидазолов в растениеводстве применяются такие фунгициды, как тиабендазол и беномил. Естественно возникал вопрос, о возможности их применения против наиболее патогенных седентарных видов фитонематод, таких, как галловая нематода и картофельная цистообразующая. При исследованиях in vitro, было получено, что ни беномил, ни тиабендазол не оказывали влияния на вылупление из яиц личинок галловой нематоды M. incognita (Magnucka, Suzuki, PietrJ., et al., 2007). В вегетационных опытах на томатах, заражённых галловой нематодой была показана низкая нематицидная эффективность данных препаратов (Whitead, Bromilow, Fraser, et al, 1985). Однако эти же препараты оказались активны в отношении картофеля, зараженного цистообразующей нематодой Globodera rostochiensis, оба препарата значительно угнетали развитие патогена (Whitead, Bromilow, Fraser, et al, 1985).
Фенбендазол, широко применяемый в ветеринарии антгельминтный препарат, снижал зараженность растений огурца галловой нематодой, но его активность была недостаточно высокой (Удалова, 2001). Можно предположить, что это связано с плохой растворимостью фенбендазола и, как следствие, оно плохо проникало в растение. Фезол представляет собой растворимую форму фенбендазола. Представляло интерес исследовать возможность применения фезола с хитозаном против галловой нематоды на огурцах и сравнить их действие на нематоду с фенбендазолом и хитозаном, а также провести оценку влияния комплексного препарата на развитие растений.
Материалы и методы. Препараты фенбендазол и его растворимая форма - фезол были получены от д.в.н. П.П. Диденко (ВИГИС). Семена огурцов были обработаны следующими соединениями: 0,5 %; 1 %; 2 % хитояном; (низкомолекулярный хитозан (25 кД), растворенный в 2 % янтарной кислоте); 0,5 %; 1 %; 2 % хитояном с фезолом; фенбендазолом; фезолом. Контролем являлись семена, замоченные в воде. Учитывали всхожесть растений по вариантам обработок. Заражение галловой нематодой, M. incognita, проводили при появлении у основной массы взошедших растений первого настоящего листа. Инвазия составила 10 тыс. личинок/растение. В течение вегетации проводился уход и наблюдения за состоянием растений. По окончанию эксперимента были произведены соответствующие морфометрические измерения растений (рост, вес), корни огурцов были обследованы на заражение галловой нематодой по 4-х балльной шкале.
Результаты и их обсуждение. В результате проведённых исследований было выявлено, что хитоян в исследованных концентрациях, фезол, а также хитоян в композиции с фезолом не угнетали, а в некоторых случаях стимулировали прорастание семян in vitro, а также рост и развитие
471
вегетирующих растений in vivo. Так, обработанные семена огурцов хитояном проросли на третьи сутки от 80% - в 1% хитояне, до 100% - в 2 % хитояне, тогда как в контроле проросло всего 75 %. При обработке семян фезолом проросло 98 %. Нерастворимая форма фенбендазола задерживала развитие семян, проросло всего 8 %. При совместной обработке семян огурцов хитояном и фезолом практически все семена на 3 сутки после замачивания проросли. Все варианты обработки хитояном, фезолом и их комбинации не угнетали развития вегетирующих растений и были на уровне контроля, при этом отмечалось более раннее образование цветов, а затем завязей у обработанных растений, в отличие от контроля. Очевидно, что комбинация хитозана с фезолом благотворно действовала на развитие растений огурца.
Заражение растений, обработанных фенбендазолом, было практически на уровне контроля, балл заражения - 3,5 (Табл.1). В этом варианте отмечались крупные и многочисленные галлы. Обработка растений хитояном, фезолом и комбинацией хитояна с фезолом независимо от концентрации хитояна, позволила существенно снизить балл заражения. Так при замачивании семян огурца в 1 % растворе хитояна балл заражения составил 1,1; фезолом - 2 балла, а наиболее эффективной комбинацией препаратов были 2% хитоян с фезолом, где балл заражения - 1,5, а количество галлов на грамм корня было в 2,5 раза меньше, чем в контроле. В этом же варианте отмечались самые мелкие галлы.
Таблица 1
Влияние препаратов фенбендазола и хитояна на показатели заражённости растений огурца галловой нематодой
Вариант обработки балл Кол-во галлов/г корня Max размер галла, мм2 Средний размер галла, мм2
фенбендазол 3,5 268 35,8 7,8
Фезол 2 108 15,8 6,7
0,5 % хитоян 1, 7 94 17,1 5,8
1 % хитоян 1,1 166 18,0 6,6
2 % хитоян 1,3 126 36,0 5,3
0,5 % хитоян.+фезол 1,6 150 28,1 6,5
1 % хитоян.+фезол 1,9 130 16,5 6,7
2 % хитоян +фезол 1,5 98 14,0 5,0
контроль 4 246 26,3 7,9
Заключение. Таким образом, в результате исследований было выявлено, что фезол не фитотоксичен, а комбинация хитояна с фезолом обладала
472
ростстимулирующим действием. Обработка растений хитояном в 1 и 2%-ной концентрациях, существенно снижала зараженность корневой системы огурцов галловой нематодой. При обработке фезолом тоже наблюдалось некоторое снижение зараженности. Наиболее эффективной в отношении нематод была комбинация 2%-ной хитояна с фезолом. Однако усиления антинематодного действия хитояна при одновременном внесении хитояна с фезолом не наблюдалось. Возможно, это связано с недостаточно точно выбранной концентрацией фезола.
Работа поддержана программой «Биоресурсы» и РФФИ.
Application of chitoyan in combination with fezole in control of Meloidogyne incognita in cucumbers. Udalova V.B., Udalova Zh.V., Zinovjeva S.V. All-Russian K.I. Skryabin Institute of Helminthology. Center of Parasitology of IPEE RAS.
Summary. Treatment of cucumbers by chitoyan at 1 and 2% concentrations significantly reduced M. incognita infection of cucumber roots. Fezole treatment only resulted in the certain decrease of infection. The combination 2% chitoyan+fezole was the most efficacious but one didn’t note the promotion of antinematode effects at simultaneous application of the above mixture. Fezole didn’t exibit phytotoxicity as while combination chitoyan+fezole displayed the growth stimulating effects.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ ФИТООВИЦИДНЫХ СУБСТАНЦИЙ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ЭНТЕРОБИОЗА
Упырев А.В., Хроменкова Е.П., Васерин Ю.И.,
Димидова Л.Л., Касмылина Ю.В., Криворотова Е.Ю.
ФГУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии»
Роспотребнадзора
Введение. В настоящее время имеющиеся в литературе сведения об эффективности действия дезинфектантов на возбудителей паразитарных болезней недостаточны (2). В официальном реестре дезинфицирующих средств овициды не представлены.
Существующее представление о меньшей устойчивости возбудителей паразитозов к предлагаемым дезинфицирующим средствам, по сравнению со споровыми формами микроорганизмов, недостаточно обоснованы и не всегда оправданы (2). Известные дезинвазионные способы, методы и средства, как правило, не технологичны. Препараты, рекомендованные к применению для этих целей, а также продукты их разложения, например хлорсодержащие, часто оказывают неблагоприятное воздействие на организм человека. Наиболее существенным является то, что предлагаемые для работы в качестве
473