Применение газовой хроматографии как основного метода анализа при создании препаратов пролонгированного действия на основе производных 2-(9-оксоакридин-10(9н)-ил)-уксусной кислоты Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 543.544.054.9

ПРИМЕНЕНИЕ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ КАК ОСНОВНОГО МЕТОДА АНАЛИЗА ПРИ СОЗДАНИИ ПРЕПАРАТОВ ПРОЛОНГИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ НА ОСНОВЕ ПРОИЗВОДНЫХ 2-(9-ОКСОАКРИДИН-10(9Н)-ИЛ)-УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ

© 2017 Е. В. Грехнёва1, Т. Н. Кудрявцева2, Е. А. Денисова3

1 канд. хим. наук, доцент кафедры химии e-mail: grekhnyovaev.@yandex.ru

2 канд. хим. наук, руководитель НИЛ]рганического синтеза e-mail: labOS.kgu@mail.ru 3 студент 5 курса специальности 04.05.01 - фундаментальная и прикладная химия e-mail: denisova.ek@mail.ru

Курский государственный университет

Создана лекарственная композиция на основе фармакологической субстанции «Энтеросгель», полимерных соединений и действующего вещества (2-(9-оксоакридин-10(9н)-ил)-уксусной кислоты), обеспечивающая пролонгированное выделение препарата. Найдены оптимальные условия хроматографирования производных акридонуксусной кислоты, делающие возможным эффективный контроль выхода фармацевтического препарата из лекарственной композиции.

Ключевые слова: газовая хроматография, бутиловый эфир 2-хлоракридонуксусной кислоты, полиметилсилоксан, альгинат натрия, гуаровая камедь, натриевая соль карбоксиметилцелюозы, пролонгированное действие, сухое и влажное гранулирование

В фармакологии активно используются производные акридонуксусной кислоты (АУК) (соли, амиды, гидразиды, карбоксиакридоны) - представители класса гетероциклических органических соединений в качестве противовирусных, противоопухолевых препаратов [Грехнева и соавт. 2015; Кудрявцева и соавт. 2013]. Наряду с этим во многих случаях возможности применения подобных биологически активных соединений ограничены в связи с появлением побочных эффектов при многократном использовании лекарственного средства, что не позволяет вводить в организм требуемое количество биологически активного соединения, нередко обеспечивающее необходимое длительное действие препарата, тем самым удорожая применение. Подобные недостатки могут быть устранены при использовании биологически активных веществ в составе носителя, в качестве которых чаще всего используются различные полимеры, в которых скорость постепенного (пролонгированного) выделения лекарственного средства может регулироваться строением полимера, что позволяет точно дозировать используемый препарат и достигать наибольшего положительного эффекта при лечении. Таким образом, разработка подобной фармакологической субстанции является актуальной задачей.

В данной работе предпринята попытка создания препарата пролонгированного действия на основе 2-(9-оксоакридин-10(9н)-ил)-уксусной кислоты (2-хлорАУК). В качестве полимерного носителя были выбраны гуаровая камедь, альгинат натрия, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ), которые в медицине применяют в качестве загустителей, стабилизаторов, связующих и пролонгаторов действия лекарственных веществ. Также в состав таблеток вводили полиметилсилоксан,

известный под товарным знаком «Энтеросгель», служащий в фармацевтической химии для иммобилизации других химических молекул. В нашем случае полиметилсилоксан является сорбентом действующего вещества, позволяющим удлинить время выхода лекарственной субстанции.

Экспериментальная часть. Анализ хлорпроизводных АУК осуществлялся на приборе «Кристалл 2000М» (газ-носитель N2, детектор электронного захвата, давление газа-носителя 70 кПа, расход газа-носителя 30 мл/мин, температура колонки 180— 250 оС) по методу абсолютной градуировки. Для построения градуировочной зависимости 0,01 г бутилового эфира 2-хлорАУК, растворили в минимальном количестве ДМФА и доводили объем раствора до 100 мл этанолом. Приготовленный раствор с концентрацией 0,1 г/л разбавляли для получения растворов со следующими концентрациями: 0,08 г/л, 0,06 г/л, 0,04 г/л, 0,02 г/л, 0,005 г/л, затем отбирали в виалу по 1 мл каждого приготовленного раствора и проводили хроматографирование в выбранных ранее условиях. Для создания таблетмасс различного состава использовали методику сухого (при получении лекарственных форм состава бутиловый эфир 2-хлорАУК : ПВП (0,1 г : 0,1 г), бутиловый эфир 2-хлорАУК : КМЦ : энтеросгель (0,1 г : 0,1 г : 0,02 г), бутиловый эфир 2-хлорАУК : альгинат № : энтеросгель (0,1 г : 0,1 г : 0,1 г)) и влажного гранулирования (при получении лекарственных форм состава бутиловый эфир 2-хлорАУК : альгинат Na : энтеросгель (0,1 г : 0,1 г : 0,1 г), бутиловый эфир 2-хлорАУК : гуаровая камедь : энтеросгель (0,1 г : 0,1 г : 0,1 г). Компоненты в заданном соотношении подвергали гранулированию в агатовой ступке с последующими прессованием на пресс-форме (диаметр пуансона 5 мм) и расфасовкой в блистеры. Полученные таблетки помещали в среду для депонирования (1 мл н-октанола) и отбирали параллельно две пробы (10 мкл разбавляли 1 мл этанола) через определенные промежутки времени, после чего каждую из них подвергали хроматографированию три раза (п=3).

Обсуждение результатов. Первоначально осуществили синтез эфиров 2-хлоракридонуксусной кислоты (бутилового и этилового) в результате проведения нескольких последовательных стадий, включающих синтез 41 -хлорфенилантраниловой кислоты, ее циклизацию и очистку, алкилирование полученного 2-хлоракридона бутиловым эфиром хлоруксусной кислоты, омыление выделенного бутилового эфира 2-хлоракридонуксусной кислоты и ее этерификацию с этиловым и бутиловым спиртами [Грехнева и соавт. 2016].

Подобрав оптимальные условия хроматографирования эфиров 2-хлоракридонуксусной кислоты, построили калибровочную зависимость площади пиков растворов бутилового эфира 2-хлорАУК, получаемых на хроматограммах, от заданных концентраций (рис. 1).

300000

250000

200000

о. 150000

о

100000

50000

0 ^-------

0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12

С, г/л

Рис. 1. График зависимости площади пика бутилового эфира 2-хлорАУК от концентрации

Грехнёва Е. В., Кудрявцева Т. Н., Денисова Е. А. Применение газовой хроматографии как основного метода анализа при создании препаратов пролонгированного действия на основе производных 2-(9-оксоакридин-10(9н)-ил)-уксусной кислоты

При создании таблетформ пролонгированного действия, применяли в качестве связующих поливинилпирролидон, альгинат натрия, гуаровую камедь, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы, которые за счет вязкости среды способны дозированно высвобождать действующее вещество. Однако при использовании исключительно представленных полимеров и эфиров 2-хлоракридонкарбоновых кислот желаемый длительный эффект высвобождения не достигался, то есть биологически активное вещество переходило в модельную среду практически сразу. В связи с этим дополнительно в состав каждой лекарственной формы вводили эквивалентное количество полиметилсилоксана в виде фармакологического препарата «Энтеросгель». Полиметилсилоксан, благодаря своей пространственно сшитой глобулярной пористой упаковке макромолекул, способен адсорбировать молекулы действующего вещества, что увеличивает время высвобождения препарата из таблетки. В качестве моделирования липоидной среды был использован н-октанол благодаря его формальному сходству с липидами: длинная алкильная цепь и функциональная группа, проявляющая как протонодонорные, так и акцепторные свойства.

По методике, описанной выше, были рассчитаны концентрации высвобождающегося в модельную среду бутилового эфира 2-хлорАУК из таблеток, различных по природе и технологии создании. Опираясь на полученные результаты, сравнили эффективность полимерной матрицы, входящей в состав таблетированных форм, в отношении пролонгированного высвобожденного действующего вещества, а также подобрали наиболее приемлемый способ изготовления таблеток (рис. 2-4).

Рис. 2. Сравнение концентрации бутилового эфира 2-хлорАУК, перешедшего в раствор из таблеток, полученных методом сухой грануляции

В соответствии с данным графиком скорость высвобождения действующего вещества минимальна при использовании в качестве полимерного носителя альгината №.

£

I3

X

а.

I Гуаровая камедь I Альгинат N3

, л ,], I

Время, ч

Рис. 3. Сравнение концентрации бутилового эфира 2-хлорАУК, перешедшего в раствор из таблеток, полученных методом влажной грануляции

Таким образом, применение гуаровой камеди в качестве полимерного носителя в готовых лекарственных формах обеспечивает минимальную скорость высвобождения действующего вещества, по сравнению с остальными изученными полимерами. Причем хорошо видно, что профиль высвобождения ЛВ для каждого полимера индивидуален. Поэтому, в зависимости от задач, можно создавать композиции с различными программами и скоростями высвобождения действующего вещества.

■t6 ■ метод влажнго гранулирования,

i5 а- альгинат Na

|4 ■ метод сухого

Z £ 2 гранулирования, альгинат Na

1 1 ,

гмтч1люг^с0чг^ г^ -q- см со ю ГМГМ 1Л 1Л т и") ю го И И Н (О Время, ч

Рис. 4. Сравнение концентрации бутилового эфира 2-хлорАУК, перешедшего в раствор из таблетформ, полученных методом сухой и влажной грануляции с использованием в качестве полимерного носителя альгината натрия

В случае использования природных полимеров скорость высвобождения действующего вещества зависит от способа формования таблетки (рис. 4). Скорость минимальна при использовании метода влажного гранулирования, что в сочетании с использованием в качестве полимерного носителя альгината № и гуаровой камеди открывает возможность создания лекарственных форм пролонгированного действия.

Выводы

• Таблетированные формы, состоящие из полиметилсилокана, полимерных соединений и действующего вещества, более эффективны в отношении дозированного выделения препарата вследствие того, что создается целая композиционная система: из пористой структуры матрицы, в качестве которой выступает «Энтеросгель», биологически активное вещество десорбируется, попадая в вязкую среду КМЦ, альгината натрия или гуаровой камеди, откуда диффундирует в модельный раствор с меньшей скоростью.

• Скорость высвобождения бутилового эфира 2-хлоакридонуксусной кислоты в среду н-октанола минимальна при использовании метода влажного гранулирования.

• Для создания таблетформ с пролонгированным высвобождением действующего вещества предпочтительнее использовать в качестве полимерного носителя гуаровую камедь и альгинат натрия.

Библиографический список

Грехнева Е.В., Кудрявцева Т.Н., Денисова Е.А. Хроматографический анализ акридонов и их производных // Проблемы теоретической и экспериментальной химии: тез. докл. XXVI Российской молодежной науч. конф., посвящ. 120-летию со дня рожд. акад. Н.Н. Семенова, г. Екатеринбург, 27-29 апреля 2016 г. Екатеринбург, 2016. С. 120.

Грехнева Е.В., Кудрявцева Т.Н., Чаплыгин Д.А. и др. Количественный анализ 4-карбоксиакридона хроматографическими методами // Актуальные проблемы химии, химической технологии и химического образования: сб. докл. всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием, посвящ. 60-летию образования кафедры химии КГУ, г. Курск, 22-24 дек. 2015 г. Курск, 2015. С. 29-33.

Грехнёва Е. В., Кудрявцева Т. Н., Денисова Е. А. Применение газовой хроматографии как основного метода анализа при создании препаратов пролонгированного действия на основе производных 2-(9-оксоакридин-10(9н)-ил)-уксусной кислоты

Кудрявцева Т.Н., Богатырев К.В., Сысоев П.И. и др. Синтез и исследование антибактериальной активности некоторых производных фторзамещенных акридонов // Фторные заметки: сетевой журн. 2013. № 2. URL: http://notes.fluorine 1.ru/public/2013/2_2013/letters/rusindex.html (дата обращения: 26.05.2016)