CC BY
88
формирование колоний практически не отличалось от контроля. По всей видимости, после прикрепления гифов грибов ингибирующее действие экстракта не проявлялось.
Применение экстракта чаги в концентрации 10 мг/л подавляет развитие гифов грибов в течение всего времени опыта. Отдельные гифы гриба были отмечены только на некоторых икринках через 72 часа после разрушения оболочки икринки вследствие бактериального лизиса. Зараженность икры составила 100,0%.
Максимальный эффект использования экстракта чаги получен при концентрации 25 мг/л. Развитие сапролегнии не происходило в течение всего времени опытов, а оболочка икринки сохраняла свою целостность. Вероятно, что помимо подавления грибной микрофлоры, экстракт чаги также ингибирует сапрофитные бактерии.
Таким образом, экстракт чаги оказывает положительное влияние на сохранность нативной икры золотой рыбки (Carassius auratus). Наибольший положительный эффект получен при использовании ЭЧ в концентрации 10 и 25 мг/л.
Список используемой литературы:
1. Бауер О.Н., Мусселиус В.А., Стрелков Ю.А. Болезни прудовых рыб М.: Колос, 1969. — 342 с.
2. Головина Н.А., Стрелков Ю.А., Воронин В.Н. и др. Ихтиопатология.- М.: Мир.-2003.- 448 с.
3. Грищенко Л.И., Акбаев М.Ш., Васильков Г.В. Болезни рыб и основы рыбоводства.-М.: Колос,-1999.- 456 с.
4. Бородин А.Л., Горбунов А.В., Никифоров-Никишин А.Л. Изменения микроэлементного состава хрусталика рыб в процессе развития катаракты // Вопросы рыболовства. 2007. Т. 8. № 1-29. С. 138-141.
5. Бородин А.Л., Горбунов А.В., Никифоров-Никишин А.Л. Изменение элементного состава хрусталика рыб под влиянием тяжелых металлов // Рыбное хозяйство. 2007. № 2. С. 92-93.
6. Schaperclaus W. Fischkrankheiten, Berlin, 1954. 120 с.
7. Березина, М.П. К анализу действия чаги на организм / М.П. Березина, М.В. Еременко, С.М. Андреева, П.А. Якимов, Е.А. Гусева// Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений. М.-Л.: Наука, 1961.- С. 166-189.
8. Гаврилов, А.С., Щеголев, А.А., Гусельникова, Е.В., Ларионов, Л.П., Бреднева, Н.Д. Адаптагенное действие препарата чаги // Хим. фарм. ж. - 2003. - Т. 37; № 2. - С. 54-56.
9. Бородин А.Л., Никишин А.Л., Горбунов А.В., Никишин Д.Л. Статистические характеристики процессов клеточной пролиферации эпителия хрусталика рыб. Митотическая активность эпителия // Рыбное хозяйство. 2013. № 4. С. 48-49.
© Кобиашвили Г.А. Савушкина С.И., 2016
УДК 5 574
Кобиашвили Гулия Александровна
доцент
ФГБОУ ВО МГУТУ им. КГ. Разумовского (ПКУ), г. Москва, РФ
E-mail: [email protected] Савушкина Светлана Ильинична доктор биол. наук, профессор ФГБОУ ВО МГУТУ им. КГ. Разумовского (ПКУ), г. Москва, РФ
E-mail: [email protected]
ПРИМЕНЕНИЕ ЭКСТРАКТА ЧАГИ (INONOTUS OBLIQUUS) В ПЕРИОД ИНКУБАЦИИ ИКРЫ
ЗОЛОТОЙ РЫБКИ (CARASSIUS AURATUS)
Аннотация
Представлены результаты антимикотического действия экстракта чаги (Inonotus obliquus) в концентрации от 5 до 25 мг/л на грибы рода сапролегния в период инкубации икры золотой рыбки (Carassius
_МЕЖДУНАРОДНЫЙ НАУЧНЫЙ ЖУРНАЛ «СИМВОЛ НАУКИ» №4/2016 ISSN 2410-700Х_
auratus). Максимальный терапевтический эффект получен при использовании экстракта чаги в концентрации 10мг/л.
Ключевые слова
Экстракт чаги, золотая рыбка, Инкубация икры, Подвижность спермиев
Паразитарные болезни рыб имеют широкое распространение в аквакультуре и сильно влияют на эффективность выращивания рыбы в хозяйствах [1, с. 75; 2, с. 20; 3, с. 17; 4, с. 138; 5, с. 93; 6, с. 27]. Значительный результат в борьбе с паразитарными болезнями рыб достигается благодаря профилактическим мерам обработки водоемов и противопаразитарным препаратам. Большой урон наносят рыбам заболевания, возбудителями которых являются грибы порядка Saprolegniales.
Сапролегниозу подвержены рыбы всех возрастных групп, но особенно тяжело болеет молодь. Кроме карповых, сапролегниозом тяжело болеют осетровые и лососевые, а также ракообразные. При заболевании на теле рыбы появляется белый ватообразный налет, чаще в хвостовой части. Смертность среди рыбы достигает 50% и более. Особенно тяжело проходит заболевание после зимовки рыбы в садках. Основными причинами распространения заболевания являются плохие условия содержания рыбы, травмы, ослабление иммунитета [7, с. 84; 9, с. 48].
Большой урон приносит сапролегниоз икры рыб (биссус) - микозная болезнь икры, характеризующаяся поражением ее сапролегниевыми грибами во время заводской инкубации. Заболевание вызывают грибы порядка Saprolegnialis (около 13 видов). Обычно доминирует вид Saprolegnia parasitika. Сапролегниоз проявляется в виде белого ватообразного налета на поверхности икры. Грибы поселяются на неоплодотворенной мертвой и травмированной икре. Разрастаясь, гифы обволакивают икринку со всех сторон. При скоплении заразного начала сапролегния переходит на живую икру.
Учитывая важность сохранения жизнестойкости эмбрионов рыб, целью исследований было изучение эффективности применения экстракта чаги (Inonotus obliquus) для лечения и профилактики сапролегнеоза икры золотой рыбки (Carassius auratus)
Материалы и методы исследования
Объектом исследования служила икра икра золотой рыбки (Carassius auratus) в эмбриональный период. Икру золотой рыбки получали от производителей после гормональной инъекции. В опыте использовали следующие концентрации экстракта чаги (ЭЧ) - 5, 10 и 25 мг/л. Исследования проводили на развивающейся икре в течение 72 часов. Оплодотворение проводили на предметном стекле, предварительно оценив жизнеспособность спермы по количеству подвижных сперматозоидов и времени их активной жизни [8, с. 15]. Чтобы исключить влияние разнокачественности производителей на результаты опыта, оплодотворение икры проводили смесью спермы от 5 самцов.
Результаты исследований
Оплодотворяемость икры золотой рыбки (Carassius auratus) колебалась в разных вариантах на уровне 60-80%, а в среднем составила 70,2%. Первые гифы грибов на оплодотворенной икре без добавки экстракта чаги (контроль) были отмечены через 18 часов (табл.1).
Таблица 1.
Эффективность использования ЭЧ на оплодотворенную икру золотой рыбки при сапролегниозе
Время опыта (час) Количество зараженных икринок, %
контроль Опыт: концентрация ЭЧ, мг/л
5 10 25
6 0 0 0 0
12 0 1 0 0 0
18 65±5 0 0 0
24 100 202±10 0 0
30 100 3 4±5 0 0
36 100 100 0 0
42 100 100 0 0
48 100 4 100 0 0
54 100 100 0 0
60 100 100 0 0
66 100 100 0 0
72 100 100 605±5 0
1 появление отдельных гифов
2 появление отдельных гифов
3 гифы покрывают всю поверхность икринки 4 образование спорангиев
5 появление отдельных гифов
Развитие колоний грибов происходило медленно. Вероятно, это обусловлено тем, что развивающаяся икра выделяет специфические метаболиты, задерживающие развитие сапролегнии. Тем не менее, четкой границы колоний грибов на погибших и живых икринках отмечено не было.
Повреждение с развивающимися эмбрионами в контроле произошло через 48 часов после начала опыта. Еще через 6 часов (54 часа) все икринки погибли и были покрыты плотным ватным покровом гифов.
Использование экстракта чаги 5мг/л дало следующие результаты. Отдельные гифы отмечены на оплодотворенных икринках через 30 часов. Повреждение развивающейся икры отмечено спустя 72 час опыта в количестве 20 % .
Применение экстракта чаги в концентрации 10 мг/л было наиболее эффективно. При этом, ЭЧ данной концентрации препятствовал образованию гифов грибов на оплодотворенной икре в течение всего периода опыта. Оплодотворенная икра успешно завершила свое развитие и через 72 часа началось вылупление личинок. Колонии сапролегнии на неоплодотворенных икринках также не развивались и не образовывали спорангиев.
При концентрации экстракта чаги 25мг/л развитие сапролегнии также подавлялось в течение всего периода опыта. Нами было отмечено, что данная концентрация не только подавляет рост гриба, но и задерживает вылупление личинок золотой рыбки, которое происходило только на четвертый день, что несколько превышало технологические нормы.
Свободные предличинки не имели каких- либо морфологических нарушений, что позволяет утверждать: экстракт чаги не токсичен для эмбрионов. Возможно, экстракт чаги проявляет антимитотическую активность на первых этапах дробления икринки, однако это положение требует дополнительных исследований.
Таким образом, результаты показали, что экстракт чаги (Inonotus obliquus) обладает выраженным антимикотическим действием на грибы рода сапролегния в концентрации от 5 до 25 мг/л. Для использования в практике рыбоводства наиболее эффективной концентрацией следует считать 10 мг/л, так как при этой концентрации достигнут максимальный терапевтический эффект без каких- либо вредных последствий для развивающейся икры.
Список используемой литературы:
1. Бауер О.Н., Мусселиус В.А., Стрелков Ю.А. Болезни прудовых рыб М.: Колос, 1969. - 342 с.
2. Головина Н.А., Стрелков Ю.А., Воронин В.Н. и др. Ихтиопатология.- М.: Мир. - 2003. - 448 с.
3. Грищенко Л.И., Акбаев М.Ш., Васильков Г.В. Болезни рыб и основы рыбоводства.-М.: Колос, - 1999.- 456 с.
4. Бородин А.Л., Горбунов А.В., Никифоров-Никишин А.Л. Изменения микроэлементного состава хрусталика рыб в процессе развития катаракты // Вопросы рыболовства. 2007. Т. 8. № 1-29. С. 138-141.
5. Бородин А.Л., Горбунов А.В., Никифоров-Никишин А.Л. Изменение элементного состава хрусталика рыб под влиянием тяжелых металлов // Рыбное хозяйство. 2007. № 2. С. 92-93.
6. Schaperclaus W. Fischkrankheiten, Berlin, 1954. 120 с.
7. Жукинский, В.Н. Влияние абиотических факторов на разнокачественность и жизнеспособность рыб в раннем онтогенезе. Агропромиздат, 1986.- 221с.
8. Савушкина С.И. Методические рекомендации по криоконсервации спермы осетровых рыб. М.: РАСХН.-2007. 65 с.
9. Бородин А.Л., Никишин А.Л., Горбунов А.В., Никишин Д.Л. Статистические характеристики процессов клеточной пролиферации эпителия хрусталика рыб. Митотическая активность эпителия // Рыбное хозяйство. 2013. № 4. С. 48-49.
© Кобиашвили Г.А., Савушкина С.И., 2016
