CC BY
31
УДК 636.8.045
Ключевые слова: перелом, бедренная кость, кошки Key words: fracture, tibia bone, cats
'Закирова Е. Ю., 2Сергеев М. А., 2Амиров Д. Р., 2Шагеева А. Р., 2Журавлева М. Н., 2Ризванов А. А.
ПРИМЕНЕНИЕ АЛЛОГЕННОГО ОСТЕПЛАСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА «ЛИОПЛАСТ» И АЛЛОГЕННЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
В ВЕТЕРИНАРНОЙ ТРАВМАТОЛОГИИ
THE USE OF ALLOGENIC OSTEOPLASTIC MATERIAL «LIOPLAST» AND ALLOGENIC MESENCHYMAL STROMAL CELLS IN VETERINARY TRAUMATOLOGY
1 Ф^ОУ ВО «Казанский (Приволжский) государственный университет», Институт фундаментальной медицины и биологии Адрес: 420008, Россия, г. Казань, ул. Кремлевская,18 Federal State Autonomous Educational Institution of Higher Education «Kazan (Volga Region) Federal University», Institute of Fundamental Medicine and Biology Address: 420008, Russia, Kazan, Kremlevskaya str., 18 2 ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины» Адрес: 420074, Россия, г. Казань, Сибирский тракт, 34 Kazan State Academy of Veterinary Medicine, Federal State Budgetary Institution of Higher Education Address: 420074, Russian federation, Kazan, Sibirskiy tract, 35
Закирова Елена Юрьевна, к. б. н., старший научный сотрудник. E-mail: lenahamzina@yandex.ru Zakirova Elena Y., PhD in Biological Sciences, Senior Researcher. E-mail: lenahamzina@yandex.ru Сергеев Михаил Анатольевич, старший преподаватель кафедры акушерства и патологии.
E-mail:sergeev_m81@mail.ru Sergeev Michail A., PhD in Biological Sciences, Senior Researcher of the Department of Obstetrics and Pathology.
E-mail: sergeev_m81@mail.ru Амиров Дамир Рауфович, к. в. н., доцент кафедры терапии и клинической диагностики с рентгенологией.
E-mail: adam_rau@mail.ru
Amirov Damir R., PhD in Biological Sciences, Associate Professor of the Department of Therapy and Radiology.
E-mail: adam_rau@mail.ru
Шагеева Альфия Рашитовна, к. в. н., ассистент кафедры терапии и клинической диагностики с рентгенологией.
E-mail: shageevanora@mail.ru Shageeva Alfia R., PhD in Veterinary Sciences, Assistant of the Department of Therapy and Radiology.
E-mail: shageevanora@mail.ru Журавлева Маргарита Николаевна, младший научный сотрудник. E-mail: k.i.t.t.1807@gmail.com Zhuravleva Margarita N., Junior Researcher. E-mail: k.i.t.t.1807@gmail Ризванов Альберт Анатольевич, д. б. н., заместитель руководителя САЕ «Трансляционная 7П медицина», г. н. с., профессор кафедры генетики, заведующий отделом поисковых исследований НОЦ фармацевтики. E-mail:
rizvanov@gmail.com
Rizvanov Albert A., Doctor of Biological Science, Vice-Director of Strategic Academic Unit "Translational 7P Medicine", Chief Researcher, Professor of the Department of Genetics, Head of the Department of Exploratory Research in Scientific and Educational Pharmaceutical Center. E-mail: rizvanov@gmail.com
Аннотация. При поперечном диафизарном переломе большеберцовой и малоберцовой костей голени у кошек ин-трамедуллярное проведение спицы Киршнера в костномозговой канал большеберцовой кости обеспечивает более надежную фиксацию отломков по сравнению с чрезкостным остеосинтезом и внешней фиксацией спиц самоотвердевающей пластмассой. Однако опорная функция конечности при интрамедуллярном введении спицы восстанавливается на более поздних сроках. Мы предполагаем, что применение материала «Лиопласт» в качестве носителя для мезенхимальных мультипотентных стволовых клеток при замещении дефекта костной ткани во время репозиции костей у кошек вызывает воспалительную реакцию с отторжением материала и образование свищей (в 50% случаев по нашим данным). Следовательно, дальнейшее применение материала «Лиопласт» для восстановления дефектов костной ткани у кошек требует дополнительных исследований. В связи с осложнениями, возникшими в послеоперационный период, нам не удалось оценить влияние аллогенных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток на процессы остеорегенерации у кошек.
Summary. Intramedullary conducting of Kirshner needle into medullar canal of the tibia provides a more reliable fixation of bone fragments compared with perosseous osteosynthesis and external needlefixation of self-hardening plastic, associating with transverse diaphyseal fracture of tibia and fibula tibia of cats. However, the support function of the limb is restoring at later time in case of using intramedullary introduction of the needle. We assume that the application of the material "Lioplast" as a carrier for mesenchymal multipotent stem cells causes inflammation with the rejection of the material and the formation offistulas (50% of cases according to our data) in the replacement of bone tissue defect during reposition of cat bones. Therefore, further using of the material "Lioplast" requires further research for restoring bone defects of cats. In connection with difficulties during of the postoperative period, we were unable to assess the effect of allogenic multipotent mesenchymal stromal cells at the processes of bone regeneration of cats.
Введение
Восстановительная хирургия повреждений длинных трубчатых костей у животных -одна из актуальных проблем ветеринарной травматологии. Особую значимость ее решение приобретает в связи с повышением интенсивности жизни и дальнейшей урбанизацией, которая приводит не только к увеличению количества травм, но и к ухудшению их качества. С проблемой переломов конечностей чаще всего сталкиваются домашние животные небольшого размера: декоративные собаки, кошки. Чаще всего у представителей семейства кошачьих встречаются переломы конечностей (около половины случаев), оставшаяся половина - это переломы таза, хвоста, позвоночника. Реже всего у кошек встречаются переломы костей черепа [1, 2].
Нами был опробован метод лечения переломов трубчатых костей с дефектом костной ткани у кошек с применением аллогенного остеопластического материала «Лиопласт» (ООО «Лиоселл», Россия) в качестве носителя для мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток (ММСК) и имплантата, замещающего дефективную костную ткань. Аллоген-ные ММСК адипогенного происхождения in vivo использовались в качестве альтернативы аутогенным ММСК для стимуляции процессов регенерации. Костные отломки фиксировались двумя различными способами.
Материалы и методы
Донорские ММСК получены из подкожно-жировой клетчатки кошки по описанной ранее методике [3].
Объектом исследования стали четыре домашние беспородные кошки - самки в возрасте от 3-х до 5-ти лет. Животные были поделены на две группы (n=2) в зависимости от способа фиксации костных отломков.
Диагноз ставили на основании данных анамнеза, клинических признаков, а также рентгено-
графического исследования, которое выполняли в боковой и прямой проекции на рентгеновском аппарате «Арман 9Л5» (Россия) с рентгенографической пленкой «Kodak» (США).
Общую потенциированную инъекционную анестезию начинали с премедикации за 20-30 минут до общей анестезии путем подкожного введения 0,1% раствора атропина сульфата (ОАО «ДАЛЬХИМФАРМ») в дозе 0,05 мл/кг массы тела. Затем за 30 минут до общей анестезии подкожно вводили кетофен («Merial», Франция) в дозе 0,2 мл/кг массы тела. За 10-15 минут до общей анестезии внутримышечно вводили 2% раствор ксилазина гидрохлорида («Alfasan International B.V», Нидерланды) в дозе 0,2 мл/кг массы тела. Общая анестезия достигалась путем внутривенного введенияраствораЗо-летил («Virbac Sante Animale», Франция) в дозе 2 мг/кг массы тела. Для продления состояния общей анестезии осуществлялось повторное болюсное внутривенное введение Золетила в дозе 1 мг/кг.
Оперативное вмешательство проводили с соблюдением правил асептики и антисептики. Всем животным был проведен медиальный доступ к костям голени левой тазовой конечности, произведена открытая репозиция отломков. Между отломками в момент репозиции для замещения травматического дефекта костной ткани была помещена смесь 3 млн ММСК с крошкой материала «Лиопласт», склеивающим компонентом был фибриновый клей Tissucol® Kit (BAXTER AG, Austria).
Первой группе животных с целью фиксации отломков был выполнен интрамедулляр-ный металлостеосинтез спицами Киршне-ра диаметром 2 мм. Спица была проведена в костномозговом канале большеберцовой кости. Второй группе проведен чрезкост-ный металлоостеосинтез с проведением четырех-пяти спиц Киршнера диаметром 1 мм через длинник большеберцовой кости, и осуществлена внешняя фиксация концов
47
отломков самоотвердевающей пластмассой «Протакрил-М» (АТ «Стома», Россия).
После оперативного вмешательства с целью профилактики хирургической инфекции 1 раз в сутки в течение 7-ми дней внутримышечно вводили цефтриаксон (ОАО «Синтез», Россия) в дозе 100 мг/кг массы тела. Для устранения болевого синдрома и в качестве противовоспалительной терапии использовали подкожные инъекции кетофена («МЕРИ-АЛ», Франция) в дозе 0,2 мл/кг массы тела 1 раз в сутки в течение трех-пяти дней (в зависимости от общего состояния животного и признаков проявления болевого синдрома). Спицы удаляли через четыре недели.
За животными велось ежедневное наблюдение. Оценивали общее состояние и скорость восстановления функции травмированной конечности.
После проведения остеосинтеза рентгенологическое исследование выполняли еженедельно в течение двух месяцев и через полгода (для оценки скорости регенерации костной ткани в зоне перелома).
Кровь у животных брали из наружной яремной вены в вакуумные пробирки до остеосинтеза, а также спустя 24 часа и далее -еженедельно в течение полутора месяцев. В сыворотке крови определяли концентрацию общего белка, общего кальция, неорганического фосфора, а также активность щелочной фосфатазы (ЩФ). Исследования крови проводили на биохимическом анализаторе «Junior Vet 18» (Diatron, Австрия).
Результаты и обсуждение
Выделенные аллогенные ММСК адгези-ровались на культуральном пластике и имели характерную фибробластоподобную форму.
48
Все кошки, включенные в исследование, при первичном осмотре имели следующие клинические признаки: общее угнетение, отказ от корма, полное нарушение функции поврежденной конечности. При пальпации данной конечности была выражена болезненность, костная крепитация, подвижность вне сустава, отек мягких тканей. На рентгенограммах были обнаружены полные диа-физарные переломы костей голени со смещением и дефектом костной ткани.
Спустя двое суток после оперативного вмешательства общее состояние животных улучшалось, появлялся аппетит. Кошки начинали активно передвигаться.
Результаты первой группы
У животных этой группы был поставлен диагноз: «полный диафизарный перелом костей голени со смещением и дефектом костной ткани» (рис.1 А). Кошки не опирались на травмированную конечность. Постепенно включать конечность в опорную функцию кошки этой группы начинали лишь через две недели, при этом присутствовала хромота, исчезновение которой отмечалось только к 30-му дню после операции.
На 7-е сутки после оперативного вмешательства на рентгенограмме вокруг зоны перелома визуализировалась слабая перио-стальная реакция (рис.1 В).
На 14-20 день после операции на медиальной поверхности голени у всех животных данной группы (п=2) сформировались свищевые ходы, которые самопроизвольно закрылись в течение месяца.
Через 35 дней линия перелома на рентгеновском снимке визуализировалась слабо, однако была хорошо выражена периосталь-
Рис. 1. Рентгеновские снимки травмированной лапы кошки первой группы в динамике: А) при поступлении; В) через 7 суток; С) через 35 дней; D) через 60 дней; Е) через 6 месяцев.
Рис. 2. Рентгеновские снимки травмированной лапы кошек второй группы в динамике: А) при поступлении; В) после операции; С) через 7 дней; D) зона перелома через 35 дней у кошки без смещения костных отломков; Е) выраженная консолидация отломков кости у пациента со смещением костных отломков; F) выраженная консолидация отломков кости у пациента без смещения костных отломков через 6 месяцев.
ная реакция по всему длиннику и утолщение кости, а костный дефект был заполнен пери-остальной костной мозолью (рис.1 С).
Через 60 дней на рентгеновском снимке была хорошо выражена консолидация отломков, визуализировалась эндостальная мозоль по задней поверхности диафиза (рис.1 Б).
Через 6 месяцев произошла полная консолидация отломков, зона перелома на рентгеновском снимке практически не визуализируется (рис.1 Е).
Результаты второй группы
У второй группы животных также был поставлен диагноз: «полный диафизарный перелом костей голени со смещением и дефектом костной ткани». Для фиксации отломков кости был установлен аппарат внешней фиксации (рис. 2 А, В).
Кошки этой группы опирались на конечность уже через 24 часа после остеосинте-за, однако у них присутствовала хромота умеренной степени. У одного животного на 7-й день после операции произошло незначительное смещение отломков по го-
ризонтальной плоскости на (2-3) мм. В тот же день этому животному, не удаляя аппарат внешней фиксации, под общим наркозом была интрамедуллярно поставлена спица Киршнера (2 мм). Рентгенологическое исследование показало, что периостальная реакция вокруг зоны перелома выражена слабее, чем у кошек первой группы на этом же сроке (рис.2 С).
Через 35 дней на рентгеновском снимке линия перелома практически не визуализировалась, периостальная реакция по длин-нику в области соприкосновения отломков выражена умеренно. Отмечалось незначительное утолщение кости, а костный дефект был заполнен периостальной костной мозолью (рис. 2 Б).
Через 60 дней на рентгенограмме визуализировалась выраженная консолидация отломков, а также формирование периостальной и эндоостальной костной мозоли (рис. 2 Е, Б).
Через 6 месяцев произошла консолидация отломков (рис. 2 G).
Изменение биохимических показателей крови у кошек представлено в таблице 1.
Таблица 1.
Изменения биохимических показателей сыворотки крови кошек
Показатели До операции После остеосинтеза
24 ч. 7 дн. 14 дн. 21 дн. 28 дн. 35 дн. 42 дн.
Группы кошек 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2
Общий белок, г/л 67 59 66,5 59 69,7 64 69,5 65,1 69,5 77,5 69,5 77,5 80,5 85 80,5 81
Щелочная фосфатаза, ед/л 41,5 25 44 56 47 57 47,5 58,5 49 68,5 55,5 49 89,5 48 45 44
Общий кальций, ммоль/л 2,64 2,42 2,29 2,25 2,26 2,25 2,15 2,23 2,05 2,16 2,0 2,14 2,07 2,0 2,03 2,12
Неорганический фосфор, ммоль/л 1,75 1,96 1,35 1,67 1,29 1,67 1,12 1,05 1,11 1,47 1,23 1,56 1,31 1,66 1,25 1,63
Переломы длинных костей, сопровождающиеся дефектом костной ткани, относятся к категории наиболее тяжелых и сложных повреждений. Лечение такого перелома требует остеосинтеза с использованием имплантатов. Для получения хороших результатов лечения и с целью предотвращения нарушения регенеративных процессов в поврежденном участке большое значение имеют не только репозиция и стабилизация фрагментов, но и восполнение травматического дефекта. Общепринятым методом лечения травматических дефектов является пластика аутотрансплантантом. Однако, забор аутокости связан с дополнительной, иногда значительной, травмой и кровопотерей, а также с недостатком пластического материала. Отрицательные стороны костной аутопластики побуждают к поиску новых методов костной пластики и заменителей костных трансплантатов. Основным направлением при этом является разработка и внедрение в практику материалов с остеогенными и остеоиндук-тивными свойствами, в состав которых входят стромальные и остеогенные клетки. Имеются экспериментально-клинические исследования, указывающие на то, что использование алло-генных взрослых клеток-предшественников остеогенеза в достаточном количестве и в комбинации с подходящей матрицей может быть более результативным, чем применение традиционной аутологичной пересадки костной ткани. Это обстоятельство является основанием для более активного изучения нового поколения костно-пластического материала и внедрения его в практику [4,5].
Остеосинтез является в абсолютном большинстве случаев более предпочтительным методом лечения переломов у домашних животных, а часто - единственным способом иммобилизации (обеспечения неподвижности костных отломков, необходимой для успешного сращения перелома). Главной задачей операции является обеспечение стабильной фиксации костных отломков друг относительно друга в анатомически верном положении и сохранение неподвижности зоны перелома до наступления полного сращения.
Существуют разные методы фиксации костных отломков. Введение внутрикостного фиксатора при использовании интрамедуллярного
50
остеосинтеза нарушает систему кровообращения медуллярного канала, за счёт которой снабжается кровью основной объём компактного вещества. Остеоиндуктивные потенции регенераторного процесса ослабляются. Это приводит к увеличению сроков консолидации отломков по сравнению с накостным остеосин-тезом, а также увеличивает опасность послеоперационных осложнений. Однако, в связи с особенностями техники исполнения, интра-медуллярный остеосинтез, более щадящий по отношению к окружающим мягким тканям. Кроме того, для удаления фиксатора требуется дополнительная операция.
Остеосинтез спицами и полимером похож на фиксацию аппаратом Илизарова, но вместо колец в нем используют быстро отвердевающую пластмассу, которой соединяют концы спиц. Этот метод подходит исключительно самым маленьким собакам и кошкам, весьма прост в исполнении. Основными плюсами этого метода являются простая техника наложения, занимающая 10-20 минут, низкая себестоимость при высокой надежности конструкции и прочной фиксации отломков. Кроме того, акриловому полимеру можно придать любую форму, что особенно важно при сложно сформированных костях. Удаление фиксатора проходит без наркоза. При данном виде остеосинтеза сохраняется костный мозг, что создаёт благоприятные условия, инициирующие образование интер-медиарной костной мозоли и сращение перелома по первичному типу [6].
Выбор нами способа регенерации дефектов трубчатых костей у кошек был основан на том, что остеопластический материал «Лиопласт» является деминерализованной костной тканью, получаемой из зрелой костной ткани человека. Экспериментальными работами показано положительное влияние пластических материалов серии «Лиопласт» на регенерацию костной ткани на примере крыс [7]. Также показано стимулирующее действие материала «Лиопласт» на процессы регенерации в костной ткани при экспериментальном хроническом остеомиелите у кроликов [8]. Ранее нами было показано стимулирующее влияние трансплантации аутогенных ММСК адипогенного происхождения с использованием «fibrin glue Tissucol® Kit»
на процессы остеорегенерации при оперативном лечении ложного сустава большеберцо-вой кости и аллогенных ММСК c никелид-ти-тановыми гранулами в качестве носителя на процесс регенерации свища верхней челюсти у собаки [9, 10]. Согласно имеющимся литературным данным, биологические эффекты аутогенных и аллогенных ММСК in vivo практически не отличаются [11], поэтому для предотвращения дополнительного травмирования животного во время забора жировой ткани и сокращения сроков ожидания операции нами были использованы имеющиеся донорские ММСК.
В нашем случае при интрамедуллярном остеосинтезе, как и описывается в литературе, включение конечности в опорную функцию произошло на более позднем сроке по сравнению с внешней фиксацией. Однако на сроке 14-20 дней произошло образование свищей. Их появление мы связываем с отторжением материала «Лиопласт», а не с использованием аллогенных ММСК, т.к. известно, что ММСК обладают иммуномоду-лирующим, а именно иммуносупрессивным, эффектом при введении в организм [12].
У кошек второй группы полная функциональная нагрузка оперированной конечности при постановке аппарата внешней фиксации ещё до полного сращения привело к смещению отломков кости у одного животного. Таким образом, вместо того, чтобы кошке максимально быстро пройти реабилитационный период и избежать, в отличие от внутрикостно-го остеосинтеза, постоперационных осложнений, таких как контрактура и атрофия мышц, в послеоперационный период мы получили другое осложнение. Развитию этого осложнения возможно способствовала ненадежная фиксация отломков и раннее включение конечности в опорную функцию, а, возможно, материал «Лиопласт» оказывал отрицательное воздействие на процессы остеорегенерации. Об этом говорят данные рентгенологического исследования: периостальная реакция вокруг зоны перелома была выражена слабее, чем у кошек первой группы на этом же сроке. Следовательно, даже при хорошей фиксации отломков кости (у второй кошки второй группы) материал «Лиопласт» тормозил процессы образования периостальной и эндостальной мо-
золи, появляющейся позже. Эти мозоли сами по себе не свидетельствуют о сращении отломков. Костные мозоли, в основном периосталь-ные, осуществляют лишь фиксацию отломков, необходимую для процесса сращения. Фиксация отломков важна не только потому, что она обеспечивает состояние покоя, необходимое для процесса регенерации кости, но и потому, что при отсутствии фиксации подвижность отломков обусловливает постоянную травмати-зацию регенерата [13].
Несмотря на все возникшие осложнения, у всех кошек к 6-ти месяцам произошла консолидация отломков кости. Однако, у кошек второй группы более четко, чем у животных первой группы, на рентгеновском снимке визуализируется зона перелома и сохраняется периостальная реакция по задней поверхности диафиза. Развитие избыточной пери-остальной реакции происходит при нестабильной фиксации отломков кости. При этом сроки полной консолидации перелома значительно увеличиваются [13].
Согласно литературным данным, по изменению активности ЩФ можно косвенно судить об активности регенеративных процессов в костной ткани у кошек, т. к. у этого вида животных не отмечается повышение активности фермента при других патологиях. У кошек даже слабое повышение активности ЩФ следует рассматривать как значительное [14]. В данном случае мы считаем, что увеличение активности ЩФ в послеоперационный период связано с повышением активности остеобластов. Однако концентрация общего кальция (2-2,88 ммоль/л) и неорганического фосфора (0,97-1,97 ммоль/л) у кошек на всех сроках исследований не превышала физиологическую норму, что свидетельствует о физиологической регенерации костной ткани в зоне перелома без преобладания остеолитических процессов, т.к. в противном случае концентрация кальция в крови значительно возрастает (табл. 1). Значение концентрации общего белка крови за весь период наблюдения колебалось в пределах физиологической нормы.
Заключение
Полученные результаты позволяют сделать вывод о том, что при поперечном
51
диафизарном переломе большеберцовой и малоберцовой костей голени у кошек ин-трамедуллярное внедрение спицы Киршнера в костномозговой канал большеберцовой кости обеспечивает более надежную фиксацию отломков по сравнению с чрезкостным остеосинтезом и внешней фиксацией спиц самоотвердевающей пластмассой. Однако опорная функция конечности при интраме-дуллярном введении спицы восстанавливается на более поздних сроках.
Мы предполагаем, что применение материала «Лиопласт» в качестве носителя для ММСК при замещении дефекта костной ткани во время репозиции костей у кошек вызывает воспалительную реакцию с отторжением материала и образование свищей (в 50% случаев по нашим данным). Следовательно, дальнейшее применение материала «Лиопласт» для восстановления дефектов костной ткани у кошек требует дополнительных исследований.
В связи с возникшими в послеоперационный период осложнениями нам не удалось оценить влияние аллогенных ММСК на процессы остеорегенерации у кошек.
Благодарности
Работа выполнена в рамках программы повышения конкурентоспособности Казанского федерального университета и субсидии, выделенной Казанскому федеральному университету для выполнения государственного задания в сфере научной деятельности. Работа частично выполнена на оборудовании Междисциплинарного центра коллективного пользования Казанского федерального университета при финансовой поддержке государства в лице Минобрнауки России (ID RFMEFI59414Х0003) и Научно-образовательного центра фармацевтики К(П)ФУ.
Список литературы
1. Mulherin, B. L. Retrospective evaluation of canine and feline maxillomandibular trauma cases. A comparison of signalment with non-maxillomandibular traumatic injuries (2003-2012) [Текст]/ B. L. Mulherin, C. J. Snyder, J. W. Soukup, S. Hetzel // Vet. Comp. Orthop. Traumatol., 2014. - 27. - №3. - Р. 192-197.
2. Vnuk, D. Feline high-rise syndrome: 119 cases (1998-2001) [Текст] / D. Vnuk, B. Pirkic, D. Maticic, B. Radisic, M. Stejskal, T. Babic, M. Kreszinger, N. Lemo // J. Feline Med. Surg., 2004. - 6. - №5. - Р. 305-312.
3. Zakirova, E. Transplantation of allogeneic mesenchymal stromal cell for treating corneal ulcers in cats [Текст] / E. Zakirova, A. Valeeva, R. Faizullina, R. Akhmetshina, L. Nefedovskaya, A. Rizvanov // Gens&cells, 2015. - 10.- №3. - Р. 49-53.
4. Швец, А. Лечение переломов длинных костей с костным дефектом [Текст] / А. Швец, В. Ивченко, А. Самойленко, Д. Ивченко // «ТРАВМА», 2011. - Т. 12.
- С. 120-126.
5. Markoski, М. Advances in the Use of Stem Cells in Veterinary Medicine: From Basic Research to Clinical Practice [Текст] / М. Markoski // Scientifica, 2016.
6. Петровская, Н. Чрескостный остеосинтез при переломах костей предплечья у декоративных пород собак [Текст] / Н. Петровская, А. Еманов, М. Степанов // Ветеринарная клиника, 2006. - №1. - С. 26-32.
7.Белозерцева, Е. А. Механизмы рассасывания биоимплантатов серии «Лиопласт» и их влияние на регенераторные процессы в опорных тканях реципиентов : дис. ... канд. мед. наук : 14.00.15 [Текст] / Белозерцева Екатерина Александровна. - Самара, 2006. - 240 с.
8.Ладонин, С. Экспериментальное обоснование использования аллогенного деминерализованного костного имплантата в комплексном лечении хронического остеомиелита [Текст] / С. Ладонин, Е. А. Бе-лозерцева // Морфологические ведомости, 2011. - №1.
- С. 101-107.
9. Zakirova, Е. Isolation, analysis and application of authogenic adipose derived multipotential mesenchymal stromal cells from dog for therapy pseudoarthrosis of tibial bone [Текст] / E. Zakirova, M. Zhuravleva, R. Masgutov, R. Usmanov, A. Rizvanov // Gens&cells, 2014. - IX. - №3. - Р. 93-95.
10. Zakirova, Е. Case of applying allogenic mesenchymal stem cells of adipogenic origin in veterinary dentistry [Текст] / Е. Zakirova, D. Azizova, A. Rizvanov, R. Khafizov // J. of An. and Vet. Advances., 2015. - 14.
- №5. - № 1-4.
11. Dong-In, Jung. A comparison of autologous and allogenic bone marrow-derived mesenchymal stem cell transplantation in canine spinal cord injury [Текст] / Jung Dong-In, Ha Jeongim, Kang Byeong-Teck, Kim Ju-Won, Quan Fu-Shi, Lee Jong-Hwan, Woo Eung-Je, Hee-Myung // Park J. of the neurological sciences, 2009. - 285. - №1-2.
- Р. 67-77.
12. Yur-Ren, Kuo. Mesenchymal Stem Cells as Immunomodulators in a Vascularized Composite Allotransplantation [Текст] / Kuo Yur-Ren, Chen Chien-Chang, Goto Shigeru, Wei Pao-Yuan Lin,Fu-Chan, Chen Chao-Long // Clinical and Developmental Immunology, 2012. - №1. - Р. 20-22.
13.Umarov, F. Patterns of fracture repair [Текст] / F. Umarov // Украшський морфолопчний альманах, 2010. - Т. 8. - №1. - С. 137-139.
14. Ваден, Ш. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям у собак и кошек [Текст] / Ш. Ваден, Д. Нолл, Ф. Смит, Л. Тил-лей. - Москва: Аквариум, 2013. - С. 56.
52
