CC BY
59
ПРЕПАРАТЫ ЛЕЧЕБНЫХ АЛЛЕРГЕНОВ:
ПРОБЛЕМЫ И ПУТИ ПОВЫШЕНИЯ КАЧЕСТВА, БЕЗОПАСНОСТИ И ЭФФЕКТИВНОСТИ
А.А. Солдатов, Н.В. Медуницын, Ж.И. Авдеева,
В.П. Бондарев, А.Н. Миронов
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва Soldatov@expmed.ru
Резюме: Аналитический обзор основных международных нормативных требований и рекомендаций, которые касаются оценки качества, безопасности и эффективности лечебных аллергенов, используемых для специфической иммунотерапии и диагностики аллергических заболеваний. Начиная с 2009 года в ЕМА были утверждены обновленные руководства для оценки качества и проведения доклинических и клинических испытаний аллергенных препаратов, введена новая редакция фармстатьи в Европейскую Фармакопею. Руководство для оценки качества данных препаратов дополнено новыми разделами: рекомбинантные аллергены, «гомологичные ряды (группы)», смесь аллергенов и рекомбинантных аллергенов, контрольные сыворотки и т.п. Методы оценки аллергенов по показателям качества, специфической активности и при стандартизации аллергенов должны проводиться при сопоставлении с международным стандартом, отсутствие международного стандарта позволяет разработчикам создавать свой внутрипроизводственный стандарт. В рекомендации для проведения клинических испытаний включены указания для изучения аллергенов, которые входят в состав «гомологичного ряда». Не допускается проведение 1-й фазы исследований на здоровых добровольцах и включение детей в одно исследование с взрослыми.
Ключевые слова: экстракты аллергенов, рекомбинантные аллергены, смесь аллергенов, аллергоиды, гомологичные ряды (группы), специфическая иммунотерапия, оценка качества.
THERAPEUTIC ALLERGENS:
PROBLEMS AND WAYS TO IMPROVE QUALITY, SAFETY AND EFFICACY A.A. Soldatov, N.V. Medunitsyn, J.I. Avdeeva, V.P. Bondarev, A.N. Mironov
Federal State Budgetary Institution «Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products» of the Ministry of Health of the Russian Federation, Moscow Abstract: The present analytical review highlights basic international regulatory requirements and recommendations relating to the quality, safety and efficacy evaluation of therapeutic allergens used for specific immunotherapy and diagnosis of allergic diseases. Since 2009 EMA has approved updated guidelines for quality evaluation and pre-clinical and clinical trials of allergen preparations. EMA has also introduced a revised monograph into the European Pharmacopoeia. New chapters have been added to the Guideline for quality evaluation of allergen preparations such as: recombinant allergens, «homologous series (groups)», a combination of allergens and recombinant allergens, control sera, etc. Methods of allergen evaluation in terms of quality, specific activity and when performing standardization should be carried out by comparing to the international standard. If there is no international standard existing, developers are allowed to elaborate their own manufacturing standard. The recommendations for conducting clinical trials now comprise the indications for studying certain allergens which are a part of «homologous series». It is not allowed to conduct Phase 1 clinical trials in healthy volunteers and to include children in the same clinical trials with adults.
Key words: allergen extracts, recombinant allergens, combination of allergens, allergoid, homologous series (groups), specific immunotherapy, quality evaluation.
Аллергические болезни являются наиболее распространенными заболеваниями, по данным немецких специалистов в мире аллергией страдает около 300 миллионов человек, в Германии 12% населения болеют аллергическим ринитом, 10% бронхиальной астмой астмой и около 9% контактным дерматитом. В основе развития данной патологии лежит I тип аллергических реакций, при котором развивается П2 путь иммунного ответа, сопровождающийся гиперпродукцией специфических 1§Е антител. Наиболее
часто причиной развития заболевания являются аллергены: пыльца растений, домашняя и другие виды пыли, клещи, аллергены животных (эпидермис, перхоть и волосы), яды насекомых, продукты питания и др.
В 2011 году было отмечено 100-летие применения основного патогенетического метода лечения аллергических заболеваний — специфической иммунотерапии (СИТ), в основе которого лежит подкожное введение постепенно возрастающих доз причинно-
ОБЗОРНЫЕ И ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ
ОБЗОРНЫЕ И ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ
значимых аллергенов. Проведение СИТ позволяет не только ингибировать продукцию специфических IgE и снизить (исключить) основные симптомы аллергии, но и «переключить» иммунный ответ с Th2 на Th1 путь. Для проведения СИТ используются водносолевые немодифицированные, модифицированные и конъюгированные экстракты, а в последние годы были разработаны аллергены, процесс получения которых основан на технологии рекомбинантной ДНК.
К 2000 году ВОЗ, ЕМА и FDA были подготовлены и утверждены основные документы и рекомендации, которые регламентировали оценку качества, проведение доклинических и клинических испытаний аллергенных экстрактов [1, 2]. В дальнейшем появились новые данные о механизмах развития аллергии, разработаны новые технологические процессы получения аллергенов и обоснованы новые методы СИТ (например, разработаны методы получения аллергенов на основе рекомбинантной ДНК, появились новые препараты для проведения пероральной СИТ и т.п.). Это потребовало серьезного пересмотра и дополнения нормативных требований и рекомендаций, регламентирующих процесс получения и оценку качества аллергенных препаратов. В 2007 году была начата работа по пересмотру и дополнению нормативных требований и рекомендаций для оценки качества и проведения доклинических и клинических исследований аллергенных препаратов. В ЕМА были подготовлены два документа — один для оценки качества, а второй для проведения доклинических и клинических исследований аллергенных экстрактов, параллельно с этим в 2010 году была пересмотрена фармстатья в Европейской фармакопее.
Наиболее распространенным методом лечения аллергии в нашей стране является СИТ с применением широкого спектра аллергенов. Основными препаратами для лечения и диагностики аллергии в нашей стране являются водно-солевые экстракты из материалов природного происхождения. В Ставропольском НИИВС была разработана отечественная технология одноэтапной модификации пыльцевых экстрактов формальдегидом для получения аллергоидов и налажен их выпуск [3]. Получены и реализуются первые отечественные рекомбинантные препараты (например, рекомбинантный основной аллерген пыльцы березы rBet v1, предназначенный для диагностики в кожных тестах, производства холдинг «Алкор Био»). Среди последних отечественных лечебных препаратов следует выделить препараты, разработанные в институте иммунологии ФМБА России, которые представляют собой конъюгированные с полиокси-донием аллергоиды из пыльцы растений [4]. В нашей стране фармстатья на аллергенные препараты пока отсутствует, однако уже разработана и будет включена в следующее издание отечественной Фармакопеи. В целом, основные проблемы, касающиеся безопасности и эффективности аллергенных препаратов,
которые возникают у отечественных разработчиков и аллергологов, те же самые, с которыми сталкиваются зарубежные специалисты [3-6].
ГОМОЛОГИЧНЫЕ РЯДЫ (ГРУППЫ)
В обновленном руководстве ЕМА не только дополнены и расширены разделы предыдущих документов, но и включены новые разделы: смесь аллергенов, сопоставимость при внесении изменений в производственный процесс, гомологичные ряды (группы), рекомбинантные аллергены и требования для контрольных сывороток [7].
Введение «принципа гомологичных рядов (групп)» связано с тем, что пыльцевые экстракты и смеси экстрактов имеют не один, а несколько аллергенов, причем аллергены одного вида растений обладают высокой перекрестной реактивностью с аллергенами других родственно близких видов растений, что затрудняет идентификацию и характеристику всех аллергенов, которые содержат пыльцевые экстракты. Прежнее деление пыльцевых аллергенов основывалось на таксономическом подходе, согласно которому выделялись следующие большие группы пыльцы растений: голосеменные, покрытосеменные однодольные и покрытосеменные двудольные, последние соответствуют пыльце злаковых трав и деревьев. Это позволяло результаты изучения аллергенов внутри таксономической группы широко экстраполировать на представителей данной группы.
А.Р. Лоренц с соавт. [8] провели обширный анализ литературы, посвященной перекрестной реактивности и гомологии аллергенов (пыльца, клещи, яды насекомых, перхоть, волосы и эпидермис животных и др.), который позволил выявить основные группы аллергенов, которые обладают достаточно высокой перекрестной реактивностью, что позволяет их объединить в «гомологичные ряды (группы)». Проведенные исследования позволили научно обосновать требования для составления гомологичных рядов (группы) аллергенных экстрактов и определить состав некоторых групп (табл. 1).
В результате проведенной работы внутри таксономических групп были выделены «гомологичные ряды», что, с одной стороны ограничило экстраполяцию по многим параметрам, которые предусматривались в предыдущих документах внутри таксономической группы. С другой стороны, несмотря на ужесточение требований к качеству аллергенов, расширило возможности экстраполяции изученных параметров внутри «гомологичного ряда (группы)».
Гомологичный ряд (группа) создается путем включения в нее экстрактов аллергенов различных видов, родов или семейств, которые применяются в клинике при соблюдении следующих условий:
■ экстракты аллергенов должны иметь сходные физико-химические и биологические свойства исходного материала;
Таблица 1
ПРИМЕРЫ ГОМОЛОГИЧНЫХ РЯДОВ (ГРУПП), РЕКОМЕНДОВАННЫЕ ЕМА [7, 8]
Гомологичные ряды (группы)
п ыльца деревье і пыльца трав семейства злаковых пыльца сорных трав домашняя пыль
группа березы группа маслиновые группа кипарисовые группа трав семейства Роасеае (злаковые) группа пыльцы сорных трав группа клещей домашней пыли
Береза Ольха Граб Орешник Дуб Каштан Бук Маслина Ясень Бирючина Сирень Кедр Кипарис Душица Овес Ежа сборная Овсяница луговая Йоркширская трава Ячмень Райграс пастбищ. Тимофеевка Мятлик Рожь Пшеница Амброзия полыннолистная Полынь обыкновенная Постенница лекарственная Der. Pteronyssinus Der. farinae
■ экстракты аллергенов должны обладать перекрестной реактивностью/структурной гомологией аллергенов;
■ экстракты аллергенов должны иметь одинаковый состав в готовой форме препарата;
■ экстракты аллергенов должны иметь идентичные процессы экстрагирования и получения готовой формы препарата.
Один из членов гомологичного ряда выбирается в качестве «представителя ряда» (образца). Для обоснования выбора «представителя» могут быть использованы свойства, связанные с его географическими особенностями, которые были охарактеризованы при исследовании в соответствующей популяции сенсибилизированных лиц. Создание гомологичного ряда позволяет оценить по показателям качества аллерген, который является «представителем ряда», а полученные результаты экстраполировать на аллергены, которые входят в состав гомологичного ряда. Все аллергенные экстракты, которые составляют гомологичный ряд, могут быть зарегистрированы на основе результатов изучения стабильности аллергена «представителя ряда» и для аллергенов, у которых не был еще изучен данный показатель, изучение стабильности может быть проведено в пострегистраци-онном периоде. Полное исследование безопасности и эффективности проводится для «представителя ряда», а для остальных аллергенов гомологичного ряда допускается изучение безопасности в пострегистра-ционном периоде. Кроме того, производитель имеет возможность проводить валидацию на этапе разработки препарата «представителя ряда» и эти результаты валидации экстраполировать на процессы получения остальных членов гомологичного ряда.
Примеры гомологичных рядов, представленные в руководстве ЕМА (2009) [7, 8] приведены в табл. 1.
Пыльца некоторых видов деревьев (европейский бук, клен, платан, тополь, белая акация, ива, липа,
вяз и японский кедр) не была включена в гомологичные ряды, ввиду недостаточности экспериментальных данных. Для того чтобы их включить в определенный гомологичный ряд требуются дальнейшие исследования и обоснования. Также не была включена в гомологичные ряды пыльца некоторых видов злаковых (пырей, полевица, лисохвост, ложный овес, костер и свинорой) и сорных (подорожник) трав и клещи (Ac. Siro, Glyc. Domesticus, Lepid. Destructor, Thyr. entomophagus и Tyrop. Putrescentiae). В рекомендациях ЕМА не представлены гомологичные группы для аллергенов эпителия, волос и перхоти животных (собаки, кошки, морской свинки, хомяка, лошади, мыши, кролика и крысы), грибов и яда насекомых, формирование которых планируется в будущем после проведения исследований и соответствующего обоснования.
ОЦЕНКА КАЧЕСТВА
При оценке качества в первую очередь должны быть охарактеризованы три основных свойства аллергенного препарата: количество аллергенов (чтобы показать, что в препарате присутствуют все аллергены), уровень основных (соответствующих) аллергенов (характерных для данного аллергенного препарата) и общая аллергенная активность препарата.
Препараты аллергенов представляют собой особую группу препаратов, так как они используются одновременно для диагностики in vivo (в кожных или провокационных тестах) и специфической иммунотерапии (СИТ) аллергии. В то же время, для их получения используется сырье природного происхождения, которое имеет значительные вариации исходных показателей, что предъявляет повышенные требования к стандартизации данных препаратов. Поэтому на этапах производства и оценки качества для получения стандартных алергенных
ОБЗОРНЫЕ И ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ
ОБЗОРНЫЕ И ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ
препаратов рекомендуется использование международных стандартов, а при их отсутствии производственного референс препарата (ПРП). Кроме того, в последних документах ЕМА представлены более жесткие требования для исходного сырья — необходимо проведение оценки его качества, а не только представление документов с описанием свойств исходного материала.
При производстве экстрактов аллергенов проводится характеристика и контроль качества активного вещества. Если определение некоторых показателей качества активного вещества невозможно, как, например, в аллергоиде, то необходима их оценка на промежуточных стадиях производства. Исследование оценки качества активного вещества должно продемонстрировать, что производственный процесс получения препарата позволяет сохранить в экстракте основные аллергены. Это может быть продемонстрировано методами количественной оценки ингибирования связывания специфических IgE антител или методом масс-спектрометрии. Выполнение методик связывания специфических IgE антител, определения белкового профиля и оценка соответствующих аллергенов в экстрактах проводятся при обязательном сопоставлении с международным стандартом, а при его отсутствии — с ПРП. При определении аллергенной активности необходимо обосновать, какие аллергены должен содержать данный аллерген, и указать спектр определяемых аллергенов в экстракте. В случае, если общая аллергенная активность или безопасность препарата зависят от малых аллергенов, то они также должны быть определены и оценены.
Оценка специфической активности активного вещества аллергенов проводится разными методами, в зависимости от свойств самого препарата. В немоди-фицированных неочищенных и очищенных аллергенных экстрактах общая аллергенная активность оценивается методами конкурентного связывания IgE антител (например, RAST, ELISA с антителами, полученными в результате иммунизации животных, при этом реакция связывания изучаемого аллергена с антителом должна происходить в жидкой фазе).
Характеристика модифицированных аллергенов имеет отличия от оценки качества немодифи-цированных аллергенных препаратов. Аллергенные экстракты, полученные из сырья природного происхождения, в организме могут деградировать. Снижение деградации и аллергенности при повышении иммуногенности аллергена достигается в процессе модификации водно-солевых экстрактов (например, формалинизация или полимеризация глутаровым альдегидом). Для оценки качества активного вещества модифицированных аллергенов необходимо использовать методы, которые позволяют определить соответствующие аллергены в готовой форме модифицированного аллергена (например, пептидное картирование и масс-спектрометрия) и на этапах
производственного процесса охарактеризовать последовательность процесса модификации (например, гель-хроматография для оценки степени полимеризации).
Аллергенная активность в модифицированных экстрактах аллергенов (аллергоидах) проводится в два этапа, на первом этапе, перед этапом модификации, определяется активность нативных молекул экстракта (например, методом количественной ELISA) и затем в модифицированном экстракте (например, методом оценки медиаторов, выделяемых из клеток при инкубации с модифицированным аллергеном). Кроме того, для данной оценки может быть использован метод масс-спектрометрии или другие подобные методы.
В последних рекомендациях ЕМА указано, что для оценки специфической (биологической) активности аллергенных препаратов, их стандартизации и при разработке ПРП отсутствует альтернатива кожным тестам. Определение аллергенной активности проводится в прик-тесте на основе «скандинавского» подхода, при котором оценка активности проводится на 15-ти высокочувствительных к соответствующему аллергену больных, или «американского», который допускает проведение исследования на 20-ти высоко и средне (умеренно) чувствительных больных [5, 6].
Оценка качества конъюгированных аллергенных экстрактов проводится методами на основе растворимости, которые заключаются в оценки степени диссоциации в растворе (среде) конъюгированного препарата. Стабильность конъюгации оценивается по показателям, которые определяются в супернатанте после растворения (например, определение в супернатанте количества общего белка, аллергенной активности и др.).
РЕКОМБИНАНТНЫЕ АЛЛЕРГЕНЫ
Использование технологии рекомбинантной ДНК для получения аллергенов позволяет получить препараты со «стандартными» свойствами основного аллергена или смеси определенных аллергенов. При данном процессе качество белка не зависит от качества отдельных исходных материалов. Оценка качества аллергенов, полученных с использованием рекомбинантной ДНК, проводится в соответствии с нормативными документами, разработанными для рекомбинантных белков [11]. При оценке качества и характеристике таких аллергенов прежде всего следует обратить внимание на характеристику многомерной структуры белка и её влияние на имму-ногенность и безопасность препарата. При необходимости, проводится оценка посттрансляционных модификаций белковой молекулы, таких как глико-зилирование.
Определение биологических свойств рекомбинантного аллергена, которые характерны для природного аналога (например, ферментативная актив-
ность) является косвенным показателем структурной целостности белка, но не является основным для оценки аллергенных и иммуногенных свойств препарата. Кроме того, необходимо обратить внимание на количественный и качественный состав примесей (в том числе и связанных с клеткой-продуцен-том), которые могут оказать влияние на аллергенную активность и безопасность препарата. Количество активного вещества аллергена, полученного с использованием рекомбинантной ДНК, выражается в количестве массы белка на единицу объема. При этом должна быть изучена взаимосвязь между количеством рекомбинантного аллергена и биологической активностью препарата, для этого могут быть использованы методы ELISA. При оценке активности препаратов, которые содержат аллергены, обладающие высокой и низкой способностью связывать IgE, необходимо поэтапное проведение ELISA, вначале с одним аллергеном, а затем с другим. В смеси рекомбинантных аллергенов, содержание отдельных аллергенов оценивается методом ELISA непосредственно перед смешиванием, а затем после смешивания аллергенов.
СМЕСЬ АЛЛЕРГЕНОВ
Для составления смеси аллергенов проводят смешивание экстрактов аллергенов, а не исходного сырья перед его экстрагированием. При этом перед смешиванием необходимо оценить специфическую активность каждого отдельного экстракта. Общая аллергенная активность определяется в готовой форме лекарственного препарата. Если оценка специфической активности отдельных аллергенов в готовой форме лекарственного средства невозможна из-за перекрестной реактивности, то проводится определение общей аллергенной активности готовой формы методами конкурентного связывания IgE.
При составлении смеси количество экстрактов аллергенов должно быть сведено к минимуму, вне зависимости от гомологии и перекрестной реактивности. Если в состав смеси планируется включение аллергена, который не принадлежит к данной гомологичной группе, то его включение должно быть обосновано. Кроме того, не рекомендуется включение в состав смеси аллергенов, обладающих протеолитической активностью. Яды перепончатокрылых не следует смешивать с любыми другими экстрактами аллергенов и рекомбинантных аллергенов. Также не следует смешивать круглогодичные (например, домашняя пыль) и сезонные (например, пыльца) аллергены, вне зависимости от способа получения (из сырья природного происхождения или рекомбинантные аллергены).
КОНТРОЛЬНЫЕ СЫВОРОТКИ
Экстракты аллергенов разных производителей могут сильно различаться, даже разные серии одного аллергена, выпускаемые одним производителем,
могут иметь отличия. Оценка специфической активности препарата в процессе производства и стандартизация выпускаемых серий проводится методами конкурентного торможения связывания аллергенспе-цифических ^Е антител, с использованием международного стандарта или ПРП. При отборе сывороток для создания пула, содержащего специфические ^Е антитела, необходимо учитывать географические особенности сенсибилизации пациентов и уровень 1^Е антител в сыворотке. Пул создается из сывороток, полученных от 10—15 человек, которые не получали СИТ препаратами, содержащими соответствующие или перекрестно реагирующие аллергены. Не следует включать в пул сыворотки, которые содержат антитела к бычьему сывороточному альбумину, белкам молока или желатина. После создания пула сывороток необходимо оценить содержание антител, которые способны связать соответствующие аллергены.
ПРОВЕДЕНИЕ КЛИНИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ АЛЛЕРГЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ
Предыдущие рекомендации ЕМА (2005) [2] по проведению клинических испытаний были разработаны для аллергенных экстрактов из природного материала, которые используются для СИТ рино-конъюнктивита. Основными критериями отбора пациентов, эффективности и выбора конечных точек в данных рекомендациях были симптомы аллергического риноконъюнктивита. Обновленные документы ЕМА (2009) [12] были расширены, и в них включены дополнительные рекомендации.
При включении добровольцев в исследуемую популяцию необходимо оценивать симптомы, которые наблюдаются при контакте с аллергеном (например, в период пыления пыльцевых аллергенов. Для проведения СИТ с аэроаллергенами не рекомендуется включать в исследование пациентов, которые имеют сенсибилизацию к разным аллергенам (например, сенсибилизацию к сезонным и круглогодичным аллергенам) и больных, получавших курс СИТ в течение последних 5-ти лет (в предыдущих рекомендациях 2 года). Выбор пациентов для СИТ инсектной аллергии должен включать исключение мастоцитоза. Не допускается проведение первой фазы клинических испытаний на здоровых добровольцах, чтобы не вызвать их сенсибилизации, на данном контингенте допускается проведение только оценки местнораздражающего действия аллергенов.
Клинические исследования 2-й фазы, для оценки параметров зависимости «доза — эффект» рекомендуется проводить в краткосрочных исследованиях (в течение 2-4 месяцев), в качестве конечных точек могут быть использованы провокационные тесты и клинические симптомы. В данную фазу, за относительно короткий период СИТ, лабораторные иммунологические показатели (аллергенспецифические антитела, оценка клеточного звена, цитокинов и др.)
ОБЗОРНЫЕ И ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ
ОБЗОРНЫЕ И ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ
не могут служить критериями изменения аллергологического статуса.
Формально, фармакокинетические свойства аллергенных препаратов не могут быть охарактеризованы из-за невозможности определить уровень аллергенов в плазме. Однако в рекомендациях предлагается провести оценку фармакокинетических свойств по динамике косвенных показателей (например, определение уровня аллергенспецифиче-ских IgG, Т-клеточного ответа, уровня цитокинов и показателей провокационных тестов). Продолжительность исследований эффективности аллергенных препаратов зависит от цели исследования. Для оценки влияния СИТ на динамику аллергических симптомов достаточно несколько месяцев, для получения устойчивого клинического эффекта требуется 2—3 года, а для оценки долгосрочной эффективности — более длительные исследования. Первичной конечной точкой клинических исследований эффективности в популяции больных ри-ноконъюнктивитом является снижение симптомов заболевания. К возможным вторичным конечным точкам относятся динамика симптомов, курсовая доза препарата, показатели иммунитета, характеризующие аллергический процесс, провокационные аллерготесты, оценка качества жизни и др. Отмечено, что оценка показателей эффективности должна проводиться в период аллергенной нагрузки на организм больного (например, при сенной лихорадке в период пыления растения).
В последнее руководство ЕМА включены разделы, содержащие указания для проведения клинических испытаний аллергенов, входящих в состав «гомологичных рядов», аллергенов для лечения пищевой аллергии, рекомбинантных, очищенных аллергенов и изучения сопоставимости при внесении изменений в производственный процесс. Подчеркнуто, что исследования в популяции детей должны проводиться согласно специально разработанного плана, а не в комбинированных клинических исследованиях, включающих взрослых и детей. Для изучения безопасности аллергенов рекомендуется использование критериев оценки аллергических реакций, разработанных Европейской академией аллергологии и клинической иммунологии (ЕААС1).
ПОСЛЕДНЯЯ РЕДАКЦИЯ ФАРМАКОПЕЙНОЙ СТАТЬИ НА АЛЛЕРГЕННЫЕ ПРЕПАРАТЫ ЕВРОПЕЙСКОЙ ФАРМАКОПЕИ (ЕФ)
Фармстатьи ЕФ являются основными стандартами качества лекарственных средств для стран единой Европы, которые обеспечивают разработку и выпуск высококачественных препаратов. Первая фармстатья на аллергенные препараты была опубликована в 1997 году, последняя редакция — в 2010 году. Фармстатья предназначена для характеристики немодифицированных и модифицированных
водно-солевых экстрактов из сырья природного происхождения и не распространяется на рекомбинантные аллергены [13].
В последнюю редакцию фармстатьи включены требования для исходного сырья, которые касаются в первую очередь идентичности, чистоты и условий хранения (например, для аллергенов грибковой природы включено требование для определения микотоксинов).
Очень важным новым пунктом фармстатьи в разделе производство является указание, что в процессе экстракции должны быть сохранены все компоненты, обладающие аллергенными свойствами. Производителю необходимо это подтвердить исследованиями, выполненными в условиях in vitro или in vivo. Внесены изменения, касающиеся допустимого предела отклонений показателя общей аллергенной активности, который составил 150% в тестах ингиби-ции связывания аллергена с аллергенспецифическим IgE, в отличие от 200%, который указан в предыдущей фармстатье. Из последней версии фармстатьи исключен раздел «антигенный профиль», но включен новый раздел «микробиологическая контаминация».
НЕРЕШЕННЫЕ ВОПРОСЫ БЕЗОПАСНОСТИ И ЭФФЕКТИВНОСТИ
ЛЕЧЕБНЫХ АЛЛЕРГЕНОВ
Последние обновления нормативной документации направлены на повышение уровня безопасности и эффективности применения аллергенных препаратов, однако остался ряд проблем, которые требуют дальнейшего решения. Прежде всего, следует отметить, что для аллергенных препаратов очень актуальным является вопрос разработки стандартных образцов. Экстракты аллергенов могут содержать большое количество аллергенов, которые обладают перекрестной реактивностью. В последние годы были разработаны и охарактеризованы многие основные аллергены экстрактов. В связи с отсутствием единых стандартов компании создают и используют свои собственные внутренние референс-препараты и собственные единицы оценки аллергенной активности, что затрудняет сравнение препаратов, полученных от разных производителей. Для решения данной проблемы под руководством ЕМА в 2001 году начаты работы по проекту «CREATE» (разработка стандартных образцов для аллергенных продуктов и валидация методов их количественной оценки). Основной целью проекта «CREATE» является разработка стандартов на основе рекомбинантных аллергенов [14]. Первые стандартные образцы на основе рекомбинантных аллергенов планировалось получить в 2012 году.
Следующей важной проблемой является применение для лечения детей препаратов аллергенных экстрактов, конъюгированных с адъювантами на основе алюминия. Как известно, алюминий в организ-
ме при длительном применении может вызывать развитие как местных реакций (гранулемы), так и общих (вплоть до поражения нервной системы). Использование в препаратах аллергенных экстрактов адъювантов регламентируется требованиями «Адъюванты для использования в вакцинах» [15]. Однако профилактическое применение вакцин значительно отличается от терапевтического введения препаратов аллергенов. Вакцины вводятся однократно (или несколько раз с продолжительными временными интервалами), в то же время проведение СИТ может включать от 3 до 6 еженедельных инъекций в течение нескольких лет. Препараты, предназначенные для СИТ детей, выпускаются и применяются в той же дозировке, что и для взрослых, поэтому с каждой инъекцией ребенок может получить до 0.5 мг алюминия. Учитывая, что вес ребенка значительно меньше, чем взрослого, предполагается, что токсическое действие алюминия на организм ребенка будет значительно более выраженным. Дискуссия и исследования по данной проблеме продолжаются.
Еще одна проблема связана с использованием аллергенов, которые изготовлены согласно индивидуальных показаний для конкретного больного. Например, в Германии выпускается более 240 препаратов для лечения аллергических заболеваний, что охватывает 80% всех выпускаемых аллергенов. В то же время, эффективность СИТ зависит от использования именно тех аллергенов, которые явились причиной развития заболевания. При этом спектр причинно-значимых аллергенов конкретного больного может быть индивидуальным и включать аллергены, которые не содержатся в зарегистрированных экс-
ЛИТЕРАТУРА
1. Note for guidance on allergen products (CHMP/BWP/243/96).
2. Guideline on the Clinical Development of Medicinal Products for the Treatment of Allergic Rhino-Conjunctivitis (CPMP/EWP/2455/02).
3. Райкис Б.Н., Казиев А.Х. Настоящее и будущее лечебных аллергенов. М.: Триада-Х. 2001.
4. Аллергология и иммунология. Национальное руководство.
Ред. Р.М. Хаитов и Н.И. Ильиной. М.: ГЭОТАР-Медиа. 2009.
5. Пыцкий В.И., Адрианова Н.В., Артамосова А.В. Аллергические заболевания. М.: Триада-Х. 2001.
6. Радунская С.Ф., Невская Л.В., Лавренчик Е.И. Этапы развития производства аллергенов в России и современные требования к их качеству. Биопрепараты. 2010. № 3. С. 39.
7. Guideline on allergen products: production and quality issues (EMEA/CHMP/BWP/304831/2007).
8. Lorenz A.R., Luttkopf D., May S., Scheurer S., Vieths S. The Principle of Homologous Groups in Regulatory Affairs of Allergen Products // A Proposal. Int Arch Allergy Immunol. 2009. 148:1-17.
9. Nordic Council on Medicines (1989): Registration of Allergenic Preparations. Nordic Guidelines, Vol 23, 2nd ed. Uppsala, Sweden: NLN Publications: 1-34.
трактах аллергенов. Для проведения СИТ данной категории больных в Германии допускается изготовление индивидуальных препаратов для больного, которые называются «продукты для определенного больного» («Named Patient Products»,NPP) [16]. Приготовление указанных препаратов регламентируется отдельными нормативными требованиями, не требует регистрации и производится в малом количестве. Производство NPP включает: получение экстрактов аллергенов из материалов, представляемых пациентом; получение экстрактов из доступного промышленного сырья (например, пыльца, шерсть животных и т.п.) на основе индивидуальных рецептов; создание смесей аллергенов, которые могут включать аллергены из вышеуказанных пунктов по индивидуальным рецептам.
Согласно данных литературы, около 50% больных в Германии получают СИТ с использованием NPP препаратов. В то же время ряд экспертов отмечает, что NPP препараты не проходят регистрации, выпускаются на предприятиях согласно сертификата GMP и не проходят сертификационный контроль в регуляторном органе. Отсутствие контроля качества может оказать влияние на эффективность и безопасность проводимой СИТ.
Таким образом, использование отечественными производителями и регуляторными органами последних международных документов и результатов научных достижений по оптимизации производственного процесса изготовления и оценки качества лечебных аллергенов позволит повысить эффективность применения препаратов для диагностики и лечения аллергических заболеваний.
10. Turkeltaub P.C. Biological Standardization of Allergen extracts // Allergol Immunpathol. 1989. 17: 53-65.
11. ICH Q5B Quality of biotechnological products: analysis of the expression construct in cell used for production of R-DNA derived protein products. 1998
12. Guideline on the Clinical Development of Products for Specific Immunotherapy for the Treatment of Allergic Diseases (CHMP/ EWP/18504/2006).
13. Monograph: Allergen Products - Producta Allergenica 01/2010:1063. In: Council of Europe (ed.) European Pharmacopoeia, Strasbourg, ed. 6, 2010, supplement 6: 679-680, as implemented of 01. 01. 2010.
14. van Ree R., Chapman M.D., Ferreira F., Vieths et al. The CREATE project: development of certified reference materials for allergenic products and validation of methods for their quantification // Allergy. 2008. 63(3):310.
15. Guideline on Adjuvants in Vaccines for Human Use (EMEA/CHMP/ VEG/134716/2004).
16. May S., Kaul S., Luttkopf D., Vieths S. Regulation, Role and Future of Named Patient Products in Germany. Arb. Paul Ehrlich Inst. Bd. 96, Verlag Chmielorz, Wiesbaden, Germany. 2009.
ОБЗОРНЫЕ И ПРОБЛЕМНЫЕ СТАТЬИ
