CC BY
60
макрофагов [8, 9]; соответственно, ингибирующая функция альвеолярных макрофагов падает за счет снижения их функциональной активности. При воздействии цеолитов Вангинского и Куликовского месторождений на интактных животных картина популяционного соотношения статистически не отличалась от распределения в контрольной группе. При ингаляторном введении цеолитов охлаждаемым животным количество макрофагов и лимфоцитов стремилось к нормальным значениям, тем самым частично нивелируя повреждающее действие холода (рис. 3).
0 Контроль Холод "В" "В"+холод "К" Т'+холод
■ Макрофаги во 23 вв 48 в2 52
ПЛимфоциты\ 30 65 21 40 2в 38
Рис.3 Сравнение относительного числа макрофагов и лимфоцитов в материале всех групп в % (недостающие %% приходятся на прочие клеточные элементы БАЛ: нейтрофилы, эпителий и др.)
Таблица 1
Биохимические показатели ПОЛ и компонентов АОС в ткани легких
например, при общем охлаждении организма. Человек, как и животные, постоянно вдыхают с воздухом минеральные частицы, можно предположить, что случайное вдыхание ряда природных минералов в виде пыли может являться одним из звеньев в естественной системе поддержания иммунитета.
Литература
1. Виткина Т.И. Комплексная оценка воздействия факторов внешней среды на иммунобиологическую резистентность больных с респираторной патологией: Автореф. дис... д-ра биол. наук.- Иркутск, 2006.- 47 с.
2. Гамидов М. Г. // Вестник ДальГАУ, №2, 2007. - С 55-60.
3. Герасин В.А. и др. / Содержимое бронхов при хроническом бронхите.- Л., ВНИИ пульмонол. МЗ СССР, 1981.- С. 96.
4. Калинина Е.П. и др. // Бюлл. физиол. и патол. дыхания.-2001.- Вып. 9.- С. 10-14.
5. Кодинцев В.В. Защитные свойства антиоксиданта эмокси-пина при холодовом воздействии: Автореф. дис. канд. мед. наук. Владивосток, 2000.
6. Павленко Ю.В. Цеолиты - минералы XXI века / Энергия.- 2006.- № 11.- С. 60-64.
7. Паничев А.М. и др. // Тихоокеанский мед. ж.- 2003.-№4.- С. 21-24.
8. Прокопенко А.В. Системный анализ структурных проявлений компенсаторно-приспособительных реакций нижних дыхательных путей: Дис.к. м. н.- Благовещенск, 2000.- 238 с.
9. Целуйко С.С., Прокопенко А.В. Системный анализ компенсаторно-приспособительных реакций в легких.- Благовещенск, 2001.- 124 с.
10. Mumpton F.A. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1999.-Vol. 96, Issue 7.- P. 3463-3470.
Группы ЦП, мг/100 г К, оль н МДА, нмоль/г ГП, нмоль/г Витамин Е, мкг/г
Контроль 39±2,54 221,8± 14,9 8,84±1,22 90,58±4,4 205,4±7,38
Холод 28,36±3 Pi 9<0,05 294,1±21,7 Pi 9<0,05 12,71±1,00 Pl 9<0,05 124,4±9,78 Pl 9<0,02 177,31±7,0 Pl 9<0,05
«В» 35,66±2 (Pl 3>0,1) 235,5±9,9 Pl 3>0,1 8,88±0,98 (Pl 3>0,1) 89,4±4,8 (Pl 3>0,1) 190,1±5,5 (Pl 3>0,1)
«В»+холод 34,78±1,1 (Pl'4>0,1 P2.,4<0,1) 247±10,8 Pl'4>0,1 P? 4<0,1 9,56±0,81 Pl4>0,1 p? 4<0,05 116,6±11,7 (Pl'4<0,05 P9 4>0,1) 197,9±4,8 (Pl'4>0,1 P2.,4<0,05)
«К» 37,48±2,8 Р3<0,001 237±14,5 р3<0,001 7,5±0,67 р3<0,001 88,6±4,17 р3<0,001 192,6±6'25 р3<0,001
«К»+холод 32,27±1 Pl4>0,1 P? 4<0,1 261,6±13 Pl'4>0,1 P2 4<0,1 10,56±0,92 Pl'4>0,1 P2 4<0,05 110,6±10,9 Pl4<0,05 P2 4>0,1 189,4±4,2 Pl'4>0,1 P2 4<0,05
Таблица 2
Биохимические показатели ПОЛ и компонентов АОС в плазме крови во всех экспериментальных группах
Группы ЦП, мг/100 г ДК, нмоль/г МДА, нмоль/г ГП, нмоль/г Витамин Е, мкг/г
Контроль 21,44±1,27 р<0,001 51,82±5,15 р<0,001 4,92±1,15 р<0,02 20,18±1,21 р<0,001 27,16±1,69 р<0,001
Холод 15,28±1,62 (Pl 2<0,05) 67,81 ±7,04 (Pl 2<0,1) 10,62±2,08 (Pl 2<0,05) 36,16±2,78 (Pl 2<0,001) 21,01±2,64 (Pl 2<0,1)
«В» 20,28±3,24 (Pl 3>0,1) 23,62±4,4 (Pl 3<0,01) 3,72±0,39 (Pl 3<0,1) 24,58±4,52 (Pl 3>0,1) 28,42±2'10 (Pl 3>0,1)
«В+холод» 18,70±0,74 (Pl'4>0,1 P2.,4<0,1) 46,25±4,71 (Pl'4>0,1 P2,4<0,05) 7,34±0,60 (Pl'4<0,02 P9 4>0,1) 31,34±4,81 (Pl'4 0'1 P2 4>0,1) 24,46±2,81 (Pl'4>0,1 P2 4>0,1)
«К» 28,42±2,57 р<0,001 28,68±3,12 р<0,001 3,68±0,63 р<0,005 40,28±3,09 р<0,001 27,2±1,94 р<0,001
«К+холод» 19,25±1,43 (Pl'4>0,1 P2 4<0,1) 59,85±5,63 (Pl'4>0,1 p74<0,05) 7,15±0,63 (Pl'4<0,02 P9 4>0,1) 29,47±1,92 (Pl'4 0'1 P2 4>0,1) 24,33±1'88 (Pl'4>0,1 P2 4>0,1)
Как следует из табл. 1, 2 в группе «Холод», по сравнению с группой «Контроль» в ткани легких и в плазме крови было выявлено повышение содержания ДК, МДА, ГП, снижение концентрации ЦП и витамина Е. Это говорит о функциональном снижении активности АОС [5]. В группах, в которых охлаждаемые животные получали ингаляцию цеолитов, шла нормализация всех перечисленных показателей, что указывает на наличие антиоксидантного эффекта при примененном методе литоингаляции. Цеолиты при ингаляционном введении обладают криопротекторным действием на систему местного иммунитета дыхательных путей у крыс и антиоксидантным эффектом. Понимание конкретных механизмов этих процессов требует дальнейшего изучения.
Результаты данного исследования позволяют предположить, что литоингаляция с применением минералов, в том числе цеолитов, может применяться для коррекции некоторых состояний функционального перенапряжения, которые возникают,
УДК 616-002.73-615.281
ПРЕДПОСЫЛКИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЭКСТРАКТА ИЗ КОРНЯ СОЛОДКИ ГОЛОЙ (GLYCYRRHIZA GLABRA ) В ТЕРАПИИ ЛЕПРЫ
Г.Н.НАЗАРОВА, А.К.МАСЛОВ, Л.Т.СУХЕНКО, С.А.ЛУЖНОВА*
Поиск новых лекарственных средств из растительного сырья в последние годы привлекает исследователей рядом положительных свойств, которыми обладают фитопрепараты. Это -высокая эффективность при низкой токсичности, широкий спектр действия, комплексное гармонизирующее влияние на организм больного и относительная дешевизна по сравнению с синтетическими средствами [1]. На фармакологические свойства растений влияет комплекс экологических факторов, который связан с особенностями географического расположения региона (широта и долгота места, высота над уровнем моря, близость водных бассейнов и т.д.), а также количество осадков, солнечных и тепловых факторов во время вегетации. В растениях южных широт накапливается больше действующих веществ [2]. Уникальность Астраханского региона заключается в наличии большинства благоприятных факторов, способствующих накоплению дикорастущими растениями полного набора активных веществ, что является определяющим фактором в создании оригинальных биопрепаратов с высокой антибактериальной активностью.
Ранее нами показано, что экстракты из корня солодки голой обладают выраженным антибактериальным действием [3]
Цель исследования - изучение возможности лечения лепры биологически активными клеточными компонентами, содержащимися в корнях солодки голой.
Материалы и методы. Эксперимент выполнен на 120 мышах обоего пола линии СВА, сопоставимых по массе и условиям содержания. Животных заражали интраплантарно (модель лепры по Shepard [4]) взвесью возбудителя лепры (Mycobacterium leprae), выделенных от больного лепрой лепроматозного типа и пассированных трехкратно на экспериментальных животных. Доза инфекта составила 104 микробных тел на мышь. Все мыши были разделены на 3 группы. Животные 1-й опытной группы получали экстракт из корня солодки голой (в дальнейшем - экстракт) в дозе 0,2 мл/кг. Контролем служили зараженные M.leprae
* НИИ по изучению лепры, 414057, Астрахань, пр-д Н.Островского, 3, тел/факс (8512) 331322, E-mail: [email protected]
мыши, получающие основной противолепрозный препарат -диаминодифенилсульфон (ДДС) и нелеченные мыши.
Лечение животные получали per os через 2 мес. после заражения. Буфер готовили по следующей прописи: к 1 литру дистиллированной воды добавляли в определенном соотношении соли кальция, калия, магния и натрия и доводили буферный раствор до 0,1 М с рН - 7,4. Измельченное растительное сырье заливали в сосуды и буферным раствором (в соотношении 1:3), встряхивали и выдерживали в темном месте при комнатной температуре. Через 10 дней настойку сливали, отжимали остатки растений и отфильтровывали. Хранили в темном прохладном месте. Испытания препаратов вели по руководству ВОЗ [З].
Через 3, З и 7 мес. после начала лечения по З-6 мышей каждой группы декапитировали для получения крови и воспалительного инфильтрата (лапы). M.leprae в лапах мышей подсчитывали по методу ShePard и McRae [6]. Активность миелоперокси-дазы (МП) нейтрофильных гранулоцитов (НГ) крови, уровень гемоглобина, число эритроцитов, лейкоцитов и лейкоцитарную формулу определяли унифицированными методами. Функцию печени оценивали по активности аланин- и аспартатаминотран-фераз (АЛТ и АСТ) в сыворотке крови и гомогенате печени [7].
Результаты обрабатывали статистически по программе «StatgraPhics» с применением t критерия Стьюдента.
Результаты. Изучение противобактериальной активности экстракта показали, что через 3 месяца у животных обнаружено подавление роста M.leprae в подушечках лап по отношению к контролю (в 1З раз), и отмечалось антимикробное действие статистически превышающее эффект терапии ДДС (р<0,0З). Через З-7 месяцев выявилась та же тенденция к превалированию антимикробного действия экстракта корня солодки голой по отношению к контролю (8,9:1 и 10:1 соответственно) и по отношению к лечению ДДС (р<0,0З) (табл. 1).
Таблица 1
Динамика размножения М.1ергае и уровень МП в нейтрофилах периферической крови мышей при различных сроках лечения (М±т)
Показатель Период наблюдения (мес) Контроль (без лечения) Лечение ДДС Лечение экстрактом
Число микобактерий (10б) 3 99,38±8,66 п^ш^** 6^1,^**
З 110,2±11,4З 16,22±3,34* П^Ш*
7 149,76± 10,79 22,84±1,74** 14,96±1,7*
Уровень МП (у.ед.) 3 1^0,18 2-28±0-05* 2,49±0,24*
З 1,60±0,03 2-23±0-05** 2-52±0-03**
7 l^G^ 2^0,07** 2,3±0,07*
Примечание: *- р<0,0З; ** - р<0,01 по сравнению с контролем
При цитохимическом изучении НГ крови активность МП была достаточно высока к 3-му месяцу терапии при лечении экстрактом и ДДС. В контроле активность МП была низкой. К 5 месяцам лечения активность МП НГ крови при лечении экстрактом и ДДС отличались мало. В контроле (мыши без лечения) выявлено значительное снижение активности МП (табл.1). В крови опытных животных, леченных экстрактом, отмечалось повышение уровня гемоглобина и количества эритроцитов по сравнению с лечением ДДС (табл. 2).
Таблица 2
Уровень гемоглобина и эритроцитов периферической крови мышей
Группы Гб (г/л) Эр. (10/л) Гб (г/л) Эр- (10/л) Гб (г/л) Эр. (10/л)
З месяцев лечения 8 месяцев лечения 11 месяцев лечения
Лечение экстрак- том 13З±З,3 6,1±0,3 1З4±3,86 161±3,3 6,9±0,2
Лечение ДДС 122±9,01 ^0,8 127±3,2 ЗД±0Д 137±11,6
Контроль (без лечения) 103±З,72 3^0,4 98,6±12,9 3,2±0,2 107±7,4 4,6±0,4
Число лейкоцитов после 5 мес. лечения экстрактом из корня солодки голой статистически достоверно снижалось по сравнению с контролем. После 7 мес. лечения число лейкоцитов после лечения оставалось на том же уровне. В группах леченных ДДС и без лечения число лейкоцитов увеличивалось. Уровень АЛТ и АСТ у мышей, леченных экстрактом, не претерпевал статистически достоверных изменений в сравнении с таковыми у интактных и контрольных особей, что говорит об отсутствии
токсического влияния на печень мышей длительного применения биодобавки в виде экстракта корня солодки голой.
Экстракт из корня солодки голой при введении per os зараженным M.leprae особям в дозе 0,2 мл/кг ежесуточно на мышь способен оказывать эффективное антимикробное действие. Однако в результате повышения активности внутриклеточной МП, ее высокоактивные антибактериальные продукты могут оказывать и цитопатическое действие на мембраны клеток, что приводит к их неэффективному функционирования, либо разрушению [8]. С этим фактом связан спад активности МП.и снижение антибактериальной активности фагоцитов при длительном применении препарата. Полученные данные свидетельствуют о перспективности применения экстракта из корня солодки голой в лечении лепры с учетом дозы и длительности назначения препарата.
Литература
1.ВиноградоваТА., Гажеев Б.Н. Практическая фитотерапия.- М.;СПб.- 1988.
2МуравьеваДА. и др. Фармакогнозия.- 4-е изд.- М.: Медицина.- 2002.- 627 с.
3.Назарова Г.Н. и др. // Вестн. новых медиц. технологий.-2007.- Т.14, № 4.- С. 44-45.
4.Shepard C.C. // J. Exp. Med.- 1960.- Vol. 112.- P. 445-454.
5.Laboratory techniques for leprosy.- Geneva, 1987.
6.Shepard C.C., McRaeD. // Int. J. Leprosy.- 1968.- Vol. 36.-P. 78-82.
7.Лабораторные исследования в клинике / Под ред. В.В.Меньшикова.- М.; 1987.
8.Бахов Н.И. и др. // Лаб. дело.- 1988.- № 6.- С. 3-12.
УДК [616.37-002.2-092.4-08-033:611-018.5]:616-092.19
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТОВ В ЛИПОСОМАЛЬ-НОЙ ФОРМЕ В КОРРЕКЦИИ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПЕРВИЧНОМ ХРОНИЧЕСКОМ ПАНКРЕАТИТЕ
И.А. РАДИОНОВ*
Первичный хронический панкреатит (ПХП) относят к числу заболеваний с наиболее тяжелой патологией органов гепатопанкреа-тодуоденальной области с многочисленными проблемами, с малоизученным и до конца неясным патогенезом и лечением [1, 2]. Нет однозначного представления об общих закономерностях развития повреждений при ПХП, как в самой поджелудочной железе (ПЖ), так и в функционально сопряженных с ней органах. Важным патогенетическим звеном в развитии и течении ПХП независимо от его этиологии является окислительный стресс (ОС) и возникающее в результате повреждение тканей. Выход в системный кровоток трипсина и других панкреатических ферментов приводит к активации системы комплемента. Благодаря комплементу происходит включение в патологический процесс нейтрофилов -основного поставщика активных форм кислорода (АФК) в организме. АФК способствуют дальнейшему разрушению панкреоци-тов, запуская тем самым порочный круг панкреатита, а также оказывают разнообразные системные эффекты, поражая не только ПЖ, но и другие уязвимые органы. Роль нарушений в системе перекисного окисления липидов (ПОЛ) при остром и ПХП уже не вызывает сомнений, а усилия ученых направлены на совершенствование методов коррекции оксидативных процессов. Применение антиоксидантов снижает выраженность многих проявлений панкреатита, выраженность болевого синдрома, способствует уменьшению летальности и осложнений.
Цель работы - поиск путей коррекции антиоксидантной системы (АОС) как ключевого звена, способного компенсировать усиление процессов ПОЛ и предупредить развитие органной недостаточности при ПХП. Исследовано действие различных антиоксидантов на проявления ОС при экспериментальном ПХП. Предполагаемые корректоры антиоксидантного статуса использовали в терапии экспериментального ПХП в форме липосом (ЛП) что обеспечивает наиболее быструю и точную (полную) доставку препарата к поврежденным органам и тканям.
* Каф. госпитальной хирургии КемГМА Росздрава, г. Кемерово
