CC BY
13
Т аким образом, как показали результаты исследования, первому и второму взрослым периодам, а также зрелому возрасту соответствует период относительной стабилизации в строении интрамурального сосудистого русла почечных вен. Оно представляет на данном этапе онтогенеза человека сложную единую трехмерную сеть, архитектоника которой определяется глубиной локализации и структурными компонентами венозной стенки. Плотность сосудистой сети в зрелом возрасте составляет - (67,0±3,3) капилляров на единицу площади венозной стенки. В процессе старения в стенках почечных вен происходят инволютивные изменения в системе микроциркуляции, что проявляется уменьшением плотности капиллярных сетей в наружной и средней ее оболочках (42,0±2,1 капилляров на единицу площади венозной стенки) в результате чего образуются бессосуди-стые зоны. Артериолы и венулы микрососудистой сети стенок почечных вен приобретают резкую извилистость.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Абрамова Н.Н. Магнито-резонансная томография и ангиография при обследовании живых доноров почки // Материалы конференции «Клиническая трансплантация органов». - М., 2005. - С. 29-31.
2. Гурина О.Ю. Сравнительно-гистологическое и онтогенетическое исследование сосудистого эндотелия // Морфология. - 1992. - № 3. - С. 76-80.
3. Макаренко Н.Ю. Изменчивость строения соединительно-тканного каркаса внутриорганного сосудистого русла почки: автореф. дис. ...канд. мед. наук. - Иркутск, 1990. - 31 с.
4. Мойсюк Я. Г. Хирургические аспекты трансплантации правой почки от живого донора. // Тезисы конференции «Клиническая трансплантация органов». - М., 2007. - С. 160-161.
5. Семенова Л.К. Объективные морфологические критерии возрастной периодизации // Основные закономерности роста и развития детей и критерии периодизации. - Одесса, 1975. - С. 162-163.
6. Хэм А., Кормак Д. Гистология. - М.: Мир, 1983. - Т. 3-4. - 218 с.
7. Чернух А.М. Микроциркуляция. - М.: Медицина, 1984. - 507 с.
8. Шаршаткин А.В., Азаренкова О.В., Мойсюк Я.Г. Анализ отдаленных результатов трансплантации почки от живого родственного донора. // Медицинский альманах. Спецвыпуск. Высокие технологии в медицине. - 2008, Май. - С. 34-36.
9. Moisiuk G. Living-related kidney transplantation the preffered solution for organ shortage in Russia. // Transplant Int. - 2007. -Vol. 20, Suppl. 2. - P. 201.
Кафаров Эдгар Сабирович, кандидат медицинских наук, ассистент кафедры анатомии человека ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121, (8512) 52-53-21, e-mail: [email protected]
УДК 614.484:547-38
© В.Я. Курилов, Е.В. Абросимова, В.Н. Андрус, 2011
В.Я. Курилов1, Е.В. Абросимова2, В.Н. Андрус1
ПОВРЕЖДАЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ КОМПОЗИЦИОННЫХ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ «ДЕЗКОН» И «БРИЛЛИАНТ» НА БАКТЕРИИ И СПОРЫ
1ФГУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт», г. Волгоград 2ОАО «Новая Поликлиника - Астрахань» г. Астрахань
Изучено повреждающее действие новых композиционных четвертично-аммониевых соединений «Дезкон» и «Бриллиант» на клетки микроорганизмов. Результаты электронно-микроскопических исследований свидетельствуют о выраженных морфологических изменениях с деструкцией клеточных стенок, выбросом цитоплазматического матрикса.
Ключевые слова: дезинфекция, дезинфицирующие средства «Бриллиант» и «Дезкон», микроорганизм, деструкция, цитоплазматический матрикс.
V.Ya. Kurilov, E.V. Abrosimova, V.N. Andrus
THE DAMAGING ACTION OF COMPOSED DISINFECTANT MEANS «DEZKON» AND «BRILLIANT»
ON BACTERIA AND SPORES
The article deals with the study of damaging action of new composed quadric-ammonium compounds «Dezkon» and «Brilliant» on the cells of microorganisms. The results of electronic-microscopic investigation proved the expressed morphologic changes with distruction of cellular walls, out-come of cytoplasmatic matrix.
Key words: disinfection, disinfectants «Dezkon» and «Brilliant», microorganism, distruction, cytoplasmatic matrix.
Профилактические мероприятия при эндогенной внутрибольничной инфекции (ВБИ) в медицинской практике, в том числе и стоматологической, реализуются обязательным соблюдением противоэпидемиологических мероприятий, к числу которых относится дезинфекция.
Ассортимент антимикробных препаратов для дезинфекции в последние годы существенно расширился. В России разрешено применение и практически используется более 400 препаратов для дезинфекции, предстерили-зационной очистки и стерилизации. Однако, оценивая по научным публикациям последнего десятилетия результаты борьбы человека с миром микробов, несложно убедиться, что «перевес» не на стороне человека. Возрастает количество штаммов микроорганизмов, устойчивых к целым классам химических соединений, что предопределяет необходимость получения и целесообразность применения для дезинфекции все новых дезинфицирующих средств. К таковым можно отнести отечественные композиционные средства на основе четвертично-аммониевых соединений «Дезкон» и «Бриллиант» [1].
Целью данного исследования было изучить характер повреждающего действия новых дезинфицирующих средств «Дезкон» и «Бриллиант» на различные микроорганизмы и споры с помощью электронного микроскопа.
Материалы и методы исследования. Изучение повреждающего действия дезинфицирующих средств на тонкую морфологическую структуру грамположительных и грамотрицательных бактерий и спор проводилось на просвечивающем электронном микроскопе Jem-100 SX (Япония).
В качестве объектов исследования использовали суспензии бактерий Escherichia coli (E. coli) K-12 и Staphylococcus aureus (S. aureus) до и после обработки 2,0% раствором средства «Дезкон» в течение 60 мин или 3,0% раствором средства «Бриллиант». В качестве модельной споровой культуры использовали суспензию Bacillus anthracis (B. anthracis) до и после обработки 1,0% раствором средства «Дезкон» в течение 60 мин. Микробы фиксировали в 4,0% растворе глутарового альдегида и Na-какодилатном буфере рН=7,2 в течение 2 часов при комнатной температуре; затем образцы дофиксировали в 1,0% растворе OsO4 в буфере по Ruter Kellenberger [2] pH=6,0 в течение 2-х часов при температуре 18-20°С. Материал обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и окиси пропилена, затем заключали в агар Difko.
Кусочки материала объемом около 1м3 пропитывали и заключали в электронную смолу ERL -4206 по Spurr [3]. Полимеризация проводилась при температуре 48°С.
Ультратонкие срезы толщиной 300-400 А° получали на ультратоме LKB-2128 (Швеция), монтировали на сетки-подложки, покрытые формваром. Дополнительно срезы контрастировали 1,0% спиртовым раствором уранилацетата и водным раствором цитрата свинца по Venable Cogehall, затем просматривали в электронном микроскопе Jem-100 SX (Япония) при ускоряющем напряжении 80 кВ и инструментальном увеличении 200050000 крат.
Результаты и обсуждение. При контроле эффективности дезинфекции средствами «Дезкон» и «Бриллиант» с помощью электронной микроскопии было установлено, что их воздействие на вегетативные формы бактериальных клеток характеризуются, в первую очередь, повреждением клеточной стенки.
Так, воздействие уже 2,0% концентрации средства «Бриллиант» в течение 15 мин на Е. coli вызывает у части бактерий формирование пузырьков и везикул из поверхностных слоев клеточной стенки с последующим их отделением от клетки (рис. 1 А).
А Б В Г
^ - « * 1 • Ж * * * "V < * * , Л Г • ш «- У ' ■ * ■ ■« щ - 3 с ■ •• ф 1 СУ' Ф-
Рис. 1 А - E. coli. Воздействие 2,0% концентрации средства «Бриллиант». Деструкция бактериальной клетки.
Увеличение *12 000; Б - штамм E. coli К-12. При воздействии средства «Дезкон» в течение 15 мин интенсивная вакуолизация цитоплазмы. Увеличение *38 000; В - Агрегация бактериальных клеток S. aureus при воздействии 1,0% концентрации препарата «Бриллиант». Увеличение *20 000; Г - Воздействие препарата
«Дезкон» на S. aureus. Увеличение *20 000.
При 30 мин воздействии 1,0% раствор средства «Бриллиант» на S. aureus отмечается появление на поверхности клетки большого количества пузырьков и везикул (рис. 1 Б), тогда как 0,5% раствор средства «Дез-кон» уже через 15 мин вызывает тотальную деструкцию бактериальной клетки, проявляющуюся в формировании на ее поверхности множества пузырьков разнообразной величины (рис. 1 В).
Препарат «Дезкон», являющийся каркасным гетероциклическим соединением, включающим ЧАС, при 15 мин воздействии 1,0% концентрации на B. anthracis вызывает широкое отслоение клеточной стенки (рис. 2 Б).
А Б В Г
Рис. 2. Электронномикроскопическое изображение спор В. апШгас18 после обработки 1,0% раствором средства «Бриллиант». А - Просветление зоны нуклеотида. Увеличение *35 000; Б - Воздействие средства «Дезкон» вызывает широкое отслоение клеточной стенки. Увеличение *30 000; В - В спорах В. апШгас18 при воздействии 1,0% раствора препарата «Дезкон» их сердцевина уплотнена, оболочки расслоены;
Г - Воздействие средства «Дезкон» (2,0% р-р 30 мин) вызывает массовый выброс цитоплазматического
матрикса. Увеличение *8 000.
В то же время применение 1,0% раствора средства «Бриллиант» в течение 60 мин на возбудителя сибирской язвы приводит к появлению менее выраженных изменений в структуре клеток; у них отмечается просветление зоны нуклеотида и концентрация уплотнения матрикса цитоплазмы вблизи клеточной стенки (рис.2 А).
Тотальная деструкция клеток, резкое просветление матрикса цитоплазмы и его уплотнение возникают у спор В. аПИгашз при воздействии 1,0% концентрации рабочего раствора препарата «Дезкон» в течение 60 мин (рис. 2 В), тогда как 2,0% раствор данного средства вызывает подобные изменения через 30 мин и сопровождается массовым выбросом цитоплазматического матрикса (рис. 2 Г).
Таким образом, при электронно-микроскопическом исследовании выявлены выраженные морфологические изменения кишечной палочки, золотистого стафилококка и вегетативных клеток возбудителя сибирской язвы, подвергнутых воздействию рабочих концентраций исследованных дезинфицирующих средств, что может являться одним из критериев отбора наиболее перспективных из них для использования в стоматологической практике.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Федорова Л.С. Теория и практика совершенствования дезинфицирующих средств. - М.: Медицина, 2006. - 216 с.
2. Ruter A., Kellenberger E., L’ inclusion polyester pour I ulrtamicrotonie // J. Ultrastruct. Res. - 1968. -Vol. 2. - P. 200-214.
3. Spurr A.R. A Low-viscosity epoxy resin embedding medium for electron microscopy // J. Ultrastruct. Res. -1969. - Vol. 26. - P. 31-43.
Курилов Виктор Яковлевич, кандидат медицинских наук, заведующий лабораторией электронной микроскопии и гистохимии ФГУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт», Россия, 400131, г. Волгоград, ул. Голубинская, 7, тел. (8442) 32-33-48.
Абросимова Елена Владимировна, врач ОАО «Новая Поликлиника - Астрахань», заведующая стоматологическим отделением, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Кирова, 39, тел. (8512) 39-41-15, е-таіі: [email protected]
Андрус Валерий Николаевич, кандидат медицинских наук, заведующий лабораторией дезинфекции ФГУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт», Россия, 400131, г. Волгоград, ул. Голубинская, 7, тел. (8442) 32-33-48
