CC BY
14экспериментальная и клиническая урология №3 2015 www.ecuro.ru
Потенциальные биомаркеры гиперактивности детрузора в комплексной диагностике нарушений мочеиспускания у пациентов с рассеянным склерозом
Putative biomarkers of the detrusor overactivity in the diagnostics of the voiding dysfunction in patients with multiple sclerosis
I.V. Bazhenov, E.S. Filippova, V.V. Bazarnyi, S.V Sazonov, L.I. Volkova, L.N. Zaytseva, A.A. Mostovikh, V.S. Potapov
The aim of the study was the estimation of practical benefit for the assessment of putative biomarkers of the detrusor overactivity (DO) in the blood and urine ofpatients together with other diagnostic modalities. Twenty patients with voiding dysfunction in age 28 to 60 years were included in the study. Control group consisted of 20 healthy patients (age 2072 years). In every patient the following biomarkers were measured quantitatively in the blood and urine: nerve growth factor (NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), vascular endothelial growth factor, VEGF), cortisol, granulocyte colony-stimulating factor (GCSF). Sonography of urinary tract with estimation of residual volume, urodynamics and urethrocystoscopy with a forceps biopsy of bladder wall were although carried out. Histological and immune-histochemical investigation of bioptates (including NGFR mouse-derived monoclonal antibodies) was performed. Increased levels of NGF, VEGF and GCSF in urine, and NGF, BDNF and GCSF in blood were detected in patients with multiple sclerosis (MS), compared to control group. There was no correlation between the levels of biomarkers in blood and in urine and severity of voiding dysfunction or urodynamic findings. NGFR was overexpressed in urothelium of patients with MS. It was shown for a first time, that urinary GCSF could be a biomarker of neurogenic detrusor overactivity.
И.В. Баженов1,2, Е.С. Филиппова1,2, В.В. Базарный1,2, С.В. Сазонов1, Л.И. Волкова1,2, Л.Н. Зайцева1,2, А.А. Мостовых1, В.С. Потапов1
1ГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Екатеринбург,
2ГБУЗ СО «Свердловская областная клиническая больница №1», г. Екатеринбург
Рассеянный склероз - одно из тяжелых, инвалидизи-рующих заболеваний центральной нервной системы, являющийся сложной комплексной медико-социальной проблемой. Развиваясь у людей в возрасте от 20 до 45 лет рассеянный склероз (РС) может быстро привести к потере трудоспособности. В настоящее время в мире около 3 миллионов больных рассеянным склерозом. В России заболеваемость рассеянным склерозом составляет от 30 до 100 случаев на 100 000 населения [1, 2].
Дисфункция нижних мочевых путей встречается по данным разных авторов у 50-96% больных РС [3, 4]. Наиболее распространенными симптомами заболевания явля-
ются: учащенное мочеиспускание (32-99%), наличие императивных позывов (32-85%) и ургентное недержание мочи (19-80%) [3, 4, 5]. Реже встречаются затрудненное мочеиспускание и хроническая задержка мочи (2-20%) [4, 5].
Традиционно для диагностики нарушений мочеиспускания у неврологических больных используется комплексное уродинамическое исследование (КУДИ). Согласно клиническим рекомендациям Европейской ассоциации урологов пациентам с нейрогенной дисфунк-
цией нижних мочевых путей уро-динамическое исследование должно выполняться 1 раз в два года при отсутствии гиперактивности детрузора и 1 раз в год при наличии гиперактивности или сниженной комплаэнтности мочевого пузыря. Учитывая инвазивность, а также малую доступность комплексного уродинамического исследования в рутинной клинической практике, поиск биологических маркеров нейрогенного мочевого пузыря является актуальной задачей. Возможно, новые биомаркеры позволят судить о тяжести состояния, прогнозировать течение заболевания и правильно подбирать оптимальную схему лечения.
Цель исследования - определить практическую значимость количественного определения потенциальных биологических маркеров гиперактивности детрузора в крови и моче пациентов, используя комплексный подход к диагностике нарушений мочеиспускания у больных рассеянным склерозом.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В исследование вошло 20 больных рассеянным склерозом (16 женщин и 4 мужчины) в возрасте от 28 до 60 лет (43,35±9,21), предъявляв-
экспериментальная и клиническая урология №3 201 5 www.ecuro.ru
ших жалобы на проблемы с мочеиспусканием. Контрольную группу составили 20 пациентов (14 женщин и 6 мужчин) в возрасте 20-72 лет (38,35±17,19), находящихся в клинике урологии СОКБ №1 по поводу заболеваний, не сопровождавшихся гиперактивностью детрузора мочевого пузыря или детрузорно-сфинк-терной диссинергией (кисты почек, мочекаменная болезнь, хронический цистит и др.)
Критериями исключения для пациентов с рассеянным склерозом были: тяжесть основного заболевания, затрудняющая проведение комплексного уродинамического исследования и цистоскопии, отказ пациента от выполнения инвазив-ных вмешательств, наличие гиперплазии предстательной железы или стриктуры уретры у мужчин. В контрольную группу не вошли пациенты с признаками инфравези-кальной обструкции, лейкоциту-рией и клиническими симптомами воспаления нижних мочевых путей.
Все пациенты дали добровольное информированное согласие на проведение диагностических манипуляций, забор крови и мочи для исследования. Дизайн исследования одобрен локальным этическим комитетом ГБУЗ СО СОКБ№1 (протокол заседания №106 от 03.03.2014 г).
Пациентам основной и контрольной групп предлагалось заполнить анкеты-опросники (опросник для оценки симптомов гиперактивного мочевого пузыря, опросник SF-36), в течение 3-х суток вести дневник мочеиспусканий. Всем пациентам выполнялось лабораторное обследование, УЗ-исследование мочевых путей с определением объема остаточной мочи, комплексное уродинамическое исследование (КУДИ), уретроцистоско-пия с щипковой биопсией мочевого пузыря.
Проводились общеклинические анализы крови и мочи, а также количественное определение в крови
и моче методом иммунофермент-ного анализа фактора роста нервов (nerve growth factor, NGF), нейро-трофического фактора головного мозга (brain-derived neurotrophic factor, BDNF), васкулоэндотелиаль-ного фактора роста (vascular endothelial growth factor, VEGF), кортизола, гранулоцитарного коло-ниестимулирующего фактора (granulocyte colony stimulating factor, GCSF).
КУДИ осуществлялось с использованием уродинамической системы Triton (Laborie medical technologies) в соответствии с требованиями Международного общества по удержанию мочи [6] и включало в себя ретроградную водную цистометрию медленного наполнения (25 мл/мин.) в положении сидя, исследование «давление -поток», профилометрию уретры, электромиографию мышц тазового дна.
Биоптаты слизистой мочевого пузыря заливали в парафин и исследовали ступенчатыми срезами с окраской гематоксилин-эозином. Помимо гистологического, выполнялось иммуногистохимическое (ИГХ) исследование препаратов на наличие экспрессии рецепторов к фактору роста нервов (NGFR).
ИГХ исследование выполняли на автоматическом иммунностей-нере «VentanaBenchMarkGX» с использованием мышиных монокло-нальных антител к NGFR (клон MRQ-21, CellMarque, США), а также системы визуализации Ven-tanaultraViewUniversalDABDetec-tionKit (США). Время инкубации с антителами, при использовании смягченного режима демаскировки антигена, составило 16 минут при 37°С. После окончания программы окрашивания дегидратированные препараты заключались под покровные стекла и исследовались на микроскопе "ZeisslmagerM" (Германия). Положительным контролем окрашивания NGFR являлись мио-эпителиальные клетки протоков молочной железы, отрицательным -
отсутствие экспрессии NGFR на других структурах. Внутри гистологического среза стенки мочевого пузыря внутренним положительным контролем NGFR являлись нервные волокна в собственной пластинке слизистой оболочки. Оценка уровня экспрессии иммуно-гистохимического окрашивания проводилась с использованием балльной системы. При этом отсутствие экспрессии оценивалось как -
0 баллов, слабая экспрессия -
1 балл, умеренная экспрессия -
2 балла, сильная экспрессия -
3 балла. Экспрессию NGFR оценивали раздельно в структурах собственной пластинки слизистой мочевого пузыря, базальных и супра-базальных слоях, а также в поверхностных слоях уротелия.
Статистическую обработку данных осуществляли с помощью программного пакета SPSS 14.0 for Windows. Оценку статистической значимости различий проводили по непараметрическому критерию Манна-Уитни. Различия считались достоверными при р<0,05. Для определения тесноты связи между переменными использовали коэффициент корреляции Спирмана [7].
РЕЗУЛЬТАТЫ
Из 20 больных РС 17 (85%) предъявляли жалобы на учащенное мочеиспускание и наличие императивных позывов, сопровождающихся у 15 (75%) ургентным недержанием мочи. Восемь (40%) пациенток отмечали недержание мочи не только на фоне сильного позыва, но также при кашле и физической нагрузке. У 9 (45%) больных ургентное недержание мочи сочеталось с затрудненным мочеиспусканием, трех (15%) пациентов беспокоила только странгурия. У одной пациентки наличие императивных позывов и учащенное мочеиспускание сопровождались постоянным дискомфортом в уретре и мочевом пузыре.
Данные анализа дневников мочеиспусканий пациентов с IB
экспериментальная и клиническая урология №3 2015 www.ecuro.ru
рассеянным склерозом приведены в таблице 1.
Пациенты с рассеянным склерозом имели достоверно большую частоту дневных и ночных мочеиспусканий и меньший объем мочи за одно мочеиспускание.
У 30% пациентов нарушения со стороны нижних мочевых путей появились одновременно с другими симптомами рассеянного склероза,
Таблица 1. Результаты анализа дневников основной и контрольной групп
у 5% предшествовали первым проявлениям заболевания. Среднее время возникновения симптомов нижних мочевых путей от момента установления диагноза РС составляло 4,0±4,2 года.
У всех больных РС, имевших симптомы ургентности, наличие гиперактивности детрузора было подтверждено в ходе комплексного уродинамического исследования.
мочеиспусканий пациентов
Показатели Пациенты с РС Контрольная группа
Минимальный объем мочи за мочеиспускание, мл 73,68+37,15* 125+27,39
Максимальный объем мочи за мочеиспускание, мл 270,52+97,03* 491+115,66
Средний объем мочи за мочеиспускание, мл 157,37+55,26* 308,33 + 50,7
Среднее количество мочеиспусканий за день 11,53+5,6* 6,7+0,81
Среднее количество мочеиспусканий за ночь 2,00±1,61* 0,17+0,41
Данные представлены в виде: mean±S.D., р<0,05
Таблица 2. Данные комплексного уродинамического исследования пациентов с рассеянным склерозом
Показатели Min Max Mean St. Error
Первый позыв на мочеиспускиние, мл 15 250 86,21 14,66
Нормальный позыв на мочеиспускиние, мл 40 340 124,60 16,61
Сильный позыв на мочеиспускиние, мл 60 500 178,25 26,99
Максимальная цистометрическая емкость, мл 70 500 232,89 30,37
Объем мочевого пузыря при первом эпизоде гиперактивности, мл 20 500 117,52 27,94
Давление детрузора при гиперактивности, см Н2О 3 28 9,94 1,78
Максимальное давление детрузора в фазу опорожнения, см Н2О 2 42 12,26 2,24
Давление детрузора при максимальном потоке мочи, см Н2О 2 39 10,22 2,37
Максимальная скорость потока мочи, мл/с 3 30 13,89 1,72
Рис.1. Цистометрия наполнения пациентки с рассеянным склерозом (женщина, 42 года). На графике представлен эпизод гиперактивности детрузора с ургентным недержанием мочи
Результаты КУДИ представлены в таблице 2.
Функциональная емкость мочевого пузыря (МП) у пациентов с рассеянным склерозом была снижена до 233±30 мл. При этом спонтанное непроизвольное сокращение МП у некоторых пациентов начиналось уже при наполнении МП до 20 мл. Средний объем МП при возникновении эпизода гиперактивности составлял 117±28 мл. В 88% случаев эпизоды гиперактивности приводили к ургентному недержанию мочи (рис. 1).
Из 13 пациентов, предъявлявших жалобы на затрудненное мочеиспускание, у 10 (50% от общего числа больных РС) человек при исследовании «давление-поток» и электромиографии мышц тазового дна была диагностирована детру-зорно-сфинктерная диссинергия (ДСД) (рис. 2). У трех пациентов объем остаточной мочи на фоне функциональной обструкции достигал 200-250 мл и ДСД сочеталась с гипотонией мочевого пузыря.
Количественная оценка содержания в крови и моче пациентов нейротрофинов показала, что уровень фактора роста нервов в моче и крови пациентов с РС выше, чем в контрольной группе (табл. 3). Ней-ротрофический фактор головного мозга оказался менее показательным маркером нейрогенного поражения нижних мочевых путей: его уровень в моче в двух группах не отличался, в крови был несколько выше для больных РС. Содержание васкулоэндотелиального фактора роста и гранулоцитарного колоние-стимулирующего фактора в моче пациентов с нейрогенным мочевым пузырем превышало уровень в контрольной группе.
Показатели этих маркеров в сыворотке крови пациентов, а также содержание кортизола в крови и моче в двух группах существенно не отличались. Полученные различия при оценке с помощью непараметрических тестов оказались статистически незначимы.
экспериментальная и клиническая урология №3 201 5 www.ecuro.ru
117
Эндоскопическая картина слизистой МП у пациентов с рассеянным склерозом не имела существенных отличий от контрольной группы, за исключением пациентов с ДСД и большим объемом остаточной мочи. У этих больных обращала на себя внимание трабекулярность слизистой оболочки стенки МП. У пациентки, предъявляевшей жалобы на дискомфорт в уретре и МП, при цистоскопии были выявлены признаки шеечного цистита.
Гистологическое исследование биоптатов слизистой МП в 90% случаев показало наличие признаков хронического воспаления минимальной активности.
При иммуногистохимическом исследовании биоптатов слизистой МП уровень экспрессии рецепторов к фактору роста нервов во всех слоях уроте-лия у больных с рассеянным склерозом был выше, чем в контрольной группе (рис. 3-5). Результаты анализа данных ИГХ представлены в таблице 4.
Рис.2. Исследование «Давление-поток» у пациента с рассеянным склерозом (мужчина, 36 лет): картина детрузорно-сфинктерной диссинергии
Таблица 3. Потенциальные биомаркеры нейрогенного мочевого пузыря в моче и крови пациентов основной и контрольной групп
Группа
РС (моль/л) Контроль(моль/л)
NGF, моча 21.0+6.7 8.9+1.8
NGF, кровь 79.3±22.0 26.8+9.5
BDNF, моча 37.0+11.5 41.4+9.3
BDNF, кровь 11383.3+1085.4 8495.4+768.9
VEGF, моча 45.5+6.8 35.6+4.1
VEGF, кровь 1.2+0.5 1.2+0.4
GCSF, моча 33.03+13.45 19.2+10.0
GCSF, кровь 10.64+5.9 9.8+6.02
NGF-фактор роста нервов, BDNF-нейротрофический фактор головного мозга, VEGF- васкулоэндотелиаль-ный фактор роста, GCSF-гранулоцитарный колониестимулирующий фактор
Таблица 4. Уровень экспрессии рецепторов к фактору роста нервов (NGFR) в слизистой оболочке мочевого пузыря
Группа Уровень экспрессии NGFR в слоях слизистой оболочки мочевого пузыря (балл)
Поверхностные Базальные и супраба-слои уротелия зальные слои уротелия Собственная пластинка слизистой
Контрольная группа 0+0 0,44+0,24 1,78+0,15
Пациенты с рассеянным склерозом 0,17+0.09 1,24+0,26 2,23+0,11
В каждом случае отсутствие экспрессии оценивалось как - 0 баллов, слабая экспрессия - 1 балл, умеренная экспрессия - 2 балла, сильная экспрессия - 3 балла
ОБСУЖДЕНИЕ
Роль нейротрофинов в качестве потенциальных биомаркеров гиперактивного мочевого пузыря активно изучается в последние годы [8, 9]. Повышенный уровень NGF и BDNF отмечается в моче и крови пациентов с гиперактивным мочевым пузырем и имеет тенденцию к снижению на фоне лечения антимускариновыми препаратами или ботулотоксином [9, 10]. В исследовании А. Giannantoni и соавт. было показано, что инъекции ботули-нического токсина в стенку мочевого пузыря уменьшают уровень NGF в тканях и усиливают экспрессию рецепторов к NGF [11]. В
о
¿г
'.V
и
*
»г
/Л
•3" -
• *
Рис. 3. Отсутствие экспрессии рецепторов к фактору роста нервов в базальных слоях уротелия пациентки контрольной группы (микрофотография ИГХ препарата). 400 х
Рис. 4. Наличие экспрессии рецепторов к фактору роста нервов в базальных слоях уротелия пациента с рассеянным склерозом (микрофотография ИГХ препарата). 400 х
экспериментальная и клиническая урология №3 2015 www.ecuro.ru
Имеются и противоположные результаты. Так L.A. Birder и соавт., исследовав концентрацию NGF непосредственно в биоптатах слизистой мочевого пузыря у женщин с гиперактивностью детрузора и без нее, не нашли существенных различий [12].
Нам не встретились работы, посвященные исследованию нейротро-финов в качестве маркеров нейроген-ного мочевого пузыря у пациентов с РС.
Рассеянный склероз - хроническое демиелинизирующее заболевание ЦНС, в основе которого лежат сложные иммунопатологические механизмы, приводящие к нейродегене-ративному повреждению с гибелью аксонов. Параллельно с демиелини-зацией при PC наблюдаются и процессы регенерации, в частности, восстановление миелина. Предполагается, что макрофагами, микро-глией или другими клетками синтезируются нейротрофины, влияющие на процесс пролиферации и диффе-ренцировки олигодендроцитов и, следовательно, процесс ремиелини-зации [13]. Наиболее изученным из семейства нейротрофинов является фактор роста нервов. NGF влияет на рост аксонов и поддержание синап-тических связей в нейронах головного и спинного мозга, клеток спи-нальных ганглиев и постганглионар-ных вегетативных нейронов. Кроме того, фактор роста нервов может быть вовлечен в нейроиммунные взаимодействия и внутритканевое воспаление [14].
В литературе имеются лишь единичные сообщения об изучении уровня сывороточного NGF при PC. Показано как значительное повышение содержания NGF в спинномозговой жидкости больных PC при обострении заболевания в сравнении с заметным снижением при ремиссии [15], так и его отсутствие [16]. Продемонстрировано образование ауто-антител к фактору роста нервов у пациентов с РС [17].
Повышенный уровень нейро-трофинов в сыворотке крови и моче пациентов с РС может быть обуслов-
лен системным патологическим процессом, протекающим в нервной системе. Однако наличие большого числа рецепторов к NGF в слизистой мочевого пузыря указывает на вовлеченность нейротрофинов в патогенез симптомов нижних мочевых путей при РС.
Рецептор фактора роста нервов или рецептор p75 (P75NTR) является низкоаффинным рецептором нейротрофинов (NGF, BDNF, NT3, NT4), а также играет важную роль в регулировке активности других нейротро-финных рецепторов (TrkA, TrkB, TrkC). Рецепторы под воздействием нейротрофинов способствуют пролиферации, дифференциации и выживанию клетки. В присутствии NGF этот рецептор способен как запускать программированную клеточную гибель, так и защищать клетки от апоптоза [18]. Высокий уровень экспрессии рецепторов к фактору роста нервов, обнаруженный в уро-телии пациентов с рассеянным склерозом, может обеспечивать реализацию таких тканевых эффектов NGF как модуляция ответа уротелия на воспаление, регуляция пролиферации и NGF-опосредованная индукция апоптоза.
При анализе данных не было выявлено корреляции между уровнем нейротрофинов и выраженностью симптомов со стороны нижних мочевых путей, в том числе, наличием ургентного недержания мочи. Уровень биомаркеров также не коррелировал с цистометрическими параметрами - минимальным объемом мочевого пузыря, при котором возникает гиперактивность детру-зора, и давлением детрузора в момент непроизвольного сокращения.
Кроме того, уровни BDNF и NGF не были взаимосвязаны между собой. Однако отмечена статистически значимая корреляция между BDNF и GCSF в моче пациентов с рассеянным склерозом (коэффициент корреляции Спирмена=0,347, p<0,05). Гранулоцитарный колоние-стимулирующий фактор является главным гемопоэтическим фактором
роста, регулирующим грануло-цитопоэз, и широко применяется в медицине при лечении нейтропений различной этиологии. В нервной системе GCSF участвует в стимуляции нейрогенеза, оказывает противовоспалительное действие и подавляет апоптоз. В исследовании G. Ghoniem и соавт. было показано повышенное содержание GCSF в моче пациентов с гиперактивным мочевым пузырем наряду с другими воспалительными цитокинами [19].
Выявленное в ходе исследования повышение уровня NGF, VEGF и GCSF в моче, а также выраженная экспрессия рецепторов к NGF в уро-телии пациентов с рассеянным склерозом и симптомами нижних мочевых путей указывают не только на процессы де- и ремиелинизации в стенке мочевого пузыря, но и на наличие воспалительной реакции слизистой. Присутствие воспалительных изменений в слизистой оболочке было подтверждено в ходе гистологического исследования биоптатов. Выявленные закономерности приближают нас к пониманию патогенеза нейрогенного мочевого пузыря.
ВЫВОДЫ
Биологические маркеры нейро-генного мочевого пузыря, такие как NGF, BDNF, VEGF и GCSF, имеют хорошие предпосылки для применения в клинической практике, но на сегодняшний день не могут заменить комплексное уродинамическое исследование в диагностике нейроген-ных расстройств мочеиспускания.
У пациентов с рассеянным склерозом GCSF мочи впервые представлен в качестве маркера нейрогенной гиперактивности детрузора. Требуются дальнейшие исследования, чтобы оценить его практическую значимость и возможности клинического использования.
NGF и его рецепторы в стенке мочевого пузыря могут быть потенциальными мишенями для таргетной терапии нейрогенных расстройств мочеиспускания. □
экспериментальная и клиническая урология №3 201 5 www.ecuno.nu
Резюме:
Целью работы была оценка практической значимости определения потенциальных биологических маркеров гиперактивности детрузора в крови и моче пациентов, используя комплексный подход к диагностике нейрогенных нарушений мочеиспус-
В исследование вошло 20 больных рассеянным склерозом (РС) в возрасте от 28 до 60 лет, имеющих симптомы нижних мочевых путей. Контрольную группу составили 20 пациентов в возрасте 20-72 лет. Всем пациентам выполнялось количественное определение в крови и моче фактора роста нервов (nerve growth factor, NGF), нейротрофического фактора головного мозга (brain-derived neurotrophic factor, BDNF), васкулоэндотелиального фактора роста (vascular endothelial growth factor, VEGF), кор-тизола, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (granulocyte colony stimulating factor, GCSF). Проводили ультразвуковое исследование мочевых путей с определением объема остаточной мочи, комплексное уродинамическое исследование (КУДИ), уретроцистоскопию с щипковой биопсией мочевого пузыря. Полученные биоптаты исследовали гистологическим и иммуногистохимическим методами с использованием мышиных моноклональных антител к NGFR. В моче больных РС обнаружены более высокие, чем в контрольной группе, уровни NGF, VEGF и GCSF, в сыворотке крови - NGF, BDNF и GCSF. Корреляции между концентрацией биомаркеров в мочи и крови пациентов с нейрогенным мочевым пузырем и степенью выраженности клинических проявлений РС, а также данными КУДИ не было. С помощью ИГХ-исследования был доказан более высокий уровень экспрессии NGFR в клетках уротелия пациентов с нейрогенным мочевым пузырем по сравнению с контрольной группой. GCSF мочи впервые представлен в качестве маркера нейрогенной гиперактивности детрузора.
Ключевые слова: нейрогенный мочевой пузырь, фактор роста нервов, нейротрофический фактор головного мозга, васкулоэндотелиальный фактор роста, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, маркеры гиперактивности детрузора, рассеянный склероз.
^y words: neurogenic bladder, nerve growth factor (NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), vascular endothelial growth factor (VEGF), granulocyte colony-stimulating factor (GCSF), markers detusor overactivity, multiple sclerosis.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гусев Е.И., Завалишин И.А., Бойко А.Н. Рассеянный склероз: Клиническое руководство. М.: Реал Тайм, 2011. 528 с.
2. Шмитд Т.Е., Яхно Н.Н. Рассеянный склероз. М.: Медпресс, 2010. 267 с.
3. Мазо Е.Б., Завалишин И.А., Кривобородов Г.Г., Шварц П.Г. Рассеянный склероз и нарушения мочеиспускания: клиника, диагностика, лечение. // Неврологический журнал. 2002. № 4. С. 4-7.
4. Corcos J. A urological challenge: Voiding dysfunction in multiple sclerosis. // Can Urol Assoc J. 2013. Vol. 7, N.9-10. P.181-182.
5. Adli Oel Y, Corcos J. Bottulinum neurotoxin-A treatment of lower urinary tract symptoms in multiple sclerosis. // Can Urol Assoc J. 2014. Vol. 8, N.1-2. P.61-67.
6. Schäfer W, Abrams P, Liao L, Mattiasson A, Pesce F, Spangberg A, Sterling AM, Zinner NR, van Kerrebroeck P. International Continence Society Good urodynamic practices: uroflowmetry, filling cystometry, and pressure-flow studies. // Neurourol Urodyn. 2002. Vol 21, N 3. P. 261-274.
7. Герасимов А.Н. Медицинская статистика: Учебное пособие. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2007. 480 с.
8. Seth JH, Sahai A, Khan MS, van der Aa F, de Ridder D, Panicker JN, Das-gupta P, Fowler CJ. Fowler Nerve growth factor (NGF): a potential urinary bio-marker for overactive bladder syndrome (OAB)? // BJU Int. 2013. Vol.111, N 3. P. 372-380.
9. Fry CH, Sahai A, Vahabi B, Kanai AJ, Birder LA. What is the role for biomarkers for lower urinary tract disorders? ICI-RS 2013. // Neurourol Urodyn. 2014. Vol. 33, N 5. P. 602-605.
10. Liu HT, Chen CY, Kuo HC. Urinary nerve growth factor levels in overactive bladder syndrome and lower urinary tract disorders. // J Formos Med Assoc. 2010. Vol. 109, N. 12. P. 862-878.
11. Giannantoni A, Conte A, Farfariello V, Proietti S, Vianello A, Nardicchi V, Santoni G, Amantini C. Onabotulinumtoxin-A intradetrusorial injections
modulate bladder expression of NGF, TrkA, p75 and TRPV1 in patients with detrusor overactivity. // Pharmacol Res. 2013. Vol. 68, N. 1. P. 118-124.
12. Birder LA, Wolf-Johnston A, Griffiths D, Resnick NM. Role of urothelial nerve growth factor in human bladder function. // Neurourol Urodyn. 2007. Vol. 26. P. 405-409.
13. Acosta CM, Cortes C, MacPhee H, Namaka MP. Exploring the role of nerve growth factor in multiple sclerosis: implications in myelin repair. // CNS Neurol Disord Drug Targets. 2013. Vol. 12, N. 8. P. 1242-1256.
14. Vaidyanathan S, Krishnan KR, Mansour P, Soni BM, McDicken I. p75 nerve growth factor receptor in the vesical urothelium of patients with neuropathic bladder: an immunohistochemical study. // Spinal Cord. 1998. Vol. 36, N. 8. P. 541-547.
15. Laudiero LB, Aloe L, Levi-Montalcini R, Buttinelli C, Schilter D, Gillessen S, Otten U. Multiple sclerosis patients express increased levels of beta-nerve growth factor in cerebrospinal fluid. // Neurosci Lett. 1992. Vol .147, N.1. P. 9-12.
16. Massaro AR, Soranzo C, Bigon E, Battiston S, Morandi A, Carnevale A, Callegaro L. Nerve growth factor (NGF) in cerebrospinal fluid (CSF) from patients with various neurological disorders. // Ital J Neurol Sci. 1994. Vol.15, N. 2. P. 105-108.
17. Переседова А.В. Свободнорадикальные реакции и аутоантитела к фактору роста нервов при рассеянном склерозе: автореф. дисс...канд. мед. наук. М. 1999. 27 с.
18. Kuo HC, Liu HT, Chancellor MB. Can urinary nerve growth factor be a biomarker for overactive bladder? // Rev Urol. 2010. Vol. 12. P. 69-77.
19. Ghoniem G, Faruqui N, Elmissiry M, Mahdy A, Abdelwahab H, Oommen M, Abdel-Mageed AB. Differential profile analysis of urinary cytokines in patients with overactive bladder. // Int Urogynecol J. 2011. Vol. 22, N. 8. P. 953-961.
