CC BY
17
УДК 669.5:669.4:669.891:616.71-007.234
Е.М. Ылецька, Н.М. Онул,
В.В. Калтчееа
ПОР1ВНЯЛЬНА ОЦ1НКА БЮПРОТЕКТОРНО1 ДП ЦИНКУ В ОРГАН1ЧН1Й ТА НЕОРГАН1ЧН1Й ФОРМ1 НА ОСТЕОТРОПН1СТЬ СВИНЦЮ В ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ УМОВАХ
ДЗ «Днтропетровсъка медична академiя МОЗ УкраИни»
кафедра загалъно'1 гтени
(зав. - д. мед. н., проф. Е.М. Бшецъка)
пл. Соборна, 4, Днтро, 49000, Украна
SE «Dnipropetrovsk medical academy of Health Ministry of Ukraine» Department of General Higiene Soborna Sq., 4, Dnipro, 49000, Ukraine e-mail: enbelitska@ukr.net
Ключовi слова: цинк, свинецъ, калъцш, остеопороз, юстка Key words: zinc, plumbum, calcium, osteoporosis, bone
Реферат. Сравнительная оценка биопротекторного действия цинка в органической и неорганической форме на остеотропность свинца в экспериментальных условиях. Белецкая Э.Н., Онул Н.М., Калиничева
В.В. Химическая агрессия техногенного загрязнения окружающей среды, по мнению специалистов, является ведущим фактором риска для популяционного здоровъя населения. Систематическое поступление конта-минантов в смежные жизнеобеспечивающие среды - воздух, воду, растителъные и животные пищевые продукты за прямыми и опосредованными миграционными цепями, создает и комплексное, и комбинированное их влияние на организм. При этом следует отметитъ, что именно химический фактор, с одной стороны, является наименее изученным в этом отношении, с другой стороны он представляет наиболее существенную и резко возрастающую экологическую угрозу для здоровъя человека. В организме человека костная тканъ имеет наиболъшие кумулятивные свойства по отношению ко многим ксенобиотикам, в частности к группе тяжелых металлов, среди которых свинец является лидером по степени родства к костной ткани. В связи с этим целъю является эксперименталъное исследование особенностей влияния различных форм цинка на содержание калъ-ция в костной ткани при свинцовой интоксикации. В резулътате проведенных исследований установлено, что низкодозовое влияние свинца в условиях подострого опыта обуславливает достоверное уменъшение содержания калъция в костной ткани на 28% в сравнении с аналогичными данными контролъной группы животных, что снижает ее плотностъ и становится фактором риска развития остеопений и остеопорозных состояний организма. Комбинированное воздействие свинца и органических и неорганических форм цинка достоверно увеличивает содержание калъция на 16,43% и 22,04% соответственно, по сравнению со свинцовой группой, что позволяет предположитъ протекторные свойства цинка при свинцовой интоксикации за счет эффекта биоантагонизма. При изолированном введении органических и неорганических форм цинка содержание калъция в костной ткани увеличивается в 1,4 и 2,04 раза соответственно по сравнению с контролъной группой. Полученные резулътаты подтверждают остеопротекторностъ цинка, особенно органических его форм, при свинцовой интоксикации и дают основание считатъ, что в системе «свинец - цинк» формируется эффект биологического антагонизма.
Abstract. Comparative evaluation of bioprotective action of zinc in organic and inorganic form on osteotropism of lead in experimental conditions. Biletska E.M., Onul N.M., Kalinichevа V.V. Chemical aggression of technogenic pollution of the environment, according to experts, is the leading risk factor for population health. A systematic entry of contaminants in the related life-supporting environments - air, water, plant and animal food products by direct and indirect migration chains creates both integrated and combined effect on the body. It should be noted that a chemical factor, on the one hand, is the least studied in this respect, on the other hand it represents the most significant and rapidly growing environmental threat to human health. In the human body bone tissue has the highest cumulative properties against many xenobiotics, in particular to heavy metals, among which lead is the leader in relationship to the bone tissue. In this regard, the goal is to study peculiarities of different forms of zinc on calcium content in bone tissue in lead intoxication. As a result of researches it is established that low dosed effect of lead during subacute experience causes a significant decrease of calcium content in the bone tissue by 28% in comparison with those of control group of animals, this reduces its density and becomes a risk factor for the development of osteopenic and osteoporotic state of the organism. Combined effect of lead and organic and inorganic forms of zinc zeliably increases calcium content by 16.43% and 22,04% respectively, as compared with lead group, suggesting protective properties of zinc in lead intoxication due to the effect of bioantagonism. In the isolated introduction of organic and inorganic forms of zinc, calcium content in the bone tissue increases by 1.4 and 2.04 times respectively, as compared with the control group. The obtained results confirm osteoprotective action of zinc, particularly of organic forms in lead intoxication and give reason to believe that in the system "lead - zinc" effect of biological antagonism is formed.
Хiмiчна агрешя техногенного забруднення навколишнього середовища, на думку фаивщв, е провiдним фактором ризику для популяцшного здоров'я населення. Систематичне надходження контамiнантiв у сумiжнi життезабезпечуючi середовища - говоря, воду, рослинш i твариннi харчовi продукти за прямими й опосеред-кованими м^ацшними ланцюгами, створюе i комплексний, i комбiнований !х вплив на орга-нiзм. При цьому слiд зазначити, що саме хiмiч-ний фактор, з одного боку, е найменш вивченим у цьому вщношенш, з iншого боку - представляе найбiльш iстотну i рiзко зростаючу екологiчну загрозу для здоров'я людини.
Так, згiдно з аналiзом Всесвггньо1 Оргашзаци Охорони Здоров'я (ВООЗ), у списку кра1н за за-гальною кiлькiстю щорiчних смертей вщ забруднення повiтря Украша посiдае 6 мiсце, а за по-казником смертностi наша краша стала лiдером у свiтi [12].
В органiзмi людини кiсткова тканина мае найбiльшi кумулятивнi властивостi по вщношен-ню до багатьох ксенобютиюв, зокрема до групи важких металiв, серед яких свинець е лщером за ступенем спорiдненостi до юстково! тканини [3, 9, 13, 10, 14, 18]. Враховуючи, що кальцш i свинець розподiляються, депонуються i метаболiзу-ються практично щентично, головною небезпе-кою свинцю е не тшьки накопичення його в юстковш тканинi людини, але й замщення в нiй кальцiю, що зменшуе И щiльнiсть та сприяе розвитку остеопорозно! патологи [6].
Разом з тим, у механiзмi розподшу та екс-креци свинцю в органiзмi за даними [11, 17] сут-теве значення мае мшроелемент цинк, як його доведений бюантагошст.
Слiд пiдкреслити, що в останш роки кiлькiсть токсикологiчних дослщжень з вивчення впливу наночасток на об'екти довкшля та людину сут-тево зросла. Але, на жаль, активш дослiдження впливу низькодозових рiвнiв нанометалiв на органiзм майже не торкаються оцiнки !х ток-сичних ефектiв саме на кiсткову тканину при iзольованому i/або комбiнованому надходженш, а також порiвняльних аспектiв !х ди зi звичай-ними формами металiв.
У зв'язку з цим метою е експериментальне дослiдження особливостей впливу рiзних форм цинку на вмют кальцiю у кiстковiй тканиш при свинцевiй штоксикаци.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ IX ДОСЛ1ДЖЕНЬ
Для проведення експериментальних до-слiджень було обрано самиць щурiв лшп Wistar вшом 2,5-3 мiсяцi, з масою тша 150-170 г. В екс-перимент використано методичнi пiдходи, що
вщповщають сучасним мiжнародним вимогам щодо проведення токсиколопчних експеримен-TiB з використанням тварин вiдповiдно до Свро-пейсько1 конвенцiï. Утримували тварин в опти-мальних умовах вiварiю на стандартному рацюш i3 вiльним доступом до води та 1'ж1 вiдповiдно до юнуючих вимог [7]. Адаптацiйний перюд тривав 12 днiв, протягом якого визначали загальний стан тварин. Тварини були розподшеш на п'ять пщдослщних та одну контрольну групи у ви-падковому порядку з формуванням однорiдностi за середньою масою по 8 щурiв у кожнiй груш.
В експериментальних моделях використо-вували розчини ацетату свинцю, хлориду цинку та цитрату цинку. Цитрат цинку був отриманий за аквананотехнолопею i наданий Украшським державним НД1 нанобiотехнологiï та ресурсо-збереження (м. Киïв). В умовах пщгострого екс-перименту був змодельований iзольований вплив ацетату свинцю, хлориду цинку та цитрату цинку, комбшований вплив бiнарних систем «ацетат свинцю - хлорид цинку» та «ацетат свинцю - цитрат цинку», який вщдзеркалив реальне 1'х спiввiдношення у ^dmi життедiяльностi населення промислово розвинутоï територiï [2].
Вiдповiдно до дизайну експерименту (рис. 1), дозу ацетату свинцю, близьку до 1/ 30000 LD50, що вщповщае 0,05 мг/кг маси тша, вводили iзо-льовано (перша дослщна група) та в комбшаци з хлоридом цинку в дозi 1,5 мг/кг маси тша, що в 7 разiв нижче порогу токсичносп [5] (четверта дослщна група) i з цитратом цинку в дозi 1,5 мг/кг (п'ята дослщна група). Хлорид цинку введений iзольовано в дозi 1,5 мг/кг тваринам другоï до-слiдноï групи, а цитрат цинку - в дозi 1,5 мг/кг (третя дослщна група). Щурам контрольноï групи (шоста група) у щ ж строки вводили дистильовану воду, яку використовували при приготуваннi агенту впливу. Для максимального наближення експерименту до природних умов обрано перо-ральний шлях введення за допомогою внутрш-ньошлункового зонду, згiдно з методичними реко-мендацiями з вивчення токсичносп металiв.
На кiнцевому етапi дослщження проводили миттеву декапiтацiю тварин тд тiопенталовим наркозом i вiдбирали матерiали для подальших дослiджень вiдповiдно до €вропейськоï кон-венцiï. Стегнову юстку препарували та видiляли за загальноприйнятими методиками [8]. У юстко-вiй тканинi визначали кiлькiсть кальщю методом титрування у Днiпропетровськiй фши Д1 «1н-ститут охорони трунив Украши» «Держгрунт-охорона» [4].
Статистична обробка та аналiз результатiв виконаш за загальноприйнятими методиками з використанням лщензшних програм статистич-ного аналiзу Statistica v.6.1 та Microsoft Excel [1].
Рис. 1. Дизайн експериментальних дослщжень
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ГХ ОБГОВОРЕННЯ
Отримаш результати свщчать, що низько-дозовi рiвнi ацетату свинцю при iзольованому та комбiнованому його введенш з препаратами цинку в оргашзм тварин протягом пiдгострого дослiду призводять до змiн вмiсту кальцiю у стегнових кiстках щурiв рiзноспрямованого характеру.
Так, у тварин першо! групи тд впливом свинцю середня концентращя кальцiю в юст-ковiй тканиш становить 78,5±0,08 мг/г (табл.), що порiвняно з аналогiчними даними контрольно! групи тварин на 28% нижче (109,1±0,22 мг/г) та тдтверджуеться високим ступенем статис-
тично! вiрогiдностi (р<0,01). Отриманi данi кореспондуються з результатами подiбних до-слiджень шших авторiв [13].
Аналiз результатiв дозволяе вважати, що за рахунок значного зменшення вмiсту кальцiю у юстковш тканинi в умовах ди свинцю, з урахуванням його тропностi до юстково! тка-нини, акумулюючо! близько 90% свинцю орга-нiзму, створюються передумови порушення мiнерального складу юсток, яке здатне спричи-нити певш морфологiчнi змiни та розвиток у подальшому остеопатiй [13, 14].
Вмпст кальщю в к1стков1й тканин1 щур1в
П/п групи Розчини, що вводились тваринам Статистичт показники Отриман1 результати мг/г
1група ацетат свинцю (РЬ) М ±т 78,5 * 0,08
2 група хлорид цинку ^пх) М ±т 155,0* 0,99
3 група цитрат цинку (наноаквахелатна форма цинку) / ) М ±т 222,2 * 3,0
4 група ацетат свинцю (РЬ) + хлорид цинку ^пх) М ±т 91,4 * 0,24
5 група ацетат свинцю (РЬ) + цитрат цинку (наноаквахелатна форма цинку) / ) М ±т 95,8 * 0,3
6 група дистильована вода М ±т 109,1 0,22
Прим1тка. * - р < 0,01 пор1вняно з контрольною групою.
Вмiст кальцiю в кiстковiй тканиш при iзольо-ваному впливi хлориду цинку на щурiв за середшми величинами становить 155,0±0,99 мг/г, що у твтора рази бiльше порiвняно з контрольною групою (р<0,01). Це зростання кальцiю пов'язано зi встановленою останшми десятирiччями остеотропнiстю цинку, його важ-ливою роллю у процес забезпечення мше-рального гомеостазу юстково! тканини [19]. Так, виявлено, що в юстщ мiститься значний рiвень -30% вiд загально! кшькосп цинку в органiзмi [15], який бере безпосередню участь у сиш^ оргашчного матриксу кiстки [16].
Ще бiльше зростання кальцiю отримано при iзольованому введеннi цитрату цинку у нано-аквахелатнiй формi. Результати свщчать, що вмiст кiсткового кальцiю за середшми зна-ченнями достовiрно збшьшений у 2,04 рази по вщношенню до контрольно! групи (р<0,01) та
становить 222,2±3,0 мг/г. Тобто аквананоцитрат цинку мае таю ж властивосп, як i неорганiчна форма, але внаслiдок бiльшо! бiодоступностi по-рiвняно зi звичайним цинком [7] швидше про-никае через кишковий бар'ер, зв'язуеться з активними центрами фермеш!в i мобiлiзуе кiстковий метаболiзм.
Середня концентращя кальщю у кiстках до-слiдних тварин четверто! групи, експонованих бшарною сумiшшю «свинець - цинк», становила 91,4±0,24 мг/г, що по вщношенню до контролю на 16,2% нижче, до тварин свинцево! групи - на 14,1% вище, а порiвняно зi щурами цинково! групи - на 41% нижче (рис. 2).
Аналiз таких рiзноспрямованих результатiв дозволяе висунути певнi припущення. 1зольована дiя свинцю викликае максимальне зменшення кiсткового кальцiю, у зв'язку з вщомою ос-теотропнiстю свинцю, який характеризуеться
схожими на кальцш фiзико-хiмiчними власти-востями, замщуе останнiй у кiстковiй матриц iз подальшими наслiдками його депонування. 1зо-льований вплив цинку призводить до суттевого зростання кальцiю в юстках. При одночасному введеннi в оргашзм свинцю та цинку, о^м описаних вище особливостей, вiдбуваються змши хiмiчного складу юстково! тканин в про-цесi експерименту, що пояснюеться антаго-
нiстичними взаемодiями дослiджуваних речовин мiж собою на рiзних рiвнях - всмоктування в шлунково-кишковому траки, транспортування, тканинному та клiтинному рiвнях, що зумовлюе блокування остеотропно! активност в першу чергу свинцю, це, в свою чергу, призводить до значного гальмування процесу втрати кальщю юстково! тканиною.
100
80
60
40
20
42,2
-27,99
103,9
-16,15
-12,11
контроль
-20
-40
Дточ1 речовини в дослвдних групах % - рпницн вм1сту кальщю м1ж досл1дними та контрольною групами
□ Ацетат свинцю □ Хлорид цинку □ Цитрат цинку
В Ацетат свинцю+хлорид цинку □ Ацетат свинцю+цитрат цинку
0
Рис. 2. Вплив iзольованоТ та комбшованоТ ди свинцю й оргашчноТ та неоргашчноТ форм цинку на вмкт кальцш в кктковш тканиш лабораторних тварин
Щодо зростання вмiсту кальщю в юстках при введеннi цинку, то це може бути пов'язано, на наш погляд, iз потенщюванням ним юсткового метаболiзму, про що мова теж йшла ранiш.
Отже, вплив бшарно! сумiшi «свинець -цинк» певною мiрою гальмуе процес накопи-чення свинцю в юстковш тканинi i втрати нею кальщю завдяки саме цинку - вщомому бюанта-гонiсту свинцю [11, 17], що ще раз доводить бюпротекторш властивостi цинку по вщношен-ню до остеотропно! дп останнього.
Стосовно моделювання одночасного впливу свинцю i цитрату цинку, то спрямованiсть змш вмiсту кальцiю в кiстках щурiв порiвняно з
iзольованою дiею цих речовин свщчить про !х тотожшсть з результатами четверто! дослщно! групи. Так, аналiз рiвнiв кальцiю у щурiв п'ято! групи виявив збшьшення кiсткового кальцiю на 22,04% порiвняно з першо! групою впливу свинцю (р<0,01). Вiрогiдно припустити, що на-ноаквахелатна форма цинку внаслiдок бшьшо! бiодоступностi, порiвняно зi звичайним цинком, при комбшованому введеннi зi свинцем ще бшь-шою мiрою, шж неорганiчний цинк, пiдвищуе рiвень юсткового кальцiю - на 7,93% (р<0,01).
Порiвнюючи результати четверто! та п'ято! груп щурiв з контрольною, доцшьно вiдзначити позитивну особливiсть, що середш показники
кшькосп кальщю в юстковш тканиш обох експериментальних груп практично вщповщають даним контрольно! групи.
Таким чином, у результат проведених експериментальних дослiджень встановлено, що при iзольованому введеннi хлориду цинку та цитрату цинку вмют юсткового кальцiю бiльший за контрольну групу в 1,42 та 2,04 разу вщ-повiдно. Та за умов комбшованого введення цинку та ацетату свинцю зменшуе остеотроп-нiсть останнього, що проявляеться достовiрним збiльшенням вмюту кальцiю у стегнових кiстках експериментальних тварин, особливо в комбь нацп з цитратом цинку (р<0,01), що тдтверджуе остеопротекторнiсть цинку за умови свинцево! iнтоксикацi!.
Вищенаведене дае шдставу вважати, що в системi «свинець - цинк» формуеться ефект бюлопчного антагошзму. Змiнюючи кiнетичнi параметри свинцю та штенсившсть його зв'язу-вання з SH-групами ферментiв, наноцинк вна-слiдок бiльшо! бiодоступностi порiвняно зi зви-чайним цинком [7] швидше проникае через кишковий бар'ер i зв'язуеться з актив ними
центрами ферменпв, перешкоджаючи форму-ванню стiйких комплексiв 3i свинцем, проте це припущення потребуе подальших дослiджень.
ВИСНОВКИ
1. Низькодозовий вплив свинцю протягом тдгострого дослщу зумовлюе достовiрне зменшення вмiсту кальщю в юстковш тканинi на 28% порiвняно з аналогiчними даними контрольно! групи тварин, що знижуе !! щiльнiсть та стае фактором ризику розвитку остеопенш та остео-порозних станiв органiзму.
2. Комбшований вплив свинцю й органiчних та неоргашчних форм цинку достовiрно збшьшуе вмiст кальцiю на 16,43% та 22,04% вщповщно, порiвняно зi свинцевою групою, що дозволяе припустити протекторш властивостi цинку при свинцевiй штоксикаци за рахунок ефекту бюан-тагошзму.
3. Цинк в органiчнiй формi мае бiльш потужнi протекторнi ефекти, шж у неорганiчнiй формi, що тдтверджуеться збшьшенням вмiсту кальцiю при ди свинцю у 2 та 1,4 разу вщповщно.
СПИСОК Л1ТЕРАТУРИ
1. Антомонов М.Ю. Математическая обработка и анализ медико-биологических данных / М.Ю. Антомонов. - Киев, 2006. - 558 с.
2. Белецкая Э.Н. Биопрофилактика экозависи-мых состояний у населения индустриально развитых территорий / Э.Н. Белецкая, Т.А. Головкова, Н.М. Онул // Актуальные проблемы транспортной медицины. -2011. - Т.3, № 2. - С. 48-56.
3. Белецкая Э.Н. Гигиенические аспекты остео-тропности свинца как фактора риска кальцийдефи-цитной патологии у человека (обзор литературы) / Э.Н. Белецкая, Н.М. Онул, О.В. Безуб // Медичш пер-спективи. - 2014. - Т. 19, № 2. - С. 130-139.
4. ГОСТ 26570-95 Межгосударственный стандарт. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения кальция.
5. Ершов Ю.А. Механизмы токсического действия неорганических соединений / Ю.А. Ершов, Т.В. Плетнева. - Москва: Медицина, 1989. - 272 с.
6. Куценко С.А. Основы токсикологии / С.А. Куценко.- Санкт-Петербург, 2002. - 395 с.
7. Лабораторш тварини в медико-бюлопчних експериментах / В.В. Шшак, В.Г. Висоцька, В.М. Магаляс [та ш.]. - Чершвщ: Мед. ун-т, 2006.350 с.
8. Методические указания по гигиенической оценке новых пестицидов / Е.А. Антонович, Ю.С. Каган, Е.И. Спыну [и др.]. - Киев, 1988. - 212 с.
9. Allen LH. Food Safety: Heavy Metals / LH. Allen // Encyclopedia of Human Nutrition. Third Edition. - 2013. - P. 331-336.
10. Blood lead and cadmium levels in a six hospital employee population. PESA study, 2009 / M. González-Estecha, E. Trasobares, M. Fuentes [et. al.] // J. Trace. Elem. Med. Biol. - 2011. -Vol. 25. - P. 22-29.
11. Boscolo P. Neurohumoral blood pressure regulation in lead exposure / P. Boscolo, M. Car-mignani // Environ Health Perspect. - 1988. - Vol. 78.
- P. 101-106.
12. Bushak L. China tops WHO list for deadly outdoor air pollution / L.Bushak // WHO. - 2016. E-resource: https://www.theguardian.com/environment/ 2016/sep/27/more-than-million-died-due-air-pollution-china-one-year
13. Effects of subchronic exposure to lead acetate and cadmium chloride on rat's bone: Ca and Pi contents, bone density, and histopathological evaluation / H. Lu, G. Yuan, Z. Yin [et. al.] // Int. J. Clin. Exp. Pathol. -2014. - Vol. 7. - P. 640-647.
14. Kupraszewicz E. Excessive ethanol consumption under exposure to lead intensifies disorders in bone metabolism: A study in a rat model / E. Kupraszewicz, MM. Brzóska // Chem. Biol. Interact. - 2013. - Vol. 203.
- P. 486-501.
15. Moser-Veillon R.B. Zinc needs and homeostasis during lactation / R.B. Moser-Veillon // Analyst. - 1995.
- Vol. 120. - P. 895-897.
16. Persicov A.V. Unstable molecules form stable tissues / A.V. Persicov, B. Brodsky // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2002. - Vol. 99, N 3. - P. 1101-1103.
17. Plasma renin activity and urinary kallikrein excretion in lead-exposed workers as related to
hypertension and nephropathy / P. Boscolo, G. Galli, A. Iannaccone [et al.] // Life Sci. - 1981. - Vol. 28. -P. 175-184.
18. Quantification of metallothionein on the liver and kidney of rats by subchronic lead and cadmium in
combination / S. Dai, Z. Yin, G.Yuan [et al.] // Environ Toxicol Pharmacol. - 2013. - Vol. 36. - P. 1207-1216.
19. Schoenau E. The "Muscle-Bone-Unit" in Children and Adolescents / E.Schoenau, H. M. Frost // Calcif Tissue Int. - 2002. - Vol. 70. - P. 405-407.
REFERENCES
1. Antomonov MYu. [Mathematical processing and analysis of biomedical data]. Kiev, 2006;558. Russian.
2. Beletskaya EN, Golovkova TA, Onul NM. [Biological prevention of ecologically dependent conditions in the population of industrialized territories]. Ak-tual'nye problemy transportnoy meditsiny. 2011;3(2):48-56. Russian.
3. Beletskaya EN, Onul NM, Bezub OV. [Hygienic aspects of osteotropism of lead as a risk factor cal-ciomercato pathology in humans (literature review)]. Medicni perspektivi. 2014;19(2):130-9. Russian.
4. [GOST 26570-95 Interstate standard. Feed, mixed fodders, feed raw materials. Methods for the determination of calcium]. Russian.
5. Ershov YuA, Pletneva TV. [Mechanisms of toxic action of inorganic compounds]. Moskva: Meditsina, 1989;272. Russian.
6. Kutsenko SA. [Fundamentals of toxicology]. Sankt-Peterburg, 2002;395. Russian.
7. Pishak VV, Visots'ka VG, Magalyas VM. [Laboratory animals in biomedical experiments]. Chernivtsi: Med. un-t, 2006;350. Ukrainian.
8. Antonovich EA, Kagan YuS, Spynu EI. [Methodical instructions on hygienic evaluation of new pesticides]. Ministerstvo zdravookhraneniya SSSR; VNII gigieny i toksikologii pestitsidov, polimerov i plasti-cheskikh mass. Kiev; 1988. Russian.
9. Allen LH. Food Safety: Heavy Metals. Encyclopedia of Human Nutrition. Third Edition. 2013;331-6.
10.Gonzalez-Estecha M, Trasobares E, Fuentes M. Blood lead and cadmium levels in a six hospital employee
population. PESA study, 2009. J Trace Elem Med Biol. 2011;25:22-29.
11.Boscolo P, Carmignani M. Neurohumoral blood pressure regulation in lead exposure. Environ Health Perspect. 1988;78:101-6.
12. Bushak L. China tops WHO list for deadly outdoor air pollution. WHO.-2016 . Available from: https://www.theguardian. com/environment/2016/sep/27/ more-than-million-died-due-air-pollution-china-one-year
13.Lu H, Yuan G, Yin Z. Effects of subchronic exposure to lead acetate and cadmium chloride on rat's bone: Ca and Pi contents, bone density, and histopatho-logical evaluation. Int J Clin Exp Pathol. 2014;7:640-7.
14.Kupraszewicz E, Brzoska MM. Excessive ethanol consumption under exposure to lead intensifies disorders in bone metabolism: A study in a rat model. Chem Biol Interact. 2013;203:486-501.
15.Moser-Veillon RB. Zinc needs and homeostasis during lactation. Analyst. 1995;120:895-7.
16.Persicov AV, Brodsky B. Unstable molecules form stable tissues. Proc. Natl. Acad. Sci. 2002;99(3):1101-3.
17.Boscolo P, Galli G, Iannaccone A. Plasma renin activity and urinary kallikrein excretion in lead-exposed workers as related to hypertension and nephropathy. Life Sci. 1981;28:175-84.
18.Dai S, Yin Z, Yuan G. Quantification of metal-lothionein on the liver and kidney of rats by subchronic lead and cadmium in combination. Environ Toxicol Pharmacol. 2013;36:1207-16.
19.Schoenau E, Frost HM. The "Muscle-Bone-Unit" in Children and Adolescents. Calcif Tissue Int. 2002;70:405-7.
CraTra Hagmm^a go pegaKmi' 03.10.2016
♦
16/ TOM XXI/ 4
129
