CC BY
10
УДК 619:616,99:619:612.33:636.98
Тафшчук Р.1., к. вет. н., доцент кафедри паразитологи та iхтiопатологil © Лье1еський нацюнальний утеерситет еетеринарног медицины та ботехнологт
iм. С.З .Гжицького.
ПОКАЗНИКИ МГГОТИЧНО1 АКТИВНОСТ1 ТА ЗАГАЛЬНОГО Р1ВНЯ ПАТОЛОГ1ЧНИХ М1ТОЗ1В У ОРГАНАХ КОРОПА ЗА ВПЛИВУ НЕМАТОДОЦИД1В
Проведено дослiдження по еизначенню еплиеу антигельмттиюе - риболixy, броеадазолу та зашифроеаного препарату на мШотичну актиетсть та рiеень патологiчних мiтозiе е iмунокомпетентних органах коропа.
Ключовi слова: короп, м^ози, хромосоми, риболк, бровадазол, фенбендазол.
Вступ. Вщомо, що бшьшосп нематодоцидних антигельмiнтикiв притаманна iмунодепресивна дiя, що не виключае li вплив на порушення пролiферативноl активностi соматичних клiтин. Тому нам представлялося важливим дослiдити вплив нематодоцидних препараив на мiтотичну активнiсть популяци соматичних клiтин таких iмунокомпетентних оргашв коропа, як селезiнка, зябра, нирки, кишечник.
Матер1али та методи. Нами дослщжувався вплив препарату риболiк, бровадазолу i зашифрованого препарату (готуеться заявка на патент). Дослщження проводилось на групах дослщних i контрольних коропiв-двохрiчок (n=10) живою масою 250-300 гр. Риби утримувались в добре аерованих акварiумах кафедри паразитологи та iхтiопатологil. Першш дослiднiй групi на крохмальному клейстерi ентерально задавався риболiк, другiй - бровадазол i третiй - зашифрований препарат. Bri три препарати задавались в дозi 50 мг на кшограм живо! маси риб. Контрольну групу складали риби, яким за допомогою сечостатевого катетера задавався чистий крохмальний клейстер. Пiсля 5 дшв коропiв дослiдних i контрольно! групи знерухомлювали i вiдбирали проби дослщжуваних органiв для цитогенетичних дослiджень. Отримаш данi представленi в таблицях 1 та 2.
Результати дослщження. Як видно з таблиць 1 та 2 внаслщок випробування антигельмштних препаратiв нами встановлено, що у груш контрольних риб профази в дослщних органах коливались в межах вщ 48,0±0,40%о (зябра) до 51,4±0,55% (нирки); метафази - вщ 38,4±0,56% (кишечник) до 40,3±0,40% (зябра) до 51,4±0,55% (нирки); метафази - вщ 38,4±0,56% (кишечник) до 40,3±0,40% (селезiнка); анафази - вщ 9,6±0,55% (кишечник) до 14,2±0,20% (зябра) i телофази вiдповiдно вiд 1,2±0,20% (зябра) до 1,8±0,20% (селезiнка i кишечник). Серед спонтанних патологiчних мiтозiв у групi контрольних риб найчастше зустрiчались вiдставання хромосом в метафаз^ анафазi i телофазi, а також хромосомш мости
Так, найменший рiвень мiтозiв з вiдставанням хромосом в метафазi спостерiгався в зябрах (1,7±0,15%), а найбiльший - в нирках (3,1±0,20%), проте
© Науковий консультант, проф. Юсьшв 1.Д. Таф1йчук Р.1., 2011
патолопчних мiтозiв, пов'язаних з вщставанням хромосом в анафазi i телофазi найменше було в кишечнику (1,5±0,10%о), а найбiльше - в зябрах (3,1±0,15%о). Фрагментацiя хромосом була знайдена тiльки в нирках i становила 0,15±0,20%. Найнижчий рiвень клiтин iз хроматидними мостами в стади анафази був у селезшщ, найвищий - у зябрах. В цшому рiвень спонтанних патологiчних мiтозiв у рiзних органах був майже однаковий i коливався у межах 0,56±0,69%.
Таблиця 1
Показники 1\птотнчно1 активност оргашв коропа тд впливом нематодоцидних антигелычштикчв (дослщ, контроль, М±м, п I_
Групи риб Органи коропа Фази мггоз1в %о Млотични й 1ндекс (МI) % Коефщент фаз (КФ) %„
Профази Метафази Анафази Телофази
Контроль (п-10) селезшка 47,6±0,40 41,3±0,40 12,2±0,20 1,8±0,20 10,32 0,62±0,04
зябра 47,0±0,51 38,0±0,25 14,2±0,20 1,2±0,20 10,02 0,53±0,04
нирки 50,3±0,55 38,5±0,55 10,4±0,30 2,3±0,20 10,02 0,65±0,03
кишечник 47,3±0,40 39,5±0,50 9,6±0,55 1,8±0,20 10,18 0,78±0,02
Дослщ I (риболк) селезшка 16,4±0,40 *** 45,8±0,25 *** 38,2±0,30 *** 3,2±0,25 *** 9,95 0,15±0,02 ***
зябра 18,52±0,25 *** 41,2±0,20 *** 30,1±0,55 *** 3,1±0,20 *** 9,48 0,22±0,01 ***
нирки 16,2±0,25 *** 48,2±0,25 *** 32,1±0,20 *** 4,1±0,20 *** 9,96 0,16±0,02 ***
кишечник 15,2±0,20 *** 44,4±0,40 *** 28,3±0,40 *** 2,9±0,25 *** 9,58 0,21±0,03 ***
Дослщ II (брова- дазол) селезшка 25,0±0,35 *** 38,2±0,20 *** 34,1±0,15 *** 2,7±0,15 ** 9,9 0,17±0,02 ***
зябра 22,5±0,40 *** 39,6±0,20 *** 35,3±0,20 *** 2,6±0,20 *** 9,94 0,20±0,03 ***
нирки 21,8±0,40 *** 41,8±0,50 *** 32,9±0,25 *** 3,5±0,15 ** 9,98 0,21±0,01 ***
кишечник 22,8±0,35 *** 46,2±0,45 *** 28,5±0,40 *** 2,5±0,20 * 9,8 0,18±0,01 ***
Дослщ III (зашифрований препарат) селезшка 45,5±0,40 *** 42,4±0,30 * 9,4±0,15 *** 2,6±0,15 ** 10,19 0,65±0,03
зябра 43,8±0,50 *** 42,5±0,20 *** 12,2±0,20 * 1,5±0,20 10,03 0,60±0,04
нирки 40,0±0,55 *** 45,8±0,15 ** 11,5±0,25* 2,7±0,20 10,02 0,64±0,03
кишечник 42,0±0,50 *** 45,5±0,10 *** 10,4±0,30 2,1±0,15 10,1 0,75±0,05
Примтка * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001
Найвищий м^отичний iндекс дорiвнював у селезшщ - 10,32%, найменший -у зябрах i нирках. Коефiцieнт фаз становив вщповщно вiд 0,53% (зябра) до 0,78% (кишечник).
У першш дослщнш групi, коропам яко! вводився риболж у всiх органах встановлено достовiрнi зменшення рiвня профаз за рахунок збiльшення кiлькостi метафаз, анафаз i телофаз у порiвняннi з контролем (Р<0,001). Виявлено достовiрнi збiльшення вах видiв патологiчних мiтозiв (Р<0,001). В цшому кшьюсть виявлених патологiчних мiтозiв у порiвняннi з контролем збшьшувалась пропорцiйно у всiх органах в середньому в 4,5 рази, i !х рiвень коливався в межах
вщ 1,85% (зябра) до 3,3% (нирки). Поряд з тим зменшувався м^отичний шдекс, рiвень якого коливався в межах вщ 9,48% (зябра) до 9,95% (селезшка). Коефщент фаз зменшувався вiрогiдно у вах органах i становив 0,15-0,21%о.
Таблиця 2
Р1вень патолопчних мптомв у органах коропа тд впливом нематоцидних
антигельмштикчв (дослiд, контроль, М±м, п)
Групи риб Органи коропа Патолопчш мггози, зв'язаш з пошкодженням хромосом Патоло-пчш мггози разом %
Ввдставання хромосом Фрагментащ я хромосом %% Мости %
в метафаз1 в анафаз1 1 телофаз1
Контроль (п=10) Селезш ка 2,4±0,10 2,8±0,10 - 1,6±0,10 0,68
зябра 1,7±0,15 3,1±0,15 - 2,1±0,15 0,69
нирки 3,1±0,20 2,0±0,20 0,15±0,20 1,65±0,15 0,69
Кишечн ик 2,4±0,15 1,5±0,10 - 1,7±0,40 0,56
Дослад I (риболж) Селезш ка 9,2±0,20 *** 8,1±0,10 *** 3,3±0,10 *** 6,4±0,15 *** 2,7
зябра 8,4±0,15 *** 4,3±0,10 *** 2,7±0,15 *** 3,1±0,10 *** 1,85
нирки 9,3±0,20 *** 12,0±0,10 *** 3,8±0,25 *** 8,2±0,15 *** 3,33
Кишечн ик 8,2±0,10 ** 5,1±0,15 *** 3,8±0,15 *** 13,4±0,20 *** 3,05
Дослвд II (брова-дазол) Селезш ка 7,2±0,16*** 5,5±0,10 *** 0,8±0,15 *** 5,6±0,5 *** 1,91
зябра 6,5±0,13 *** 4,4±0,16 *** 0,5±0,10 *** 3,9±0,10 *** 1,51
нирки 6,48±0,15 *** 5,1±0,15 *** 0,92±0,15 *** 4,5±0,15 *** 1,7
Кишечн ик 7,3±0,15 *** 5,2±0,10 *** 1,2±0,15 *** 4,6±0,10 *** 1,83
Дослвд III (зашифрований препарат) Селезш ка 2,92±0,15 * 2,33±0,15 ** 0,15±0,05 *** 3,1±0,10 *** 0,85
зябра 2,77±0,20 *** 3,16±0,20 0,11±0,005** * 2,5±0,15 *** 0,853
нирки 2,95±0,15 3,2±0,15 *** 0,25±0,10 3,8±0,10 1,02
Кишечн ик 3,25±0,10 *** 3,6±0,20 *** 0,1±0,02 *** 3,25±0,15 *** 1,02
Примтка: *** -р < 0,001; ** -р < 0,01; * -р < 0,05.
У м^отично-активних органах риб друге! дослщно! групи, яким задавався бровадазол, нами було виявлено, що дослiджуваний препарат також достовiрно знижував кшьюсть профаз, збiльшуючи одночасно кшьюсть метафаз, анафаз i телофаз, але в меншiй мiрi, нiж левамiзол, хоча рiзниця також е вiрогiдна (Р<0,01). Порiвняно з контролем кшьюсть патологiчних мiтозiв у всiх органах вiрогiдно збiльшувалася (Р<0,01). Найвищий рiвень !х спостерiгався у селезiнцi (1,9%), нирках (1,7%) i кишечнику (1,8%), що перевищувало контрольний показник приблизно в 2,8 рази. Мiтотичнi iндекси i коефiцiенти фаз у порiвняннi до контролю зменшувались i узгоджувались з показниками попередньо! дослiдно! групи.
Привертають увагу показники третьо! дослщно! групи, яким задавався зашифрований препарат Нами виявлено, що вш викликае вiрогiдне зменшення кшькост профаз (Р<0,01) i збiльшення метафаз (Р<0,01) у всiх дослiджуваних органах порiвняно з iншими препаратами, що вивчалися (риболiк i бровадазол). Проте, слщ вiдмiтити, що рiзницi мiж кiлькiстю анафаз i телофаз у контрольнш i дослiднiй групах виявилась недостовiрною (Р<0,5), навiть в деяких органах показники були нижчими за контрольш (селезшка, зябра). Що стосуеться патолопчних мiтозiв ще! групи, то !х рiвень достовiрно зростав в середньому у 1,5 рази i коливався вiд 0,85% до 1,2% у порiвняннi з контролем. Дослщжуваний препарат не впливав iстотно на показники м^отичного iндексу i коефщенти фаз.
Висновки. Нами встановлено, що вс дослiджуванi препарати - риболщ бровадазол, за зашифрований препарат - впливають на мiтотичну активнiсть соматичних клiтин риб, змiнюючи спiввiдношення фаз м^озу. Найвищий рiвень патологiчних мiтозiв iндукують риболiк та бровадазол (фенбендазол), а зашифрований дослiджуваний препарат у порiвняннi з ними проявляе найменшу мутагенну дiю.
Л1тература
1. Васильков Г.В. Филометроидоз карпов : автореф. дисс. на соискание д. вет. н: спец. 03.00.19. "Паразитология, гельминтология". — М., 1973, — 40 с.
2. Висманис К.О. Цикл развития возбудителя филометроидоза и физиологическое состояние карпов // Рыбохоз. исслед. в басс. Балт. моря. — Рига: Зинатне, 1981. — №16. — С. 75—81.
3. Ивасик В.М., Сковронский Р.В., Свирепо Б.Г., Ворона К.И. К изучению цикла развития Philometra lusii Vismanis. В кн.: проблемы паразитологии. — К.: Наукова думка, 1967. — С. 462.
4. Секретарюк К.В., Стибель В.В., Седнева С.А. Вплив експериментального аскаридозу на цитогенетичний гомеостаз поросят // Ветеринарна медицина Укра!ни. — 1997. —№1. — С . 42—43.
5. Секретарюк К.В., Тафшчук Р., Седнева 1.А. "Споаб виготовлення прямих препараив метафазних хромосом риб" Декларацшний патент Укра!ни на винахщ N34814A вщ 15.03.2001 р.
6. Степанов А.В. Характеристика хромосомного аппарата хозяина при трихоцефалезной инвазии : материалы. XI конф. Укр. общ. паразитологов. — К., 1993. — С.156.
7. Руководство по изучению генетических эффектов в популяции человека. — Женева: ВОЗ, 1989. — 121 с.
Summary Tafijchuk R.I.
STUDY ON MITOTIC ACTIVITY AND COMMON LEVEL PATHOLOGICAL MITOSIS IN BODIES CARPS AND INFLUENCE NEMATODOCYDES
PREPARATIONS
The study of influence nematodocydes preparations, on mitotic activity and level pathological mitosis in somatic cells of carps. The change of the course ofphases of mitosis, the increase of the level of pathological mitosis. The greatest level pathological mitosis to produce Rybolyk and Brovadazol and least - encrypted investigational drug in the given dozes.
Рецензент - д.вет.н., проф. Стибель В.В.
