Научная статья на тему 'Показники клітинного циклу клітин легеневої тканини щурів після опікового ураження шкіри'

Показники клітинного циклу клітин легеневої тканини щурів після опікового ураження шкіри Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
142
46
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ОПіК ШКіРИ / КЛіТИННИЙ ЦИКЛ / ДНК-ЦИТОМЕТРіЯ / ЛЕГЕНі / HAES-LX 5% / ЛАКТОПРОТЕїН З СОРБіТОЛОМ

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Очеретнюк А. О., Прокопенко С. В., Черешнюк І. Л., Лисенко Д. А.

В статті представлено аналіз показників клітинного циклу клітин легень на фоні опіку шкіри та при корекції 0,9 % розчином NaCl, лактопротеїном з сорбітолом або HAES-LX 5% через 1, 3 та 7 добу після опікового ураження шкіри у щурів. Виявлено, що опікове ушкодження шкіри супроводжується суттєвим зниженням показників фази синтезу ДНК, нормалізація яких не відбувається на 7 добу після ураження. При застосуванні на фоні опікового ураження шкіри лактопротеїну з сорбітолом через 1 добу встановлено значне підвищення індексу проліферації (ІР) та фази G2 + M, а також зменшення показників фази G0G1 порівняно із показниками групи Опік + 0,9 % NaCl. На фоні дії препарату HAES-LX 5% через 3 доби після опіку шкіри виявлена виражена тенденція до зменшення блоку проліферації (р=0,0927) та збільшення фази G2 + M (р=0,0547) в порівнянні із аналогічними показниками на 3 добу групи Опік + 0,9 % р-н NaCl. Застосування лактопротеїну з сорбітолом, або HAES-LX 5%, через 7 діб після опікового ушкодження шкіри, призводить до нормалізації показників клітинного циклу легень, яке характеризувалось зменшенням блоку проліферації, а також позитивним стимулюючим впливом на синтез ДНК при застосуванні HAES-LX 5%.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Очеретнюк А. О., Прокопенко С. В., Черешнюк І. Л., Лисенко Д. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Показники клітинного циклу клітин легеневої тканини щурів після опікового ураження шкіри»

4. Нетюхайло Л. Г. Патогенез отково'1 хвороби (в 2 частинах) / Л. Г. Нетюхайло, С. В. Харченко, А. Г. Костенко // Cbît медицини та бюлогп. - 2011. - № 1. - С. 127-131, 131-135.

5. П'ятницький, О. Ю. Експериментальне дослщження фармаколопчних властивостей субстрату крюконсервовано'1 шюри свит / Ю. С. П'ятницький, Л. В. Яковлева, О. Ю. Кошова // Клтачна фармацiя. - 2013. - Т. 17 № 1. - С. 56-62.

6. Цимбалюк А. В. Використання подрiбненого субстрату люфшзованого ксенодермоiмплантата для мiсцевого лiкування откових хворих з iнфiкованими ранами III-IV ступенiв / А. В. Цимбалюк, Н. В. Гуда, О. О. Кирик // Шпитальна мрурпя. - 2013. - № 1. - С. 81-84.

7. ЬерекИа L. N. In vitro effects of pulmonary surfactant on macrophage morphology and function / L. N. Ьерейа, E. A. Alexandres, M. V. Erokhim // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2012. Vol. - 152. - P. 489-493.

8. Vtiurin B. V. The comparative characteristics of pulmonary and renal ultrastructural changes in burn sepsis / B. V. Vtiurin, I. A. Chekmareva, E. N. Gordienko [et al.] // Arh. Patol. - 2008. - Vol. 70, N 1. - P. 29-35.

УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ КОМПОНЕНТОВ АЭРОГЕМАТИЧЕСКОГО БАРЬЕРА РЕСПИРАТОРНОГО

ОТДЕЛА ЛЕГКИХ В ДИНАМИКЕ ПОСЛЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРМИЧЕСКОЙ ТРАВМЫ И ПРИМЕНЕНИИ ЛИОФИЛИЗИРОВАННЫХ КСЕНОДЕРМОТРАНСПЛАНТАТОВ Небесна З. М., Волков К. С., Котик А. А.

В эксперименте на белых крысах проведено изучение субмикроскопического состояния компонентов аэрогемати-ческого барьера респираторного отдела легких в стадиях ранней и поздней токсемии, септикотоксемии после термической травмы в условиях проведения ранней некректомии и применении измельченного субстрата лиофилизированной ксенокожи. Установлено, что использование данного препарата предотвращает развитие деструктивных изменений в структурах аэрогематического барьера в ранний срок исследования и положительно влияет на протекание регенераторных процессов и их нормализацию в поздние сроки эксперимента.

Ключевые слова: аэрогематический барьер, ультраструктурные изменения, термическая травма, лиофилизированная ксенокожа.

Стаття надшшла 9.10.2014 р.

ULTRASTRUCTURAL CHANGES OF THE AERO-HEMATIC BARRIER COMPONENTS OF THE RESPIRATORY PORTION OF THE LUNGS IN THE DYNAMICS AFTER EXPERIMENTAL THERMAL TRAUMA AND USAGE OF THE LYOPHILIZED XENOGRAFT Nebesna Z. M., Volkov K. S., Kotyk A. O.

In the experiment on white rats the condition of submicroscopic components of the aero-hematic barrier of the respiratory portion of the lung was studied in the early and late stages of toxemia, septicotoxemia after thermal trauma in terms of early necrectomy and usage morselized substrate of lyophilized xenograft. Established that the use xenograft prevents development of destructive changes in the structures of the aero-hematic barrier in the early stages of the experiment and a positive effect of regenerative processes and their normalization in the later stages of the experiment.

Key words: aero-hematic barrier, ultrastructural changes, thermal trauma, lyophilized xenograft.

Рецензент Срошенко Г.А.

УДК 616-001.17:599.323.4;591.22;576.36

ПОКАЗНИКИ КЛ1ТИННОГО ЦИКЛУ КЛ1ТИН ЛЕГЕНЕВО1 ТКАНИНИ ЩУР1В П1СЛЯ

ОП1КОВОГО УРАЖЕННЯ ШК1РИ

В статп представлено аналiз показниюв кл^инного циклу кйтин легень на фот отку шюри та при корекцп 0,9 % розчином №С1, лактопротешом з сорб™лом або НАЕ8-ЬХ 5% через 1, 3 та 7 добу тсля откового ураження шюри у щурiв. Виявлено, що откове ушкодження шюри супроводжуеться суттевим зниженням показниюв фази синтезу ДНК, нормалiзацiя яких не вщбуваеться на 7 добу тсля ураження. При застосувант на фот откового ураження шюри лактопротету з сорб™лом через 1 добу встановлено значне тдвищення тдексу пролiферацiI (1Р) та фази 02 + М, а також зменшення показниюв фази 0001 порiвняно iз показниками групи Отк + 0,9 % №С1. На фот дп препарату НАЕ$-ЬХ 5% через 3 доби тсля отку шюри виявлена виражена тенденщя до зменшення блоку пролiферацiI (р=0,0927) та збшьшення фази 02 + М (р=0,0547) в порiвняннi iз аналопчними показниками на 3 добу групи Отк + 0,9 % р-н №С1. Застосування лактопроте1ну з сорб™лом, або НАЕ$-ЬХ 5%, через 7 дiб тсля откового ушкодження шюри, призводить до нормалiзацiI показниюв кл^инного циклу легень, яке характеризувалось зменшенням блоку пролiферацiI, а також позитивним стимулюючим впливом на синтез ДНК при застосувант НАЕ$-ЬХ 5%.

Ключовi слова: отк шюри, кйтинний цикл, ДНК-цитометрiя, легет, НАЕ$-ЬХ 5%, лактопротет з сорб1толом.

Робота е фрагментом НДР «Структуры змти в легенях в умовах ендогенноI штоксикаци, що викликана отком штри, та н корекцй втчизняними шфузшними препаратами лактопротешом з сорбтолом та HAES-LX-5% (експериментальне дотдження)», номер держреестрацн: 0112U004187.

Проблема терапи ошково! хвороби (ОХ) на фош терм1чного ураження шюри залишаеться актуальною в сучаснш медициш не зважаючи на значш усшхи в лшуванш дано! патологи. Одшею з основних причин недостатньо! ефективност1 запропонованих засоб1в терапИ е недостатн1сть знань щодо патогенезу даного ушкодження, його пол1морфн1сть. Одним 1з таких прояв1в е

ураження легень, яке на сьогодш розглядасться, як один з найважлившпх елемеппв патогенезу отково1 хвороби [5]. Дане ушкодження може бути первинним - в результат прямого термiчного ураження легень, i вторинним - внаслщок загального порушення клiтинноï регуляцiï. Легеневi ускладнення у виглядi пневмонiï частiше виявляють в гострий перiод опiковоï хвороби -зафшсовано, що третина легеневих ускладнень виникае в першi двi доби пiсля опiкового ураження, яю проявляються у виглядi гострого набряку легень, гострого легеневого ураження, пневмонп [4]. Доведено, що ушкодження легень прямо залежать вщ площi ураженоï шкiри - вони часто виникають при опiках 20 % площi тiла i 100 % при ошках, що перевищують 50 %, загальна летальнiсть при розвитку легеневих уражень досягае 50 % [3].

Загальноприйнятим поглядом на основш механiзми ушкодження легень на фот ОХ шкiри е видiлення основно1' ролi токсичного впливу продуктiв оптового ушкодження шкiри та медiаторiв запалення, якi видiляються в результатi формування iмунноï вiдповiдi органiзму [1, 7]. Дiя всiх цих чинникiв реалiзуеться на рiвнi клiтин легень, яю змiнюють свое функцiонування (зменшення синтезу ДНК та посилення реакцп на апоптозш стимули), що в подальшому призводить до клiнiчних проявiв ураження легень[8, 9].

Пошук нових засобiв що зможуть попередити або зменшити ушкодження легень на фонi отково1' хвороби е перспективним напрямом терапи ОХ. На сьогоднi iснуе гостра необхщшсть в розробцi нових схем терапи, як б спричиняли протективну дiю на показники клiтинного циклу кл^ин легень. Перспективним е застосування препараив лактопротеш та HAES, як виявили сво1' протективнi властивостi на фош откових уражень на кл^ини печiнки та тимусу [2].

Метою роботи було визначення показниюв кл^инного циклу клiтин легень через 1, 3 та 7 добу тсля термiчного опiку шкiри на фош корекцп 0,9 % розчином NaCl, лактопротену з сорбiтолом або HAES-LX 5%.

Матерiал та методи дослщження. Експериментальне дослiдження показникiв кл^инного циклу клiтин легенево1' тканини через 1, 3 та 7 дiб тсля откового ураження шюри виконано на 108 щурах-самцях лiнiï Вютар масою 155-160 грамiв на базi науково-дослiдного центру Вiнницького нацiонального медичного унiверситету iменi М.1. Пирогова. Утримання та манiпуляцiï з тваринами проводили у вщповщност до "Загальних етичних принцитв експериментiв на тваринах", ухвалених Першим нацiональним конгресом з бюетики (Кшв, 2001), також керувалися рекомендащями "Свропейсько1' конвенцiï про захист хребетних тварин, як використовуються для експериментальних та шших наукових цшей" (Страсбург, 1985) i положеннями "Правил доклшчно1' оцiнки безпеки фармакологiчних засобiв (GLP)". Тварини були роздiленi на 6 груп (по 18 тварин у кожнш груш): I, II, III - щури без термiчноï травми, яким проводилась окрема iнфузiя 0,9% розчину NaCl, лактопротешу з сорб™лом (ЛП) або HAES-LX 5 % у дозi 10 мл/кг; IV, V, VI - тварини з оптом, яким за аналопчною схемою та у такому ж дозовому режимi проводили окреме введення дослщжуваних речовин.

Опт (пiсля вiдповiдноï премедикацп) викликали шляхом прикладання до бiчних поверхонь тулуба тварин чотирьох мщних пластинок (по двi пластинки з кожного боку), яю попередньо тримали протягом шести хвилин у водi з постiйною температурою 100°С. Загальна площа опiку у щурiв зазначено1' маси складала 21-23 % при експозицп 10 секунд, що е достатшм для формування опiку II-III ступеня та розвитку шокового стану середнього ступеня важкостi.

0,9% розчин NaCl вводили внутршньовенно протягом 5-6 хв. у дозi 10 мл/кг маси тша. Iнфузiю проводили у нижню порожнисту вену, для чого виконували ïï катетеризацiю в асептичних умовах через стегнову вену. Перше введення 0,9% розчину NaCl здшснювали через 1 годину тсля моделювання патолопчного стану, наступш iнфузiï виконували щоденно впродовж 7 дiб. Забiр матерiалу проводився пiд пропофоловим наркозом. У тварин тсля декаттацп робили розтин грудно1' порожнини i вирiзали за допомогою леза невеликi шматочки легень.

Вмют ДНК в ядрах кттин легень щурiв визначався методом проточно1' цитометрiï. Суспензiï ядер з кл^ин легень отримували за допомогою спещального розчину для дослiдження ядерно1' ДНК CyStain DNA (фiрми Partee, Шмеччина), вiдповiдно до протоколу-iнструкцiï виробника. Даний розчин дозволяе маркувати ядерну ДНК дiамiдинофенiлiндолом (DAPI), який входить до його складу. При виготовленш нуклеарних суспензш використовували спецiальнi одноразовi фiльтри CellTries 50 мкм (Partee, Шмеччина). Проточний аналiз виконувався на багатофункщональному науково-дослiдному проточному цитометрi "Partee PAS" ^рми Partee, Нiмеччина), в НДЦ ВНМУ iменi M.I. Пирогова.

Для збудження флуоресценци БЛР1 застосовувалось УФ-випромiнювання. З кожного зразка нуклеарно1 суспензи аналiзу пiдлягало 20 тис. подiй. Цикшчний аналiз виконувався засобами програмного забезпечення ИоМах (РаГес, Нiмеччина) у повнш цифровiй вiдповiдностi згiдно математично! модел^ де визначались: 0001 - вщсоткове спiввiдношення клiтин фази 0001 до вшх клiтин клiтинного циклу (вмют ДНК = 2с); 8 - вщсоткове спiввiдношення фази синтезу ДНК до вшх клiтин клiтинного циклу (вмют ДНК > 2с та < 4с.); 02 + М - вщсоткове сшввщношення фази 02 + М до вшх кттин клiтинного циклу (ДНК = 4с); 1Р - iндекс пролiферацil, який визначаеться за сумою показникiв 8 + 02 + М; ВР - блок пролiферацil, який оцшюеться по спiввiдношенню 8/(02 + М) (збшьшення числа клiтин в фазi 02 + М при низьких значеннях 8-фази свiдчить про затримку пролiферацil в стадп 02 + М).

Статистична обробка отриманих результатiв була проведена в лщензованому пакетi '^ТЛТКТГСЛ 6.1" iз застосуванням непараметричних методiв оцiнки отриманих результата. Оцiнювали правильнiсть розподiлу ознак за кожним iз отриманих варiацiйних рядiв, середнi значення кожно1 ознаки, що вивчалася та стандартне квадратичне вщхилення. Достовiрнiсть рiзницi значень мiж незалежними кiлькiсними величинами визначали за допомогою U-критерiя Мана-Уiтнi.

Результати дослiдження та Тх обговорення. Для вивчення можливого впливу 0,9 % розчину №С1, лактопротешу з сорбiтолом, або ИЛБ8-ЬХ 5% на нормальний цикл кттин легень нами було проведене дослщження показникiв клiтинного циклу клiтин легень в щурiв без опiкового ураження шюри (табл. 1).

Таблиця 1

Показники истинного циклу клiтин легень в щурiв без опiку шкчри на тлi дп 0,9% розчину

N аС1, лактопротетну з сорбiтолом, або ИЛЕ8-ЬХ 5% (М±о)

Показники Групи тварин

клопиного циклу 0,9 % р-н №С1 (п=6) Лактопроте1н з сорб1толом (п=6) ИЛБ8-ЬХ 5% (п=6)

Через 1 добу вщ початку експерименту

0001 (%) 80,09±3,69 79,05±1,67 70,97±2,36

8 (%) 3,33±0,99 3,05±1,11 3,09±0,87

02 + М (%) 16,58±2,93 17,91±1,00 16,94±1,80

1Р 19,91±3,69 20,96±1,67 20,03±2,36

ВР 0,20±0,04 0,17±0,06 0,18±0,04

Через 3 доби вщ початку експерименту

0001 (%) 81,26±2,31 80,18±3,10 80,19±2,13

8 (%) 2,66±1,09 3,48±0,94 3,19±0,74

02 + М (%) 16,08±2,51 16,33±2,61 16,61±1,95

1Р 18,74±2,31 19,82±3,10 19,80±4,53

ВР 0,17±0,08 0,22±0,05 0,19±0,05

Через 7 д1б вщ початку експерименту

0001 (%) 81,12±3,46 81,23±2,77 80,49±2,65

8 (%) 3,04±1,01 2,90±0,99 3,01±0,46

02 + М (%) 15,85±2,97 15,87±2,33 16,50±2,19

1Р 18,89±3,45 18,77±2,77 19,51±2,65

ВР 0,20±0,07 0,18±0,06 0,18±0,03

Отриманi нами результати дослiдження вмюту ДНК в клiтинах легень тварин без ошку шкiри, яким вводили 0,9% розчин КаС1 цiлком узгоджуються з даними японських дослiдникiв [10] стосовно кл^инного циклу в кттинах легень визначеного у iнтактних тварин, як вказують на переважання кл^ин перебуваючих в фазi пролiферативного спокою - 0001, та значно меншу кiлькiсть клiтин, що перебувають в сташ пролiферативноl активностi (8 фаза, 02 + М фаза). При цьому отримаш нами середш значення показниюв клiтинного циклу клiтин легень щурiв без опiкового ураження на фош застосування 0,9% розчину КаС1, особливо середнi значення показникiв 8-фази, не зважаючи на рiзнi способи виготовлення суспензiй та !х маркування, а також iншi вiдмiнностi в чаш та умовах експеримеипв, практично сшвпадають з даними отриманими вищевказаними авторами у iнтактних щурiв.

Достовiрноl рiзницi мiж аналогiчними показниками кттинного циклу клiтин легень мiж групами тварин як отримували 0,9% розчин №С1 або лактопроте1ну з сорб™лом або ИЛБ8-ЬХ 5% в усi термши дослiдження (через 1, 3 та 7 добу) встановлено не було. Це свщчить про вщсутнють будь-якого небажаного впливу дослщжуваних препаратiв на нормальш процеси пролiферацil в легенях у щурiв.

На наступному етапi даного дослщження вивчались показники клiтинного циклу кл^ин легень через 1, 3 та 7 дiб пiсля ошкового ушкодження шкiри на фонi корекцп лактопроте1ном з

сорб1толом або НАЕ8-ЬХ 5% иорГвняно Гз корекщею змодельовано! иатологи 0,9 % розчином №С1. Було выявлено, що вже через 1 добу июля ошково! травми шюри на фош застосування ЛП або НАЕ8-ЬХ 5% також, як Г при застосуванш 0,9 % розчину №С1 в тканиш легень вщмГчаються суттевГ порушення показниюв клГтинного циклу (табл. 2).

Таблиця 2

Показники кштинного циклу кштин легень через 1 добу шсля терм1чнот травми шк1ри на фош застосування 0,9 % розчину лактопротетну з сорб1толом (ЛП) або HAES-LX 5% за

даними проточнот ДНК-цитометрп (М±д)

Груии тварин Показники кл1танного циклу

0001 (%) 8 (%) 02 + М (%) 1Р БР

0,9 % №С1 80,09±3,69 3,33±0,99 16,58±2,93 19,91±3,69 0,20±0,04

Отк +0,9 % р-н №С1 92,14±4,13 # 2,54±1,66 5,32±2,50 # 7,86±4,13 # 0,44±0,11 #

Отк + ЛП 84,20±4,80 * 4,08±0,87 11,72±4,65 * 15,80±4,80 * 0,39±0,14 #

Отк + НАЕ8-ЬХ 5% 88,79±3,67 # 3,49±1,14 7,72±2,56 # 11,21±3,67 # 0,45±0,03 #

Примаки: тут Г в подальшому, 1. # - позначена статистично значуща рГзниця (р<0,05) за критерГем Мана-Угтш порГвняно з групою контролю;2. * - позначена статистично значуща рГзниця (р<0,05) за критерГем Мана-УГтш порГвняно з групою Ошк + 0,9 % ШС!.

Так, встановлено, що через 1 добу шсля ошкового пошкодження шюри на фош застосування 0,9 % розчину №С1, лактопроте!ну з сорбГтолом або НАЕ8-ЬХ 5%, вщбуваються однонаправлеш змши иоказниюв кттинного циклу кттин легень, иорГвняно з аналопчними показниками тварин без ошкового пошкодження, яю проявляються достовГрно шдвищеними значеннями блоку иролГферацп (ВР).

Однак, на фош застосування НАЕ8-ЬХ 5% ва показники клгшнного циклу, окрГм иоказниюв, що характеризуюсь фазу синтезу ДНК, суттево (р<0,05) вщрГзнялись вщ иоказниюв групи тварин без оп1ково! травми шюри г в той же час, не мали достовГрних вщмшностей вщ аналопчних иоказникiв групи Оиiк + 0,9 % р-н №С1. На рисунку 1 представлений приклад ДНК-пстограми суспензп ядер клiтин легенiв щури через 1 добу иiсля ошку шкiри на тлi застосування НАЕ8-ЬХ 5%.

Водночас, иоказники клiтинного циклу клгган легень груии Оиiк + ЛП (рис. 2) не вщрГзнялись вщ иоказникiв 0001, 8-фази, 02 + М та iндексу пролiферацiI, визначених у груиi щурiв без ошкового ураження, але в порiвняннi iз цими ж иоказниками груии Ошк + 0,9 % №С1 встановлена статистично значуща (р<0,05) рiзниця, що проявлялась у иiдвищених значеннях iндексу иролiферацiI, бiльших значеннях иоказниюв фази 02 + М та менших иоказниюв фази 0001. Поряд з цим, нами не встановлено достовiрних вщмшностей мiж иоказниками клiтинного циклу клггин легень в груиах тварин Ошк + ЛП та Ошк + НАЕ8-ЬХ 5%. На нашу думку, це може свщчити про те, що на фош застосування ЛП через 1 добу шсля ошково1' травми шюри бшьш суттево зменшуеться негативний вплив ошкового ушкодження на клгганний цикл клгган легень иорГвняно з шшими дослiджуваними засобами. Також, це може свщчити про нормалiзуючий вплив ЛП саме на пролiферативний потенщал

кштин легень на фош ошку шири в даний иерюд сиостереження.

Рис. 1. ДНК-гiстограма ядерно1' суспензи клГтин легень щура через 1 добу шсля ошку на фош застосування НАЕ8-ЬХ 5%. ЯШ (8иБ-0001, фрагментацiя ДНК).

Рис. 2. ДНК-гiстограма ядерноI суспензи клГтин легень щура через 1 добу шсля ошку на фош застосування лактопротешу з сорбГтолом. ЯШ (8ИБ-0001, фрагментащя ДНК).

Через 3 доби шсля термiчного ошку шюри у щурГв на фот корекцп 0,9 % розчином №С1, або ЛП, або НАЕ8-ЬХ 5% виявлеш достовГрш розбГжносп мГж иоказниками клгганного циклу клгган легень з аналопчними иоказниками тварин без ошку, яю в кожнш Гз дослщжуваних груи мали певш особливосп (табл. 3). ПорГвняно з иоказниками груии тварин без ошкового ураження в груш Ошк + 0,9 % р-н №С1 через 3 доби шсля ошку, як Г через 1 добу шсля оиiковоI травми зберГгались достовГрно меншГ иоказники 02 + М та бшьшГ иоказники штервалу 8ИБ-0001 Г блоку пролГферацл. В груш Ошк

+ ИЛБ8-ЬХ 5% ильки показник 8-фази мав виражену тенденщю (р=0,055) до бшьших значень порiвняно з аналогiчним показником групи тварин без опiку в даний термiн дослiдження. Отже, отримаш результати вказують, що через 3 доби тсля опiку шкiри в заданих умовах експерименту застосування ИЛБ8-ЬХ 5% призвело до посилення пролiферативноl активностi вiдносно групи тварин з ошком яким проводилась корекцiя 0,9 % розчином №С1. Подiбнi змши, хоча i в меншiй мiрi, нiж на фот ИЛБ8-ЬХ 5%, встановлено i на тлi застосування лакгопротешу з сорбiтолом, хоча для показнику 02 + М вщмшносп мали лише характер тенденцп.

Таблиця 3

Показники истинного циклу кштин легень через 3 доби шсля ошку шк1ри на фон1 застосування 0,9 % розчину N80, ЛП або ИЛЕ8-ЬХ 5% за даними проточноТ ДНК__цитометрп (М±д)_

Групи тварин Показники кл1танного циклу

0001 (%) 8 (%) 02 + М (%) 1Р БР

0,9 % №С1 81,26±2,31 2,66±1,09 16,08±2,51 18,74±2,31 0,17±0,08

Отк +0,9 % р-н №С1 85,54±6,44 4,59±2,31 9,87±4,13 # 14,46±6,44 0,44±0,07 #

Отк + ЛП 80,39±3,88 4,18±0,95 # 15,43±3,91 19,61±3,88 0,29±0,12

Отк + ИЛБ8-ЬХ 5% 80,60±4,29 5 3,88±0,97 15,52±4,61 5 19,40±4,29 5 0,29±0,15

Примака: 5 - позначена статистично значуща р1зниця (р<0,05) за критер1ем Мана-У1тш пор1вняно з групою Ошк + 0,9 % №С1 через 3 доби шсля оптового ушкодження.

Через 7 дiб пiсля опiкового ураження шкiри в груш Опт + 0,9 % р-н №С1 порiвняно iз показниками групи тварин без оптового пошкодження спостерiгали достовiрно бiльшi значення показниюв фази 8, iнтервалу 8иБ-0001 та блоку пролiферацil (табл. 4).

Таблиця 4

Показники кштинного циклу кштин легень через 7 дiб шсля ошку шюри та на фош корекцп

за даними проточноТ' ДНК-цитометрп (М±д)

Групи тварин Показники клтнного циклу

0001 (%) 8 (%) 02 + М(%) 1Р БР

0,9 % р-н №С1 81,12±3,46 3,04±1,01 15,85±2,97 18,89±3,45 0,20±0,07

Отк +0,9 % р-н №С1 81,81±5,22 4,95±1,19 # 13,24±4,61 18,19±5,22 0,40±0,11 #

Отк + ЛП 79,37±2,38 3,84±1,31 16,79±1,77 20,63±2,39 0,23±0,08 *

Отк +ИЛБ8-ЬХ 5% 79,70±3,49 у 4,66±1,13 # 15,64±3,55 у 20,3±3,49 у 0,32±0,12

Примака: у - позначена статистично значуща р1зниця (р<0,05) за критер1ем Мана-У1тш пор1вняно з групою Отк + 0,9 % №С1 через 7 д1б тсля откового ушкодження.

Пюля опiкового ураження шкiри на фош застосування ИЛБ8-ЬХ 5%, в даний термш, порiвняно з групою тварин без ошку, виявлено достовiрно бiльшi показники фази 8 (рис. 3) та незначну тенденщю до менших значень блоку пролiферацil (р=0,079). В аналопчний термiн дослiдження, порiвняно з групою тварин Отк +0,9 % р-н №С1 в грут щурiв Опiк + ЛП встановлено достовiрно меншi значення блоку пролiферацil. Однак, мiж показниками груп Опiк + ИЛБ8-БХ 5% та Опiк + ЛП в цей термш достовiрних вщмшностей мiж показниками клiтинного циклу кл^ин легень встановлено не було, що може свщчити про аналопчну направленiсть !х корегуючо! дн.

Пщводячи пiдсумок необхiдно вiдмiтити, що при аналiзi динамiки показникiв клiтинного циклу кл^ин легень в групi Отк + ИЛБ8-БХ 5%, через 3 доби шсля оптового ураження шюри, порiвняно з показниками ще1 ж групи через 1 добу тсля опту, спостерпали достовiрно меншi значення фази 0001 та бiльшi показники 02 + М та 1Р. На фот ИЛБ8-БХ 5% через 7 дiб пiсля отково1 травми шкiри порiвняно з аналогiчними показниками ще1 ж групи через 1 добу тсля опту зберпалась достовiрно менша кiлькiсть клiтин 0001, бiльшi показники фази 02 + М та 1Р i незначна тенденщя до бiльших значень показникiв фази 8 та блоку пролiферацil. Достовiрноl рiзницi мiж показниками клiтинного циклу через 3 та 7 дiб тсля оптового ураження шюри на фот застосування ИЛБ8-БХ 5% нами не виявлено.

Рис. 3. ДНК-пстограма ядерно1 суспензп клггин легень щура через 7 д1б шсля ошку на фош застосування ЫЛБ8-ЬХ 5%. £N1 (8иБ-0001, фрагментащя ДНК).

Дослщження динамГки показниюв клГтинного циклу клГтин легень тварин групи Ошк + ЛП через 1 та 7 дГб июля моделювання иатологп виявило вщмшностГ мГж иоказниками 0001, 02 + М, 1Р та БР у виглядГ теиденцП, а мГж аналопчними иоказниками, визначеними у щурГв цiеI ж груии через 3 та 7 дГб июля оиiковоI травми, вщмшностей встановлено не було.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Таким чином, на фош застосування лактопротешу, через 7 дГб июля оиiковоI травми шюри, нормалГзацГя иоказникГв клГтинного циклу легень характеризувалась бшьш вираженим зменшенням блоку иролГферацп, на вщмшу вщ НАЕ8-ЬХ 5%, який демонструе в цей перюд стимулюючий вилив на синтез ДНК.

1. Внутршньовенне введення препарапв лактопротешу з сорбгтолом або HAES-LX 5% у дозi 10 мл/кг, як i 0,9 % розчин NaCl впродовж 7 дiб не впливае на показники клiтинного циклу клiтин легень щуpiв.

2. Застосування лактопротешу з сорбгтолом або HAES-LX 5%, через 7 дiб пiсля опiкового ушкодження шири II-III ступеня площею 21-23 % поверхш тiла у щуpiв, призводить до нормашзацл показниюв клiтинного циклу легень, яке характеризувалось зменшенням блоку пpолiфеpацil, а також позитивним стимулюючим впливом на синтез ДНК при застосуванш HAES-LX 5%.

Перспективи подальших дослгдженъ полягають в тому, що отримаж дат дозволять з'ясувати найбшъш оптималъш режими застосування препарату HAES-LX 5% для корекци порушенъ клтинного циклу клтин легень тсля термiчноl травми штри що може тдвищити ефективтстъ л^вання отковок хвороби.

Ж

1. Боенко С. К. Поражение дыхательных путей у обожжённых / С. К. Боенко [и др.]. // - Киев, - 1990. - С. 96-118.

2. Гунас I. В. Наслщки впливу отку шюри на показники клтинного циклу клтн тимусу та ix корекщя лактопроте'шом з сорб^олом або HAES-LX 5 % / I. В. Гунас, Б. О. Кондрацький, Е. В. Черкасов [и др.] // Biomedical and Biosocial Anthropology. - 2012. - C. 135 - 141.

3. Спиридонова Т.Г. Полиорганная дисфункция и недостаточность у обожженных: автореф. дис. на соискание научн. степени доктора мед. наук : 14.00.27, 14.00.17 / Спиридонова Тамара Георгиевна. - М., - 2007. - 41 с.

4. Климов А. Г. Искусственное поддержание газообмена у пострадавших с термической травмой в период ожогового шока: автореф. дис. на соискание научн. степени доктора мед. наук: спец. 14.00.37 / Климов А. Г. - M., - 2010.

5. Фюталь Е. Я. Комбустюлопя / Е. Я. Фюталь, Г. П. Козинець, Г. С. Самойленко [та ш.] // - Кшв : "1нтерлшк". - 2004. -С. 24-26.

6. Dai Z. Ringer's malate solution protects against the multiple organ injury and dysfunction caused by hemorrhagic shock in rats / Z. Dai.[ et al.] // Shock. - 2012. - Vol. 38, № 3. - P. 268-274.

7. Galani V. The role of apoptosis in the pathophysiology of Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS): an up-to-date cell-specific review / V. Galani, E. Tatsaki, M. Bai [et al.] // Pathol. Res. Pract. - 2010. - Mar 15. - Vol. 206, № 3. - P. 145-150.

8. Li W. The change in apoptosis and proliferation of pulmonary tissue cells in rats with smoke inhalation injury / W. Li, Z. Yang, X. Yang [et al.] Zhonghua Shao Shang Za Zhi. - 2002. - Vol. 3. - P. 139-141.

9. Li W.J. Effects of smoke inhalation injury on the phagocytic function of rat alveolar macrophage and on neutrophil apoptosis / W.J. Li, Z.C. Yang, E.H. Li [et al.] // Article in Chinese. - Zhonghua Shao Shang Za Zhi. - 2003. - Vol. 19(3). - P. 163-166.

10. Matsubar M. Paraquat causes S-phase arrest of rat liver and lung cells in vivo / M. Matsubara, K. Yamagami, Y. Kitazawa [et al.] // Arch. Toxicol. - 1996. - Vol. 70, № 8. - P. 514-518.

ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА КЛЕТОК ЛЕГОЧНОЙ ТКАНИ КРЫС ПОСЛЯ ОЖОГОВОГО

ПОРАЖЕНИЯ КОЖИ Очеретнюк А. О., Прокопенко С. В., Черешнюк I. Л., Лисенко Д. А.

В статье представлен анализ показателей клеточного цикла клеток легких на фоне ожога кожи и при коррекции 0,9% раствором №С1, лактоиротеином с сорбитолом или НАЕ8-ЬХ 5% через 1, 3 и 7 сутки после ожогового поражения кожи у крыс. Выявлено, что ожоговое повреждение кожи сопровождается существенным снижением показателей фазы синтеза ДНК, нормализация которых происходит на 7 сутки после поражения. При применении на фоне ожогового поражения кожи лактопротеина с сорбитолом через 1 сутки установлено значительное повышение индекса пролиферации (1Р) и фазы 02 + М, а также уменьшение показателей фазы 0001 по сравнению с показателями группы Ожог + 0,9% №С1. На фоне действия препарата НАЕ8-ЬХ 5% через 3 суток после ожога кожи обнаружена сильная тенденция к уменьшению блока пролиферации (р = 0,0927) и увеличение фазы 02 + М (р = 0,0547) по сравнению с аналогичными показателями на 3 сутки

CELL CYCLE INDICES OF RATS LUNGS TISSUE

CELLS AFTER BURN SKIN LESION Ocheretnyuk A.O., Prokopenko S.V., Chereshnyuk I.L., Lysenko D.A.

The article presents the analysis of the performance of the cell cycle of lungs cells against a background of burning the skin and in the correction of a 0,9 % solution of NaCl, lactoprotein with sorbitol or HAES-LX 5% at 1, 3 and 7 days after burn skin lesions in rats. It was revealed that the burn damage of the skin accompanied by a significant reduction in DNA synthesis phase indices, normalization which occurs on the 7th day after the defeat. When applied on a background of burn skin lesions lactoprotein with sorbitol in 1 day found a significant increase in proliferation index (PI) and phase G2 + M, and the decline in the G0G1 phase as compared with the group Burn + 0,9% NaCl. On the background of the drug HAES-LX 5% after 3 days after burn skin revealed a strong tendency to decrease proliferation block (p = 0,093) and increased phase G2 + M (p = 0,055) compared with those

группы Ожог + 0,9% р-р №С1. Применение лактопротеина с сорбитолом или ИЛБ8-ЬХ 5%, через 7 суток после ожогового повреждения кожи, приводит к нормализации показателей клеточного цикла легких, что проявлялось уменьшением блока пролиферации, а также положительным стимулирующим влиянием на синтез ДНК при применении ЫЛБ8-ЬХ 5%.

Ключевые слова: ожог кожи, клеточный цикл, ДНК-цитометрия, легкие, ЫЛБ8-ЬХ 5%, лактопротеин с сорбитолом.

Стаття надшшла 12.09.2014 р.

on day 3 group Burn 0,9% NaCl. Usage of lactoprotein with sorbitol or HAES-LX 5%, 7 days after burn injury of the skin, caused a normalization of cellular cycle of lungs, which was characterized by a decrease of block proliferation index, as well as a positive stimulating effect on DNA synthesis in the application of HAES-LX 5%.

Key words: burns of the skin, cell cycle, DNA cytometry, lungs, HAES-LX 5%, lactoprotein with sorbitol.

Рецензент Запорожець Т.М.

УДК 615.212:616.831-092.9:616.832-004.2-092.4

ВПЛИВ ЗНЕБОЛЮЮЧИХ ЗАСОБ1В НА ДОСЛ1ДНО-ОР16НТОВАНУ ФУНКЦ1Ю ЦНС У ЩУР1В ЗА УМОВ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ЕКВ1ВАЛЕНТУ РОЗС1ЯНОГО СКЛЕРОЗУ

Дана стаття присвячена дослщженню впливу знеболюючих засоб1в на показники рухово - дослщницько1 функцп в тест «вщкрите поле» у бших щур1в в умовах формування дем1ел1шзуючего дисбалансу в ЦНС (модель експериментального алерпчного енцефалом1ел1ту (ЕАЕ)). Встановлено, що аналгетичш препарати не справляють ютотного впливу на психоемоцШш прояви у тварин в тест «вщкрите поле» в умовах ЕАЕ, що тдтверджено зареестрованими показниками акт1в грумшгу та болюЫв, яю в юнщ експерименту вщповщали показникам вихщного фону. Також слщ зазначити позитивний вплив ¡бупрофену 1 кеторолаку при стльному використант з металпредтзолоном: юльюсть переЫчених квадраив, а також дослщницька актавшсть (заглядання в шрки 1 вертикальн стшки над майданчиком) мали тенденщю до вщновлення рухового дефщиту 1 рееструвалися на тл1 показниюв вихщного фону. Надал1 плануеться вивчення фармакодинам1чних аспекив знеболення дослщжуваних препараив в умовах експериментальних екв1валент1в розЫяного склерозу на тт лжування металпредтзолоном.

Ключов! слова: розаяний склероз, фармакотерашя, експеримент, ненаркотичш анальгетики.

Робота е фрагментом НДР «Системна фармакологiя неотоХдних аналъгетитв та засобiв медикаментозного захисту мозку в умовах патологiчних сташв» (ДР № 0114и000935).

Розсшний склероз (РС) - захворювання нервово1 системи, котре виникае в молодому та середньому вщ (15-40 роюв). Особливютю хвороби е одночасне враження декiлькох вiддiлiв ЦНС, що призводить до появи у хворих рiзноl невролопчно1 симптоматики. До тепершнього часу змiннлося уявлення про саму сутнють РС, як про захворювання, «вражаючому мiелiновi оболонки провщниюв головного та спинного мозку», при якому перюди загострень змiнюються перюдами повного або майже повного клшчного благополуччя [9]. В останнi роки з'являеться все бiльше даних, яю свiдчать про значну, якщо не провщну роль - нейродегенеративних процешв в патогенезi РС i стае очевидним, що вже на раншх етапах захворювання розвиваеться нейрональне i аксональне нейродегенеративне ушкодження [15]. Причому пошкодження аксонiв спостерiгаеться не тшьки в вогнищах демiелiнiзацil, а розповсюджуеться вдовж всього аксонального волокна [10]. У зв'язку з встановленими в останш роки фактами, в даний час РС розглядаеться не тшьки як аутоiмунне демiелiнiзуюче захворювання, але i як нейродегенеративне захворювання [13, 14].

Нейропсихолопчт змiнн при РС включають зниження iнтелекту, порушення поведiнки. Частiше у хворих на РС переважае депреая. При розсiяному склерозi ейфорiя часто поеднуеться iз зниженням iнтелекгу, недооцiнкою тяжкостi свого стану, розгальмуванням поведiнкн. Близько 80% хворих на розаяний склероз на раншх стадях захворювання мають ознаки емоцшно1 несгiйкосгi з багаторазовою з рiзкою змiною настрою за короткий промiжок часу [12]. У бiльшосгi хворих спостериаеться також больовий синдром [11], що потребуе призначення знеболюючих засобiв. На сьогодш перелiк болетамуючих засобiв е лiднруючнм на фармацевтичному ринку Украши. Також вiдомi данi, щодо переваг та недолiкiв в механiзмi дп дано1 групи препарагiв [1]. Проте даних щодо впливу анальгетиюв на поведiнковi реакцл у хворих на РС нами в лiтературi не визначено.

Метою роботи була експериментальна оцшка орiенговно-дослiдноl функцп щурiв в гесгi «вiдкрнге поле» на фош отримання знеболюючих засобiв за умов експериментального е^валенту розсiяного склерозу з урахуванням фармакотерапп загострень метилпредшзолоном.

Матерiал та методи дослiдження. Дослщження проведеннi на 80 бiлнх безпородних щурах, масою 220-270 г., яю утримувались у стандартних умовах вiварiю ДЗ «ДМА МОЗ Украши» [6]. Дослщження виконувались у вiдповiдносгi до принцитв Хельсшксько1 декларацп, прийнятох Генеральною асамблеею Всесв^ньо1 меднчноl асощацп (2000р.), Конвенцп Ради

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.