Подходы к оценке повышенного риска развития паразитарных заболеваний Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

30

ЗНиСО ЯНВАРЬ №1 (238)

— использование современных покрытии труб, исключающих формирование на их поверхности биопленок.

Профилактика легионеллеза в современном обществе является одним из элементов стратегии в обеспечении безопасности воды. Разработанная и внедренная за последние годы методическая база для диагностики и профилактики легионел-леза в РФ в полноИ мере соответствует международным стандартам и позволяет осуществлять эффективный контроль потенциально опасных водных систем.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Систер В.Г. Биологическая безопасность централизованных систем кондиционирования воздуха (эпидемиологические и микробиологические аспекты) / В.Г. Систер [и др.] // Экология жилых помещений города Москвы. Сб. трудов постоянно действующего научно-практического городского семинара. М.: МГУИЭ, 2005.

2. Систер В.Г. Экологическая безопасность / В.Г. Систер [и др.] //Пять звезд. М.: 2011. № 3. С. 35—36.

3. Эпидемиологический надзор за легионеллезной инфекцией: МУ 3.1.2.2412—08. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзор, 2009.

4. Онищенко Г.Г., Демина Ю.В., Тартаковский И.С. Современная концепция организации эпидемиологического надзора за легионеллезной инфекцией / Г.Г. Онищенко [и др.] //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. М.: 2009. № 5. С. 85—91.

5. МР 02.039—09 «Выявление и количественное определение легионелл в водных образцах внешней среды методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием тест-систем производства ЗАО Синтол». М.: ФГУЗ Федеральный центр гигиены и эпидемиологии, Роспотребнадзора. 2009. 33 с.

6. СП 3.1.2.2626—10 «Профилактика легионеллеза». М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Рос-потребнадзора, 2010. 26 с.

Контактная информация:

Иванникова Елена Михайловна, тел.: 8 (926) 611-36-96, e-mail: iegh510@yandex.ru

Contact information: Ivannikova Elena, phone: 8 (926) 611-36-96, e-mail: iegh510@yandex.ru

-♦+♦-

ПОДХОДЫ К ОЦЕНКЕ ПОВЫШЕННОГО РИСКА РАЗВИТИЯ ПАРАЗИТАРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

М.И. Лукманов1,2, М.М. Туйгунов2

APPROACHES TO AN ASSESSMENT OF THE INCREASED RISK OF DEVELOPMENT OF PARASITIC DISEASES

M.I. Lukmanov, M.M. Tuigunov

1ФГБОУ ВПО Башкирский государственный аграрный университет; 2ГБОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа

Выявлены ассоциации HLA-аллеля DQ2 локуса DQB1* и генотипа GA полиморфизма (-308) G/A гена фактора некроза опухолей альфа TNFA с предрасположенностью к заболеванию цистным эхинококкозом. Полученные данные можно рассматривать как дополнительный критерий для оценки риска развития и прогноза заболевания.

Ключевые слова: цистный эхинококкоз, генетический полиморфизм, факторы риска.

The association of HLA-DQ2 allele DQB1* locus genotype and GA polymorphism (-308) G/A gene tumor necrosis factor alpha TNFA with a predisposition to the disease cystw echinococcosis. These data can be recommended as an additional criterion for assessing risk and prognosis.

Keywords: cystic echinococcosis, genetic polymorphism, risk factors.

В эпидемиологии под понятием «риск» подразумевается потенциальная возможность (вероятность) осложнения эпидемиологической ситуации, ожидаемая или возникающая в связи с неблагоприятным воздействием определенных факторов [3]. «Риск заражения» — это возможность проникновения возбудителя, возникающая при наличии определенного механизма передачи от источника заражения, климатогеографических условий, подходящих для выживания инвазионного начала, а также низкая эффективность медико-профилактических мероприятий. Индивидуальная восприимчивость к заболеванию в значительной степени обусловлена функционированием иммунной системы. Многочисленные данные литературы свидетельствуют об ассоциациированности ряда инфекционных и паразитарных болезней с определенными антигенами HLA (Human Leykocyti Antigens), группами крови, активностью продукции цитокинов. На основании полученных результатов разработаны биохимические и иммунологические

г-Ь

маркеры для прогнозирования характера развития инвазий. Исследования по выявлению коррелятивной связи полиморфных аллелей генов контроля иммунного ответа с повышенным риском развития паразитарного заболевания единичны.

Цель работы — выявление ассоциации гена HLA-DQB1 — главного комплекса гистосовме-стимости и полиморфного локуса гена фактора некроза опухолей альфа TNFA — с заболеванием цистным эхинококкозом.

Материал и методы. Иммуноглобулины класса IgG к антигенам выявлялись в сыворотке венозной крови с помощью твердофазного иммуно-ферментного анализа (ИФА).В исследовании применялись диагностические тест-системы «Эхинококк-IgG-стрип» компании ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск).

В качестве объекта исследования использовались образцы ДНК ^ = 78), полученные из периферической венозной крови методом фенольно-хлороформной экстракции [5].

ЯНВАРЬ №1 (238)

31

Типирование аллельных специфичностей '— HLA-гена, класса II, локуса DQB1* осуществлялось при помощи метода ПЦР с применением стандартного набора реагентов фирмы PROTRANS т (Германия). Рестрикционный полиморфизм ^ (—308)G/A гена фактора некроза опухолей ^ альфа-TNFA изучался методом анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов продуктов полимеразной цепной реакции синтеза ДНК (ПЦР-ПДРФ) [4].

В качестве контроля проводились аналогичные исследования среди здоровых и серонега-тивных (ИФА(—)) в отношении эхинококкоза лиц (N = 51). Группы обследованных пациентов и контроля были сопоставимы по возрасту, полу, этнической принадлежности и месту жительства. Для статистического анализа использовали стандартные методы. Разница в распределении частот генотипов и аллелей генов между группами рассчитывалась с использованием критерия х2 с поправкой Йетса на непрерывность с помощью программы RxC-статистика (Roff, Bentzen; 1989). Статистически значимыми считали различия при р < 0,05. Для количественной оценки относительного риска заболевания по конкретному аллелю или генотипу вычислялся показатель отношения шансов (odds ratio — OR). При OR = 1 ассоциации нет, при OR > 1 — рассматривалось как положительная ассоциация заболевания с аллелем или генотипом, OR < 1 — как отрицательная ассоциация (Schlesselman, 1982).

Результаты и обсуждение. При обследовании методом ИФА у 78 лиц была обнаружена положительная серологическая реакция (ИФА(+)) к специфическим антигенам эхинококка,при этом у 49 из них диагностирован цистный эхинокок-коз (ЦЭ) на основании обнаружения кисты при ультразвуковом исследовании, а ее паразитарный характер был подтвержден после оперативного вмешательства в стационаре. У 29 обследуемых лиц с положительной реакцией ИФА киста не выявлена.

Проведено исследование распределения частот HLA-аллелей локуса DQB1 у серопозитив-ных лиц и лиц группы контроля. Среди здоровых наиболее частотными были специфичности DQ5 и DQ6, в группе ЦЭ чаще встречались DQ2 и DQ6. Статистический анализ выявил существенные различия частот полиморфного варианта DQ2 у больных ЦЭ и в контроле (30,6 % против 17,6 %; х2 = 3,923; p = 0,048; OR = 2,059; 95 % CI: 1,058-4,009); у больных ЦЭ и здоровых серопо-зитивных лиц (30,6 % против 13,8 %; х2 = 4,718; p = 0,03; OR = 2,758; 95 % CI: 1,166-6,525). Полученные результаты согласуются с данными литературы об ассоциации гаплотипа HLA-B8, DR3, DQ2 с тяжелым течением эхинококкоза у населения Европы.

Известно, что у носителей HLA-DQ2 наблюдается более высокая продукция интерлейкинов (ИЛ-5, ИЛ-10), интерферона (ИФ-y) и фактора некроза опухолей альфа (ФНО-а). исследования показали, что в крови у больных ЦЭ наблюдается существенная активация продукции интерфе-ронов а и y, причем уровень данных цитокинов

зависит от локализации эхинококковой кисты и множественности поражения [2]. Установлена зависимость активной продукции ИФ-а и ИФ-y с HLA-фенотипом больных ЦЭ. На основании проведенных исследований было сделано предположение, что при инвазии Echinococcus granulosus активная выработка ИФ-y, стимулирующего Тх2, связана с формированием капсулы эхинококковой кисты [2]. Также выявлена корреляция повышенного уровня цитокинов ФНО-а и ИЛ-6 в крови с характером развития эхинококкоза печени [1]. Обнаружено, что ФНО-а может индуцировать экспрессию HLA-антигенов.

ФНО-а (кахектин) — медиатор макрофагов и лимфоцитов, который играет важную роль в регуляции процессов дифференцировки, роста и метаболизма этих клеток [4]. Взаимодействуя с другими цитокинами, рецепторами клеточной поверхности, белками острой фазы и др., кахектин служит важным звеном между воспалительными и иммунными реакциями. Биологические эффекты зависят от концентрации ФНО-а. Известно, что транзиция G/A в —308 позиции промоторной области гена TNFA приводит к повышенной экспрессии, вдвое увеличивая продукцию клетками цитокина ФНО-а [4]. При избыточной секреции ФНО-а активируются макрофаги и нейтрофилы, вызывая синтез каскада интерлейкинов, в т. ч. IL1, IL6, IL8, IL10 [4].

Проведенный анализ распределения частот генотипов полиморфного локуса (—308)G/A гена фактора некроза опухолей альфа TNFA показал, что среди больных ЦЭ носители генотипа GG составляли 53,1 %; GA - 44,9 % и АА - 2,0 %; в контроле соответственно GG — 74,5 %; GA — 23,5 %; АА — 2,0 %. У больных ЦЭ генотип GA встречался значительно чаще, чем в контроле (х2 = 4,177; p = 0,041; OR = 2,649; 95 % CI: 1,123—6,244). Частота генотипа GG у больных ЦЭ была существенно ниже по сравнению с контролем (х2 = 4,102; р = 0,043; OR = 0,387; 95 % CI:

0.167.0,9). Высокий показатель отношения шансов позволяет считать, что генотип GA гена TNFA ассоциируется с заболеванием ЦЭ.

Заключение. Таким образом, проведенные исследования показали, что HLA-аллель DQ2 и генотип GA гена TNFA ассоциируются с предрасположенностью к цистному эхинококкозу. На основании полученных результатов можно рекомендовать их в качестве молекулярно-генетических маркеров оценки риска развития заболевания и использовать как дополнительный критерий для прогнозирования характера течения инвазии.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Машурова Е.В. Цитокиновый портфель при эхинокок-козе печени: автореф. дис. ... канд. мед. наук. М., 2008. 24 с.

2. Озерецковская Н.Н. Интерфероновый статус и антигены системы HLA / Н.Н. Озерецковская, А.М. Щербаков, С.Н. Сунцов [и др.] //Мед. паразитология. 1992. № 1. С. 42—44.

3. Черкасский Б.Л. Понятие «риск» в эпидемиологии / Б.Л. Черкасский //Эпид. и инф. болезни. 2006. № 4. С. 5—10.