CC BY
33
Таблица 2
Суммарный дебит компонентов печеночной желчи у больных вирусными гепатитами
Компоненты ХГВ ХГВтіп ХГС ХГСтіп норма
Желчь, мл/мин 111±9 р>0,05 102±14 р>0,05 119±11 р>0,05 99±15 р>0,05 104±7
Холевая кислота 1,014±0,21 р<0,01 0,927±0,123 р<0,05 0,96±0,17 р<0,01 1,03±0,11 р<0,05 1,407±0,155
Холестерин 0,79±0,1 р>0,05 0,72±0,12 р>0,05 0,98±0,12 р>0,05 0,65±0,11 р>0,05 0,64±0,09
Холато-холестериновый коэффициент 1,28±0,18 р<0,01 1,29±0,13 р<0,01 1,04±0,21 р<0,01 1,58±0,14 р<0,05 2,53±0,17
Билирубин 0,372±0,052 р<0,05 0,278±0,036 р>0,05 0,253±0,031 р>0,05 0,275±0,05 р>0,05 0,285±0,025
Кальций 0,297±0,029 р<0,05 0,21±0,022 р<0,05 0,411±0,027 р<0,05 0,181±0,03 р>0,05 0,138±0,012
Фосфолипиды 0,114±0,08 р<0,05 0,197±0,072 р>0,05 0,152±0,07 р<0,05 0,174±0,07 р<0,05 0,23±0,06
Фосфолипидно-холестериновый коэффициент 0,112±0,11 р<0,05 0,274±0,031 р>0,05 0,156±0,08 р<0,05 0,267±0,05 р>0,05 0,29±0,04
Из таблицы 1 видно, что болевые и (или) дискомфортные ощущения испытывают 42,1-90,2% больных ВГ, процентное соотношение которых является прямо пропорциональным степени активности вирусного процесса. Наиболее часто предъявляемой жалобой у больных ВГ, является ощущение тяжести в правом подреберье, характерной для 31,6-39,9% больных ВГ встречающейся в независимости от активности процесса. Жалобы на болевые ощущения говорят о вовлечении в процесс билиарного тракта.
Наиболее распространенными жалобами желудочной диспепсии у больных ВГ были непереносимость жирной пищи (41,2-69,6%) и горечь во рту (21,3-59,8%) что является свидетельством нарушения процесса желчеотделения.
Жалобами, характеризующими кишечную диспепсию, были запоры (31,7-36%) и метеоризм (27,7-34,9%), что говорит о нарушении процесса пищеварения и уменьшении поступления ЖК в кишечник.
Астено-вегетативными проявлениями ВГ у обследованных больных были в основном жалобы на повышенную утомляемость (60,5-81,3%) и слабость (58,3-73%).
Артралгии встречались у 15,8% больных ХГСтт, 17,1% ХГВтт и у 25% и 25,9% больных ХГС и ХГВ соответственно.
Всем больным ВГ было проведено ЭХДЗ. У всех обследованных больных ВГ был рассчитан суммарный дебит компонентов выделившихся в двенадцатиперстную кишку после введения раздражителя.
Из результатов, приведенных в таблице 2, видно, что у всех больных ВГ достоверно снижен
суммарный дебит ХК и ХХК, также у больных ХГВ, ХГВтт и ХГС увеличен суммарный дебит кальция, у больных ХГВ, ХГС и ХГСтт снижен суммарный дебит ФЛ, у больных ХГВ и ХГС также снижен ФЛХК. Все вышеперечисленные изменения говорят о нарушении дуоденальной фазы пищеварения, снижении секреции ЖК и наличии у подавляющего большинства больных ВГ синдрома БН. При разделении БН на лёгкую (суммарный дебит ХК 0,6-1,2 ммоль/ч), средней степени тяжести (суммарный дебит ХК 0,1-
0,5 ммоль/ч) и тяжёлую (суммарный дебит ХК ниже 0,1 ммоль/ч) [3, 6] получены результаты, приведенные на рисунке.
У большинства больных ВГ присутствует синдром БН. Так, у больных с репликативными формами В и С БН была выявлена у 92% и 94,4%, из них средняя степень у 37,5% и у 34,2%.
У больных с интегративными формами гепатитов В и С БН также встречалась у подавляющего большинства 79,7% и 83,3% соответственно, из них средняя степень БН отмечена у 21,1% и у 18,4% больных соответственно.
На основании проведённого исследования можно сделать следующие выводы.
1. У больных ВГ наиболее часто встречаются жалобы на дискомфортные и болевые ощущения в правом подреберье, что говорит о вовлечении в патологический процесс всего билиарного тракта. Более чем у трети больных ВГ встречаются жалобы на непереносимость жирной пищи, метеоризм и обстипацию, что является яркой клинической характеристикой синдрома БН.
2. Наиболее информативным инструментальным методом диагностики синдрома БН является
0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
ЕЗ Средняя степень В Легкая степень В Отсутствует |
Рис. Синдром билиарной недостаточности у больных вирусными гепатитами.
ЭХДЗ с биохимическим исследованием порций желчи (ХК, холестерин, ХХК, билирубин, кальций, ФЛ, ФЛХК, СРБ) и расчётом суммарного дебита компонентов желчи, выделившихся за час после введения раздражителя.
3. У больных с активными формами ВГВ и С нарушена желчеобразующая и желчевыделительная функция печения, клинически проявляющаяся жалобами на дискомфортные и (или) болевые ощущения в правом подреберье, непереносимость жирной пищи, метеоризм и обстипацию, что является яркой клинической характеристикой синдрома БН. Нарушен биохимический состав желчи, а именно: снижен уровень секреции ХК, ФЛ, и, как следствие, ХХК и ФЛХК, что говорит о её высоких литогенных свойствах, а в 92-94,4% случаев развивается БН.
4. У больных ВГВ и С с минимальной степенью активности, при отсутствии объективных клинических проявлений, нормальных или относительно нормальных показателях биохимического исследования крови (нормальное содержание уровня билирубина, нормальное или минимальное повышение печёночных трансаминаз), отсутствии (или низкой) репликации вируса (что подтверждено ПЦР исследованием), также нарушен биохимический состав порций желчи и дебит ее компонентов. У 79,7-83,3% больных развивается
синдром БН, что, безусловно, должно учитываться при лечении данной группы больных.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ильченко А.А. Билиарная недостаточность и синдром нарушения пищеварения // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - М., 2004. - № 3. - С. 76-82.
2. Максимов В.А., Чернышев А.Л., Неронов В.А. и др. Билиарная недостаточность: этиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение // Эффективная фармакотерапия в гастроэнтерологии и гепатоло-гии. - 2006. - № 1, июнь. - С. 6-11.
3. Максимов В.А., Чернышев А.Л., Тарасов К.М. Дуоденальное исследование. - М.: ЗАО "Медицинская газета", 1998. - 192 с.
4. Максимов В.А., Далидович К.К., Чернышев А.Л., Мельников В.Л. Диагностические тесты при заболеваниях органов пищеварения. - Пенза, 2005. -228 с.
5. Максимов В.А., Далидович К.К., Федорук А.М. и др. Редкие болезни, клинические синдромы и симптомы заболеваний органов пищеварения. -М., ИТ "АдамантЪ", 2007. - 384 с.
6. Максимов В.А., Чернышев А.Л., Тарасов К.М., Неронов В.А. Билиарная недостаточность. - М.: ИТ "АдамантЪ", 2008. - 232 с.
УДК 616.37-002:616.155.1
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СПОСОБЫ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ СТРУКТУРНОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО
ГНОЙНОГО ХОЛАНГИТА
© Ярош А.Л., Сергеев О.С., **Долгарева С.А.
Белгородская областная клиническая больница святителя Иоасафа, Белгород; кафедра хирургических болезней № 1 медицинского факультета Белгородского государственного университета, Белгород; кафедра физики, информатики и математики Курского государственного медицинского университета, Курск E-mail: [email protected]
В экспериментальных условиях установлены характер и выраженность изменений структурно-функциональных свойств эритроцитов при гнойном холангите и разработаны эффективные способы их фармакологической коррекции. Полученные в работе данные свидетельствуют о том, что в условиях экспериментального гнойного холангита нарушается целый ряд параметров структурно-функциональных свойств эритроцитарной мембраны, играющих важную роль в патогенезе иммунологических расстройств при данной нозологии, которые могут быть корригированы введение сочетания дерината с эспа-липоном, полиоксидония с мексидолом или, что более эффективно, абактала с мекси-кором.
Ключевые слова: острый гнойный холангит, структурно-функциональные свойства эритроцитов, эритроцитар-ная мембрана, фармакотерапия.
PHARMACOLOGICAL WAYS OF CORRECTION OF DISTURBANCES IN STRUCTURAL AND FUNCTIONAL PROPERTIES OF ERYTHROCYTES AT EXPERIMENTAL PURULENT CHOLANGITIS
Yarosh A.L., Sergejev O.S, Dolgareva S.A.
St. Ioasaph Belgorod Regional Clinical Hospital, Belgorod;
Surgical Diseases N 1 Department of the Medical Faculty of the Belgorod State University, Belgorod;
Physics, Informatics & Mathematics Department of the Kursk State Medical University, Kursk
In the experimental conditions changes of structural and functional properties of erythrocytes are established at purulent cholangitis and effective ways of their pharmacological correction are developed. The obtained data testify that in the conditions of the experimental purulent cholangitis the amount of parametres of structural and functional properties of erythrocyte membrane is broken that plays an important role in a pathogenesis of immunologic disorders at the given pathology. These changes can be corrected by combinative introduction of Derinat with Espa-liponom, Polyoxydonium with Mexidol or, that is more effective, Abactal with Mexicor.
Keywords: acute purulent cholangitis, structural and functional properties of erythrocytes, erythrocyte membrane, pharmacotherapy.
При болезни клетка, в частности ее плазматическая мембрана, реагирует молекулярными изменениями, носящими как патологический, так и адаптивный характер [7]. В полной мере подобная ситуация сложилась и в области изучения патологии эритроцита. Повышенный интерес исследователей к эритроциту при болезнях разного генеза обусловлен его участием в процессах, связанных с поддержанием гомеостаза на уровне целого организма, и прежде всего иммунного. Существующие данные не оставляют сомнений в том, что эритроциты являются важным звеном механизма иммунорегуляции при стрессе и в условиях патологии [5, 6].
При этом роль эритроцитов в условиях хирургической патологии полностью не изучена. Это в первую очередь касается такой часто встречающейся и социально значимой патологии билио-
панкреатодуоденальной зоны, как гнойный холангит, так как он сам по себе чреват генерализацией процесса с образованием множественных абсцессов печени, развитием билиарного сепсиса, полиорганной недостаточности. Летальность при гнойном холангите, по данным разных авторов, составляет от 5% до 88% [1].
Отсутствие достоверных данных о структурно-функциональных свойствах эритроцитов при гнойном холангите предопределяют целесообразность их детального изучения для определения способов фармакологической коррекции нарушений при данных нозологиях.
В связи с этим, целью исследования явилось изучение характера и выраженности изменений структурно-функциональных свойств эритроцитов в условиях экспериментального гнойного хо-
лангита и разработка эффективных способов их фармакологической коррекции.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Экспериментальная часть исследований проведена на 208 крысах линии Вистар массой 180200 г. Все животные содержались в одинаковых условиях, на обычном пищевом режиме. Для получения статистически достоверных результатов группы формировали из 15-17 животных. В контрольные и опытные группы входили животные одного возраста, полученные из питомника одновременно. Разброс в группах по исходной массе не превышал ±10%. Все исследования проводили в одно и то же время суток с 8 до 12 ч. с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986).
Острый гнойный холангит (ЭГХ) моделировали по Г.Г. Ахаладзе [1] в модификации С.В. Костина с соавт. [3]: инъекционным путем в проксимальном направлении в общий желчный проток вводилась микробная взвесь штамма № 195 гемолитической E. coli в концентрации 1 • 105 КОЕ в 1 мл физиологического раствора в дозе 0,2 мл/кг массы, сразу после введения проводилась перевязка протока на игле выше места пункции. Гнойный холангит при гистологическом исследовании подтверждался уже на третьи сутки.
В эксперименте исследовалась эффективность использования сочетаний препаратов: ридостина ("Вектор", Россия) с рибоксином ("Дальхим-фарм", Россия), дерината ("Техномедсервис", Россия) с эспа-липоном ("Esparma", Германия), мексидола ("Эллара", Россия) с полиоксидонием
("ПетроваксФарм", Россия) или с абакталом ("Lek", Словения).
Дозы, способы и схемы введения препаратов, представленные в таблице 1, соответствовали рекомендациям, приведенным в пособии по фармакотерапии М.Д. Машковского "Лекарственные средства" (2000) и аннотациях к использованию препаратов. Т.к. начиная с третьих суток моделирования гнойного холангита возрастает летальность в группах животных, нами применялся антибиотик широко спектра цефотаксим, кроме группы, получавшей абактал и мексикор.
Эритроциты получали из 5 мл гепаринизиро-ванной крови по методу E. Beutler и фракционировали в градиенте плотности яичного альбумина на фракцию "легкие" (1,079 г/см3) и "тяжелые" (1,1179 г/см3) [11]. Определяли сорбционную способность эритроцитов (ССЭ) [9] и сорбционную емкость их гликокаликса [10]. О функциональном состоянии эритроцитов судили также по содержанию в них малонового диальдегида (МДА) [9].
Мембраны эритроцитов получали методом G.T. Dodge [12]. Электрофорез проводили в присутствии додецилсульфата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K. Laemmli) [14]. Белки окрашивали кумаси голубым R-250 по модифицированной методике G. Fairbanks [13]. Количественное содержание белковых фракций рассчитывали через площадь и известную концентрацию яичного альбумина, выступающего как маркерный белок. Полученные значения пересчитывали на 1 мг общего белка в исследуемом образце сухих мембран эритроцитов.
Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя непараметрические методы: критерии Вилкоксона-Манна и Уитни, Крускала-Уоллиса, Фридмана и непараметрический вариант критерия Ньюмена-Кейлса [4].
Таблица 1
Применение препаратов
Препарат Способ введения Разовая доза, мг/кг Схема введения
Количество инъекций (введений) Интервал между инъекциями (введениями), ч.
Деринат Внутримышечно 2 5 24
Ридостин Внутримышечно 1,5 5 24
Полиоксидоний Внутримышечно 0,15 5 24
Абактал Внутривенно 15 10 12
Мексидол Внутримышечно 1 5 12
Эспа-липон Внутривенно 15 5 24
Рибоксин Внутривенно 5 5 12
Примечание: для сопоставления данных с группой животных, получавших абактал и мексидол, в других группах животные дополнительно получали цефотаксим (12 мг/кг через 12 часов № 10).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При моделировании ЭГХ у животных на первые сутки снижается представительность глице-ральдедиг-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФД), тогда как сорбционные свойства и концентрация МДА в эритроцитах остается на уровне контроля (табл. 2).
На 5-е сутки после моделирования гнойного холангита у животных выявлено увеличение ССЭ и СЕГ, концентрации МДА, представительности анионтранспортного белка (или белка полосы 3), Р-спектрина и белка полосы 4.5, но уменьшение представительности анкирина и глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (табл. 2).
К 7-м суткам после моделирования ЭГХ в эритроцитарной мембране дополнительно снижается количество анкирина, актина, но несколько уменьшается ССЭ по сравнению с пятыми сутками ССЭ (табл. 2).
Установлено, что сыворотка от животных с ЭГХ на 5-е сутки вызывает изменения в представительности белков в эритроцитарной мембране. Так, у интактных эритроцитов через 3 часа инкубирования наблюдается снижение количества в их мембране Г3ФД (на 27,3%) и анкирина (на 20,2%), но повышение ССЭ (на 33,1%).
Увеличение представительности Р-спектрина стимулирует полимеризацию спектрина, который
"прошивает" эритроцитарную мембрану, делая ее прочнее и стабильнее, но менее эластичной и упругой. Белок полосы 4.5, образуя водный канал, участвует в транспорте глюкозы и аминокислот в клетку. Поэтому увеличение представительности белка полосы 4.5 стимулирует пластический и энергетический обмен в эритроцитах. Повышение количества анионтранспортного белка увеличивает скорость транспортировки углекислого газа из тканей в легкие. Возрастание внутриклеточной концентрации МДА свидетельствует о недостаточности антиоксидантной системы защиты эритроцитов, а снижение представительности белка полосы 6 (глицеральдегид-3-фосфатдегидроге-наза, ММ=35 кД) является одним из факторов старения эритроцитов.
У фракции легких эритроцитов по сравнению с цельным пулом интактных эритроцитов наблюдается повышение Р-спектрина, Г3ФД и снижение представительности тропомиозина и глутати-он-8-трансферазы. Тогда как у тяжелых эритроцитов снижается количество Р-спектрина, анки-рина, АТБ и повышается содержание тропомио-зина, дематина, концентрация МДА и ССЭ (табл. 3).
При оценке динамики структурнофункциональных свойств эритроцитов от начальных значений установлено, что у фракции тяжелых эритроцитов в условиях ЭГХ на 5-е сутки наблюдается сдвиг в 9 показателях, отражающих
Таблица 2
Представительность белков мембраны эритроцитов и их сорбционные свойства у животных с ЭГХ
в зависимости от сроков моделирования (М±т)
Белок(полоса) Контроль Эритроциты животных с ЭГХ (сутки после моделирования)
1-е 5-е 7-е
1 2 3 4
а-спектрин (1а) 109,5±11,2 П5Д±10,3 108,2±8,70 98,1±8,80
Р-спектрин (1Р) 92,0±8,70 95,1±8,80 106,7±4,20*‘ 110,1±8,90*1
Анкирин (2) 69,5±4,04 64,9±3,70 54,2±3,60*' 44,0±3,30*1
Анионтранспортный белок (3) 172,6±10,2 191,1±11,3 209,1±15,2*1 236,6±14,6*'
Белок полосы 4.1 (4.1) 80,9±7,10 79,4±6,80 71,1±7,00 75,0±4,90
Паллидин (4.2) 63,9±5,90 62,1±5,10 57,8±4,80 55,1±4,70
Белок полосы 4.5 (4.5) 71,9±6,10 78,1±6,30 113,4±8,20*1 129,2±10,3*1
Дематин (4.9) 39,2±2,80 41,2±3,20 33,6±2,90*2 30,3±2,50*2
Актин (5) 116,1±8,00 101,1±8,50 98,1±8,20 81,5±7,10*1-3
Глицеральдегид-3 -фосфатдегидрогеназа (6) 56,0±4,10 47,7±3,70*1 33,8±3,40*1 31,2±2,50*!
Тропомиозин (7) 66,4±4,90 67,9±5,60 58,4±4,80 58,1±4,70
Глутатион-8-трансфераза (8) 61,4±5,00 57,7±4,70 56,5±4,60 52,1±4,60
СЕГ 0,95±0,11 1,11±0,12 1,36±0,12*1 1,45±0,14*12
ССЭ 16,4±1,30 18,2±1,60 32,1±2,20*1,2 21,5±1,80*1,3
МДА 3,20±0,30 3,40±0,23 5,10±0,34*1,2 5,6±0,37*1,2
Примечание: звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р<0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы эти различия.
Таблица 3
Представительность белков мембраны различных фракций эритроцитов и их сорбционные свойства
у животных с ЭГХ
Белок (полоса) Контроль Эритроциты животных с ЭГХ на 5-е сутки
Цельные Легкие Тяжелые
1 2 3 4
а-Спектрин (1а) 109,5±11,2 108,2±8,70 92,6±8,20 93,6±7,80
Р-Спектрин (1Р) 92,0±8,70 106,7±4,20*‘ 120,3±6,90*1,2 88,9±9,20*23
Анкирин (2) 69,5±4,04 54,2±3,60 59,4±4,10 42,7±4,60*1-3
Анионтранспортный белок (3) 172,6±10,2 209,1±15,2#1 210,6±20,3*1 156,6±12,0*23
Белок полосы 4.1 (4.1) 80,9±7,10 71,1±7,00 70,2±6,90 80,3±6,90
Паллидин (4.2) 63,9±5,90 57,8±4,80 61,2±5,70 76,6±5,60
Белок полосы 4.5 (4.5) 71,9±6,10 113,4±8,20*‘ 128,9±10,3*1 110,30±9,80*1
Дематин (4.9) 39,2±2,80 33,6±2,90 30,2±3,50 50,5±5,50*1-3
Актин (5) 116,1±8,00 98,1±8,20 86,6±7,40*1 102,3±7,60*3
Глицеральдегид-3 -фосфатдегидрогеназа (6) 56,0±4,10 33,8±3,40*1 49,90±4,50*2 30,3±4,50*3
Тропомиозин (7) 66,4±4,90 58,4±4,80 45,6±5,60*1,2 72,2±6,40*2,3
Глутатион-Б-трансфераза (8) 61,4±5,00 56,5±4,60 46,6±3,70*1,2 76,9±5,40*1-3
СЕГ 0,95±0,11 1,36±0,12*‘ 1,13±0,11 1,42±1,60*13
ССЭ 16,4±1,30 32,1±2,20*‘ 25,6±2,20*1 38,4±3,20*1-3
МДА 3,20±0,30 5,10±0,34*1 4,10±0,32*1 6,50±0,51*1-3
структурно-функциональные свойства эритроцитов, а у фракции легких эритроцитов - в 7 показателях.
Полученные факты в экспериментальных исследованиях о наиболее выраженных изменениях структурно-функциональных свойств эритроцитов на 5-е сутки от начала моделирования хирургической патологии можно сопоставить с данными литературы о роли эритроцитов в регуляции иммунного гомеостаза при патологии [2] и результатами исследований, проведенных по изучению состояния иммунологической реактивности у животных в условиях ЭГХ, в которых максимальные иммунологические нарушения имели место на 5-7 сутки от моделирования [10]. Это еще раз подтверждает важную роль эритроцитов в регулировании иммунологического гомеостаза при патологии, в частности при остром панкреатите и гнойном холангите. Возможно, иммуно-тропные свойства легких и тяжелых эритроцитов могут быть обусловлены различными изменениями их структурно-функциональных свойств. При изучении нарушений структурно-функциональных свойств различных фракций эритроцитов у животных с ЭГХ на 5-е сутки от моделирования выявило, что фракции легких и тяжелых эритроцитов отличаются как от общего пула эритроцитов, так и друг от друга, при этом более выраженные изменения имеют место у фракции тяжелых эритроцитов. Полученные результаты позволяют предположить, что изменения структурно-функ-
циональных свойств различных фракций эритроцитов обусловливают различные их иммунотроп-ные эффекты, доказанные целым рядом исследований [5, 8]. Эти данные вписываются в концепцию, что красные клетки крови являются интегрирующим звеном между взаимодействием ге-патоцитов и макрофагов. Так, гепатоциты выделяют в сосудистое русло соединения, индуцирующие появление у легких эритроцитов свойства усиливать выделение макрофагами селезенки иммуносупрессирующих цитокинов [2].
Многие лекарственные соединения, обладающие иммунотропной и антиоксидантной активностью, обладают свойством ослаблять иммуно-супрессирующие свойства легких эритроцитов и индуцировать появление иммуностимулирующих свойств у тяжелых эритроцитов [2, 5, 6],
при этом не исключено, что в основе данных эффектов лежат изменения структурно-функциональных свойств эритроцитов, обусловленные структурными перестройками мембранных белков [2].
Инъекции ридостина и рибоксина животным с ЭГХ начиная с первых суток от моделирования корригируют содержание анкирина и ССЭ, снижая количество ГБТ (табл. 4).
Введение животным с ЭГХ сочетания дерина-та и эспа-липона нормализует количество в эрит-роцитарной мембране Р-спектрина, анкирина, СЕГ и корригирует ССЭ и концентрацию МДА (табл. 4).
