CC BY
99
Первый опыт криоконсервации овариальной ткани
Ключевые слова: овариальная ткань, культивирование
Keywords:
cultivation,
human ovarian tissue
Гамзатова З.Х.1, Комличенко Э.В.2, Костарева А.А.1, Галагудза М.М.1,
Малашичева А.Б.1, Белякова М.В.1, Беженарь В.Ф.2, Берлев И.В.3
1 ФГБУ «Северо-Западный Федеральный медицинский исследовательский центр»
(Санкт-Петербург, Российская Федерация)
194156, Российская Федерация, Санкт-Петербург,пр. Пархоменко, д. 15
2 ГБОУ ВПО Первый Санкт-Петербургский Государственный медицинский университет им.акад.И.П.Павлова Минздрава России (Санкт-Петербург, Российская Федерация)
197022, Российская Федерация, Санкт-Петербург, Льва Толстого, дом 6/8
3 ФГБУ НИИ онкологии им.Н.Н.Петрова Минздрава России (Санкт-Петербург, Российская Федерация) 197758, Российская Федерация, г. Санкт-Петербург, пос. Песочный, ул. Ленинградская, д. 68
First experience in the cryopreservation of ovarian tissue
Gamzatova Z.H.1, Komlichenko E.V.2, Kostareva A.A.1, Galagudza M.M.1,
Malashicheva A.B.i, Belyakov M.V.1, Bejenar V.F.2. Berlev I.V.3
1 Federal North-West Medical Research Centre (Saint Petersburg, Russian Federation)
15, Parkhomenko street, St. Petersburg, Russian Federation, 194156
2 Pavlov First Saint Petersburg State Medical University (Saint Petersburg, Russian Federation)
6/8, L'va Tolstogo str., Saint Petersburg, Russian Federation, 197022
3 FGBU im.N.N.Petrova Cancer Research Institute (Saint Petersburg, Russian Federation)
68, ul. Leningradskay, pos. Pesochnii, Saint-Petersburg, Russian Federation,197758 E-mail: [email protected]
На сегодняшний день, примерно у 1 из 400 взрослых в анамнезе имеется диагноз онкологического заболевания. К 2030 году ожидается увеличение количества этих пациентов на 50%. Это те больные, которым будет успешно выполнено противоопухолевое лечение. Около 45% этих пациентов составят женщины, и соответственно 10% из них будут иметь онкогинекологические заболевания в репродуктивном возрасте, не имея возможности реализовать свою фертильность. По данным Американского Общества Клинической Онкологии (ASCO), одним из современных методов сохранения фертильности у онкологических пациенток является аутотрансплантация криоконсервированной овариальной ткани. Данный метод с каждым годом все более широко используется в качестве варианта сохранения фертильности во многих странах и в частности в России. За последнее десятилетие по всему миру родилось 37 здоровых детей. Ортотопическая аутотрансплантация криоконсервированной овариальной ткани имеет уникальные преимущества по сравнению с другими методами сохранения фертильности. Данная процедура: 1) не требует отсрочки противоопухолевой терапии, так как может быть выполнена в кратчайшие сроки; 2) безопасна при гормонально-зависимых опухолях, так как не требует проведения стимуляции овуляции перед стартом химио- и лучевой терапии; 3) может быть выполнена вне зависимости от дня менструального цикла; 4) является единственным методом сохранения возможности к деторождению у пациенток препубертатного возраста; 5) способствует восстановлению как эндокринной функции яичников, так и последующей фертильности.
С 2014 года в гинекологическое отделение ФГБУ «СЗФМИЦ» направляются пациентки различных категорий для обсуждения вопросов сохранения фертильности. Пациентки поступают из клинических больниц города Санкт-Петербурга, а также из НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова. В 2014 году создан криобанк овариальной ткани, в котором хранится 142 образца овариальной ткани. Данные биоптаты хранятся для научных целей (отработка методики замораживания ткани), а также для последующей аутотрансплантации. Процедуры частичной декортикации ткани яичника, замораживания, хранения в криобанке, а также последующей аутотрансплантации были одобрены Этическим Комитетом ФГБУ «СЗФМИЦ». Включенные в исследование пациентки тщательным
образом осведомлены о цели и задачах научного исследования и подписывали форму «Информированного согласия». Перед включением в исследование всем пациенткам осуществлялось серологическое исследование крови на наличие СПИДа, сифилиса, а также гепатитов В и С, с целью избежания возможной кросс-контаминации образцов в дюаре с жидким азотом при длительном хранении биологических материалов. В день операции за 30 минут до забора ткани готовилась среда и поддерживалась при температуре +4С. Удаленный овариальный биоптат транспортировался при +4 в течение 15 - 30 мин в генетическую лабораторию, где осуществлялась отсепа-ровка коркового вещества от мозгового и нарезка ткани на несколько образцов размерами длина - 5 мм, ширина - 5 мм и толщина - 1мм. После этого, следующим этапом овариальные биоптаты помещались в 2 мл пробирки с жидкостью для заморозки, содержащей диметилсульфоксид (DMSO). Перед замораживанием, по 2 образца ткани яичников от каждой пациентки были фиксированы в формальдегиде и растворе Буэна (свежий контроль) согласно стандартным методикам. Это было сделано для того, чтобы сравнить морфологические образцы овариальной ткани до заморозки и после стандартного медленного замораживания и размораживания образцов ткани яичника. Патоморфологическое исследование выявило хорошую сохранность овариальной ткани после разморозки (большое число нормальных фолликулов, умеренный фиброз). Следующим этапом нами планируется проведение, иммуногистохимического, культурального (In Vitro Culture) исследований, а также работа в эксперименте на моделе иммунодефицитных мышей «Immunodeficient nu/nu female Balb/C mice».
Наша основная цель заключается в обеспечении онкологических больных репродуктивного возраста не только качественным и своевременным лечением, но также и высоким качеством жизни после завершения противоопухолевой терапии. На современном этапе, сохранение фертильности является крайне востребованным направлением в медицине, а также имеет первостепенное значение для многих пациентов, у которых диагностирован рак в репродуктивном возрасте. Врачи и пациенты должны иметь современную и достоверную информацию для того, чтобы сделать сохранение фертильности постоянной возможностью для пациентов, желающих иметь детей в будущем.
Международная научно-практическая конференция «РЕПРОДУКТИВНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ОНКОЛОГИИ» 22-23 мая 2015. Обнинск, Калужская область, Россия
бП
