Научная статья на тему 'Перспективы мониторирования антибиотикоустойчивости условно-патогенных представителей Enterobacteriaceae молекулярно-генетическими методами'

Перспективы мониторирования антибиотикоустойчивости условно-патогенных представителей Enterobacteriaceae молекулярно-генетическими методами Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
66
20
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Инфекция и иммунитет
Scopus
ВАК
RSCI
ESCI
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Б.Р. Кулуев, Д.Н. Дубровская, Д.Я. Хайдарова, И.А. Шакирова, А.Р. Мавзютов

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Перспективы мониторирования антибиотикоустойчивости условно-патогенных представителей Enterobacteriaceae молекулярно-генетическими методами»

Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.

Инфекция и иммунитет

торая относится к числу наиболее чувствительных и простых полуколичественных методов.

Цель работы — выявление штамма B.pseudomallei с оптимальным составом антигенов для создания чувствительного и специфичного мелиоидозного эритроцитарного антигенного диагностикума.

Для создания диагностикума использовали антигены штаммов возбудителя мелиоидоза и близкородственного вида B. thailandensis с различной вирулентностью (ЛД50 для золотистых хомячков: B. pseudomallei 57 576 (< 101 м.к.), B. pseudomallei 111 (< 101 м.к.), B. pseudomallei 107 (> 107 м.к.) и B. thailandensis 264 (> 106 м.к.). Антигенные препараты получали водно-солевой экстракцией и осаждением 40% сульфатом аммония. Состав оценивали в реакции имму-нодиффузии и иммуноэлектрофорезе. Полученная фракция содержала нейтральный антиген 8 и отрицательно заряженный антиген d, присутствующие во всех штаммах B. pseudomallei коллекции инститита и играющие роль при идентификации мелиоидоза.

Диагностикумы проверяли в РНГА с сапными и мелиоидозными сыворотками: гипериммунными, иммунными и от зараженных животных. РНГА с анализируемыми диагностикумами позволила выявить антитела в гипериммунных сыворотках в разведениях от 1:5000 до 1:100 000, а в сыворотках животных, зараженных сапом и мелиоидозом (белая крыса и морская свинка) — от 1:80 до 1:640. РНГА с диагностикумами на основе антигенов B.pseudomallei 107 и смеси антигенов B. pseudomallei 57 576 и 111 с сыворотками кроликов, вакцинированных авирулентными живыми культурами B. pseudomallei VPA, 107 и B. thailandensis 264 выявила титры от 1:640 до 1:2560. РНГА с диагностикумом на основе антигенов B. thailandensis 264 выявила максимальный титр 1:640 с этими же сыворотками. Контроль специфичности осуществляли, используя гетерологичные иммунные сыворотки и интактные сыворотки лабораторных животных. РНГА со всеми диагностикумами с гетерологичными сыворотками показала титры антител от 0 до 1:140, а с интакт-ными сыворотками — от 0 до 1:40. Диагностикум на основе антигена B. pseudomallei 107 показал большую специфичность и чувствительность. Учитывая авирулентность B. pseudomallei 107, из этого штамма получали комплекс антигенов, оптимальный для создания мелиоидозного эритроцитарного диагно-стикума.

ПЕРСПЕКТИВЫ МОНИТОРИРОВАНИЯ АНТИБИОТИКОУСТОЙЧИВОСТИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ENTEROBACTERIACEAE МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ Б.Р. Кулуев12, Д.Н. Дубровская2, Д.Я. Хайдарова2, И.А. Шакирова2, А.Р. Мавзютов2

1Учреждение Российской академии наук Институт биохимии

и генетики Уфимского научного центра РАН;

2ГБОУ ВПО БГМУ Минздравсоцразвития России, г. Уфа

В настоящее время для контроля за распространением антибиотикоустойчивости и профилактики внутрибольничных инфекций преимущественно используются методы серийных разведений, диско-диффузионный, Е-тест. Они отличаются трудоемкостью, продолжительностью и низкой воспроизводимостью, поскольку ориентированы на выявление

фенотипических признаков. Указанное не позволяет использовать их для решения эпидемиологических задач.

В связи с этим нами был проведен поиск нуклеотидных последовательностей генов Enterobacteriaceae, отвечающих за их антибиоти-коустойчивость и подобраны соответствующие праймеры, характеризующиеся схожими температурами отжига, но разными размерами ампликонов для возможности в дальнейшем множественной ПЦР и одновременной детекции нескольких генов антибиотикоустойчивости. В качестве тестовых использовали 150 клинических штаммов условно-патогенных энтеробактерий (Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Proteus morganii и Escherihia coli). В результате проведенных исследований нам удалось обнаружить 10 исследуемых генов, а именно гены marA, marQ гены устойчивости к амино-гликозидам, сульфаниламидам, тетрациклину, фосфомицину, бацитрацину, эритромицину, три-метоприму и блеомицину, тогда как гены устойчивости к тобрамицину, гентамицину, хлорамфени-колу и альбицидину выявлены не были. У Klebsiella pneumoniae обнаруживаются гены устойчивости к 6 антибиотикам (аминогликозидам, сульфаниламидам, фосфомицину, эритромицину, триме-топриму, блеомицину) и два гена множественной антибиотикоустойчивости — marA и marG Причем 4 штамма Klebsiella pneumoniae имели гены устойчивости к трем антибиотикам и 2 штамма к двум антибиотикам одновременно. У E. coli обнаруживались гены резистентности к 3 антибиотикам (сульфаниламидам, тетрациклину, бацитрацину), причем практически все анализируемые штаммы были резистентны к бацитрацину. Для Proteus mirabilis был характерен лишь ген устойчивости к эритромицину. Чаще всего резистентность среди условно-патогенных энтеробактерий наблюдалась к триметоприму, тетрациклину, бацитрацину, сульфаниламидам, фосфомицину. Реже встречалась устойчивость к блеомицину и эритромицину.

Работа выполнена при поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009—2013 гг., в рамках реализации мероприятия 1.2.1. (ГКП385от 30.07.2009).

РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ХЛАМИДИЙНОЙ И ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИЙ У ЖИТЕЛЕЙ САНКТ-ПЕТЕРБУРГА ПО ДАННЫМ СЕРОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА

Л.Б. Куляшова, Л.А. Березина, А.В. Закревская, А.Б. Жебрун

ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург

Урогенитальный хламидиоз относится к одной из самых распространенных инфекций передаваемых половым путем и является важным фактором формирования вторичного бесплодия. В настоящее время отсутствуют объективные данные об инфи-цированности Chlamydia trachomatis и вирусами семейства Herpesviridae общей популяции населения Санкт-Петербурга.

Целью настоящего исследования явилось изучение распространенности хламидийной и герпетической инфекций в Санкт-Петербурге по данным се-роэпидемиологического мониторинга.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.