CC BY
22
КЛИНИЧЕСКИЙ ОПЫТ
DOI: 10.23868/201812049
ПЕРСОНАЛИЗИРОВАННАЯ КЛЕТОЧНАЯ ТЕРАПИЯ.
iii. КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗВАННЫХ ПОРАЖЕНИЕМ ЗАДНЕГО ЭПИТЕЛИЯ РОГОВИЦЫ
С.Э. Аветисов1, Е.А. Каспарова1, А.А. Каспаров1, А.М. Суббот1, А.И. Антохин2, А.С. Павлюк2, Л.Л. Фадеева3, С.А. Феофанов4
1 Научно-исследовательский институт глазных болезней, Москва, Россия
2 Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва, Россия
3 Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи, Москва, Россия
4 Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва, Россия
PERSONALIZED CELL-BASED THERAPY IN OPHTHALMOLOGY.
iii. CLINICAL EFFICACY IN THE TREATMENT OF CORNEAL ENDOTHELIAL DISEASES
S.E. Avetisov1, E.A. Kasparova1, A.A. Kasparov1, A.M. Subbot1, A.I. Antohin2, A.S. Pavliuk2, L.L. Fadeeva3, S.A. Feofanov4
1 Scientific Research Institute of Eye Diseases, Moscow, Russia
2 N.I. Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia
3 N.F. Gamaleya Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Moscow, Russia
4 М.М. Shemyakin and YuA. Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry of the RAS, Moscow, Russia
e-mail: kletkagb@gmail.com
Тяжелые поражения заднего эпителия роговицы, как правило, приводят к прогрессирующему отеку роговицы, нарушению ее прозрачности, резкому снижению зрения и, как следствие, к необходимости пересадки донорской роговицы, что может грозить послеоперационными осложнениями. В этой связи ведется активный поиск лечебных воздействий на пораженный клеточный слой, которые позволят избежать хирургического вмешательства.
Цель работы — оценить клиническую эффективность метода персонализированной клеточной терапии (введение в переднюю камеру глаза клеточного препарата: суспензии активированных аутогенных лейкоцитов в сыворотке крови) в лечении ранней послеоперационной буллезной кератопатии и тяжелых форм герпетического кератоиридоциклита.
Представлены результаты применения персонализированной клеточной терапии у 210 пациентов: 60 пациентов с послеоперационной буллезной кератопатией и 150 с герпетическим кератои-ридоциклитом. Пациенты с герпетическим кератоиридоциклитом были разделены на 2 подгруппы: 75 пациентов получали персонализированную клеточную терапию (опытная подгруппа), другим 75 пациентам интракамерально вводили раствор полудана (контрольная подгруппа). Выраженный терапевтический эффект при лечении послеоперационной буллезной кератопатии был получен в 44 % случаев, прирост остроты зрения составил 0,49±0,27. Наблюдалось расправление складок десцеметовой мембраны, полная резорбция отека роговицы, снижение толщины роговицы с 801±112 мкм до 582±55 мкм. При лечении герпетического кератоиридоциклита выздоровление было достигнуто у 85 % пациентов, которым проводилась персонализированная клеточная терапия — воспалительная инфильтрация роговицы и отек полностью резорбировались, восстанавливалась прозрачность роговицы, прирост остроты зрения составил 0,6±0,3. О нормализации структуры роговицы после персонализированной клеточной терапии свидетельствуют как клиническая картина, так и данные прижизненной конфокальной микроскопии. Установлена корреляция клинического эффекта с концентрацией в клеточном препарате провоспалительных цитокинов: ФНО-а, ИЛ-6 и ИЛ-1.
Таким образом, персонализированная клеточная терапия является эффективным методом лечебного воздействия на клетки поврежденного заднего эпителия роговицы, не требующим проведения кератопластики.
Ключевые слова: персонализированная клеточная терапия, полиА:полиУ, задний эпителий роговицы, клиническая эффективность, буллезная кератопатия, герпетический кератоиридоциклит.
Severe lesions of corneal endothelium usually lead to progressing corneal oedema, sharp decrease in visual acuity and as a result to the need for transplanting donor cornea that can provoke relevant sequelae, thus an active search for alternative impacts to the affected cell layer is underway allowing for keeping out of operative intervention.
The purpose of this research is to evaluate the clinical efficacy of a method of personalized cell therapy (aqueous chamber administration of suspension consists of activated autologous leukocytes in serum) aimed to treatment of early postoperative bullous keratopathy and severe form of herpetic keratoiridocyclitis.
The results of clinical application of personalized cell therapy in 210 patients with postoperative bullous keratopathy (60) and herpetic keratoiridocyclitis (150) — divided into 2 subgroups: 75 patients received personalized cell therapy (experimental subgroup), the other 75 patients were injected intracamerally with a solution of poludan preparation (control subgroup), are presented in the article. The pronounced therapeutic effect in the treatment of early postoperative bullous keratopathy was achieved in 44 % of cases, with an increase in visual acuity of 0,49±0,27. Straightening of the descemet membrane's folds, significant dehydration of corneal stroma and complete restoration of corneal transparency, a reduction in the thickness of the cornea from 801±112 |jm to 582±55 |jm have been achieved. In the group of herpetic keratoiridocyclitis treatment, recovery was achieved in 85 % — complete resorption of corneal infiltration and edema and restoration of corneal transparency. The increase in visual acuity in this group was 0,6±0,3. The normalization of the corneal structure after personalized cell-based therapy is also evidenced by in vivo confocal microscopy data. The correlation of the clinical effect with the concentration in the cellular preparation of TNF-a, IL-6 and IL-1 was established. Personalized cell therapy is effective method of curative action on damaged corneal endothelium that does not require keratoplasty.
Keywords: personalized cell therapy, polyA:l_l, corneal endothelium, clinical efficacy, bullous keratopathy, herpetic keratoiridocyclitis.
Введение
В предыдущих публикациях нами были представлены данные анализа цитокинового состава и популяций лейкоцитов разработанного клеточного препарата (КП) для проведения персонализированной клеточной терапии (ПКТ) [1, 2]. КП состоит из суспензии лейкоцитов периферической крови, активированных процессами коагуляции и агонистом toll-like-рецепторов 3 типа — поли-адениловой-полиурациловой кислотой (полиА:полиУ) в аутогенный сыворотке пациента. Разработка и внедрение такого рода продуктов не подлежит регулированию ФЗ № 180 «О биомедицинских клеточных продуктах».
Одновременно с изучением фундаментальных механизмов действия ПКТ велась клиническая работа по применению активированных лейкоцитов в аутогенной сыворотке у больных с тяжелыми поражениями заднего эпителия роговицы: при ранней послеоперационной буллезной кератопатии (ПБК) и герпетическом керато-иридоциклите (ГКИЦ), первые результаты которой были опубликованы нами в 2011 г. [3, 4]. Кроме того, совместно с клиническими отделениями НИИ ГБ проводилось исследование состояния заднего эпителия роговицы после ПКТ методом прижизненной конфокальной микроскопии [5]. В настоящей работе клинические данные, полученные ранее, дополнены данными пациентов, вошедших в исследование в последние годы, а также проведен корреляционный анализ эффекта ПКТ с содержанием провоспалительных цитокинов в КТ.
Задний эпителий роговицы, называемый также «эндотелий» роговицы, представляет собой монослой специализированных, чаще шестигранных плоских клеток, которые выстилают заднюю поверхность роговицы и непосредственно контактируют с влагой передней камеры глаза. Эти клетки поставляют в роговицу растворенные в водянистой влаге питательные вещества, удаляют метаболиты, и одновременно, поддерживают строму роговицы в слабо гидратированном состоянии, необходимом для её прозрачности.
При обширной утрате клеток заднего эпителия роговицы в результате операций, травм или воспаления развивается хронический отек роговицы с нарушением ее трофики, образованием стойкого помутнения, снижением остроты зрения вплоть до слепоты и развитием болевого синдрома разной степени выраженности [6]. Появление этих симптомов связано с тем, что клетки заднего эпителия роговицы у взрослого человека обладают низкой способностью к регенерации, они либо не пролиферируют вообще, либо делятся со скоростью, недостаточной для восполнения клеточных потерь. Однако ex vivo, при помещении изолированного роговичного диска в питательную среду, и in vitro, в клеточной культуре, клетки этого вида активно вступают в митотический цикл [7].
Послеоперационная буллезная кератопатия (ПБК) — частое (0,2-2,4 %) и тяжелое осложнение хирургического лечения катаракты, и, реже — антиглаукома-тозных операций, в ходе которых происходит ятрогенное повреждение заднего эпителия роговицы, и, как следствие, потеря его насосной функции, что приводит к пропитыванию всех слоев роговицы влагой передней камеры и прогрессирующему отеку, утолщению и потере прозрачности, образованию булл — эпителиальных пузырей, наполненных жидкостью, при вскрытии которых пациент испытывает острую боль, а эрозии на их месте являются «открытыми воротами» для инфекции. Развивается рого-вичный синдром (светобоязнь, слезотечение, блефаро-спазм), что вместе со значительным ухудшением зрения снижает качество жизни больного [6].
Возможности консервативной терапии ПБК (использование гиперосмотических и витаминных средств, лечебных мягких контактных линз, выполняющих бандажную функцию, и гелий-неоновая лазерстимуляция) ограничены и носят лишь паллиативный характер. В связи с этим, изучение применения нового нехирургического метода лечения, который может стать альтернативой сквозной пересадке роговицы, показанной в далеко зашедших случаях ПБК, является важной и актуальной задачей современной офтальмологии.
Следует сказать, что различные модификации метода с использованием активированных лейкоцитов для лечения роговичных дистрофий применяются в нашей стране и дают хорошие результаты [8, 9]. Кроме того, О.И. Кривошеина и М.С. Дениско (2017) обосновали эффективность введения других дериватов периферической крови — аутогенных мононуклеарных клеток крови в строму роговицы при эпителиально-эндотелиальной дистрофии роговицы [10].
Японские ученые сосредоточили внимание на более таргетной клеточной популяции в качестве КП для клеточной терапии ПБК: культивированных клетках заднего эпителия роговицы в комбинации с фармакологическим стимулятором деления — ингибитором ПИо киназы У-27632. В настоящее время проводится клиническое исследование безопасности и эффективности этого метода лечения [11].
Герпетический кератоиридоциклит (ГКИЦ) — воспаление роговой и сосудистой оболочек глаза, вызванное вирусом простого герпеса. Примерно 30 % ГКИЦ развиваются по эндотелиальному типу, когда вирус поражает в первую очередь именно задний эпителий роговицы, и характеризуются выраженным воспалением, тор-пидным течением и плохо поддаются лечению. Исходами эндотелиальных поражений часто являются отечные бельма роговицы, резко снижающие остроту зрения пациентов. Лечение ГКИЦ включает терапевтические методы: использование препаратов ацикловира, интерферона, иммуномодуляторов, витаминов, а также хирургические вмешательства — различные виды послойной и сквозной кератопластики. Тем не менее, часть ГКИЦ все равно не поддается лечению традиционными методами и, следовательно, как и при ПБК, актуальным является поиск и оценка эффективности новых перспективных методов воздействия на поврежденную ткань для восстановления функции заднего эпителия роговицы [12].
Цель работы — оценить клиническую эффективность метода ПКТ (введение в переднюю камеру глаза КП: суспензии активированных аутогенных лейкоцитов в сыворотке крови) в лечении ранней послеоперационной буллезной кератопатии и тяжелых форм герпетического кератоиридоциклита.
Материал и методы
Исследование проводилось в рамках НИР «Совершенствование методов диагностики и комплексного лечения воспалительных и дистрофических заболеваний роговицы» (0511-2014-0024) и НИР «Инновационные подходы к изучению патогенеза, диагностике и хирургическому лечению заболеваний хрусталика и роговицы на основе морфологического, ультраструктурного и биомеханического анализа» (0511-2019-0009) с разрешения локального этического комитета ФГБНУ НИИГБ (протокол № 16 от 24.06.2013), после подписания пациентами информированного согласия.
В работе приведены результаты лечения 210 пациентов: 60 пациентов с ПБК и 150 с ГКИЦ. Сроки наблюдения больных составили от 3 мес. до 7 лет.
До включения в исследование пациентам с ранней ПБК, которая может развиваться в течение от нескольких дней до 3 мес. после оперативного вмешательства, проводилось консервативное лечение на протяжении от 2,5 недель до 1,5 мес. (экспресс-инстилляции гиперосмотического раствора глюкозы, дексаметазона, солкосерила; курсы субконъюнктивальных инъекций дексаметазона; лазерная стимуляция; ношение лечебных контактных линз), однако тенденции к выздоровлению не наблюдалось. Острота зрения колебалась от правильной светопроекции до 0,6 и составляла в среднем 0,10±0,12. Все больные этой группы получали пКт.
Пациенты из группы ГКИЦ с эндотелиально-стромаль-ными поражениями, включая буллезные герпетические кератоиридоциклиты, увеакератиты, дисковидные ГКИЦ, были разделены на 2 подгруппы: 75 пациентов получали ПКТ (опытная подгруппа), другим 75 пациентам интракаме-рально вводили раствор полудана (контрольная подгруппа).
Средняя острота зрения у пациентов этой группы до лечения составляла 0,11±0,02. Всем больным проводили общеофтальмологическое исследование, включавшее визометрию, определение рефракции, зеркальную микроскопию, фоторегистрацию, тонометрию, анализ со-скобов конъюнктивы на антигены герпесвирусов и аденовирусов, прижизненную конфокальную микроскопию роговицы (ПКФМС).
Проведение процедуры персонализированной клеточной терапии. В условиях операционной, после ретробульбарной анестезии и выполнения парацентеза, производили полное замещение влаги передней камеры глаза на КП — аутогенную сыворотку со стимулированными in vitro комплексом полиА:полиУ собственными лейкоцитарными клетками (3х106 кл./мл). Метод получения клеток для ПКТ описан в предыдущих публикациях [1, 2].
Объем введенного КП зависел от анатомических особенностей строения передней камеры глаза пациента и составлял 0,2-0,3 мл (в среднем 0,25 мл). Оставшуюся часть КП (1,0-1,5 мл) вводили под конъюнктиву пара-лимбально. Сразу же после операции больной ложился лицом вниз и находился в таком положении в течение 2 ч. для осаждения клеток на заднюю поверхность роговицы.
Количество проведенных процедур ПКТ колебалось от 1 до 5 в зависимости от клинической динамики. Повторные сеансы ПКТ обеспечивали рециркуляцию цитокинов при регулярном замещении влаги передней камеры глаза на КП.
Критерии эффективности использования персонализированной клеточной терапии. Лечебный эффект ПКТ оценивали как «выраженный» при расправлении более 70 % складок десцеметовой оболочки, полной резорбции отека стромы, исчезновении буллезных изменений эпителия, повышении прозрачности, уменьшении толщины роговой оболочки и улучшении остроты зрения от 0,25 до 0,90.
Эффект расценивали как «частичный» при расправлении 40-50% складок десцеметовой оболочки, частичной резорбции отека, исчезновении буллезных изменений эпителия роговицы, улучшении остроты зрения от 0,05 до 0,20.
Определение концентрации цитокинов методом иммуноферментного анализа. В сывороточной части КП определяли концентрацию ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО-а с использованием наборов реагентов для иммуноферментного анализа (ЗАО Вектор-Бест, Россия), согласно рекомендованным протоколам фирмы-производителя. Результаты регистрировали на иммунологическом фотометре Яхонт-01 (НПП Буревестник, Россия) при длине волны 450 нм. До исследования образцы хранили при -20°С.
Статистический анализ. При статистическом анализе данных проверяли нормальность их распределения,
для оценки различия средних значений применяли двух-выборочный тест Стьюдента. Различия считали достоверными при р<0,05. Оценку корреляционных зависимостей проводили с помощью рангового критерия Спирмена.
Результаты
Группа пациентов с ранней послеоперационной буллезной кератопатией. Выраженный терапевтический эффект после проведения ПКТ был отмечен в 44 % случаев; частичный эффект наблюдался у 23 % больных; отсутствие эффекта у 33 % больных. Прирост остроты зрения в группе пациентов с выраженным эффектом составил 0,49±0,27, у пациентов с частичным эффектом 0,12±0,04. Средние показатели пахиметрии до лечения равнялись 801±112 мкм, после проведения ПКТ — 582±55 мкм (различие статистически достоверно). Уменьшение толщины роговицы после проведения ПКТ свидетельствовало о резорбции ее отёка.
После проведения ПКТ в группе пациентов с выраженным и частичным эффектом прозрачность роговицы восстанавливалась и ПКФМС давала возможность визуализировать структуру роговицы. Средние значения плотности эндотелиальных клеток (ПЭК) после лечения составили 1080±463 кл./мм2. Ядра, визуализируемые в кератоцитах и эндотелии, были крупными и гиперрефлективными, что указывает на интенсивно протекающие в них синтетические процессы.
Клинический пример: больная Ф., 68 лет (рис. 1). Через 1 мес. после операции факоэмульсификации катаракты пациентка обратилась с жалобами на повторяющиеся острые боли в ОБ, выраженное чувство инородного тела, слезотечение, светобоязнь, туман перед ОБ, низкое зрение на ОБ. В течение 1 мес. после обращения пациентка получала консервативное лечение, но выраженной положительной динамики отмечено не было.
При осмотре: ОБ раздражен, в центре роговицы имеется обширная эрозия роговицы (по-видимому, на месте вскрывшейся крупной буллы), эпителий отечен, стро-ма роговицы отечна, оптический срез резко утолщен, в центральной и парацентральной области — грубые складки десцеметовой оболочки (около 40 % от площади роговицы). Острота зрения 0Б=0,04 н/к; ВГД ОБ — 12 мм. рт. ст.; пахиметрия ОБ — 775 мкм в центре; ПЭК не определяется.
С диагнозом ОБ — ЭЭД роговицы, ОЫ-о/у глаукома IIА, артифакия, пациентка была госпитализирована в НИИ ГБ. В послеоперационном периоде отмечали повышение ВГД на ОБ, которое было скомпенсировано гипотензивными препаратами.
Через 1 мес. после 3 сеансов ПКТ отек роговицы ОБ резорбировался, складки десцеметовой оболочки полностью расправились, прозрачность роговицы увеличилась и острота зрения повысилась до 0,8. При ПКФМС роговицы ОБ был обнаружен умеренный пле-оморфизм и выраженный полимегатизм ЭК, незначительное снижение прозрачности десцеметовой оболочки, во всех слоях роговицы наблюдался умеренный отек экстрацеллюлярного матрикса, увеличивающийся к передним слоям, базальный слой эпителия был сохранен. ПЭК ОБ составил 2200 кл./мм2; пахиметрия ОБ — 570 мкм в центре роговицы. Срок наблюдения — 11 мес., состояние роговицы ОБ — стабильное.
Группа пациентов с герпетическим кератоиридоци-клитом. Выздоровление после 2-4 процедур применения КП в опытной подгруппе составило 85 %, в контрольной (интракамеральное введение раствора полудана) — 56 %. Средняя острота зрения в опытной подгруппе после лечения равнялась 0,6±0,3, в контрольной — 0,50±0,32.
Рис. 1. Биомикроскопическая картина и прижизненная конфокальная микроскопия роговицы (ПКФМС) до [А—В; Vis 0S-0,04 н/к) и после (Г-Д; Vis 0S-0,8 н/к) применения ПКТ при ПБК (больная Ф.): А, Б, Г — биомикроскопия; В, Д — ПКФМС заднего эпителия; Е — ПКФМС стромы роговицы; Ж — ПКФМС заднего эпителия в норме
Ж
Б
Рис. 2. Биомикроскопическая картина и прижизненная конфокальная микроскопия роговицы (ПКФМС) до (А, Б; Vis OS-0,09 н/к) и после (В, Г; Vis 0S-0,8 н/к) применения ПКТ при ГКИЦ (больная Л.): А, В — биомикроскопия; Б, Г — ПКФМС заднего эпителия; Д — ПКФМС стромы в норме; Е — ПКФМС заднего эпителия в норме
Клинический пример: больная Л., 29 лет (рис. 2). Больная Л. поступила в НИИ ГБ с диагнозом OS — торпид-но текущий интерстициальный герпетический кератит, уве-акератит. На фоне перенесенного гриппа отметила постепенное снижение остроты зрения в течение двух недель. Обратилась в одну из московских глазных больниц, где получала активную противовирусную, противовоспалительную и витаминную терапию: ПАБК, пирогенал, зовиракс, наклоф, цикломед, солкосерил, тауфон, полудан парабуль-барно, валтрекс per os 500 мг дважды в сут. в течение
1 мес. Несмотря на проводимое лечение, заболевание продолжало прогрессировать, острота зрения снизилась с 0,60 до 0,09. При поступлении: ОБ — глазная щель сужена, смешанная инъекция глазного яблока. Роговица: выраженная диффузная инфильтрация и единичные мелкие очаги некроза в строме роговицы, отек стромы и эпителия роговицы. Оптический срез роговицы резко утолщен, крупные «сальные» преципитаты и наложения на эндотелии. Передняя камера средней глубины, влага прозрачна, зрачок узкий, единичные задние синехии, радужка отечна,
с глазного дна слабый розовый рефлекс. Офтальмоскопия невозможна в связи с отеком роговицы. Tensio OS пальпа-торно — плюс 1. Была назначена гипотензивная терапия — бетоптик 0,5 % дважды в сут. Активная противовирусная, противовоспалительная и десенсибилизирующая терапия была продолжена в виде глазных капель, парабульбарных и внутримышечных инъекций.
В день госпитализации в НИИ ГБ в условиях операционной была выполнена операция интракамеральной ПКТ: в 1 мм от лимба произведен парацентез, через который в полость передней камеры введена канюля с тупым концом. Передняя камера промыта, удалены преципитаты с задней поверхности роговицы, разделены задние синехии, в переднюю камеру введено 0,6 мл аутогенной сыворотки, содержащей взвесь активированных лейкоцитарных клеток, наложен узловой шов. Последующие 2 операции включали только введение КП в переднюю камеру глаза. Уже через 5 сут. после первой процедуры отметили положительную динамику: инфильтрация стро-мы уменьшилась, эпителий стал менее отечным, оптический срез роговицы стал тоньше, ее задняя поверхность очистилась. Vis 0S=0,15 н/к. Внутриглазное давление 0S, пальпаторно — в норме. На 23 сут. после начала лечения сохранялась некоторая шероховатость эпителия, площадь зоны инфильтрации в строме сократилась в 2 раза, оптический срез был близок к норме, преципитатов не было. Vis 0S=0,5 н/к. В течение последующего мес. после выписки на фоне поддерживающего лечения было достигнуто полное выздоровление: инфильтрация полностью резорбировалась, прозрачность роговицы восстановилась, в центральной и парацентральной зонах имелись поверхностные субэпителиальные нежные помутнения (исход кератита), острота зрения левого глаза повысилась до 0,8 н/к. При дальнейшем наблюдении в течение 2 мес. рецидивов отмечено не было и пациентку направили на курс противогерпетической вакцинации.
Следует отметить, что эффект ПКТ начинает проявляться уже в первые сут после процедуры и, как правило, достигает максимума спустя 1-2 мес. после ее проведения.
Корреляция эффекта клеточного препарата с концентрацией цитокинов. Анализ цитокинового профиля КП обнаружил высокую концентрацию провоспалитель-ных цитокинов ФНО-а, ИЛ-6, ИЛ-1 в сывороточной части КП у больных, хорошо отвечающих на проводимую ПКТ.
Высокий уровень провоспалительных цитокинов, как правило, рассматривают в негативном ключе, т. к. концентрация этих веществ в жидких средах глаза неизбежно
ЛИТЕРАТУРА:
1. Аветисов С.Э., Суббот А.М., Антохин А.И. и др. Персонализированная клеточная терапия в офтальмологии. I. Метод получения и цито-фенотип аутологичного клеточного продукта. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2011; 6(2): 38-42.
2. Аветисов С.Э., Суббот А.М., Антохин А.И. и др. Персонализированная клеточная терапия в офтальмологии (II): цитокиновый профиль аутогенного клеточного продукта. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2012; 7(1): 49-53.
3. Павлюк А.С., Антохин А.И., Суббот А.М. и др. Клиническая эффективность персонализированной клеточной терапии заболеваний эндотелия роговицы. Катарактальная и рефракционная хирургия 2011; 11(2): 45-49.
4. Каспаров А.А., Каспарова Е.А., Фадеева Л.Л. и др. Персонализированная клеточная терапия ранней буллезной кератопатии (экспериментальное обоснование и клинические результаты). Вестник офтальмологии 2013; 129(5): 53-61.
5. Каспарова Е.А., Бородина Н.В., Суббот А.М. Прижизненная конфокальная микроскопия для оценки эффективности персонализированной клеточной терапии при лечении ранней послеоперационной буллезной кератопатии. Вестник офтальмологии 2012; 128(1): 26-33.
6. Рапуано К.Дж., Хенг В.Дж. Роговица. М: ГЭОТАР-Медиа; 2010.
повышается в развитой стадии воспалительного процесса и отчасти является маркером тяжести заболевания. Однако, эффекты, опосредуемые цитокинами, могут сыграть и положительную роль в процессах регенерации, потому что провоспалительные цитокины ослабляют межклеточные контакты между эндотелиоцитами, снимая тем самым один из механизмов ингибирования митоза [13].
Корреляционный анализ по методу Спирмена показал, что результат лечения находится в умеренной прямой связи с концентрацией в клеточном препарате ФНО-а (п8=0,627), ИЛ-6 (г=0,79) и ИЛ-1 (пэ=0,87).
Полученные результаты согласуются с предложенной нами гипотезой о механизме действия КП, реализующего свой эффект, в частности, за счет ослабления межклеточных связей, что позволяет клеткам заднего эпителия роговицы пройти цикл цитокинеза, или, как минимум, увеличивает их способность мигрировать и закрыть зону дефекта [2].
Выводы
ПКТ с использованием аутогенных клеточных продуктов открывает новые возможности для эффективного лечения поражений заднего эпителия роговицы и нивелирует проблемы с получением, обработкой и иммунологической совместимостью клеточного материала.
Полученные корреляционные зависимости эффекта ПКТ и цитокинового состава КП подтверждают возможный механизм терапевтического действия описываемого метода за счет ослабления контактного ингибирова-ния митоза.
Эффективность и безопасность ПКТ проверена в клинических исследованиях — больные, которым была показана кератопластика, не только смогли избежать пересадки донорской роговицы, но и восстановили зрение. При лечении ранней ПБК выраженный терапевтический эффект был достигнут в 44 % случаев, при лечении ГКИЦ выздоровление наступило у 85 % пациентов.
Благодарности
Исследовательская работа проводилась в рамках НИР «Совершенствование методов диагностики и комплексного лечения воспалительных и дистрофических заболеваний роговицы»(0511-2014-0024) и «Инновационные подходы к изучению патогенеза, диагностике и хирургическому лечению заболеваний хрусталика и роговицы на основе морфологического, ультраструктурного и биомеханического анализа» (0511-2019-0009).
7. Каспарова Е.А., Суббот А.М., Калинина Д.Б. Пролиферативный потенциал заднего эпителия роговицы человека. Вестник офтальмологии 2013; 129(3): 82-8.
8. Астахов С.Ю., Рикс И.А., Папанян С.С. и др. Опыт клинического применения персонализированной клеточной терапии для лечения больных с первичной эндотелиальной дистрофией после факоэмульсифика-ции. Офтальмологические ведомости 2017; 10(4): 6-12.
9. Скачков Д.П., Дровняк Я.А., Штилерман А.Л. Интрастромальная кератоинфузия аутоплазмы, активированной полуданом, в лечении пациентов с индуцированной кератопатией. Дальневосточный Медицинский Журнал 2017; 1: 58-60.
10. Кривошеина О.И., Дениско М.С. Клиническая эффективность нового хирургического лечения эндотелиально-эпителиальной дистрофии роговицы с применением аутоцитокинов. Современные технологии в офтальмологии 2017; 3: 245-7.
11. Okumura N., Kinoshita S., Koizumi N. Application of Rho kinase inhibitors for the treatment of corneal endothelial diseases. J. Ophthalmol. 2017; 2017: 2646904.
12. Каспаров А.А. Офтальмогерпес. М: Медицина; 1994.
13. Joyce N.C., Harris D.L., Mello D.M. Mechanisms of mitotic inhibition in corneal endothelium: contact inhibition and TGF-beta2. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2002; 43(7): 2152-9.
Поступила: 26.10.2018
